Prospecção dos óleos essenciais de Lippia grata Schauer e Croton blanchetianus Baill contra Sporothrix brasiliensis.
Esporotricose; micoses subcutâneas; produtos naturais; bioatividade.
A esporotricose é uma doença provocada por espécies do gênero Sporothrix, que afetam os animais domésticos e humanos, resultando em uma micose emergente na América Latina em razão dos desafios envolvendo a transmissão zoonótica e o tratamento da infecção. As emergências das infecções fúngicas e a vigilância de resistência aos antimicrobianos têm impulsionado a busca por novos fármacos. Neste cenário, ressalta-se a bioprospecção de produtos naturais, incluindo os óleos essenciais, já reconhecidos pela promissora atividade antimicrobiana. Assim, nesse estudo avaliou-se a bioatividade, in vitro e in vivo, dos óleos essenciais de Lippia grata (OELg) e Croton blanchetianus (OECb) contra amostras de Sporothrix brasiliensis, além da atividade antibiofilme e da combinação entre os óleos e um antifúngico clínico. Com esse propósito, após a obtenção OELg e o OECb por hidrodestilação e análise da composição química por cromatografia gasosa associada a espectrofotometria de massas, foi avaliada a atividade antifúngica dos óleos através da determinação da concentração inibitória minima (CIM) por microdiluição em caldo e a concentração fungicida mínima (CFM) por semeio em meio sólido. A combinação dos óleos com o itraconazol foi realizada por meio do método “checkerboard”. A capacidade de formação de biofilme pelas amostras de Sporothrix brasiliensis, assim como a atividade antibiofilme dos óleos, foram determinadas pela quantificação da biomassa através da análise das densidades ópticas após coloração por cristal violeta. Para comparar a ação dos óleos essenciais com o itraconazol in vivo foram realizados os ensaios utilizando larvas de Galleria mellonella, avaliando-se o perfil de sobrevivência e carga fúngica. Como resultados, obteve-se os rendimentos 1,05% e 0,3%, respectivamente, para OELg e OECb. Na composiçáo do OELg predominaram os monoterpenos carvacrol (48,5%), timol (7,7%), ρ-cimeno (15%) e γ-terpineno (13,7%), enquanto no OECb, majoritariamente, os sesquiterpenos γ-elemeno (18,4%), espatulenol (11,6%), β-cariofileno (10,8%), β-gurjuneno (10%) e trans-calameneno (9,4%). Os diferentes óleos apresentaram atividade anti-Sporothrix. As CIM do OELg variaram de 48 µg/mL à 12.500 µg/mL para a forma filamentosa, e 31,25 µg/mL à 250 µg/mL para a forma leveduriforme. Observou-se ação fungicida contra 85,71% e 100%, respectivamente, para as formas filamentosos e leveduriformes. Para o OECb, as CIM ocorreram entre 97 µg/mL e 6.250 µg/mL na forma filamentosa, e 62,5 µg/mL e 250 µg/mL para a forma leveduriforme, tendo ação fungicida, respectivamente, sobre 66% e 82,35%. Na avaliação da combinação do OELg com o itraconazol encontrou-se sinergismo (28,5%), aditividade (42,8%) e indiferença (28,5%) na forma filamentosa, já para a forma leveduriforme observou-se 100% de aditividade, Na análise da combinação do OECb com o itraconazol, observou-se sinergismo (33%), aditividade (50%) e indiferença (16,6%) para a forma filamentosa, já para a forma leveduriforme se detectou aditividade (40%) e sinergismo (60%). Todas as amostras testadas produziram biofilmes, sendo classificadas em moderadas (17,6%) e fortes produtoras (5,8%). Os resultados dos ensaios in vivo com larvas de Galleria mellonella, encontram-se em fase de repetição e análise. Como conclusão, os resultados encontrados neste estudo permitem afirmar que o OELg e o OECb, apresentam ótima atividade anti-Sporothrix, motivando a avaliação de seus constituintes, isoladamente, em busca do desenvolvimento de fitofármacos ou aquisição de protótipos que possam ser utilizados para a elaboração de fármacos aplicados ao tratamento das micoses, incluindo a esporotricose.