A α, β-amirenona (ABAME) é um composto natural da classe dos triterpenos, que apresenta grande potencial de atividade antiinflamatória, cicatrizante. Os filmes de quitosana são cada vez mais usados para uso tópico porque permitem uma liberação gradual do medicamento e apresentam muitas vantagens como biodegradáveis, flexíveis, duráveis e resistentes, não se rompem nem rasgam facilmente. Assim, o objetivo deste estudo é desenvolver, caracterizar e avaliar os filmes de quitosana incorporados com a α, β-amirenona, além de analisar a o efeito antiinflamatório e cicatrizante, visando a aplicação tópica no tratamento de lesões cutâneas. Os sistemas de ABAME foram avaliados pelas seguintes técnicas: FTIR, DR-X, DSC, TG e MEV. Na parte in vivo, o modelo animal foram os camundongos, sendo subemtidos a lesões no dorso e acompanhados por 14 dias para avaliação do processo cicatricial da lesão. Após a eutanasia, foram avaliados a quantificação das citocinas, a macroscopia das lesões e a análise histológica. A análise térmica demonstrou a incorporação da amostra e um aumento na estabilidade térmica do ABAME. Os espectros de FTIR dos filmes demonstraram interações ocorrendo entre ABAME e a matriz de quitosana. Os resultados de DRX mostraram picos em halos, característicos de compostos amorfos, indicando a amorfização do ABAME pela quitosana. Imagens de MEV mostraram o protótipo incorporado na matriz de quitosana de forma homogênea e com perda parcial da característica cristalina do ABAME puro. In vivo foi possível observar que a terapia com filmes incorporados com ABAME é bastante eficaz, visto que possui propriedades antiinflamatórias que auxiliaram no processo de cicatrização de lesões cutâneas, possibilitando avaliar esta evolução de forma macroscópica, histológica e com a citocinas dosadas no presente estudo. Neste estudo os fatores analisados sugerem que o curativo de quitosana com ABAME obtiveram um efeito regenerador nos camundongos, minimizando os parâmetros do processo inflamatório e progredindo a cicatrização. Sugere que se desenvolvam estudos observacionais dos efeitos em longo prazo dos curativos, além de outras análises que possam verificar se os mesmos não sofrem alterações ao longo do tempo, do mesmo modo avaliar a eficácia no tecido cicatrizado.

O receptor NMDA é um receptor ionotrópico do glutamato, esse canal de íons Ca2+ possui 4 subunidades estruturalmente semelhantes entre si. Este é composto usualmente por duas subunidades de GluN1 (subunidade de ligação da glicina) e duas de GluN2 (subunidade de ligação do glutamato). As subunidades GluN2 variam entre GluN2A até GluN2D. Antagonistas de receptor NMDA-GluN2B tem se mostrado promissores no tratamento de diversas doenças que acometem o SNC, com menores incidências de efeitos adversos que os antagonistas não competitivos como a cetamina. Dessa forma, foi feita uma vasta pesquisa na literatura por moléculas já sintetizadas da classe, a fim de se fazer estudos in sílico. Primeiramente as moléculas foram separadas em grupo de acordo com sua similaridade, nesse trabalho foi empregado a similaridade de tanimoto com o auxílio do programa Gefhi, para ser gerados clusters. Duas networks foram construídas com esse programa: uma mostrando os dados de afinidade em pKi e outra em pIC50. Os clusters mais relevantes gerados foram avaliados em simulações de dinâmica molecular, a fim de descobrir a melhor forma de encaixe delas dentro do sítio ativos dos inibidores alostéricos de receptores NMDA. Alguns resíduos foram observados como primordiais, os resíduos da Tyr109 e a Phe114 devido a interação de empilhamento π se mostraram extremamente necessários para a interação e por consequência um anel aromático na porção distal se torna obrigatório para a relação estrutura atividade da molécula. Na porção oposta também se faz necessário um grupo benzil, pois resíduos como Pro177 e Phe176 acompanham o movimento desses anéis para realizar, também, interações do tipo π, e juntamente desse anel a presença de um grupo doador ou aceptor de ligação de hidrogênio é importante para a estabilização da molécula no sítio, os aminoácidos Glu236, Ser132, e Thr174 são os principais envolvidos. Um estudo de QSAR-3D serviu para corroborar com as teorias propostas com os resultados da dinâmica. Dois resultados principais foram obtidos, a necessidade de um anel benzênico na porção distal da molécula, na qual se liga em um bolso hidrofóbico, essa cadeia muito curta ou muito longa provoca queda de atividade. Alguns descritores demonstraram a necessidade de substituintes em porções específicas das moléculas, o que ajudou a planejar novos inibidores com grande potência teórica. Esses estudos podem abrir horizontes a descoberta de futuros medicamentos para atuarem nesse receptor e gerarem efeitos terapêuticos para os mais diversos transtornos que acometem o sistema nervoso central.

Introdução: O tratamento intensivo de neonatos associa -se a um grande volume de dados em seus prontuários. O tratamento desses dados pode ser feito através de Machine Learning: ferramenta capaz de auxiliar na detecção e na tomada de decisões de uma ampla gama de condições médicas, incluindo reações adversas ao medicamento (RAM). Objetivo: Treinar modelo de predição para auxiliar na detecção de reações adversas aos medicamentos em neonatos internados em uma UTI. Metodologia: estudo observacional desenvolvido na Unidade de Terapia Intensiva Neonatal de um hospital de ensino no Brasil. Dados clínicos foram coletados a partir do seguimento farmacoterapêutico diário, processados e analisados por machine learning através de bibliotecas escritas em linguagem Python. Resultados: Oitocentos e três neonatos foram incluídos no estudo, com média de idade gestacional 32,2 ± 4,2 semanas e peso ao nascer médio de 1807,2 ± 936,6g. A incidência de RAM foi de 10,8%. Antimicrobianos, especialmente os aminoglicosídeos, foram os medicamentos mais prescritos nessa população. Um algoritmo foi treinado e testado na predição de RAM em UTI neonatal, cujas métricas foram precision (0,35) e recall (0,823), com especificidade (80%) e sensibilidade (67%). Conclusão: Existe um alto potencial no método de machine learning na predição de RAM em neonatos internados em uma UTI.

Introdução: Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) é uma doença maligna do sistema linfo-hematopoético caracterizada pelo acúmulo de precursores linfóides neoplásicos (linfoblastos) de origem B ou T na medula óssea (MO)e/ou sangue periférico (SP). O diagnóstico e classificação, dessas leucemias, ocorre pela classificação morfológica Franco-Americana-Britânica (L1, L2 ou L3) associada a características do perfil imunológico de malignidade de células T ou B, com base no perfil de expressão de anticorpos monoclonais (AcMo) dirigidos contra os antígenos de diferenciação celular por citometria de fluxo (CF). Vários estudos têm demonstrado que imunofenótipos de células blásticas nem sempre exibem característica de diferenciação linfóide normais, mas exibem imunofenótipos aberrantes. Assim, blastos de alguns casos de LLA B podem possuir antígenos T ou mielóides assim como de células T de LLA podem possuir antígenos B ou mielóides. Objetivos: Determinar o perfil imunofenotípico pela CF em 88 pacientes com LLA (linhagem B ou T) diagnosticados no Laboratório de Citometria de Fluxo do Hemocentro Dalton Cunha – HEMONORTE, do estado do Rio Grande do Norte, Basil. Metodologia: Todas as amostras de SP e/ou MO foram submetidasà imunofenotipagem por CF usando um painel de AcMo específico para o diagnóstico de leucemias agudas (LA) diretamente conjugados a fluorocromos. Resultados: A faixa etária dos pacientes variou de 1 mês a 84 anos, com mediana de 13 anos sendo 62,5% do sexo masculino. A cepa observada mais frequente foi a B e o subtipo mais evidente foi a LLA Pré-B Comum. Dentre os marcadores celulares avaliados, os mais expressos na linhagem B foram CD19, CD10 e cCD79a e os antígenos mais expressos na linhagem T foram CD3, CD7, CD5 e CD2. Uma pequena porcentagem (6,8%) eram células T duplamente positivas. Conclusão: Conclui-se que os indivíduos com LLA neste estudo apresentam características demográficas, clínicas e imunofenotípicas semelhantes às observadas em outros estudos, demonstrando que a CF é uma metodologia essencial no diagnóstico e seguimentos dessas leucemias.

O sisal é a principal fibra dura produzida no mundo. Na composição química do resíduo de Agave sisalana, são encontrados carboidratos, saponinas e compostos fenólicos. Os compostos fenólicos são utilizados na indústria cosmética com atividades fotoprotetora e antioxidante. Este trabalho teve como objetivo desenvolver uma formulação multifuncional com atividades antioxidante e fotoprotetora a partir do resíduo industrial de A. sisalana. Foi realizado uma extração por ultrasonicação do material vegetal sólido, variando as concentrações do agente extrator (etanol/água 50%, 80% e 100%). O extrato com melhor rendimento foi caracterizado quimicamente e avaliado quanto a atividade antioxidande in vitro. Foram preparadas dez formulações fotoprotetoras variando as concentrações dos emulsificantes e o tempo de cisalhamento. O extrato de A. sisalana a 1,0% foi incorporado às formulações mais estáveis e a estabilidade preliminar e acelerada dessas foi avaliada e investigada quanto a segurança. As formulações fotoprotetoras contendo ou não o extrato que se apresentaram estáveis após 90 dias, tiveram a determinação do Fator de Proteção Solar in vivo, Fator de Proteção UVA, comprimento de onda crítico, e proteção contra a luz visível e azul. A extração por ultrassom utilizando etanol/água 50%, como veículo extrator foi a que apresentou melhor rendimento. O extrato exibiu boa concentração de compostos fenólicos e apresentou atividade antioxidante in vitro nas diferentes etapas da cascata oxidativa. Emulsões sem e com o extrato de A. sisalana 1,0% se mantiveram estáveis durante 90 dias, apresentando comportamento reológico desejável para um cosmético de uso tópico. A emulsão contendo o extrato de A. sisalana apresentou-se segura após os estudos clínicos. Verificou-se que a adição do extrato a formulação fotoprotetora aumentou estatisticamente o FPS quando comparada a formulação sem o extrato com proteção contra radiação UVA, comprimento de onda crítico, absorção da luz visível e azul e contemplam as exigências da legislação atual para protetores solares. Diante dos resultados apresentados o resíduo sólido de A. sisalana pode ser utilizado como ingrediente de formulações cosméticas fotoprotetoras e antioxidantes.

A morbimortalidade vem se tornando cada vez mais frequente causada principalmente pelas doenças crônicas não-transmissíveis. Ter uma ferramenta de triagem para auxiliar no diagnóstico da síndrome metabólica e risco cardiometabólico, que seja rápida, fácil aplicação e baixo custo, é uma necessidade para a realidade da saúde pública brasileira que não consegue proporcionar o acesso aos exames de rotina para toda a população. Assim, o objetivo do estudo foi propor pontos de corte para índices antropométricos a fim de identificar o risco cardiometabólico e síndrome metabólica, bem como comparar a sua capacidade preditiva. Trata-se um estudo descritivo com delineamento transversal. A amostra foi composta por 330 sujeitos, sendo 192 do sexo feminino e 138 do sexo masculino, estudantes universitários com idades entre 18 e 59 anos. Como critérios de inclusão, os participantes poderiam ou não apresentar algum critério válido para diagnóstico de síndrome metabólica, NCEP/ATP III. Foram excluídos do estudo gestantes, pessoas com deficiência física, pessoas com utilização de órteses, gesso ou em qualquer situação que interferisse nos resultados das medidas antropométricas de forma a não permitir o cálculo dos índices, assim como as pessoas com doenças crônicas ou metabólicas que afetassem o estado da composição corporal. Foram realizadas medidas de massa corporal, estatura e circunferência da cintura para calcular os índices antropométricos A body shape index, Body Roundess index, Circunferência da cintura e Razão cintura/ estatura (ABSI, BRI, CC, RCE). O percentual de gordura foi verificado por meio de DXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry), além de determinadas a partir da amostra sanguínea, as concentrações séricas de glicose de jejum, colesterol total, HDL-colesterol, LDLcolesterol e triglicerídeos. Também foi medida a pressão arterial. Como resultados, os pontos de corte dos índices antropométricos para o sexo feminino foram propostos: ABSI >0.073; BRI >1.81; CC >87.8 e RCE >0.52; além dos pontos de corte para a distribuição de gordura corporal: 49,5% para gordura total, para gordura ginoide 42,9% e para gordura androide 44,2%. Já para o sexo masculino foram propostos os seguintes resultados: ABSI >0.079; BRI >3.42; CC >90 e RCE >0.5 como pontos de corte de índices antropométricos; e 26,3% para gordura corporal total, para gordura ginoide 28,7% e gordura androide 34,5%. Com base na sensibilidade e especificidade dos dados, pudemos observar que a CC obteve resultados excelentes para ambos os sexos, podendo ser amplamente aplicada na população brasileira, além do BRI que obteve melhores resultados para o sexo feminino e o RCE para o sexo masculino, obtendo pontos de corte ótimos para triagem do risco cardiometabólico e da síndrome metabólica. Além disso, ficou evidenciado que o ABSI não possui um bom poder preditivo para os fatores de risco analisados. Quanto à adiposidade, a gordura androide apontou ser a melhor preditora de risco cardiometabólico e síndrome metabólica.

Os radicais livres, produzidos para a manutenção da infecção pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi) no humano na fase crônica da Doença de Chagas, tem relação direta com o desenvolvimento de cardiomiopatias. Antioxidantes vem sendo usados como aliados no tratamento dessa condição. Os nitróxidos são radicais livres estáveis capazes de interagir com espécies reativas, reduzindo sua carga no organismo e, consequentemente, agindo na redução do estresse oxidativo corporal. O Tempol é o nitróxido mais estudado, e a partir da adição outros grupamentos, pode-se obter diversos compostos, como o Bztempo (BZT). Complexos de inclusão com a β-ciclodextrina (βCD) podem ser obtidos para a melhoria de características físico-químicas e a biodisponibilidade de diversos compostos. Tendo isso exposto, o seguinte estudo buscou obter racionalmente um complexo de inclusão contendo BZT e a βCD para o tratamento da infecção por T. cruzi. O planejamento dos complexos de inclusão foi feito a partir de metodologias in sílico, sendo elas Relação Quantitativa Estrutura-Propriedade (QSPR-2D) e Energia de Interação Linear (LIE). Os sistemas obtidos por mistura física (MF), malaxagem (MAL) e slurry (SL), caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Calorimetria Diferencial Esploratória (DSC) e Análise Termogravimétrica (TGA). A atividade in vitro foi feita pela inibição de resazurina em duas formas evolutivas da cepa Y de T. cruzi, epimastigota e tripomastigota, frente as amostras de BZT, βCD, MAL e SL. O modelo de predição obtido por QSPR-2D aliado ao LIE foi capaz indicar a viabilidade dos complexos de inclusão entre o BZT e βCD, demonstrando energias livres favoráveis para a interação. O FTIR indicou a formação de complexos de inclusão por MAL e SL, pois obtiveram espectros que diferem das bandas características dos compostos isolados. As fotomicrografias obtidas por MEV demonstraram a natureza cristalina do BZT e também foram indicativos da formação dos complexos por alterações na superfície dos sistemas, comparado aos compostos isolados. O DSC dos sistemas obtidos de MF e MAL apresentaram picos endotérmicos característicos dos compostos isolados. Por sua vez, o SL apresentou um perfil térmico diferente, com eventos próprios da mistura. A TGA demonstrou que os sistemas obtidos por MAL e SL incrementaram a proteção térmica do BZT isolado. No tocante da atividade in vitro, a βCD não interferiu na atividade para ambas as formas evolutivas e os complexos de inclusão testados, MAL e SL, incrementaram a atividade do BZT isolado. Para formas epimastigotas, MAL e SL não chegaram a obter os mesmos resultados do fármaco usado como controle positivo, o Benzonidazol (BZND). Para essa forma evolutiva, entre eles, o MAL obteve maior atividade em comparação ao SL até a concentração 50 μg/mL e a partir de 50 μg/mL, o SL obteve maior atividade. Para as formas tripomastigotas, o MAL obteve atividade semelhante ao BZND nas concentrações de 10 e 25 μg/mL. Em 50, 100 e 1 μg/mL, o MAL se sobressaiu em relação ao BZND, e ao outro método de obtenção testado, o SL. Os resultados demonstraram que os complexos de inclusão obtidos com BZT por MAL e SL podem ser aliados no tratamento da Doença de Chagas.

A hepatite autoimune (HAI) é uma doença hepática grave que afeta crianças e adultos em todo o mundo. Ela se desenvolve em indivíduos geneticamente susceptíveis quando um gatilho ambiental leva a uma resposta autoimune direcionada a autoantígenos hepáticos, envolvendo as células imunes, citocinas, auto-anticorpos e o sistema complemento. Nos últimos anos a atividade imunomoduladora da vitamina D vem sendo estudada e neste sentido a associação desta vitamina com as doenças autoimunes vêm sendo investigada, visto que ela atua nas vias de regulação que previnem e melhoram a inflamação e a imunidade. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a associação da vitamina D com a hepatite autoimune, por meio da avaliação do estado nutricional de vitamina D e da expressão dos genes que codificam o seu receptor (VDR) e as citocinas IL-6 e IL-10 em crianças e adolescentes com HAI. Para este fim, 30 voluntários (16 pacientes com diagnóstico de HAI - Grupo Caso e 14, sem o diagnóstico da doença - Grupo Controle) foram incluídos no estudo. Foi realizada a coleta de sangue periférico por punção venosa para avaliação do estado metabólico geral (parâmetros bioquímicos), quantificação da 25(OH)D3 e quantificação da expressão do RNAm de VDR, IL6 e IL10. Observou-se que a maioria dos pacientes com HAI é do sexo feminino com idade média de 14 anos. No tocante aos parâmetros bioquímicos, foram encontrados aumentos nas atividades de AST (aspartato aminotransferase), ALT (alanina aminotransferase), GGT (gama glutamil transferase), FAL (fosfatase alcalina) e LDH (lactato desidrogenase), para os pacientes com HAI quando comparados aos controles. Já em relação à vitamina D, observou-se uma grande frequência de indivíduos com valores abaixo do recomendado nos pacientes com HAI (71%), enquanto que nenhum dos indivíduos do grupo controle apresentou valores abaixo do recomendado, além disso observou-se uma correlação entre a expressão de IL10 com a quantificação da 25(OH)D, sugerindo que quanto menor a concentração de vitamina D, menor será a expressão de IL10. Assim, pode-se concluir que os pacientes do grupo caso mostram um perfil característico de pacientes com HAI compensados e que há indícios de que a vitamina D pode estar associada ao desenvolvimento da doença.

A integridade da pele é essencial para a vida humana. Quando ocorre uma ruptura nessa barreira física, o intuito do mecanismo de reparo é induzir uma resposta rápida e eficiente para evitar complicações como a formação de queloides ou evolução para uma ferida crônica. Nesse cenário, a demanda pela busca de biomoléculas, com características antioxidantes, antimicrobiana, anti-inflamatória e imunoestimulante, como os quitooligossacaídeos (QOS), que possam auxiliar no processo de cicatrização, tem aumentado recentemente de maneira acelerada. Diante disso, esse estudo apresenta como objetivo produzir QOS, em dois tempos de hidrólise (1 e 5 minutos) por quitosanases derivadas de Bacillus toyonensis, realizar sua caracterização estrutural, avaliar sua biocompatibilidade, em modelos de toxicidade aguda in vivo e citotoxidade, e sua ação cicatrizante nos modelos de migração celular (“scratch”) in vitro e no de reparo de feridas in vivo. O processo de degradação enzimática da quitosana produziu oligossacarídeos com grau de desacetilação de cerca de 80%, com predominância de hexâmeros indicada através da técnica de cromatografia de permeação em gel (CPG) e comprovada na análise de espectrometria de massas. O ensaio de toxicidade aguda confirmou a não toxicidade dessas substâncias e a viabilidade celular indica a biocompatibilidade dessas oligossacarídeos sobre fibroblastos murinos. A capacidade dos QOS em estimular a migração de fibroblastos in vitro foi observada em todas as concentrações testadas (100; 250; 500 µg/mL), com uma redução de até 100% no tamanho da ranhura após 12 horas da adição da concentração de 500 µg/mL de QOS produzidos com 5 minutos de hidrólise. O efeito cicatrizante in vivo desses oligossacarídeos foi confirmado no modelo da ferida induzida por corte cirúrgico, onde essas moléculas apresentaram redução significativa para os grupos testados com QOS1 30 mg/kg (89,25% ± 2,2), QOS1 300 mg/kg (82% ± 10,6), QOS5 30 mg/kg (89,25% ± 1,7) e QOS5 300 mg/kg (93% ± 0,8) quando comparados ao grupo salina (61,25% ± 8,1) no sétimo dia de experimento. Apesar de não possuir mecanismo de ação conhecido, a presença de hexâmeros pode estar relacionada com os efeitos biológicos dos QOS. Dessa forma, os resultados obtidos indicam o potencial uso como cicatrizante dos QOS para o âmbito farmacêutico

A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença específica da gestação caracterizada por hipertensão e lesão em órgão-alvo após 20 semanas de gestação. As complicações da PE podem comprometer diretamente a vida da mãe e do feto/neonato. Assim, o entendimento do desenvolvimento da doença pode levar a uma intervenção mais precoce e um manejo mais adequado, diminuindo o risco à saúde materna e fetal/neonatal. Neste sentido, há evidências da associação entre a deficiência de vitamina D e falha nos processos de imunomodulação que estariam diretamente relacionados ao desenvolvimento e a evolução da PE. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a concentração de 25-hidroxivitamina D (25(OH)D) e sua correlação com parâmetros bioquímicos gerais em gestantes com PE. Foram incluídas 45 gestantes, sendo 25 com diagnóstico de PE com sinais de gravidade (Grupo PE) e 20 normotensas (Grupo normotensas). Após assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido foram coletadas uma amostra de sangue em jejum, para a avaliação do perfil bioquímico geral e quantificação da 25(OH)D, e uma amostra da primeira urina da manhã para a determinação da relação albumina:creatinina urinária (RAC). Para a avaliação da vitamina D o grupo PE foi subdividido de acordo com o momento do desenvolvimento da PE, em grupo PE precoce (pacientes que desenvolveram PE antes da 34ª semana de gestação) e grupo PE tardia (pacientes que desenvolveram PE a partir da 34ª semana de gestação); e de acordo com a presença (grupo PE + HR) ou não (grupo PE) de hipertensão resistente associada. Em relação ao perfil bioquímico geral das pacientes observou-se valores aumentados de ureia (p<0,001), creatinina (p<0,001), RAC (p<0,001), ácido úrico (p<0,001), AST (p=0,016), LDH (p=0,002), fósforo (p=0,046) e magnésio (p<0,001), assim como valores diminuídos de albumina (p<0,001), proteína total (p<0,001) e cálcio (p<0,001), no grupo PE quando comparado às normotensas. No tocante à quantificação da 25(OH)D, foram observados valores estatisticamente menores no grupo PE precoce quando comparado ao grupo PE tardia (p = 0,045), não sendo observadas diferenças estatísticas entre os demais grupos estudados. Foi notada, ainda, uma correlação negativa entre os valores da 25(OH)D e da RAC (r=-0,765, p<0,001). Assim, conclui-se que há indícios de que a deficiência de vitamina D pode estar associada à PE precoce e que quanto menor a concentração de 25(OH)D maior será a gravidade da PE.

O câncer colorretal (CCR) é o tumor maligno mais comum do trato gastrointestinal. É uma doença multifatorial que envolve fatores ambientais, genéticos e de estilo de vida. Devido à ausência de biomarcadores específicos e sensíveis, os pacientes com CCR geralmente são diagnosticados em um estágio avançado e, consequentemente, sofrem de uma baixa taxa de sobrevida global em 5 anos. Vários estudos demonstraram que pequenos RNAs não codificantes, como os microRNAs (miRNAs) obtidos de exossomos, são biomarcadores potenciais em vários tipos de câncer, incluindo o CCR, e que podem ser detectados de forma estável tanto no soro quanto no plasma. Desta forma, o presente estudo busca apresentar uma visão geral do papel dos miRNAs exossômicos circulantes com potencial para atuar como biomarcadores para o diagnóstico e prognóstico do CCR a partir de evidências disponíveis na literatura. Neste intuito, desenvolveu-se uma revisão da literatura consultada na base eletrônica de dados publicados entre 2015 a 2019. Foram identificados 28 artigos que descreveram os miRNAs exossômicos circulantes como potenciais biomarcadores de diagnóstico, prognóstico e alvos terapêuticos do CCR. Um total de 59 miRNAs exossômicos diferencialmente expressos foram sugeridos como bons candidatos para uso como biomarcadores do CCR. Desta forma, a presente revisão almeja que o uso de biomarcadores circulantes, em conjunto com os métodos de triagem atuais, possam fornecer um caminho para uma futura utilização na prática clínica em pacientes com CCR e, consequentemente, contribuir para diminuição da mortalidade decorrente da dificuldade da detecção precoce, assim como na melhoria da qualidade de vida dos pacientes.

A licófita Selaginella convoluta é uma espécie nativa do bioma Caatinga e está inserida no grupo das plantas da ressureição. No gênero Selaginella é relatada uma ampla diversidade de moléculas quimicamente singulares, em especial as que compõem as classes de biflavonoides e selaginelinas, sendo estas últimas exclusivas do gênero. O presente projeto objetiva estudar a ocorrência de metabólitos secundários de interesse farmacêutico em S. convoluta, norteando-se em dados prévios de proteoma obtidos de partes aéreas e raízes em situação de dessecação e irrigação, sendo um dos principais interesses, o estudo da biossíntese de metabólitos secundários de interesse farmacêutico. A análise instrumental do proteoma foi realizada em um sistema UPLC DionexUltimate 3000 com re-fragmentação dos íons mais intensos em espectrômetro de massas com detector de armadilha linear em quadrupolo (LTQ), sendo o tratamento dos dados realizado pelo software PatternLab for Proteomics. Os resultados de proteoma enfatizam a preparação da espécie para tolerar a dessecação por meio de mecanismos coordenados de proteção e sinalização inter-órgãos. Destacam-se as partes aéreas enquanto o principal órgão na biossíntese de metabólitos secundários, contudo é perceptível o envolvimento e comunicação da planta como um todo na mobilização de enzimas presentes em vias de biossíntese. Neste sentido, àquelas ligadas a biossíntese de fenilpropanoides sugerem a construção de metabólitos das classes de cumarinas e ligninas, sendo também elencanda a enzima polifenol oxidase, importante reguladora da via de fenilpropanoides, como atuante na síntese de produtos naturais em S. convoluta. As abordagens apresentadas contribuem para a inserção de métodos inovadores no estudo de moléculas oriundas de espécies da Caatinga, bem como permitem a resolução de questões de fronteira no estudo de espécies vegetais com enfoque na biossíntese de moléculas de potencial bioativo, o que promove este bioma exclusivamente brasileiro no cenário de alto impacto biotecnológico do Brasil.

Introdução: As RAM têm uma incidência significativa entre pacientes hospitalizados. Um passo importante para reduzir a incidência das reações adversas seria a identificação daqueles pacientes que estão em risco aumentado de desenvolver uma RAM a partir de fatores de risco individuais. Objetivo: Desenvolver uma ferramenta para prever reações adversas a medicamento em pacientes hospitalizados. Metodologia: Estudo observacional, analítico, de casos-controles na proporção 1:2, de todos os pacientes admitidos durante o período junho de 2016 a dezembro de 2017 no Hospital Universitário Onofre Lopes, Brasil. Para a identificação das variáveis dos pacientes associadas com a ocorrência de RAM foi realizada inicialmente, com a totalidade da população do estudo, a análise univariada de cada variável do paciente por regressão logística condicional. Para a análise multivariada foram incluídas as variáveis que em análise univariada apresentaram associação significativa com a ocorrência de RAM a um nível de significância <0,10. Foi utilizado o programa estatístico Stata 12. Resultados: A proporção de pacientes em que ocorreu uma ou mais RAM foi de 4,43% (IC95% 4,00-4,90%). As reações adversas mais comuns foram a hipoglicemia (26,4%) e a hipotensão (15,2%). A análise univariada identificou 27 variáveis que se mostraram associadas com a ocorrência de RAM. Doze variáveis se mantiveram estatisticamente relacionadas com a ocorrência de RAM, dentre elas o sexo feminino (OR ajustado (ORA) 1,61, IC 95% 1,18-2,21), história prévia de RAM (ORA 1,97 IC 95% 1,34-2,90), diabetes sem (ORA 1,63 IC 95% 1,13-2,34) e com lesão de órgão alvo (ORA 6,49, IC 95% 3,56-11,83) e prescrição de medicamento administrado por via intravenosa (ORA 1,60, IC 95% 1,14-2,24). Conclusão: A prevalência de RAM foi observada em 3,97% dos pacientes, com destaque para reações dose dependentes de hipoglicemia e hipotensão. Foram identificados doze fatores independentes de risco de desenvolvimento de RAM, destacando-se a diabetes com lesão em órgão alvo como o fator de maior impacto. A partir desses fatores, o instrumento de avaliação de risco para desenvolvimento de RAM foi elaborado e validado.

A biodiversidade brasileira oferece enorme riqueza de flora, oportunidade singular para a atividade de bioprospecção. Dentre as moléculas bioativas, encontradas na maioria dos organismos vegetais, os alcaloides representam uma ampla variedade de estruturas químicas. Dentre os biomas brasileiros, a Caatinga, vegetação predominante da região Nordeste, oferece patrimônio biológico que não pode ser encontrado em nenhum outro local do planeta. É neste ambiente xérico que se encontra a Erythroxylum pungens O.E Shulz, espécie arbórea-arbustiva com grande potencialidade em alcaloides bioativos pouco explorados. O objetivo deste trabalho é a bioprospecção de alcaloides tropânicos de Erythroxylum pungens O. E. Shulz, coletadas em ambiente natural, a avaliação do efeito do estresse hídrico em plantas jovens e avaliação do potencial bioativo in vivo em organismo modelo Danio rerio (Zebrafish), bem como, análise in silico do alcaloide majoritário. No Capítulo 1, realizou-se o experimento de estresse hídrico por meio da suspensão de rega em espécimes de E. pungens até 20 dias. Concluímos que E. Pungens consegue armazenar altos índices de prolina, aminoácido osmoregulador e protetor, como resposta à tolerância a seca. Também, a partir de análises por CG-MS, foi possível observar que a produção diferenciada de alcaloides tropânicos está relacionada mais com a fase de desenvolvimento do que com a condição de estresse hídrico em que a planta foi submetida. No capítulo 2 foi possível identificar, por meio de análises espectroscópicas realizadas por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-EM), que foram identificados 13 alcaloides tropânicos neste estudo, sendo três destes inéditos para a espécie e classe de alcaloide. O alcaloide majoritário do caule foi isolado e realizada a atividade biológica com ele. Realizou-se o ensaio de toxicidade, para as larvas, a dose letal foi de 4,73 mg/L enquanto não houve toxicidade em experimento com até 30 mg/L com peixes adultos. No ensaio comportamental de campo aberto com zebrafish adultos para avaliar a atividade bioativa do alcaloide tropânico majoritário dos caules, o 3α-(2-metilbutiriloxi)tropan-6,7-diol mostrou ação psicoestimulatória a 30 mg/L. No teste in silico, os alvos envolvidos nas vias antidepressivas foram identificados atracando com o alcaloide. 3α-(2-metilbutiriloxi)tropan-6,7-diol parece estar envolvido em alterações comportamentais do zebrafish e merece investigação futura como uma possível nova molécula no tratamento de sintomas depressivos, ou possível efeito alucinógeno.

As plantas pertencentes ao gênero Erythrina são fontes de alcaloides tetracíclicos do tipo benzilisoquinolínicos, podem ser encontradas no nordeste brasileiro, no bioma da Caatinga e utilizadas na medicina popular principalmente como depressor do sistema nervoso central (sedativo, calmante). Um dos fatores limitantes que muitos produtos naturais apresentam como medicamentos é seu baixo rendimento e difícil obtenção em quantidades suficientes para abastecer a indústria farmacêutica. Dessa forma, de acordo com estudos de fronteira na área é importante compreender aspectos da biossíntese de alcaloides através de ferramentas moleculares. Este trabalho tem como objetivo contribuir com o estudo na área de biossíntese no que se refere aos alcaloides presentes nas folhas e sementes da espécie Erythrina velutina Willd através das tecnologias ômicas (transcriptoma, proteoma e perfil metabólico) de forma a compreender a dinâmica de produção dessas moléculas com potencial bioativo. Portanto, para a investigação do transcriptoma realizamos o sequenciamento de novo pela primeira vez em uma espécie do gênero e em uma planta nativa do bioma Caatinga. A análise do proteoma e do perfil metabólico direcionado foram realizados com uma estratégia de Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massas [LC-MS/MS] aliado à ferramenta do Molecular Networking para os metabólitos secundários. Como resultado, foram identificados 17 transcritos e 4 proteínas candidatos a compor a via biossintética dos alcaloides isoquinolínicos em sementes e folhas desta espécie. Além disso, 29 alcaloides foram anotados pertencendo às três classes de alcaloides da reportadas para o gênero: dienoide, alcenoide e lactona, sendo 12 alcaloides comum a folhas e sementes, 8 encontrados exclusivamente em semente e 9 exclusivos em folhas. Esses dados contribuem com o conhecimento cientifico no delineamento de estratégias de intervenção biotecnológica para estudos futuros, a fim de melhorar a produção dessas moléculas bioativas na planta, além da valorização de uma planta da Caatinga do RN como fonte de alcaloides com potencial interesse farmacêutico.

A infecção causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi acomete os seres humanos ocasionando a doença de Chagas. Atualmente, as principais medidas disponíveis para essa doença são tratamento e controle vetorial. O desenvolvimento de vacinas acontece, principalmente, pelo o uso de antígenos do agente etiológico. As partículas semelhantes a vírus (do inglês virus-like particles ou VLPs) são estruturas análogas a cápsides virais compostas essencialmente por proteínas estruturais, não possuem material genético viral e são amplamente utilizadas em protocolos de vacinação por causa de suas propriedades imunoestimulatórias. Nesse contexto, o objetivo do atual trabalho foi caracterizar a capacidade imunoestimulatória de partículas semelhantes a virus de Triatoma virus (VLPs-TrV), na presença e ausência do adjuvante hidróxido de alumínio, utilizando o modelo murino de imunização, paralelamente observar o comportamento imunogênico das VLPs com quatro antígenos recombinantes quiméricos de T. cruzi denominados mix-IBMP. Para isso, camundongos BALB/c (Mus musculus) com 8 semanas de idade foram utilizados e amostras de soros foram colhidas em diferentes momentos. O perfil de anticorpos IgG total, IgG1, IgG2a, IgG2b e IgG3 foram determinados por ELISA. Os dados obtidos demonstram a capacidade de VLPs-TrV sem a presença de alumínio induzir preferencialmente os anticorpos do tipo IgG2b e IgG3, além disso, os animais imunizados com VLPs-TrV tiveram o mesmo perfil de IgG total que os imunizados com VLPs-TrV associado ao hidróxido de alumínio. Além disso, mix-IBMP tem melhor perfil de IgG total e subclasses IgG1 e IgG3 quando associado a VLPs-TrV, mesmo com a possível competição antigênica entre VLP e antígenos IBMP. Em conclusão, esses resultados contribuem para a potencialização de VLPs-TrV como adjuvante em formulações vacinais em modelo murino, apesar dos mecanismos na indução da resposta polarizada para Th1 precisarem ser mais claramente entendidos.

A principal estratégia de controle das doenças transmitidas pelo mosquito Aedes aegypti é a eliminação do vetor, principalmente em sua fase larval. Apesar da eficácia dos larvicidas e inseticidas comerciais, esses produtos apresentam toxicidade ambiental sendo o uso de produtos naturais uma alternativa para essa problemática. O objetivo desse estudo foi desenvolver e caracterizar formulações contendo cinamato de pentila e avaliar sua atividade larvicida para o Aedes aegypti. O cinamato de pentila foi obtido por semissíntese através da esterificação do ácido cinâmico. Este composto foi caracterizado e sua pureza determinada por RMN 1H e CLUE-EM/EM. Foram realizados ensaios de atividade do cinamato de pentila em larvas L3 e em mosquitos adultos de A. aegypti, obtendo-se uma atividade larvicida com DL50 de 19,9 μg.mL-1, e contra mosquitos adultos na dose de 200 μg por frasco teste, 80,8 ± 3,8 % de mortalidade em 2 h. Foram produzidas nanoemulsões com as lecitinas PHOSAL® 50+ (PHO), LIPOID® S 20 (L20) e LIPOID® S 75-3 (L75) por agitação mecânica e ultra turrax. As nanoemulsões foram submetidas à secagem por atomização para a obtenção de micropartículas sólidas caracterizadas por FTIR, MEV, DSC e TG. As nanoemulsões obtidas por agitação com turrax tiveram menores tamanhos de gotícula, sendo a de PHO: 81,0 ± 1,8 nm; L20: 120,4 ± 4,9 nm e L75 com 150,9 nm. As nanoemulsões de PHO se mostraram as mais estáveis durante 30 dias de observação, também foram as que apresentaram maior teor de cinamato de pentila com 66,0 ± 0,5%. As imagens obtidas por MEV evidenciaram que as micropartículas formadas pelas diferentes lecitinas tiveram aspecto semelhante entre elas. Nos espectros de FTIR foram observados sinais de estiramento característicos do cinamato de pentila e dos excipientes e pelas técnicas de DSC e TG foi possível ver um aumento da estabilidade do composto incorporado nas micropartículas sólidas. O estudo preliminar de toxicidade em zebrafish demonstrou evidências de toxicidade do cinamato de pentila em baixas concentrações, entretanto futuros estudos poderão ser realizados para a influência do solvente neste tipo de modelo. As nanoemulsões e micropartículas produzidas se mostraram adequadas para viabilizar o uso em água desse éster com potencial uso como larvicida e adulticida, abrindo perspectivas para estudos com outros compostos.

Infecções ocasionadas por microrganismos patogênicos como Mycobacterium tuberculosis e Helicobacter pylori tem demonstrado índices alarmantes em relação a sua incidência e prevalência no Brasil afora. Portanto, há uma necessidade urgente de planejar novos fármacos, seguros e eficientes com o intuito de hostilizar essas infecções. O planejamento de fármacos baseado na estrutura do receptor é uma tecnologia que pode ser empregada neste processo, bastando apenas o conhecimento de um alvo de interesse para doença e ligantes com afinidades variáveis. A desidroquinato desidratase II (DHQase II) é uma enzima que faz parte da rota biossintética dessas bactérias, denominada como a via chiquimato. Essa via é considerada de suma importância para o crescimento desses microrganismos patogênicos. Diante disso, a DHQase II tornou-se um alvo atrativo para o planejamento racional de novos inibidores. O objetivo geral desse trabalho foi o planejamento racional de novos compostos ativos que possam inibir esta enzima. A utilização das técnicas de regressões lineares para desenvolver modelos preditivos de QSAR (2D, 3D, 4D e híbrido) com ótimos parâmetros estatísticos, possibilitou na elaboração de moléculas inéditas sem a real necessidade de execução de teste de atividade biológica in vitro ou in vivo. Os descritores dos respectivos modelos lineares atrelados as análises dos Activity Cliffs, corroboraram na elucidação das interações intermoleculares dos inibidores com o sítio receptor da DHQase II das duas bactérias. Os dados obtidos servem como guia para o planejamento racional de novos antibióticos potentes e altamente seletivos para atuar na inibição enzimática da DHQase II.

A Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) é uma endocrinopatia de causa
multifatorial, origem indefinida e que acomete uma considerável parcela da população
feminina em idade reprodutiva. Devido ao seu perfil metabólico característico, podem
apresentar dislipidemia, obesidade, síndrome metabólica (SM) e resistência à insulina (RI),
estes fatores podem contribuir para o desenvolvimento de estresse oxidativo (EO). Esse EO
gerado pelo excesso de espécies reativas de oxigênio favorece o desenvolvimento de
complicações, como a aterosclerose, doenças inflamatórias, cardíacas, entre outras.
Considerando este fato, a coenzima Q10 é uma benzoquinona que desempenha um papel
importante na eliminação de radicais livres e na inibição da oxidação lipídica e protéica.
Diante disso, o presente estudo objetivou avaliar o efeito da suplementação com a coenzima
Q10 sobre a resistência insulínica em mulheres obesas com SOP. A população do estudo foi
composta por 60 mulheres obesas, com idades entre 20 e 40 anos com e sem o diagnóstico de
SOP. Para análise comparativa, as pacientes foram divididas em dois grupos: Caso (obesas
com SOP - n = 30); Controle (obesas sem SOP – n = 30), e submetidas à suplementação com
a coenzima Q10 100mg/dia via oral por 08 semanas. A obesidade foi caracterizada pelo índice
de massa corporal (IMC), considerando o ponto de corte ≥ 30,0 kg/m². Em seguimento, as
mulheres foram avaliadas quanto aos parâmetros clínicos, bioquímicos e hormonais. A análise
estatística dos dados foi realizada com o pacote estatístico SPSS© 22. A RI esteve presente
em 76,7% do grupo caso e 80% do grupo controle. A análise comparativa entre o grupo SOP
pré e pós-intervenção, demonstrou diferenças significativas em relação à massa (91,1 vs. 89,9
kg p=0,008), glicose 120 minutos (138 vs. 122,5 mg/dL p=0,004), insulina (16,2 vs. 10,7
μUI/mL p=0,000), HOMA-IR (3,67 vs. 2,31 p=0,000) e QUICKI (0,31 vs. 0,30 p=0,000).
Além disso, foram observadas alterações significativas no perfil hormonal, tais como
hormônio folículo estimulante (5,4 vs. 6,0 UI/mL p=0,004), hormônio luteinizante (6,3 vs. 4,5
UI/mL p=0,000), testosterona (32,1 vs. 22,0 ng/dL p=0,000) e progesterona (0,20 vs. 0,35
ng/dL p=0,000). Em relação ao grupo controle (pós-suplemetação), foi possível observar
resultados significativos frente aos parâmetros bioquímicos e hormonais. Deste modo, a
intervenção com a coenzima Q10 pode promover efeitos benéficos em relação às principais
alterações metabólicas e hormonais que estão presentes na SOP e obesidade.

O aumento de surtos de doenças infeciosas, a progressão mundial da resistência microbiana e o elevado impacto de doenças tropicais negligenciadas reforça a busca por novas moléculas com potencial antimicrobiano. A quitosana é um copolímero formado de D-glicosamina e N-acetil-glicosamina, obtida pela desacetilação parcial da quitina. A hidrólise da quitosana gera os quitooligossacarídeos (QOS) e monossacarídeos. Os QOS apresentam maior vantagem em relação à quitosana devido a maior solubilidade e menor viscosidade. Aliado a esses parâmetros, pesquisas demonstram o vasto potencial biológico dos QOS com propriedades antimicrobiana, anti-inflamatória, antioxidante e antitumoral. Apesar do conhecimento dos efeitos biológicos dos QOS, a atividade antiparasitária dessas moléculas é pouco estudada. Dessa forma, os objetivos deste estudo foram obter QOS, a partir da hidrólise enzimática da quitosana por quitosanases provenientes de Bacillus toyonensis, caracterizar os oligômeros e avaliar seus efeitos citotóxicos, antimicrobiano e antiparasitário in vitro. A mistura de QOS produzidos por hidrólise enzimática nos tempos de 5 e 10 min de reação foram caracterizados por RMN 1H e ¹³C, uni e bidimensional, e espectrometria de massas. Ambos os oligômeros avaliados não demonstraram citotoxicidade sobre células cancerígenas e não cancerígenas até 2 mg/mL. Os QOS revelaram efeito antimicrobiano semelhante a quitosana frente a bactérias e leveduras. No ensaio antiparasitário, os QOS apresentaram inibição parasitária tempo-dependente sobre os parasitos Trypanosoma cruzi e Leishmania amazonensis. A possibilidade de obtenção de uma molécula de elevado interesse biotecnológico a partir de resíduos da carcinicultura, resultando na diminuição do impacto ecológico, releva a importância do estudo e utilização dos quitooligossacarídeos para obtenção de novos agentes farmacológicos.

A espécie Scoparia dulcis L. (Plantaginaceae), comumente conhecida como vassourinha, é utilizada popularmente como cicatrizante, anti-inflamatório e no tratamento de doenças gastrointestinais. Os principais metabólitos secundários descritos para a espécie são os terpenos como ácidos scopadulcico A e B, scopadiol, scopadulciol, scopadulinico, ácidos scoparico A – C, mas também tem relatos da presença de flavonoides. O presente estudo teve como objetivo investigar o perfil fitoquímico e avaliar o potencial antiviral e a toxicidade do extrato das folhas de S. dulcis. Foram preparados extratos hidroetanólicos com amostras coletadas na zona urbana do município Natal e amostras coletadas na zona rural do município de Serra Caiada-RN, com variação do método de extração e teor alcoólico: maceração 35%, e 70% e turbólise 35% e 70%. Os extratos foram analisados por Cromatografia em Camada Delgada e por Cromatografia Líquida acoplada a espectrômetro de massas e foi avaliado o teor de flavonoides e fenois totais em cada extrato. Os extratos obtidos com amostras da zona urbana foram avaliados quanto a citotoxicidade pelo teste de viabilidade celular em células VERO pelo teste de MTT e atividade antiviral dos extratos frente ao vírus herpes tipo I- HSV-1 nos ensaios: de atividade virucida, pós-infecção, concomitante e pré-tratamento. A toxicidade oral aguda do extrato obtido por maceração 70% de amostras coletadas da zona rural de Serra Caiada foi avaliada em modelo in vivo, por administração oral de 2000 mg/kg. Por meio das análises cromatográficas foram identificadas ao total 31 substâncias nos extratos de S. dulcis, sendo a maioria flavonoides como O-glicosídeos derivados do núcleo quercetina, além de terpenoides como álcool benzílico, metil éster do ácido benzoico, metil éster do ácido palmítico, metil éster do ácido oleico, metil éster do ácido fitol, metil éster do ácido esteárico, n-tetracosano e mais cinco composto não identificáveis. Quanto ao teor de fenois e flavonoides totais os extratos que apresentaram o maior teor foram: turbolise 70% 104,18±0,05 para fenois e 64,06±0,05 para flavonoides e maceração 70% zona rural com 98,04±0,03 e 56,75±0,06. No ensaio do MTT, foi observada uma viabilidade celular acima de 80% para todos extratos até a concentração de 250 μg/mL, com exceção do extrato obtido por turbólise 35 % que apresentou viabilidade celular inferior à 50%. Nos modelos antivirais estudados, o extrato obtido por turbólise 70 % mostrou-se o mais eficiente quando comparado aos demais extratos, visto que, promoveu uma inibição significativa do vírus HSV-1 nos modelos avaliados. Em relação a avaliação da toxicidade aguda in vivo do extrato obtido por maceração 70% (amostra rural), não foi observado nenhuma alteração nos parâmetros bioquímicos, comportamentais ou hematológicos que fossem sugestivos de suposta toxicidade gerada pelo extrato. Por fim, a espécie apresentou um potencial efeito antiviral e não apresentou sinais de toxicidade in vitro e em modelo agudo in vivo.

A Kalanchoe laciniata (L.) DC. (Crassulaceae), conhecida popularmente como saião
e coirama branca, é uma planta de pequeno porte, de fácil cultivo e apresenta em sua
constituição química metabólitos ativos utilizados em produtos para prevenir os sinais
do envelhecimento cutâneo. Em cosméticos, a veiculação de ativos de origem vegetal
em sistemas nanoemulsionados tem recebido grande destaque devido ao menor
tamanho de gotícula, sensorial e aspecto físico mais agradáveis. Diante disso, este
trabalho teve como objetivo desenvolver nanoemulsões cosméticas, com atividade
antioxidante para prevenção do envelhecimento cutâneo, aditivadas com o extrato
hidroetanólico das folhas de Kalanchoe laciniata. Para tanto, foi realizada uma
turboextração hidroetanólica (etanol 50%, v/v) na proporção planta (folhas in natura):
solvente de 1:1 (p/v). O extrato obtido foi caracterizado quantitativamente quanto à
concentração de fenólicos e flavonoides totais. O potencial antioxidante in vitro foi
avaliado por meio de diferentes metodologias antioxidantes: sequestro de radicais 2,2-
difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), sequestro de radicais 2,2′-Azino-bis (3-
ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS˖+), capacidade antioxidante total, poder
redutor, sequestro de radicais superóxido, quelação de íons metálicos (Cu2+ e Fe2+) e
sequestro de radicais hidroxila. Nanoemulsões foram obtidas a partir de um
planejamento experimental (2³+3PC) por métodos de baixa e alta energia de
emulsificação, caracterizadas quanto ao tamanho de gotícula, polidispersividade e
potencial zeta e avaliados quanto a sua estabilidade preliminar e acelerada em
diferentes condições de armazenamento. O extrato apresentou compostos fenólicos,
flavonoides e atividade antioxidante. Uma nanoemulsão cosmética estável por 90 dias
foi obtida, contendo 20,0% de emoliente, 5,0% de tensoativos, 1,0% de conservante,
0,5% do extrato hidroetanólico de Kalanchoe laciniata e 73,5% de água destilada.
Após 90 dias em diferentes condições de temperatura as nanoemulsões produzidas
pelo processo de alta energia foram consideradas estáveis. Dessa forma, os
resultados indicam o potencial antioxidante do extrato hidroetanólico de Kalanchoe
laciniata como uma matéria-prima cosmética para prevenção dos sinais do
envelhecimento cutâneo, além de demonstrar a viabilidade de um produto cosmético
inovador nanoemulsionado.

Introdução: Problema Relacionado a Medicamento (PRM) interferem nos resultados terapêuticos ideais do paciente e podem estar associados a maior morbidade, mortalidade e gastos com saúde. Objetivo: Descrever a incidência de PRM, caracterizar quanto ao tipo e causa, avaliar a aceitabilidade das intervenções farmacêuticas, identificar fatores de risco nas primeiras 48 horas de admissão, desenvolver e validar um sistema de estratificação de risco de PRM. Método: Estudo coorte prospectivo realizado em um hospital geral de ensino, durante 2 anos, usando PCNE 6.2 para classificação de PRM detectados pela revisão de 100% das prescrições médicas. Para a identificação de fatores, a regressão logística reversa foi usada para determinar o conjunto de preditores independentes nas primeiras 48 horas após a admissão no conjunto de treinamento composto por 2/3 da população do estudo. O modelo foi validado na amostra restante. Resultados: A coorte de pacientes foi constituída por 9.303 pacientes, em um total de 12.286 episódios de hospitalização, com idade média de 52,6 ± 17,7 anos e 50,9% do sexo feminino. Foram identificados 3.373 DRP em 1.903 episódios hospitalares, uma incidência cumulativa de 15,5%. "Ineficácia do tratamento" (11,5%) e "Custo do tratamento" (5,90%) foram os PRM mais comuns e "Processo de uso de drogas" (18,4%) e "Duração do tratamento" (31,0%) as principais causas de PRM. Os medicamentos mais frequentemente envolvidos nos PRMs foram anti-infecciosos (36,0%), principalmente cefalosporinas (20,2%), anti-úlcera (38,6%), analgésicos/antipiréticos (61,2%), propulsivos (51,2%), opióides (38,5%) e antieméticos (57,4%). Das 1.939 intervenções farmacêuticas por comunicado escrito, pelo menos 21,4% não foram aprovadas pela equipe médica. A população do estudo para determinação dos fatores de risco foi composta por 1686 pacientes com idade entre 52,0 e 18,3 anos, 51,4% do sexo feminino, tempo médio de permanência de 3,24 dias e 4,5% de mortalidade hospitalar com incidência cumulativa de PRM potencial de 14,5%. A internação para cirurgia eletiva e o principal diagnóstico de doença do sistema circulatório estiveram associados à redução do risco PRM (OR 0,41 e 0,57, respectivamente, p <0,05). Frequência cardíaca ≥ 80 bpm (OR 1,41, p = 0,05), prescrição de sete ou mais medicamentos no dia 2 (OR 1,63, p = 0,05), prescrição no dia 1 de medicamentos do Código Anatômico Terapêutico Químico (ATC) classe A (trato alimentar e metabolismo, OR 2,24, p = 0,003), prescrição no dia 2 de dois ou mais medicamentos ATC classe A (OR = 3,52, p <0,001) e no dia 1 dos medicamentos ATC classe J (anti-infecciosos para uso sistêmico, OR 1,97, p = 0,001). No conjunto validação, a estatística-c do modelo preditivo foi 0,65, a sensibilidade foi 56,1% e a especificidade foi 65,2%. Conclusão: Os PRMs detectados pela revisão de 100% das prescrições médicas pelos farmacêuticos hospitalares ocorreram em proporção significativa dos episódios hospitalares, sendo mais frequentes os relacionados à efetividade e custos do tratamento. As cefalosporinas, penicilinas, antidispépticos, analgésicos, antipiréticos, opióides e antieméticos medicamentos foram os mais envolvidos em PRM. As intervenções farmacêuticas por comunicação escrita tiveram baixa aceitabilidade pela equipe médica. Foram identificados sete fatores de risco independentes de PRM potencial em pacientes hospitalizados que apresentaram desempenho preditivo justo para utilização na prática clínica.

O óleo de Euterpe oleraceae Mart. (OEO), conhecido como óleo de açaí, é comumente utilizado pela indústria de alimentos e cosméticos. À sua composição, por ácidos graxos e metabólitos fenólicos e fitoesteróides, é atribuída importantes atividades biológica, como antioxidante, antimicrobiano, ainti-inflamatório e antiproliferativo. Entretanto, o seu emprego pela indústria farmacêutica é limitada por características físico-químicas, como baixa solubilidade e instabilidade física. Complexos de inclusão têm sido utilizados para incrementar solubilidade, estabilidade e atividades biológicas de óleos vegetais. Portanto, objetivou-se no presente trabalho a obtenção e caracterização físico-química de complexos de inclusão com óleo em β-ciclodextrina (OEO-β-CD) e hidroxipropil-β-ciclodextrina (OEO-HPβ-CD) e testá-los quanto sua atividade antimicrobiana, antioxidante e anti-inflamatória. Procedeu-se a caracterização química do OEO por Cromatografia gasosa acoplada ao detector de ionização por chama (CG-FID). Determinou-se a energia de interação entre o ácido oleico e ciclodextrinas pela dinâmica molecular. Os complexos foram desenvolvidos pelos métodos de malaxagem (MX) e slurry (SL) e caracterizados por Espectroscópica de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Difratograma de Raio-X (DR-X), Análise Termogravimétrica (TG) e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC). Avaliou-se a atividade antibacteriana expressa em Concentração Inibitória Mínima (CIM) e modulatória de drogas com concentração subinibitória (MIC/8) contra Staphylococcus aureus (ATCC 25932), Enterococcus faecales (ATCC 29212), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Escherichia coli (ATCC 25922), atividade antioxidante (in vitro) e anti-inflamatória pelos métodos de edema de pata e bolsa de ar, em camundongo Swiss. A CG-FID apresentou o ácido oleico (47,58%), como o principal constituinte do óleo. Complexos de inclusão com β-CD e HP-β-CD demonstraram eficiência de encapsulação, com uma melhor energia de interação entre ácido oleico e β-CD (-41,28 ± 0,57 kJ/mol). FTIR mostrou deslocamentos nos números de onda e uma variação na intensidade de pico característica da ciclodextrina e OEO. As caracterizações morfológicas e cristalinas, em MEV e DR-X, exibiram-se variações na forma, aparência e perfil amorfo dos complexos em comparação com ciclodextrinas isoladamente. Análises de TG e DSC mostraram variações de temperatura nas perdas de massa e variações de entalpia entre OEO, ciclodextrinas e complexos de inclusão, confirmando a formação de complexos de inclusão. Valores de CIM revelaram maior atividade antibacteriana dos complexos em comparação o óleo isolado. A resposta modulatória de OEO e OEO-β-CD preparada por MX, bem como de OEO-β-CD e OEO-HP-β-CD preparados por SL mostraram um efeito sinérgico à ampicilina contra E. coli, embora manteve a atividade biológica de outros antibióticos testados. A ação antioxidante demonstrou-se potencializar atividade quelante de Fe2+, quando usado OEO-βCD (SL), enquanto a atividade de sequestro de radical OHdemonstrou efeito sinergismo entre a ciclodextrina e óleo com uso do OEO-HP-β-CD (MX). A atividade edematogênica e índices de mieloperoxidade, em modelo de edema de pata, e índices de leucócitos, mieloperoxidade, glutationa dissulfeto, em modelo de bolsa de ar, foram diminuídas, enquanto interleucina-10 foi aumentada neste mesmo modelo, sugerindo que OEO-β-CD potencializou o efeito anti-inflamatório exibido pelo OEO. As respostas farmacológicas exibidas pelos complexos são amplamente relevantes, uma vez que subsidia estudos para o desenvolvimento de novas formulações farmacêuticas.

A hipertensão e a Diabetes Mellitus são doenças em ascensão no mundo e podem causar várias complicações cardiovasculares. Diversos fármacos apresentam eficácia no tratamento dessas doenças, entretanto, muitos apresentam efeitos adversos e limitações de eficácia. O pericarpo do fruto de P. edulis f. flavicarpa O. Degener (maracujá amarelo), considerado um resíduo da indústria alimentícia é rico em compostos bioativos. Assim, devido à necessidade da busca por novos tratamentos para a hipertensão e diabetes, e com o intuito de estimular o desenvolvimento de fitoterápicos com espécies nativas do Brasil, o estudo teve como objetivo avaliar a composição fitoquímica, o perfil de toxicidade e o potencial efeito farmacológico de extratos do pericarpo em modelo não clínico de hipertensão e de diabetes. Para atingir os objetivos, a metodologia do estudo foi dividida nas seguintes partes: i: estudo fitoquímico, avaliação da atividade antioxidante in vitro e a avaliação da toxicidade oral aguda ii: avaliação não clínica da atividade antihipertensiva em modelo ex vivo de artérias isoladas e em modelo crônico de ratos espontaneamente hipertensos; iii avaliação não clínica aguda e crônica da atividade antidiabética em modelos de diabetes tipo 1, induzido por streptozotocina. Para o desenvolvimento do estudo foram produzidos dois extratos, um aquoso, preparado por decocção (AFA) e um hidroetanólico (AFM), obtido por maceração, a partir da farinha do pericarpo (pericarpo seco e triturado) de P. edulis. Os metabólitos secundários dos extratos foram identificados por CCD, CLUE-UV/DAD e CLAE-ESI-MSn, sendo os flavonoides C-glicosilados os metabólitos secundários mais encontrados em AFA e AFM. Dentre os flavonoides identificados, foi possível quantificar o teor de vicenina-2, orientina, isoorientina, vitexina e isovitexina por CLAE-QqQ-MS/MS. O polissacarídeo pectina foi encontrado apenas no extrato AFA, através de cromatografia de exclusão estérica de alto desempenho e RMN, o seu teor foi de 34,3%. De acordo com os resultados obtidos da avaliação da toxicidade oral aguda, os extratos AFA e AFM foram classificados na categoria 5 pelo GSH (Globally Harmonised Classification System for Chemical Substances and Mixtures) com DL50 >2000mg/kg, visto que, não apresentaram sinais de toxicidade aguda. O ensaio de avaliação antioxidante in vitro mostrou que os extratos tem boa atividade antioxidante pelos ensaios de CAT, poder redutor e DPPH. Na avaliação do efeito antihipertensivo foi verificado em modelo ex vivo de artéria isolada que o extrato AFM apresentou o melhor perfil de vasorelaxamento, quando comparado com AFA, esse efeito pode ser devido à abertura dos canais de potássio. Além disso, o extrato AFM nas doses 200 e 400 mg/Kg mostrou efeito hipotensivo significativo após 28 dias de tratamento e melhorou a função vascular em artéria mesentérica. Isso foi verificado pela diminuição da hipercontratilidade vascular e aumento do efeito vasorelaxante em resposta ao nitroprussiato de sódio e a Acetilcolina. Houve também uma diminuição na disfunção endotelial que pode ser atribuída ao aumento da biodisponibilidade do óxido nítrico. Assim, nossa hipótese é que todos esses efeitos foram capazes de contribuir para a redução da resistência vascular periférica, causando um efeito hipotensivo significativo. Estes resultados são inéditos para o pericarpo de P. edulis. Além disso, houve uma diminuição nos níveis plasmáticos de MDA no coração e um aumento da glutationa, sugerindo uma diminuição no estresse oxidativo, bem como um aumento no plasma de citocinas anti-inflamatórias como a IL-10. Na avaliação aguda da atividade antidiabética, observou-se que os extratos AFA e AFM nas doses de 400 e 600 mg/Kg de forma adjuvante a insulina conseguiram reduzir de forma significativa a glicemia, quando comparado aos ratos diabéticos que receberam apenas a insulina, sendo esse efeito mais significativo com tratamento com AFA. No estudo crônico de 60 dias esse efeito foi confirmado sendo observado uma redução significativa da glicemia com o tratamento dos extratos AFA e AFM na dose de 400 mg/Kg. Foi verificado ainda uma diminuição do MDA no fígado e uma dimunição de MPO no coração e rim, sugerindo que os extratos podem agir diminuindo o extresse oxidativo e a inflamação ocasionada na diabetes. A fibrose renal também foi diminuída com o tratamento crônico. Portanto, os estudos toxicológicos e farmacológicos apontaram que o extrato AFA e AFM, obtido de um resíduo industrial mostrou-se seguro e tem potencial para a obtenção de novos fitoterápicos com ação na hipertensão e na diabetes tipo 1.

O ácido ferúlico (AF) é um constituinte fitoquímico pertencente ao grupo dos polifenois encontrado principalmente no farelo de arroz e de milho, com destaque para sua atividade fotoprotetora e antioxidante. Assim, o AF vêm sendo amplamente estudado para aplicação em formulações fotoprotetoras e antienvelhecimento cutâneo. No desenvolvimento de formulações tópicas os ensaios de liberação cutânea in vitro apresentam-se como um ensaio rápido, de baixo custo e que possibilitam resultados preliminares. O uso do AF é limitado pela instabilidade da molécula frente à luz e/ou oxidação. Diante disto, sua estabilidade pode ser melhorada através da complexação com ciclodextrinas, dispersão em polímeros ou inclusão em ciclodextrinas seguido da associação de um polímero formando um sistema multicomponente. Assim, objetivou-se a obtenção de um modelo de membrana que seja semelhante à composição da pele humana para ensaios de liberação cutânea in vitro e desenvolvimento de sistemas multicomponentes com ciclodextrinas e polímeros hidrofílicos utilizando ácido ferúlico. A membrana foi obtida pela impregnação de uma solução lipídica em membrana sintética e caracterizadas por Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Microscopia de Força Atômica (MFA) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Formulações gel e gel-creme contendo AF 0,5% (p/p) foram avaliadas quanto à estabilidade e liberação in vitro na membrana otimizada através da célula de difusão de Franz. No desenvolvimento dos complexos multicomponentes procedeu-se estudos de dinâmica molecular e solubilidade em fase aquosa. Após seleção da ciclodextrina e polímero para compor os sistemas, os mesmos foram obtidos pelos métodos de malaxagem e rotaevaporação, caracterizados por DSC e TG (termogravimetria), difração de raios-X (DR-X) e espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). Além disto, foram avaliados quanto à estabilidade oxidativa e atividade antioxidante. As técnicas utilizadas para a caracterização da membrana obtida, permitiram demonstrar a ocorrência de impregnação da solução lipídica. As formulações foram estáveis quando armazenadas a 4 ºC ± 2 °C. Os resultados da liberação in vitro utilizando a membrana otimizada sugerem que esta pode ser aplicada como uma membrana acessível e simples na liberação in vitro de substâncias ativas. Com relação ao desenvolvimento dos sistemas multicomponentes, através das técnicas de caracterização foi possível compreender as interações entre o AF, ciclodextrinas e polímeros. As técnicas de obtenção dos sistemas mostraram-se adequadas, com alto de teor de incorporação do ativo. Destacando-se o método de obtenção por malaxagem, que apresentou rendimento consideravelmente maior quando comparado ao método por rotaevaporação. As ciclodextrinas e os polímeros selecionados possuíram potencial para serem empregados em sistemas multicomponentes. Uma vez que aumentaram a estabilidade do AF frente a altas temperaturas, como também auxiliaram na transição do estado cristalino para amorfo do fármaco, devido à inserção do ativo dentro da cavidade e interação com o polímero. Para a estabilidade oxidativa verificou-se, que os componentes do sistema conferiram significativa estabilidade para o AF. Na atividade antioxidante, em geral, os complexos multicomponentes potencializaram a atividade do AF. Os resultados sugerem a formação de sistemas multicomponentes estáveis, viabilizando otimização do ativo. Fornecendo subsídios para incorporação destes sistemas em formulações semissólidas.

A sulfadiazina (SDZ) é um dos fármacos utilizados para o tratamento pós-natal da toxoplasmose congênita, entretanto a única formulação oral comercialmente disponível é em comprimido (500 mg). Uma das estratégias para solucionar esse problema é através da transformação de formas farmacêuticas. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo preparar e avaliar a estabilidade física, química e microbiológica de suspensões extemporâneas de SDZ (100 mg/mL) usando comprimidos (FURP-Sulfadiazina). Os veículos de suspensão utilizados foram: A – xarope simples 85% e metilcelulose 1% (p/v); e B – sorbitol 70%. A estabilidade foi avaliada durante os dias 0, 7, 14 e 30 sob armazenamento em temperaturas controladas de 5 ºC ± 3 ºC e 22,5 ºC ± 2,5 ºC. As características físicas analisadas foram as características organolépticas, o pH, o tamanho de partícula e a viscosidade. A concentração de SDZ foi determinada através de método desenvolvido e validado utilizando a cromatografia líquida de ultra eficiência (CLUE). Os atributos microbiológicos de formas farmacêuticas não estéreis também foram avaliados, adicionando ácido p-aminobenzóico aos meios de cultura a fim de neutralizar a atividade antimicrobiana da SDZ. O pH e a viscosidade apresentaram diferenças significativas nos dias de estudo. A distribuição do tamanho de partícula foi constante até 14 dias de estudo para ambas as formulações. Todavia, apenas a suspensão de SDZ A apresentou resultados confiáveis dentro dos limites farmacopeicos, provavelmente influenciadas pela solubilidade do ativo em diferentes pH, sedimentação de partículas e redução da viscosidade. Ademais, durante o estudo não foi observado contaminação microbiana. Com base nos resultados, pode-se concluir que a suspensão de SDZ A em temperatura ambiente é estável durante 14 dias, sendo uma alternativa viável para o tratamento pediátrico da toxoplasmose congênita.

Além de seu conhecido potencial de virulência in vitro, isolados de Candida spp. têm chamado atenção pelo número crescente de relatos de resistência a medicamentos antifúngicos, constituindo um sério problema para o tratamento de infecções causadas por esses micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a susceptibilidade antifúngica de isolados de Candida spp. oriundos de pacientes com infecção de corrente sanguínea frente a antifúngicos sintéticos, bem como a uma fração enriquecida em saponinas obtida do extrato de Ziziphus joazeiro, assim como a interferência na expressão dos fatores de virulência. Foram analisados 70 isolados de Candida oriundos de hemoculturas. Realizou-se a técnica de microdiluição em caldo a fim de se observar a susceptibilidade dos isolados frente aos antifúngicos sintéticos Anfotericina B, Caspofungina, Fluconazol e Itraconazol. Posteriormente, 50 isolados foram selecionados e a avaliação da atividade antifúngica da fração foi realizada. Um total de 27 isolados foram selecionados para a realização dos ensaios de expressão dos fatores de virulência na ausência e na presença da fração. Nenhum dos isolados apresentou resistência a anfotericina B e a caspofungina. Quatro isolados de C. albicans e 1 isolado de C. glabrata foram resistentes ao fluconazol, enquanto que 3 isolados de C. albicans, 1 de C. tropicalis e 2 do complexo C. parapsilosis apresentaram susceptibilidade dose-dependente a este medicamento. Quatro isolados de C. albicans e 1 isolado de C. tropicalis apresentaram uma susceptibilidade dose-dependente ao itraconazol. Os isolados identificados como C. albicans e C. glabrata foram susceptíveis frente a fração com CIMs na faixa de 5000 – 10000 μg/mL. As cepas tratadas com a fração apresentaram uma redução de cerca de 26% na capacidade de adesão às células do epitélio bucal, diminuição na capacidade de formação do biofilme, diminuição na capacidade de filamentação (em meios líquidos e sólidos) e diminuição da produção de fosfolipases e hemolisinas. A fração enriquecida em saponinas obtida a partir do extrato de Z. joazeiro apresenta significativa atividade antifúngica, sendo capaz de interferir na expressão de fatores de virulência deste grupo de leveduras. Novos estudos devem ser conduzidos para que o mecanismo de ação envolvido seja elucidado.

Umas das etapas limitantes para o Insumo Farmacêutico Ativo (IFA) administrado por via oral ser absorvido e agir farmacologicamente, é sua prévia solubilização nos meios aquosos. Muitos candidatos a IFAs possuem baixa solubilidade aquosa, e alternativamente propor modificações físicas ou químicas nestas substâncias, são necessárias. O ácido cinâmico (AC) é um candidato a IFA que possui estudos comprovando diversas atividades farmacológicas importantes, como antimicrobiana, e antitumoral, apresentando baixa toxicidade. O uso da cocristalização é uma das principais estratégias aplicadas para melhorar a solubilidade aquosa do IFA. O objetivo foi a obtenção dos cocristais de AC e realização da sua caracterização e avaliação físico-química. As misturas físicas (MFs) foram preparadas manualmente por mistura dos pós e os cocristais (CCs) foram obtidos por evaporação de solvente com quantidades estequiométricas de IFA e coformador em razão molar 1:1. A caracterização foi realizada com uso de técnicas como Difração de Raios-X (DRX) do pó, Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Espectroscopia Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Para avaliação físico-química dos possíveis CCs, um método analítico foi desenvolvido e otimizado por Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência (CLUE) e validado de acordo com resolução vigente. A avaliação físico-química dos cocristais foi realizado por teste de solubilidade de saturação em água, e a determinação da solubilidade foi expressa por medidas de concentração. Os resultados de caracterização por avaliação de DRX do pó mostraram que a interação do AC com 8 coformadores não evidenciaram mudanças no padrão de difração das amostras sólidas obtidas após rotaevaporação. Porém, a interação do AC com outros 3 coformadores, CAF, NIC e TIA nas amostras de CCs obtidos, mostraram por DRX do pó mudanças no padrão de difração caracterizados pelo aparecimento de novos picos não identificados no padrão de difração dos insumos farmacêuticos isolados. Pelas curvas DSC, foi observado que a fusão das amostras de CCs ocorreram em temperaturas inferiores comparado aos insumos farmacêuticos isolados. Os espectros FTIR evidenciaram deslocamentos das principais vibrações para menores frequências, relacionados as possíveis ligações de hidrogênio formadas. Fotomicrografias MEV mostraram uma breve mudança no hábito cristalino dos CCs. O método analítico por CLUE foi desenvolvido por modo gradiente com fase móvel ácido trifluoroacético (TFA) a 0,1% em água ultrapura e metanol, nas condições cromatográficas otimizadas. O método mostrou-se seletivo, linear, preciso, exato e robusto. Após teste de solubilidade, a solubilidade de saturação em meio aquoso para o AC isolado foi de 0,55 mg.mL-1, e nos CCs com CAF, NIC e TIA foram de 0,9, 0,86 e 0,64 mg.mL-1, considerando-se assim um aumento significativo de 63%, 56% e 16% respectivamente, na solubilidade aquosa do IFA. Resultados demonstraram a importância do uso das técnicas de caracterização do estado sólido na identificação dos cocristais, no entanto, ainda mostram-se ser necessários a introdução de técnicas mais confirmatórias, como a DRX do monocristal. O aumento na solubilidade aquosa do AC correlaciona-se diretamente com as modificações proporcionadas pelos cocristais, o que pode favorecer a produção de um produto farmacêutico tecnologicamente mais favorável.

A Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) é uma endocrinopatia ginecológica que acomete em torno de 20% das mulheres em idade fértil. Além das complicações reprodutivas, esta síndrome encontra-se associada às alterações metabólicas e transtornos psicológicos, como redução da qualidade de vida e aumento de fatores de risco para ansiedade e depressão, que podem desestruturar a saúde e o bem estar ao longo do tempo. A infertilidade pode ocasionar impactos negativos que envolvem o sofrimento emocional, físico, psicológico e social. Como a síndrome é considerada uma das principais causas de infertilidade feminina, o presente estudo objetivou avaliar os transtornos psíquicos associados à infertilidade em mulheres com SOP. As 100 mulheres foram analisadas quanto aos aspectos clínicos, bioquímicos e psicológicos. As participantes foram submetidas à coleta de material biológico e ao preenchimento dos questionários de avaliação clínica e sociodemográfica, BDI, WHOQOL-BREF e SCL-90- R. A análise das informações coletadas foi realizada mediante processo sistematizado em base estatística de dados pelo programa Stata versão 11. As mulheres inférteis (n=55) e férteis (45) apresentaram diferenças estatisticamente significativas na média de idade (27,7±5,1 vs 24,9±5,7; p= 0,01), IMC (31,7±5,2 Kg/m2 vs 29,01±5,1 Kg/m2), no percentual de gordura androide (49,1±8,3 vs 44,2±9,7; p=0,01) e pressão arterial sistólica (123,81±14,1 mmHg vs 118,45±12,9; p=0,05). Além disso, a infertilidade foi observada em 55% (n=55) das participantes e 66% (n=66) das mulheres apresentaram pontuações médias que indicam a presença de sintomas depressivos. Os valores médios dos escores referentes ao WHOQOL-BREF foram: 56,9±17,4 (Físico), 57,3±18,8 (Psicológico), 58,5±23,3 (Social), 50,7±16 (Ambiental) e qualidade de vida geral 54,8±15. Quanto à avaliação do sofrimento emocional pelo instrumento SCL-90- R, nenhuma das participantes ultrapassou o valor normativo. No modelo de análise por regressão logística, a infertilidade não apresentou associação aos sintomas de depressão, redução da qualidade de vida e sofrimento emocional. Os resultados demonstram que mulheres com SOP apresentam sintomatologia complexa que podem estar relacionadas ao desenvolvimento de sintomas depressivos, redução da qualidade de vida, bem como sofrimento emocional, independetemente da presença de infertilidade.

A especie Commiphora leptophloeos(Burseraceae)e uma planta nativa do Brasil, pertence ao bioma caatinga e e conEHcida popularmente como gimburana-de-espinhoh e gimburana-de-cambaoh. Os estudos etnobotanicos citam o uso da especie no tratamento de inflamacoes e infeccoes. Dentro deste contexto, o presente estudo objetivou avaliar a toxidade, a atividade anti-inflamatoria e antimicrobiana em ensaios nao clinicos in vitro e in vivo dos extratos das folhas e das cascas do caule, e isolar, identificar e quantificar os marcadores quimicos. No estudo fitoquimico, o extrato hidroetanolico foi preparado por maceracao e as fracoes foram obtidas por particicao liquido-liquido (fracao diclorometano, acetato de etila-AcOEt e n-butanol-BuOH). O isolamento, a elucidacao estrutural e a caracterizacao das substancias nos extratos foram realizadas por CPC,CL-EM, FIA-ESI-IT-MS/MSe RMN de1H e a quantificacao dos marcadores nos extratos por CLAE-DAD-ELSD. A toxicidade dos extratos foi avaliadain vitro pelo ensaio de MTT e citometria de fluxo e in vivo pelo teste de toxicidade aguda, via oral. A atividade anti-inflamatoria in vitro foi avaliada pelo ensaio de oxido nitrico induzido por LPS e in vivo nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e de bolsa de ar induzida por zimosam. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela determinacao da Concentracao Inibitoria Minima (CIM) e triagem virtual dos compostos isolados foi realizada por estudos in silico. Do extrato das folhas, foram isolados 2 flavonoides por CPC e caracterizadas 16 substancias por espectrometria de massas como acidos fenolicos, flavonoides glicosilados derivados de quercetina, luteolina e apigenina e taninos condensados derivados de catequina. Das cascas do caule foram isolados 2 taninos por CPC e caracterizadas 8 substancias como acidos fenolicos e procianidinas. O extrato das folhas a 200 ƒÊg/mL e o extrato das cascas do caule nas concentracoes de 1, 10, 100 e 200 ƒÊg/mL demonstraram efeito anti-inflamatorio in vitro no ensaio de oxido nitrico induzido por LPS. No modelo de edema de pata induzido por carragenina, o extrato das folhas e das cascas do caule nas doses de 100, 200 e 400 mg/kg, via oral, reduziu significativamente (p<0,001) o edema seguido da reducao damieloperoxidase (MPO) e no modelo de bolsa de ar induzido por zimosam, nas mesmas doses testadas, reduziramsignificativamente (p<0,001) a migracao celular, a concentracao de proteinas totais, a mieloperoxidase (MPO), os niveis de malondialdeido (MDA) e da citocina pro-inflamatoria TNF-ƒ¿ e aumentou a producaoda citocina anti-inflamatoria IL-10.Na avaliacao da atividade antimicrobiana, o extrato das cascas do caule e as fracoes AcOET e BuOH demostraram efeito fungistatico e bactericida. O estudo in silicoindicou possiveis ligantes da procianidina dimerica do tipo B e isovitexina relacionados a atividade anti-inflamatoria e antimicrobiana. Os resultados obtidos sao ineditos para a especie, justificam seu uso na medicina popular e revelam que os extratos das folhas e das cascas do caule apresentam um potencial terapeutico para o desenvolvimento de fitoterapicos com propriedades anti-inflamatorias e antimicrobianas.

Acidentes provocados por serpentes são considerados um grande problema de saúde pública em várias regiões do mundo. O gênero Bothrops é responsável pela grande maioria dos acidentes ofídicos no Brasil. Sabe-se que atualmente o principal tratamento específico disponível para a picada dessas serpentes é o soro antibotrópico, porém o mesmo apresenta algumas limitações, tais como: não combater os efeitos locais de forma eficaz, difícil acesso em algumas regiões, além do alto custo. Plantas do gênero Jatropha (Euphorbiaceae) são frequentemente indicadas pela medicina tradicional, em algumas regiões do Brasil, para reverter os danos induzidos por picadas de serpentes e também com função anti-inflamatória. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho é avaliar o potencial anti-inflamatório, cicatrizante e antiofídico contra a peçonha da serpente Bothrops jararaca do extrato hidroetanólico das folhas de Jatropha mollissima (Pohl) Baill. incorporado em uma formulação desenvolvida para aplicação por via tópica. Foram realizados ensaios para avaliar a atividade anti-inflamatória tópica desta formulação nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e edema de orelha induzido por aplicação única (inflamação aguda) ou aplicações múltiplas (inflamação crônica) de óleo de cróton. Também foram realizados testes para avaliar a atividade cicatrizante da formulação, enquanto o teste de irritação cutânea foi conduzido para analisar a segurança durante o uso tópico das formulações desenvolvidas. Foi possível observar que o gel apresenta ação anti-inflamatória nos modelos de inflamação aguda induzida por carragenina, visto através da diminuição da espessura da pata, além de inibir os modelos de inflamação aguda e crônica induzidas por óleo de cróton, vistos através da diminuição da espessura da orelha, além da diminuição de parâmetros inflamatórios e oxidativos. Também foi revelado que o gel apresenta atividade cicatrizante, uma vez que o mesmo diminuiu de forma significativa o tamanho da ferida em relação ao grupo placebo. O gel não provocou irritação cutânea nos camundongos, mostrando-se seguro para uso tópico. A eficácia do gel contendo o extrato hidroetanólico das folhas de J. mollissima sozinho e em associação com o soro comercial antibotrópio-crotálico polivalente quanto ao seu potencial antiofídico frente os efeitos locais do envenenamento por B. jararaca foi avaliada no modelos de edema de pata, hemorragia muscular e dermonecrose induzidos por esta peçonha. Como resultado, foi visto que as atividades edematogênica e hemorrágica induzidas pela peçonha foram inibidas tanto pelo gel, como pela sua associação com o soro antiofídico, uma vez que estes tratamentos reduziram o edema, além de diminuírem de maneira significativa a concentração de hemoglobina no músculo inoculado com peçonha, tendo consequentemente um potencial anti-hemorrágico significativo. Nesse estudo foi exibido também que o soro antiofídico sozinho não foi capaz de inibir a dermonecrose induzida no dorso dos animais, diferentemente do gel JmF 5%, que inibiu o tamanho do halo dermonecrótico de forma significativa. Em conclusão, os resultados demonstram que o gel contendo o extrato hidroetanólico das folhas de J. mollissima apresenta potencial atividade anti-inflamatória, cicatrizante e antiofídica, atuando sobre os efeitos locais da picada, sugerindo que esta formulação de uso tópico possui um importante potencial antiofídico como alternativa complementar ao tratamento dos efeitos locais induzidos pelo envenenamento botrópico, além de atuar como potencial cicatrizante e anti-inflamatório tópico.

A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença específica da gravidez caracterizada por hipertensão e proteinúria após 20 semanas de gestação, cujas complicações da PE podem comprometer diretamente a vida da mãe e do feto. Assim, a pesquisa de um marcador para predição pode levar a uma intervenção mais precoce nos casos de PE. Uma vez que a associação dos podócitos (células renais) e de proteínas marcadores de podócitos (fator tumoral de Willms 1 – WT1, nefrina e podocina) com a PE vêm sendo descrita na literatura, torna-se importante avaliar essas proteínas, em vesículas extracelulares eliminadas na urina (VEus), nesse grupo de pacientes. Assim, foram pesquisadas as proteínas WT-1, nefrina e podocina em VEus de gestantes com PE em busca de potenciais marcadores de pré-eclâmpsia utilizando-se uma amostra coletada de forma não invasiva. Vinte gestantes, sendo 10 com diagnóstico de pré-eclâmpsia grave (hipertensão e proteinúria após 20 semanas de gestação) e 10 normotensas, foram incluídas no estudo. As proteínas foram quantificadas por Western-blot, após o isolamento das VEus por ultracentrifugação. Foi observado um aumento significativo da nefrina (p = 0,008) no grupo das pacientes com pré-eclâmpsia quando comparadas com o grupo das gestantes normotensas. Os resultados sugerem que a nefrina presente em vesículas extracelulares urinárias, pode ser um potencial marcador para a predição da pré-eclâmpsia.

Os Tetronics® são copolímeros que formam micelas e têm a capacidade de transitar
de forma reversível entre as fases sol-gel de acordo com a sua concentração, pH e
temperatura, podendo ser utilizados em sistemas de liberação controlada para
fármacos de baixa solubilidade aquosa. Foram testados os Tetronics® T904, T90R4 e
T1304 para incorporação da β-lapachona (BLPC) escolhida, por suas diversas
atividades biológicas caracterizadas, sobretudo, anticancerígenas e anti-inflamatórias
e que apresentar uma solubilidade aquosa muito baixa (0,038 mg.ml-1), que limita sua
biodisponibilidade e administração sistêmica. Para auxiliar na estabilidade fisicoquimica
das micelas, como modificador reológico foi adicionada a hectorita sintética
Laponita RD® (LAP), que forma hidrogéis. As amostras foram preparadas variando de
1 a 20% as concentrações dos polímeros e de 0 a 3% as de Laponita. Os parâmetros
analisados foram: Aumento da solubilidade da BLPC, comportamento reológico dos
sistemas, tamanho das partículas por espalhamento dinâmico de luz, caracterização
por análises térmicas (TG e DSC), Espectrometria de Infravermelho, perfil de liberação
e citotoxicidade in vitro em fibroblastos murinos e células de adenocarcinoma humano.
Os sistemas híbridos aumentaram em mais de 50 vezes a solubilidade da BLPC em
relação a água, formaram compostos estáveis termicamente e a BLPC apresenta
sinais de encapsulação nas micelas criadas, promoveram uma liberação controlada
da BLPC por 140 horas e foram mais eficientes na morte de células cancerígenas em
ensaios in vitro que o fármaco livre.

O Benznidazol (BNZ) é o fármaco de escolha para o tratamento de pacientes com infecção
por Trypanosoma cruzi. Apesar de seu amplo uso, esta molécula apresenta problemas de
eficácia devido à alta toxicidade, dificuldade de atravessar as barreiras biológicas, além da
baixa solubilidade em meio aquoso. As nanopartículas apresentam capacidade comprovada
de atravessar a maioria das barreiras biológicas e direcionamento intracelular de fármacos,
principalmente quando ligantes de superfície são inseridos para aumentar o direcionamento
do fármaco para as células infectadas. O objetivo deste trabalho foi fazer um desenho
estrutural e o monitoramento de nanopartículas funcionalizadas e fluorescentes de poli
(ácido lático-co-glicólico) (PLGA) para liberação modificada do benznidazol. As partículas
foram produzidas pelo método emulsificação com evaporação do solvente. O
desenvolvimento da formulação e parâmetros de obtenção foram otimizados por medidas de
tamanho médio de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, microscopia de força
atômica (MFA), microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia confocal (MC),
espectroscopia de absorção na região do infravermelho com transformada de fourier (FTIRATR),
eficiência de encapsulação, estudos in vitro e in vivo. Nanopartículas poliméricas
esféricas e estáveis abaixo de 250 nm foram obtidas, com a eficiência de encapsulação maior
que 95%. A cinética de liberação in vitro do fármaco demonstrou uma liberação lenta das
nanopartículas e a melhoria da atividade biológica de nanopartículas contendo BNZ. Ensaios
in vitro em células normais (Hek 293), células tumorais (Hep G2 e HT-29), amastigotas
(cepas H9c2 e Dm28c) e com epimastigotas (cepas Y, CL-Brenner e Dm28c) mostraram um
aumento na potência das nanopartículas contendo BNZ sobre o BNZ livre. A análise por
microscopia confocal mostrou que as nanopartículas entram no parasita com alta eficiência,
principalmente as funcionalizadas com ácido siálico e colesterol. Testes in vivo revelaram
que as nanopartículas contendo BNZ apresentaram efeito semelhante ao BNZ livre, mesmo
usado em concentração 20 vezes inferior. Assim, o presente trabalho aborda de forma
sistemática, o desenvolvimento de um sistema nanotecnológico com potencial inovador para
o aumento da eficácia do benznidazol em células infectadas com Trypanosoma cruzi.

As espécies Kalanchoe laciniata (L.) DC. e Bryophillum pinnatum (Lam) Pers.
(Crassulaceae), conhecidas popularmente como saião ou coirama, são utilizadas no Brasil,
especialmente na região Nordeste, e seu uso destaca-se no tratamento de problemas
inflamatórios. Na literatura são encontrados relatos sobre a constituição química dessas
espécies, na qual destaca-se a presença de flavonoides glicosilados derivados da patuletina,
canferol e quercetina, no entanto, ainda não se sabe quais são os compostos ativos. Somado a
isso, carecem de estudos de controle de qualidade que contribuam na autenticação e
diferenciação de K. laciniata e B. pinnatum, especialmente por Cromatografia Líquida de Alta
ou Ultra Eficiência (CLAE ou CLUE) ou Ressonância Magnética Nuclear (RMN). Tendo em
vista que a espécie B. pinnatum faz parte da Relação Nacional de Plantas Medicinais de
Interesse do SUS, faz-se necessário aprofundar os estudos com a espécie para garantir a
segurança, eficácia e qualidade de um possível medicamento fitoterápico que possa ser com
essas espécies. Dentro deste contexto, a proposta tem como objetivo realizar uma abordagem
metabolômica e farmacológica das espécies K. laciniata e B. pinnatum. Para atingir esse
objetivo, a metodologia do estudo foi dividida nas seguintes partes: i: isolamento e
caracterização dos marcadores químicos do extrato das folhas das espécies; ii: quantificação
dos marcadores químicos; iii: abordagem metabolômica dos extratos em resposta ao estresse
induzido por suspensão de rega e salinidade; iv: ensaios não-clínicos in vitro para avaliar os
efeitos inibitórios dos extratos frente a enzima PLA2 que auxilia no desencadeamento do
envenenamento causado por B. erythromelas. Como resultados mais significativos: i. por meio
da técnica de Cromatografia em Partição Centrífuga (CPC), utilizada para obtenção dos
compostos majoritários foi possível isolar uma substância até hoje não descrita para o gênero,
a sarmentosina; ii. a) quantificar três flavonoides no extrato de B. pinnatum por CLAE-DAD e
sugerir o flavonoide quercetina 3-O-α-L-arabinopiranosil-(1→2)-O-α-L-ramnopiranosídeo
(BP1), como marcador específico para a espécie e b) desenvolver e validar um metodologia por
RMN para quantificar a sarmentosina no extrato de B. pinnatum; iii. pela abordagem
metabolômica dos dados gerados por CLAE-EM/EM foi observado que as condições de seca e
salinidade podem influenciar na expressão de diferentes metabólitos pela planta, indicando que
as espécies são resistentes a suspensão de rega até o 20º dia, mas que a menor quantidade de
salinidade na água de rega já induz diferenças na expressão de metabólitos; iv. as atividades in
vitro evidenciaram o potencial das espécies frente ao envenenamento, e mostraram que o os
estresses salino e hídrico influenciam diretamente na atividade da PLA2. Diante do exposto,
este trabalho significou um grande avanço no estudo com as espécies, uma vez que a
investigação química e farmacológica foi aprofundada, especialmente no que tange a obtenção
de uma metodologia eficiente para o isolamento de marcadores em grande quantidade, além de
sugerir determinadas condições de cultivo que podem influenciar na expressão de metabólitos
que possam estar ligados as atividades biológicas dos extratos.

Acidentes com animais peçonhentos, principalmente serpentes e escorpiões, são considerados um sério problema de saúde pública. No Brasil, os acidentes ofídicos ocorrem principalmente por serpentes do gênero Bothrops, e os escorpiônicos pela espécie Tityus serrulatus. O tratamento convencional é o uso da soroterapia antipeçonha, que além de apresentar algumas limitações, como difícil acesso em algumas regiões e custo elevado, é capaz de neutralizar apenas as toxinas da peçonha, sendo ineficiente em inibir as reações inflamatórias endógenas. Dentro deste contexto, o estudo tem como objetivo realizar uma análise fitoquímica do suco dos frutos de Hancornia speciosa, bem como avaliar a capacidade do suco de neutralizar os efeitos inflamatórios da peçonha do escorpião Tityus serrulatus e os locais induzidos pela peçonha de Bothrops jararaca. A análise fitoquímica foi realizada através da técnica de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massas (CLAE-DAD-EM/EM). A atividade antiescorpiônica do suco foi avaliada utilizando-se do modelo animal de edema pulmonar agudo induzido pela peçonha do escorpião T serrulatus. Os animais receberam a peçonha por via subcutânea e foram tratados via oral com o suco nas doses de 100 e 200 mg/kg, utilizando-se de protocolos de pré e pós-tratamento. Após 2 horas da administração da peçonha, os animais foram eutanasiados para a coleta dos pulmões, rins e sangue. Com os tecidos dos pulmões tratados foram realizadas as seguintes análises: quantificação de citocinas, concentração de azul de Evans, dosagem da enzima mieloperoxidase (MPO) e porcentagem do peso relativo pulmonar; com os rins, dosagem de nitrito e peroxidação lipídica; e, com o sangue, avaliados parâmetros hematológicos e bioquímicos. Em relação a peçonha botrópica, a capacidade do suco em inibir seus efeitos locais foi avaliada nos modelos de edema de pata, hemorragia, miotoxicidade e dermonecrose. Para tanto, os animais receberam o suco por via oral nas doses de 100 e 200 mg/kg, sendo administrado logo após a peçonha botrópica (pós-tratamento). Através das análises por CLAE-DAD-EM/EM foram identificados 13 compostos, sendo os majoritários identificados como L-bornesitol, ácido quínico, ácido clorogênico e rutina. As observações referentes à inibição dos efeitos antiescorpiônicos demonstraram que o suco de Hancornia speciosa foi capaz de diminuir significativamente alguns importantes parâmetros como a produção das citocinas, a atividade mieloperoxidase, a concentração de azul de Evans no tecido pulmonar, a peroxidação lipídica e a dosagem de nitrito. Em relação aos efeitos botrópicos, o suco foi capaz de diminuir de forma significativa a lesão dermonecrótica, edema, hemorragia e as concentrações das enzimas creatina quinase e lactato desidrogenase. Portanto, é possível concluir que o suco de Hancornia speciosa Gomes apresenta potencial para ser utilizado como adjuvante no tratamento de envenenamentos escorpiônicos e botrópicos.

As nanopartículas lipídicas sólidas (NLS) são sistemas coloidais aplicados como carreadores de fármacos e biomoléculas atuando para o aumento da estabilidade e da capacidade em atravessar as barreiras biológicas. A veiculação de proteínas como constituinte terapêutico em formulações é um grande desafio para a indústria farmacêutica tendo em vista as limitações físico-quimícas desses componentes. No presente estudo, o triglicerídeo 1,3-diestearil-2-oleil-glicerol (TG1), foi escolhido como matriz lipídica para a obtenção das partículas devido ao seu potencial efeito cicatrizante. O objetivo do presente estudo foi desenvolver e caracterizar NLS a partir do TG1 (NLSTG1) para potencial incorporação de proteínas e biomoléculas. As partículas foram obtidas pelo método de emulsificação com evaporação do solvente e caracterizadas quanto a seu tamanho, polidispersão e potencial zeta utilizando-se a técnica de espalhamento de luz (Dynamic Light Scattering). Foram obtidas com sucesso NLSTG1 catiônicas, estáveis, com tamanhos inferiores a 300 nm, polidispersão na faixa 0,2 e potencial zeta positivo. Análises do infravermelho (FTIR-ATR) comprovaram as interações entre os constituintes nas amostras. Estudos de Microscopia de Força Atômica (AFM) constataram morfologia esférica das partículas. Elevadas concentrações de incorporação de proteína BSA foram alcançadas com as NLSTG1 catiônicas, aproximadamente 98%. A detecção de BSA por eletroforese em gel de Poliacrilamida – (SDS-PAGE) confirmou a presença de BSA nas NLSTG1 e sua eficácia na incorporação. Os ensaios de viabilidade celular comprovaram a biocompatibilidade das NLSTG1 catiônicas e uma diminuição importante da toxicidade da PEI nas nanopartículas funcionalizadas e após a adição de BSA nas NLSTG1. Na liberação in vitro foi observado que as NLSTG1 conseguiram prolongar por mais tempo a liberação da proteína quando comparada a proteína livre, atingindo seu pico máximo de liberação em 6 horas.

A Crisina (5,7-Dihidroxiflavona) pertence a classe flavona de flavonoides. E encontrada naturalmente em mel, propolis, e varias especies de plantas, incluindo especies do genero Pelargonium, Passiflora e da familia Pinaceae. A Crisina (CS) e atualmente comercializada como suplemento dietetico e, como outros flavonoides, tambem exibe diversos efeitos farmacologicos, dentre os quais estao a atividade antinociceptiva e anti-inflamatoria. Entretanto, sua eficacia tem sido limitada devido a sua baixa biodisponibilidade oral. As microemulsoes (ME) sao sistemas de liberacao modificada definidos como sistemas termodinamicamente estaveis e isotropicamente translucidos de dois liquidos imisciveis, usualmente agua e oleo, estabilizados por um filme interfacial de tensoativo, e quando necessario um cotensoativo. Estes sistemas possuem a capacidade de solubilizar compostos hidrofobicos, melhorar absorcao, biodisponibilidade e estabilidade, incrementar a eficacia e reduzir a toxicidade de farmacos incorporados. O objetivo deste trabalho foi a obtencao, caracterizacao de um sistema microemulsionado para incorporacao da CS e avaliacao da atividade antinociceptiva desse. A formulacao obtida atraves de um diagrama de fase ternario foi caracterizada fisico-quimicamente quanto ao pH, condutividade e indice de refracao. Suas caracteristicas estruturais e morfologicas foram analisadas atraves de espalhamento de luz dinamica (DLS) e microscopia de luz polarizada (MLP). Enquanto, a estabilidade da formulacao foi avaliada atraves dos estudos de estresse por centrifugacao, aquecimento-resfriamento e congelamento-descongelamento. O perfil de liberacao in vitro foi determinado utilizando o modelo de celulas de Franz. A avaliacao analgesica foi realizada atraves de um teste comportamental que avalia o aumento do limiar de forca sobre a pata dos camundongos para analisar o reflexo de retirada atraves de um analgesimetro. Alem da determinacao da capacidade de prevencao da formacao de citocinas inflamatorias avaliadas atraves de ELISA imunoensaio. Para isso foi administrada 30 minutos apos a inducao por carragenina a dose de 25mg/kg de CS e MECS. A ME desenvolvida e constituida por 5 % de miristato de isopropila, 55 % de agua e 40 % de LASR, e apresentou pH compativel com a administracao via oral, condutividade condizente com sistemas oleo em agua, alem de comportamento isotropico. A distribuicao de tamanho de goticulas foi do tipo monomodal e homogeneo, com tamanhos medios de goticulas de 170,7 } 5,3 e 158,9 } 26,7 nm, e potencial zeta negativo de -16,1 } 1,9 e -10 } 2,1, para formulacoes com e sem CS, respectivamente. A ME mostrou-se estavel frente aos estresses termicos e por centrifugacao. A liberacao in vitro da MECS obedeceu ao modelo cinetico de ordem zero e preveniu a formacao de citocinas inflamatorias (reducao de TNF ƒ¿ e aumento de IL-10, p<0,01), alem de apresentar atividade antinociceptiva em inflamacao induzida por carragenina (p<0,001). Portanto, pode-se concluir que a veiculacao da CS atraves de um sistema microemulsionado mostrou-se como uma alternativa interessante para expandir o uso desse flavonoide como um farmaco no tratamento da dor inflamatória.

A doenca de Alzheimer (DA) e uma patologia neurodegenerativa multifatorial e a
forma mais comum de demencia no idoso em todo o mundo. As principais caracteristicas
patologicas da DA incluem placas beta-amiloides (ƒÀA), emaranhados neurofibrilares
provenientes da hiperfosforilacao da proteina tau, declinio da funcao colinergica, estresse
oxidativo e inflamacao. O peptideo ƒÀA e o alvo mais estudado, pois o surgimento das placas
senis desencadeia os demais processos, ou atua por feedback nestes. O tratamento atual da DA
e baseado em inibidores da enzima acetilcolinesterase e na Memantina, um antagonista dos
receptores N-metil-D-Aspartato, contudo os tratamentos sao paliativos, uma vez que nao
interrompem o curso natural da doenca, por essa razao as novas abordagens sao baseadas em
farmacos multialvos. Dentre os produtos naturais os alcaloides sao os que mais se destacam
como fonte de novos farmacos, inclusive, os anticolinesterasicos utilizados no tratamento da
DA sao alcaloides ou derivados semi-sinteticos destes. O objetivo deste estudo e desenvolver
novas moleculas a partir da condensacao do nucleo alcaloidico pirrolizidinico a Laminoacidos
(fenilalanina e triptofano) e avaliar a atividade destas no modelo de
Caenorhabditis elegans para a DA, isto porque um screening virtual de aminoacidos
condensados a retronecina (RTN) foi realizado, e as moleculas apresentaram afinidade pela
enzima acetilcolinesterase (AChE). A Monocrotalina (MCT), molecula de partida para a
sintese dos derivados, foi isolada a partir das sementes de Crotalaria retusa por meio de
maceracao em metanol seguida de extracao acido-base, posteriormente a mesma foi
hidrolisada com hidroxido de bario e o nucleo pirrolizidinico, a Retronecina (RTN), foi obtida
por isolamento em coluna de alumina basica. A RTN foi halogenada no carbono nove atraves
de reacao com cloreto de tionila, afim de favorecer reacoes de substituicao nucleofilica nesta
posicao. Diversas propostas reacionais foram efetuadas objetivando condensar os Laminoacidos
ao nucleo pirrolizidinicos. Os ensaios biologicos in vivo foram realizados no
modelo ja bem estabelecido para a DA, Caenorhabditis elegans, um nematoide que expressa
o peptido ƒÀ-amiloide (ƒÀA) humano no musculo de forma constitutiva, que o leva a uma
paralisia progressiva, as moleculas foram testadas em 3 concentracoes 10, 50 e 100 ƒÊmol. Os
animais foram sincronizados pelo metodo de NaClO e no quarto dia foram submetidos a
temperatura de 35 oC, que acelera o fenotipo de paralisia. Os vermes foram analisados a cada
hora atraves do toque com a alca de platina, e aqueles que nao moviam a regiao posterior do
corpo eram quantificados como paralisados. Como padrao utilizou-se a Memantina (MNTN),
que e o farmaco de escolha para os quadros avancados da DA. A Memantina prolongou o
tempo de paralisia no animal, o que corrobora com a literatura. A RTN na concentracao de
100 ƒÊmol reduziu levemente a paralisia nos animais, enquanto que a retronecina clorada
(RTNCl) nao prolongou o tempo de paralisia nos animais, contudo nao foi toxica a estes
mesmo em concentracoes de 100 mmol. Os resultados mostram que a RTN e a RTNCl nao
sao toxicas como seu produto de partida, a Monocrotalina, o que e um indicativo que as
modificacoes moleculares podem ser uteis para reducao da toxicidade e ampliar os campos de
atividade biologica para alcaloides pirrolizidinicos. Estruturas quimicas foram propostas para
os produtos reacionais e espectros complementares foram solicitados.

As vitaminas antioxidantes, alfa-tocoferol e o retinol, assim como a expressão de RNAm de possíveis genes candidatos, foram associados ao risco de DCV. Em um estudo realizado anteriormente por nosso grupo de pesquisa foi sugerido que 13 genes são diferentemente expressos em pacientes com síndrome coronariana aguda. Neste trabalho, objetivou-se investigar o perfil sérico destas vitaminas e a expressão de genes candidatos em leucócitos sanguíneos de pacientes de acordo com a extensão da lesão da artéria coronária. Foram selecionados pacientes com doença arterial coronariana (n = 177), idade entre 30 e 74 anos e submetidos a angiografia coronária eletiva. A extensão da lesão coronária foi avaliada pelo índice de Friesinger, o qual foi dividido em três categorias: 0-4, 5-9 e 10-15. Os níveis séricos de alfa-tocoferol e retinol foram determinados por cromatografia líquida de alta performance (HPLC). A expressão de RNAm dos genes ALOX15, AREG, BCL2A1, BCL2L1, CA1, COX7B, ECHDC3, IL18R1, IRS2, KCNE1, MMP9, MYL4 e TREML4 foram analisadas por RT-qPCR. O nível de alfa-tocoferol foi menor no grupo 0-4 em comparação com o grupo 5-9 (p=0,035) e mostrou uma correlação positiva com os genes BCL2A1, COX7B e correlação negativa com o ECHDC3. O RNAm do gene ECHDC3 foi menos expresso enquanto que o RNAm dos genes AREG, BCL2A1, COX7B, IL18R1 e TREML4 foram mais expressos em pacientes do grupo 10-15 comparados ao grupo 0-4 (p<0,05). Além disso, o RNAm dos genes BCL2A1, BCL2L1 e MYL4 foram mais expressos em pacientes do grupo 5-9 do que no grupo 0-4 (p<0,05). Não foi observada associação entre o nível sérico de retinol e a extensão da lesão coronária ou expressão de RNAm dos genes candidatos. Níveis mais altos de alfa-tocoferol em pacientes com lesões mais extensas das artérias coronárias demonstra possivelmente uma alteração no metabolismo da vitamina E enquanto que a regulação positiva na expressão de RNAm dos genes AREG, BCL2A1, COX7B, IL18R1 e TREML4 é influenciada pela extensão das lesões das artérias coronárias mais graves. Os resultados desse estudo sugerem um potencial uso do RNAm desses genes como biomarcadores da expressão gênica para avaliar a progressão da DAC.

O câncer de tireoide (CT) é o tumor endócrino mais comum e corresponde a 1% de todas as neoplasias malignas. O número de casos diagnosticados vem aumentando e estima-se que surjam 212 mil novos casos anuais no mundo. Atualmente, não há nenhum estudo de predisposição genética ao CT realizado na população miscigenada do Rio Grande do Norte, local cuja indecência é elevada em comparação à média da população brasileira. Desta forma, o presente projeto busca avaliar a predisposição genética da população local em desenvolver o CT, a fim de compreender melhor a fisiopatologia desta doença e estabelecer potenciais biomarcadores de predisposição. Neste intuito, foi selecionado material histopatológico do banco de amostras do laboratório de Patologia da LNRCC para compor o grupo de estudo, e sangue periférico de doadores do banco de sangue Hemovida, como grupo controle. O DNA genômico das glândulas tireoide emblocadas em parafina e sangue periférico dos controles foram extraídos utilizando o conjunto de reagentes QIAamp® DNA FFPE Tissue e QIAamp® genomic DNA, respectivamente. A genotipagem de um painel de 84 SNPs foi executada através do espectrofotômetro de massa MALDI-TOF Sequenom® MassARRAY iPLEX Gold, em colaboração com o Centro Nacional de Genotipagem de Santiago de Compostela – Espanha. Trinta e seis SNPs mostraram diferenças significativas em suas frequências alélicas quando comparados entre os casos e controles. Destes, 23 SNPs foram associados ao risco de desenvolvimento do CT, destacando-se entre eles as variantes rs2997312 (OR= 6,33), rs7024345 (OR= 2,97), rs10788123 (OR= 2,78), rs116909374 (OR= 3,40) e rs965513 (OR= 2,91) por conferir maior risco de desenvolver CT aos pacientes. Adicionalmente, 13 SNPs se apresentaram como um fator de proteção para o não desenvolvimento desta neoplasia. Desta forma, o presente estudo, inédito na população do Rio Grande do Norte, sugere a associação destes SNPs como biomarcadores de predisposição de CT nesta população.

O carcinoma papilífero de tireoide (CPT) é o tumor maligno mais frequente da tireoide. Limitações no diagnóstico e determinação de prognóstico ainda representam um grande desafio para o manejo clínico do CPT, logo a busca por novos alvos para o diagnóstico minimamente invasivo torna-se crucial. Considerando a reconhecida associação entre o CPT e a inflamação crônica, o objetivo do presente estudo foi investigar o papel de citocinas plasmáticas e HLA-G solúvel como potenciais biomarcadores para o CPT. O plasma de pacientes com CPT foi obtido antes (n = 85) e após a realização da tireoidectomia (n = 77). Os níveis plasmáticos de 13 citocinas foram mensurados através de ensaio multiplex e single-plex baseado em beads por citometria de fluxo, e HLA-G solúvel foi mensurado por ELISA. Os resultados foram comparados entre si, e com um grupo controle de indivíduos saudáveis (n = 80). A associação dessas moléculas com características clínico-patológicas e o tipo de resposta ao tratamento do paciente também foi investigada. Os níveis de IL-4, IL-10, TNF, IFN-α e TGF-β1 estavam significativamente mais altos no plasma pós-tireoidectomia comparado ao plasma pré-tiroidectomia. Em comparação aos controles, foi observado um padrão de citocinas concentradas diferencialmente tanto no plasma pré-tireoidectomia quanto no plasma pós-tireoidectomia. IFN-α e TGF-β1 foram capazes de discriminar de forma independente os pacientes com CPT de controles, e IFN-α apresentou a melhor performance diagnóstica. Aumento de IL-1β e diminuição de IL-12p70 no plasma estava associado independentemente com tumores maiores (> 2,0 cm), enquanto diminuição dos níveis de sHLA-G estava associado à presença de invasão. Pacientes com resposta bioquímica/estrutural incompleta apresentaram níveis mais altos de IL-5 e IFN-α em comparação aos pacientes de resposta excelente/indeterminada. Em conclusão, os resultados mostram uma mudança significativa no perfil de citocinas plasmáticas após a remoção cirúrgica do tumor tireoidiano e boa capacidade de IFN-α e TGF-β1 em discriminar os pacientes com CPT dos controles. Citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias estavam associadas com fatores de pior prognóstico e de resposta insatisfatória ao tratamento.

A sintese de acidos graxos, principalmente pela enzima ƒÀ-cetoacil-ACP sintase III (FabH), vem despontando como um excelente alvo para novas moleculas com acao antimicrobiana. Apesar da urgencia gerada pela crescente resistencia bacteriana, a sintese de novas moleculas se mostra uma tarefa bastante dispendiosa tanto em tempo como em recursos financeiros. Neste sentido, utilizar-se das informacoes contidas nos ligantes, ja sintetizados, para extrair o maximo de informacao da afinidade pelos alvos, configura-se como uma alternativa de baixo custo operacional para o desenvolvimento direcionado de novos compostos ativos. Uma maneira eficaz de extrair estas informacoes dos ligantes e perceber que partes destas moleculas melhor contribuem com a atividade biologica. Porem, quando diante de esqueletos moleculares tao distintos, torna-se dificil a percepcao de tais fatores. Desta forma, sao as pequenas diferencas em moleculas bastante similares que melhor definem as regioes da molecula, e do inibidor, que contribuem para uma maior potencia. A relacao entre este grupo de moleculas e conhecido como Activity Cliff. Diante de todas as vantagens expostas escolheu-se esta metodologia para guiar a sintese de novos inibidores da enzima FabH. A partir deste estudo, foi possivel determinar componentes farmacoforicos que podem guiar o desenho de novos inibidores da enzima FabH. Grupos doadores de hidrogenio na regiao catalitica do sitio ativo, juntamente com grupos volumosos que aumentem a superficie de contato com a triade catalitica aliados a grupos aceptores de eletrons proximo aos aminoacidos arginina 249, arginina 36 e asparagina 210 foram os fatores percebidos para o aumento da atividade. Por fim, grupos similares a quinolina que possam interagir com os aminoacidos arginina 151, triptofano 32 em um bolso lateral adicional e realizar ligacoes de hidrogenio com o aminoacido treonina 28.

A orientina e a isoorientina são flavonoides c-glicosídicos e marcadores da espécie vegetal Passiflora edulis var. flavicarpa e de outras espécies vegetais, as quais são reportadas na literatura por suas diversas propriedades farmacológicas. Entretanto, todas estas espécies possuem um problema comum a outros candidatos a medicamentos que é a escassez de estudos sobre o metabolismo e farmacocinética dos extratos e principalmente de seus marcadores que são essenciais para comprovar a segurança e eficácia destes candidatos a novos fármacos. Com o desenvolvimento do modelo biomimético com metaloporfirinas, reações de biotransformação são simuladas para caracterizar o metabolismo in vitro e fornecer diversos produtos, os quais podem ser posteriormente identificados como metabólitos e auxiliar na redução do número de animais necessários nesta fase do estudo. Assim, através das técnicas de cromatografia em coluna clássica e CLAE, isolou-se a orientina e a isoorientina a partir do extrato de P. edulis. Estes flavonoides foram submetidos às reações com os oxidantes m-CPBA e PhIO e catalisadas pelo catalisador de Jacobsen (Mn (Salen)), um catalisador eficiente e de fácil síntese e purificação, além do catalisador sintetizado Mn(3MeOSalen)Cl, derivado de Salen ainda inédito em reações biomiméticas o qual foi caracterizado com maior potencial de oxidação. A reação da isoorientina com m-CPBA na proporção 1:20:20 (catalisador:oxidante:flavonoide) apresentou um maior consumo do substrato para ambos os catalisadores enquanto que a reação da orientina com PhIO na proporção 1:10:10 apresentou um maior consumo do substrato também para ambos catalisadores. A melhor condição foi otimizada evidenciando que os isômeros orientina e isoorientina apresentam reatividade diferente. Além disso, os produtos de reação, 3 da orientina e 5 da isoorientina, foram caracterizados por LC-MS e LC-MS/MS. Esses produtos reacionais não foram encontrados na literatura, entretanto se destaca a formação de epóxidos que são altamente reativos e podem causar toxicidade. Desta forma, este estudo pode servir de base para a realização de posteriores estudos farmacológicos e toxicológicos que confirmem a presença destes compostos como metabólitos de fase I e assegurem a segurança na utilização de produtos vegetais que possuam a isoorientina e orientina como marcadores.

O ácido ferúlico (AF) é um ácido fenólico amplamente distribuído no reino vegetal e
advindo do metabolismo secundário destes. É formado a partir do metabolismo dos
aminoácidos fenilalanina e tirosina nos vegetais, sendo abundante e encontrado em
grãos integrais, espinafre, salsa, uvas e ruibarbo. Esse estudo deve-se ao altíssimo
potencial antioxidante de grande interesse na indústria de cosméticos. Alguns testes
e estudos são exigidos pelos órgãos regulatórios internacionais e nacionais, entre
eles, a pesquisa de produtos de degradação forçada. O objetivo desta pesquisa foi
identificar e caracterizar os produtos de degradação do AF e desenvolver um
método por CLUE-DAD capaz de quantificar as impurezas e produtos de
degradação com eficiência em matérias-primas, formulações e demais formas
farmacêuticas. Nesse estudo foram realizados os estudos indicativos de
estabilidade, as degradações forçadas entre elas: Hidrólises, oxidação e
fotoestabilidade em solução e sólida, os quais foram identificados e quantificados
por um método por CLUE-DAD. Os resultados obtidos mostram-se muito
promissores, o que chama maior atenção é a estabilidade do ativo a hidrólise e a
forte instabilidade a luz, quando em solução, apresentando degradação a partir dos
primeiros 5 min. A otimização do método desenvolvido por CLUE-DAD foi feita
utilizando-se como ferramenta um planejamento fatorial. Os gráficos de superfícieresposta
e Pareto revelaram as variáveis com maior influência sobre todas as
variáveis dependentes; a concentração de acetonitrila na fase móvel e o fluxo. O
melhor método para identificação do AF e do produto de degradação, possui
resolução e seletividade satisfatória. O método desenvolvido é constituído de fase
móvel com água acidificada a 2% de ácido acético:acetonitrila (88:12), fluxo de 0,25
mL/min, temperatura do forno de 30 ºC, com detecção à 322 nm. A metodologia foi
validada se enquadrando em todos os parâmetros da validação estabelecidos,
revelando uma certa instabilidade nas variações de fluxo testadas na robustez. O
tempo de análise foi reduzido para menos de 6 minutos. O planejamento fatorial
mostrou-se uma ferramenta importante para o desenvolvimento racional e otimizado
do método.

O processo inflamatório é um evento fisiológico, cujos eventos gerados
nesse processo são ocasionados pela liberação de mediadores inflamatórios, com
o objetivo de restaurar a homeostase. Para o tratamento das inflamações são
utilizados fármacos anti-inflamatórios, no entanto, a terapia prolongada leva ao
aparecimento de reações adversas que podem ser danosas ao paciente, e diante
disso a busca por novas alternativas mais seguras e eficazes se faz relevante.
Nesse contexto, as plantas medicinais, como as espécies vegetais Jatropha
gossypiifolia (Jg) e Ipomoea pes-caprae (Ipc) podem ser destacadas como fortes
candidatas, já que na medicina tradicional são utilizadas popularmente para os
mais variados fins curativos, incluindo condições inflamatórias. Nesse sentido, no
presente estudo foi realizado o desenvolvimento de géis contendo os extratos
vegetais dessas espécies e a avaliação de sua atividade anti-inflamatória tópica,
utilizando os modelos de edema de orelha induzido por aplicação única de óleo
de cróton e edema de pata induzido por carragenina (inflamação aguda) e edema
de orelha induzido por aplicação múltipla de óleo de cróton (inflamação crônica).
Os géis apresentaram características físico-químicas adequadas e mostraram-se
estáveis durante 30 dias de observação, não apresentando nenhuma alteração na
cor, odor ou aspecto. Os géis apresentaram pH semelhante ao pH cutâneo,
minimizando dessa forma o aparecimento de irritação ou alteração cutânea,
resultados que corroborarram com os do teste de irritação cutânea in vivo, onde
os géis não apresentaram sinais clínicos de toxicidade entre os 14 dias de
observação, indicando a segurança do produto desenvolvido para uso tópico. Os
géis de Jg demonstraram atividade anti-inflamatória aguda significativa no edema
de orelha, e esta atividade foi significativamente aumentada quando quantidades
equivalentes de extrato foram aplicadas incorporadas nos géis desenvolvidos,
além disso, também reduziram significativamente os níveis de edema, nitrito e
enzima MPO nas orelhas de camundongos, com intensidade semelhante a
dexametasona (padrão antiinflamatório). O extrato de Ipc não apresentou
atividade no modelo de edema de orelha aguda, mesmo após incorporação no
gel, no entanto, inibiu significativamente o edema de pata durante todo a duração
do experimento semelhante a dexametasona. Os géis de Jg 1,0% e Ipc 5%
também mostraram significativo efeito anti-inflamatório no teste de inflamação
crônica, reduzindo significativamente o edema (observado também na análise
histopatológica) e oxidativos (peroxidação lipídica e a depleção de glutationa
reduzida) similarmente à dexametasona. Dessa forma, este estudo demonstrou a
potencialidade anti-inflamatória dos géis desenvolvidos com os extratos das
espécies J. gossypiifolia e I. pes-caprae, podendo servir como ponto inicial para o
desenvolvimento de produtos fitoterápicos para o tratamento de processos
inflamatórios.

As árvores da espécie Copaifera multijuga Hayne crescem abundantemente na região da Amazônia, apresentando grande visibilidade por seu óleo-resina, que apresenta atividade anti-inflamatória. A formação de complexo de inclusão (CI) com a ciclodextrina (CD) tem sido aplicada como alternativa para resolver algumas limitações que os óleos tem em comum, principalmente a baixa solubilidade em ambientes aquosos. Então, o objetivo deste trabalho foi desenvolver CI’s do óleo-resina de Copaifera multijuga (OCM) com a β-ciclodextrina (βCD) e com a hidroxipropil-β-ciclodextrina (HPβCD) e avaliar a atividade anti-inflamatória deles. Inicialmente, foram realizados estudos teóricos computacionais nos quais foram calculadas as energias de interação entre a βCD e o β-cariofileno (βCP), composto mais abundante do OCM. Em seguida, foram desenvolvidos os CI’s com βCD e HPβCD pelo métodos de mistura física (MF), malaxagem (MAL) e slurry (SL). Foi realizada a caracterização físico-química dos CI’s através de espectroscopia de infravermelho com transformada Fourier (FTIR), microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raio-X de pó (DRX), análise termogravimétrica (ATG) e calorimetria exploratória diferencial (DSC). Por fim, os CI’s de βCD e HPβCD foram comparadas em relação à suas atividades anti-inflamatórias com o OCM. Os estudos teóricos computacionais mostraram valores energéticos de -20,8 kcal∙mol-1 e -17,0 kcal∙mol-1 da entrada com a face menor e com a face maior do βCP, respectivamente, entrando pela cavidade maior da βCD. Na espectroscopia de FTIR, foi possível observar que ocorreu a interação entre a βCD e o OCM por MAL e SL, e entre a HPβCD e o OCM, pelo SL. Na MEV, na DRX e na ATG, foi possível concluir que houve interação entre a βCD e o OCM por MAL e SL. No caso da DSC, foi observado que ocorreu interação entre a βCD e o OCM e entre a HPβCD e o OCM pelos dois métodos. O OCM e os CI’s de βCD e de HPβCD (preparados por SL) mostraram evidente atividades anti-inflamatórias pela diminuição do edema de pata, nos níveis de nitrito e da atividade da enzima mieloperoxidase. Então, foram desenvolvidos CI’s do OCM com a βCD e de HPβCD, por SL, e eles mantiveram a atividade biológica do OCM.

Os membros da família triggering receptor expressed on myeloid cells (TREM) são associados com o risco e progressão da aterosclerose. Em resultados prévios observamos que a alta expressão do TREML4 está relacionada com fase inicial da Síndrome Coronariana Aguda. Nesse estudo, investigamos a relação dos polimorfismos e a expressão do RNAm do TREML4 em leucócitos de pacientes estratificados de acordo com a extensão das lesões das atrérias coronárias. Foram incluídos pacientes com doença arterial coronariana (DAC) (n=151), com idades entre 30 e 74 anos, submetidos à angiografia coronária eletiva. A extensão da lesão coronariana foi avaliada através do índice de Friesinger. Os polimorfismosrs 2803495 (A> G), rs2803496 (T> C) e a expressão do RNAm do TREML4 em leucócitos foram analisadas pela qRT-PCR. A expressão de TREML4 foi maior em pacientes com lesões coronarianas graves em relação aos sem lesão, baixas e intermediárias, p <0.05. Indivíduos portadores do alelo G do rs2803495 (genótipos AG / GG) e do alelo C do rs2803496 (genótipos TC / CC) apresentaram uma expressão de RNAm de TREML4 positiva (Alelo G: OR = 2.4, 95% CI 1.0-5.7, p < 0.05; e Alelo C: OR = 7.8, 95% CI = 2.9-20.9, p < 0.01, respectivamente).Entretanto, os polimorfirsmos do TREML4 não foram associados com as extensões das lesões coronárias. Em conclusão, a expressão aumentada de mRNA de TREML4 nos leucócitos é influenciada por polimorfismos e está associada a lesões mais graves das artérias coronárias, sugerindo seu papel como potencial biomarcador para investigar a extensão da lesão coronariana em pacientes com DAC.

Introdução: A síndrome do QT longo (SQTL) induzida por medicamentos pode levar ao Torsade de Pointes (TdP), uma taquicardia ventricular polimórfica rara que pode ser fatal. Objetivos: Investigar o prolongamento do intervalo QTc em pacientes admitidos em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) geral quanto a prevalência, grau de associação com os medicamentos administrados e interações medicamentosas, evolução no tempo e relação com desfechos clínicos. Métodos: Aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa de acordo com o parecer nº 666.969. Todos os pacientes deram seu consentimento por escrito. Estudo observacional, prospectivo e transversal, realizado entre maio de 2014 e julho de 2016 na UTI do Hospital Universitário Onofre Lopes. Os pacientes admitidos, de ambos os sexos e maiores de 18 foram incluídos, sendo realizado eletrocardiograma para investigar o intervalo QTc na admissão em um estudo de casos-controle. A correção do intervalo QT pela frequência cardíaca (QTc) foi realizada pela fórmula de Bazzet. Todos os pacientes foram observados até a alta da UTI (fase de coorte analítico prospectivo) para os eventos de parada cardíaca ou óbito, e aqueles com SQTL foram observados por 48 horas e no momento da alta para nova avaliação do intervalo QTc. A comparação da diferença do QTc para o valor inicial foi analisada por covariância. Para a determinação do risco de prolongamento do QTc associado a cada medicamento foi utilizada a regressão logística. A comparação entre pacientes com e sem SQTL do tempo até parada cardíaca ou morte foi analisado com o teste do logrank e por regressão logística. O risco desses eventos foi estimado por Kaplan-Meier. Resultados: Foi identificado uma prevalência de 34% (249/734) de SQTL em que 13,3% (33/249) possuíam QTc maior que 500 ms. Amiodarona (OR 2.434, p=0.02) e haloperidol (OR 3.333, p=0.02) foram associados ao SQTL, assim como medicamentos ainda não descritos em literatura: sufentanil (OR 3.667, p<0.01), clopidogrel (1.894, p=0.02), midazolam (OR 1.575, p= 0.04), noradrenalina (OR 1.701, p=0.01), nitroglicerina (OR 1.904, p=0.01), cefazolina (OR 1.897, p<0.01), cefepime (OR 0.417, p=0.01) e protamina (OR 5.952, p<0.01). A presença de interação medicamentosa aumentou o intervalo QTc em 16,8 ms (IC 95% 4.6 a 29.0 ms, p <0.01), sendo que as do tipo farmacodinâmicas foram associadas a um aumento de 27.6 ms (IC 95% 2.1 a 53.2 ms, p = 0.03). Nos pacientes em que foram prescritos medicamentos associados ao SQTL, a diferença do QTc em 48h para o valor inicial foi de 15,8 ms (IC 95% -9,9 a 41,4 ms) maior do que no grupo que não utilizou medicamentos (p=0,22). Dos pacientes com SQTL na admissão, 39% o apresentaram após 48 horas e 40% na alta. Foi identificado um risco 3 vezes maior de parada cardíaca nos pacientes com SQTL (OR 3,030, p=0,02), enquanto que não se observou diferença significativa no risco de óbito (rank p=0,87). Conclusões: Observou-se prevalência elevada de SQTL em pacientes críticos. Medicamentos ainda não descritos foram identificados como possíveis indutores de SQTL. Observou-se que o uso de medicamentos não impactou significativamente o intervalo QTc, mas que as interações medicamentosas aumentaram o intervalo QTc, destacando-se apenas as do tipo farmacodinâmica. Verificou-se aumento do risco de parada cardíaca entre o grupo QTc longo, mas sem diferença para a mortalidade.

Clopidogrel é uma terapia essencial para prevenção de trombose e aterosclerose. Contudo, a hepatotoxicidade induzida por clopidogrel é um potencial efeito adverso relacionado com lesões hepáticas e resposta antiplaquetária. Considerando a falta de diagnóstico precoce para esse efeito adverso, miRNAs derivados de exossomos podem ser úteis para melhorar o monitoramento da resposta antiplaquetária e na predição do risco de hepatotoxicidade. Portanto, primeiramente objetivamos investigar as interações miRNA-mRNA com a toxicidade do fármaco in silico utilizando dados de microarrays disponíveis e software Ingenuity Pathways Analysis 6 (IPA). Em seguida, o perfil de expressão exossomal dos miR-26a-5p, miR-145-5p, miR-15b-5p e miR-4701-3p, bem como os mRNAs alvos derivados de células PLOD2, SENP5, EIF4G2, HMGA2, STRADB e TLK1 foram avaliadas in vitro, uma vez que estes foram os alvos moleculares principalmente associados ao efeito adverso. Assim, células HepG2 foram cultivadas em RPMI contendo 5% de soro bovino fetal livre de exossomos e suplementado com penicilina (10.000 UI/mL), estreptomicina (10.000 UI/mL) e bicarbonato de sódio (44 mmols/L), mantidas a 37º C, em estufa umidificada com atmosfera de 5% de CO2 e incubadas com clopidogrel a 6,25, 12,5, 25, 50 e 100 μM durante 24 e 48 h. A citotoxicidade foi avaliada por citometria de fluxo pela análise da fragmentação do DNA e do ciclo celular. A expressão de miRNA derivados de exossomos e de mRNA derivados de células foi avaliado por RT-qPCR. As células tratadas com concentrações mais elevadas de 50 e 100 μM causaram maior fragmentação do DNA após 24 e 48 h sugerindo ser uma concentração tóxica. A expressão do miR-26a-5p foi elevada e a expressão do miR-15b-5p foi diminuída na concentração tóxica 100 μM em relação ao controle em 24 e 48 h. HMGA2, EIF4G2, STRADB e SENP5 alvos do miR-26a-5p foram pouco expressos nas concentrações tóxicas em 24 h e o HMGA2 se manteve pouco expresso depois de 48 h de tratamento. TLK1, alvo do miR-15b-5p, teve expressão diminuída em 24 h na concentração tóxica. Os resultados sugerem que concentrações tóxicas de clopidogrel podem modular a expressão de miR-26a-5p e miR-15b-5p e seus alvos de mRNA. Além disso, o miR-26a pode representar um marcador importante para prever a hepatotoxicidade induzida por clopidogrel

O desenvolvimento de novos fármacos é uma atividade de grande importância
para a indústria farmacêutica e envolve diversas etapas, entre elas o
monitoramento da qualidade e segurança das substâncias de interesse. O
ácido p-cumárico, por meio de um processo de esterificação, origina o metil pcumarato,
etil p-cumarato e isopropil p-cumarato, que são alvos de diversos
estudos biológicos, porém são escassos na literatura informações sobre suas
características físico-químicas, estabilidade e metodologia analítica para sua
identificação e quantificação. Neste contexto, esse trabalho tem como objetivo
à avaliação térmica e cromatográfica destes ésteres, visando avaliar sua
estabilidade e características físico-químicas contribuindo na pesquisa de
novos fármacos e controle de qualidade de medicamentos que venham a
apresentar estas moléculas como princípio ativo. As análises por DSC, DTA e
TG demonstraram que os derivados do ácido p-cumárico, apesar de sua
semelhança estrutural, possuem comportamentos térmicos distintos, de forma
que é possível o emprego destas técnicas para a identificação destes. O metil
p-cumarato e o etil p-cumarato apresentaram ponto de fusão em 131 °C e 65
°C respectivamente, já o isopropil p-cumarato não apresentou processo de
fusão. As três amostras possuem boa estabilidade térmica, sendo o metil pcumarato
o mais estável. Foi desenvolvido um método para identificação
simultânea destes compostos por UHPLC, o método se mostrou eficiente
também na identificação dos seus produtos de degradação ao ser aplicado no
estudo de degradação forçada.