Banca de QUALIFICAÇÃO: JOSÉ ALEX LOURENÇO FERNANDES
Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.DISCENTE : JOSÉ ALEX LOURENÇO FERNANDES
DATA : 19/11/2018
HORA: 14:30
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich - Departamento de Bioquímica
TÍTULO:
Intein Prp8: Potencial Terapêutico de um Elemento Genético Invasivo.
PALAVRAS-CHAVES:
splicing proteico, intein Prp8, Cryptococcus, Saccharomyces, Ura3, CnePrp8i.
PÁGINAS: 45
RESUMO:
Inteins são elementos genéticos invasivos que ocorrem inseridos em genes codificadores, normalmente constitutivos e essenciais, e que são transcritos e traduzidos juntamente à sequência hospedeira para então catalisarem seu próprio splicing proteico e reestabelecimento da conformação funcional da proteína hospedeira. Neste trabalho, foi criado um modelo experimental para a avaliação da função splicing do intein Prp8, em Saccharomyces cerevisiae, usando o gene URA3 como hospedeiro do intein Prp8 do fungo patogênico Cryptococcus neoformans (CnePrp8i). Como este intein também ocorre em outros importantes patógenos fúngicos causadores de micoses cutâneas e sistêmicas e está ausente no genoma humano, ele é considerado um potencial alvo terapêutico uma vez que, tendo o seu splicing inibido, o intein permaneceria na proteína hospedeira inviabilizando seu funcionamento. Neste trabalho duas construções contendo o intein CnePrp8 foram testadas, sendo que em uma delas, foi possível observar o splicing do elemento e a manutenção da função de sua proteína hospedeira heteróloga, a Ura3. A presença do intein no RNAm foi confirmada por RT-PCR, e descartou-se a possibilidade de splicing à nível de RNAm. A presença da proteína foi confirmada por Western Blot; e sua função foi observada pelo crescimento em meios sintéticos completos sem histidina e uracila, e no meio 5-FoA. A Cisplatina já foi descrita como inibidora do splicing do intein RecA de Mycobacterium tuberculosis e por isso foi testada como um possível validador, mas observou-se pouca influência na inibição do splicing do intein no modelo proposto. A criação deste sistema heterólogo permitirá o teste de drogas que potencialmente inibam o splicing do CnePrp8i.
MEMBROS DA BANCA:
Interno - 1046922 - LEONARDO CAPISTRANO FERREIRA
Externo ao Programa - 1752367 - PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
Presidente - 2085604 - SUSANA MARGARIDA GOMES MOREIRA