Dissertações/Teses

Clique aqui para acessar os arquivos diretamente da Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRN

2025
Dissertações
1
  • LETICIA MIKARDYA LIMA SALES
  • Identificação do Trypanosoma cruzi por amplificação do DNA com novos iniciadores na Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

  • Orientador : ANTONIA CLAUDIA JACOME DA CAMARA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIA CLAUDIA JACOME DA CAMARA
  • JOAO FIRMINO RODRIGUES NETO
  • ELIANE LAGES SILVA
  • Data: 28/01/2025

  • Mostrar Resumo
  • A doença de Chagas (DC) é uma infecção parasitária causada pelo protozoário

    flagelado Trypanosoma cruzi. O diagnóstico da fase crônica da doença de Chagas é

    realizado, principalmente, por meio de testes sorológicos, que detectam anticorpos

    específicos anti-T.cruzi. No entanto, resultados inconclusivos ou falsos positivos, são

    recorrentes, sobretudo devido às reações cruzadas com outros tripanosomatídeos.

    Desta forma, os avanços na biologia molecular são responsáveis por melhorar

    significativamente o diagnóstico da infecção. O objetivo deste estudo foi a

    identificação do T. cruzi de diferentes DTUs por amplificação do DNA com novos

    iniciadores na Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). O desenho dos iniciadores

    foi baseado nas sequências de DNA das cepas, clones e isolados de referência de T.

    cruzi, depositadas no GenBank do NCBI para os genes do kDNA: 9S, 18S, Citocromo

    B, Citocromo Oxidase subunidade II (COX II), NADH desidrogenase subunidade 1

    (NADH 1) e NADH desidrogenase subunidade 5 (NADH 5). Os iniciadores foram

    desenhados no software Primer Blast NCBI. Após checagem manual e testes in silico,

    os iniciadores mais promissores, desenhados para o gene do 18S (5’ –

    CAAGCGGCTGGGTGGTTATT – 3’ e 3’ – CACGGATTTCCCACAAAGGC – 5’)

    produziram um fragmento de 104pb, COX II (5’ – TGTTATCCATTCATTTACGTTAGC

    – 3’ e 3’ – CATAACTCGCTGCATTGC – 5’) produziram um fragmento de 122pb,

    NADH 1 (5’

    AAGTCCAGCAACCAATTCACTT

    3’

    e 3’

    CGTTACTCTGTGATGGCTTGA – 5’) formaram uma banda de 71pb e NADH 5 (5’ –

    AGAGTACACAGTTTGGGTTG – 3’ e 3’ – CCACATACAACTAACGTTGC – 5’), que

    produziu uma banda de 100pb foram selecionados para o estudo. Inicialmente, as

    condições da PCR foram testadas para os quatro pares de iniciadores escolhidos e

    foram definidas as temperaturas de anelamento de 60ºC (18S), 48ºC (COX II), 57ºC

    (NADH 1) e 55ºC (NADH 5). Em seguida, o teste de sensibilidade analítica foi

    realizado com diferentes DTUs, concentrações de DNA e quantidade de parasitos. Os

    iniciadores desenhados para o 18S detectaram o parasito nas concentrações de

    1000fg até 0,1fg em TcI (Col 1.7), de 1000fg até 1fg na TcII (Y) e 1000fg até 10fg na

    TcIII (CBS56). A sensibilidade analítica da concentração de parasitos na amostra de

    sangue revelou que os iniciadores do 18S conseguiram detectar o DNA do T. cruzi,

    nas concentrações de 1000p/mL em amostras de TcI e TcII; e de 10pmL até 1000p/mL

    em TcIII. A PCR do COXII não alcançou padronização adequada. Os iniciadores

    utilizados para a PCR do NADH 1 e NADH 5 não foram capazes de detectar todas as

    DTUs testadas. A identificação do T. cruzi foi pouco eficiente em amostras de sangue

    humano, de animais domesticados como Canis familiaris, Ovis aries e Capra hircus e

    o DNA parasito foi identificado em todas as amostras T. cruzi de cultura de conteúdo

    intestinal de triatomíneos.


  • Mostrar Abstract
  • Chagas disease (CD) is a parasitic infection caused by the flagellated protozoan

    Trypanosoma cruzi. The diagnosis of the chronic phase of Chagas disease is

    performed mainly by serological tests, which detect specific anti-T. cruzi antibodies.

    However, inconclusive or false-positive results are recurrent, mainly due to cross

    reactions with other trypanosomatids. Thus, advances in molecular biology are

    responsible for significantly improving the diagnosis of the infection. The objective of

    this study was to identify T. cruzi from different DTUs by DNA amplification with new

    primers in the Polymerase Chain Reaction (PCR). Primer design was based on DNA

    sequences of T. cruzi reference strains, clones and isolates deposited in NCBI

    GenBank for the kDNA genes: 9S, 18S, Cytochrome B, Cytochrome Oxidase subunit

    II (COX II), NADH dehydrogenase subunit 1 (NADH 1) and NADH dehydrogenase

    subunit 5 (NADH 5). Primers were designed using NCBI Primer Blast software. After

    manual checking and in silico testing, the most promising primers designed for the 18S

    gene (5’

    CAAGCGGCTGGGTGGTTATT

    3’ and 3’

    CACGGATTTCCCACAAAGGC – 5’) produced a 104bp fragment, COX II (5’ –

    TGTTATCCATTCATTTACGTTAGC – 3’ and 3’ – CATAACTCGCTGCATTGC – 5’)

    produced a 122bp fragment, NADH 1 (5’ – AAGTCCAGCAACCAATTCACTT – 3’ and

    3’ – CGTTACTCTGTGATGGCTTGA – 5’) formed a 71bp band and NADH 5 (5’ –

    AGAGTACACAGTTTGGGTTG – 3’ and 3’ – CCACATACAACTAACGTTGC – 5’),

    which produced a 100bp band were selected for the study. Initially, the PCR conditions

    were tested for the four chosen primer pairs and the annealing temperatures were

    defined as 60ºC (18S), 48ºC (COX II), 57ºC (NADH 1) and 55ºC (NADH 5). Then, the

    analytical sensitivity test was performed with different DTUs, DNA concentrations and

    parasite quantity. The primers designed for 18S detected the parasite at concentrations

    of 1000fg to 0.1fg in TcI (Col 1.7), from 1000fg to 1fg in TcII (Y) and 1000fg to 10fg in

    TcIII (CBS56). The analytical sensitivity of the parasite concentration in the blood

    sample revealed that the 18S primers were able to detect T. cruzi DNA at

    concentrations of 1000p/mL in TcI and TcII samples; and from 10pmL to 1000p/mL in

    TcIII. The COXII PCR did not achieve adequate standardization. The primers used for

    the NADH 1 and NADH 5 PCR were not able to detect all the DTUs tested. The

    identification of T. cruzi was not very efficient in human blood samples, from

    domesticated animals such as Canis familiaris, Ovis aries and Capra hircus and the

    parasite DNA was identified in all T. cruzi samples from cultures of intestinal contents

    of triatomines.

2
  • GILSON CASSIANO DE GÓES NETO
  • AVALIAÇÃO ANTIVIRAL IN VITRO DE NOVOS SISTEMAS DE LIBERAÇÃO COM DERIVADO NAFTOQUINONA

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • FABIO ROCHA FORMIGA
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • Data: 31/01/2025

  • Mostrar Resumo
  • O surto da dengue, doença transmitida pelo vírus DENV, se espalhou em proporção global, causando

    milhões de mortes em todo mundo. Com isso, se faz necessário o desenvolvimento de novos

    compostos que possam atuar no tratamento da dengue. As Naftoquinonas (NQs) e seus derivados

    apresentam ação antifúngica, antiparasitária e antimicrobiana, dentre estas, encontra-se o composto

    IVS320, uma molécula com promissora ação antimicrobiana, porém com baixa solubilidade. As

    ciclodextrinas (CDs) são utilizadas como uma estratégia para melhorar a solubilidade, estabilidade e

    biodisponibilidade de fármacos. Neste contexto, o desenvolvimento de complexos de inclusão (CIs)

    com ciclodextrinas pode solucionar as restrições implícitas do IVS320, e por sua vez, aumentar sua

    biodisponibilidade e a ação farmacológica. Dessa forma, o presente estudo tem o objetivo de melhorar

    as propriedades físico-químicas e biológicas da naftoquinona IVS320, através do desenvolvimento de

    complexos de inclusão. Além de avaliar a atividade anti-DENV in vitro dos sistemas de liberação

    obtidos e analisar o potencial bioativo do composto. Os complexos obtidos com as γ-CD, HP-γ-CD e

    HP-β-CD, por meio das técnicas de mistura física (MF), malaxagem (ML) e rotaevaporação (RT),

    foram caracterizados por meio das técnicas DRX, FTIR, DSC e TG. Os resultados de DRX do IVS320

    isolado exibiram reflexões cristalinas com grande intensidade em 10°, 18°, 32° e 37°, enquanto os

    difratogramas dos sistemas MF, ML e RT mostraram redução do perfil cristalino, sugerindo a

    formação dos complexos. Os espectros de FTIR dos sistemas mostraram bandas características tanto

    do IVS320 quanto das CDs empregadas, com modificações no perfil de algumas bandas. Por sua vez,

    o DSC apresentou pouca semelhança com os eventos endotérmicos e exotérmicos constatados no

    IVS320 isolado, e os CI exibiram as principais ocorrências nas faixas de 70-80°C, 190-200°C, até

    picos exotérmicos na faixa de 250°C-260°C, sinalizando cristalização. Enquanto que na TG observou

    se estágios de perda de massa bem definidos para todas as técnicas de complexação, em que os

    primeiros eventos dos sistemas ocorreram em torno de 50°C a 70°C, com cerca de 10% de perda de

    massa, já a segunda variação iniciou entre 300 a 340°C, seguindo de decaimento gradativo de massa

    até 600°C, com as maiores ∆m (aproximadamente de 80%). Com relação a atividade in vitro, o

    composto IVS320 apresentou resultado bastante satisfatório, sendo capaz de inibir o vírus DENV. Os

    resultados da caracterização físico-química indicaram a formação de CIs do IVS320 com CDs,

    evidenciando que os métodos empregados foram eficazes e que os sistemas desenvolvidos se tornam

    promissores para potencializar a atividade antiviral do IVS320.


  • Mostrar Abstract
  • The outbreak of dengue fever, a disease transmitted by the DENV virus, has spread globally, causing

    millions of deaths worldwide. Therefore, it is necessary to develop new compounds that can act in the

    treatment of dengue fever. Naphthoquinones (NQs) and their derivatives have antifungal, antiparasitic

    and antimicrobial action, among which is the compound IVS320, a molecule with promising

    antimicrobial action, but with low solubility. Cyclodextrins (CDs) are used as a strategy to improve the

    solubility, stability and bioavailability of drugs. In this context, the development of inclusion

    complexes (ICs) with cyclodextrins can solve the implicit restrictions of IVS320, and in turn, increase

    its bioavailability and pharmacological action. Thus, the present study aims to improve the

    physicochemical and biological properties of naphthoquinone IVS320, through the development of

    inclusion complexes. In addition to evaluating the in vitro anti-DENV activity of the obtained delivery

    systems and analyzing the bioactive potential of the compound, the complexes obtained with γ-CD,

    HP-γ-CD and HP-β-CD, through the physical mixing ( MF), kneading (ML) and rotary evaporation

    (RT) techniques, were characterized by XRD, FTIR, DSC and TG techniques. The XRD results of the

    isolated IVS320 exhibited crystalline reflections with high intensity at 10°, 18°, 32° and 37°, while the

    diffractograms of the MF, ML and RT systems showed a reduction in the crystalline profile,

    suggesting the formation of complexes . The FTIR spectra of the systems bands showed characteristic

    of both IVS320 and the CDs employed, with modifications in the profile of some bands. In turn, the

    DSC showed little similarity with the endothermic and exothermic events observed in the isolated

    IVS320, and the IC exhibited the main occurrences in the ranges of 70-80°C, 190-200°C, up to

    exothermic peaks in the range of 250°C-260°C, signaling crystallization. While in the TG, well

    defined stages of mass loss were observed for all complexation techniques, in which the first events of

    the systems occurred around 50°C to 70°C, with approximately 10% mass loss, while the second

    variation began between 300 and 340°C, followed by gradual mass decay up to 600°C, with the

    highest ∆m (approximately 80%). Regarding in vitro activity, the compound IVS320 presented quite

    satisfactory results, being able to inhibit the DENV virus. The results of the physicochemical

    characterization indicated the formation of IVS320 ICs with CDs, demonstrating that the methods

    employed were effective and that the systems developed are promising for enhancing the antiviral

    activity of IVS320.

Teses
1
  • KALIANY ADJA MEDEIROS DE ARAÚJO
  • DISTRIBUIÇÃO ESPACIAL E TEMPORAL DOS ACIDENTES CAUSADOS POR

    ESCORPIÃO NO MUNICÍPIO DE NATAL, ESTADO DO RIO GRANDE DO NORTE

    (2007-2018)

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • DIANA PONTES DA SILVA
  • MAIRA CONCEIÇÃO JERONIMO DE SOUZA LIMA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • RAND RANDALL MARTINS
  • Data: 24/02/2025

  • Mostrar Resumo
  • Acidentes causados por animais peçonhentos são considerados um problema de saúde pública

    no Estado do Rio Grande do Norte, localizado no Nordeste do Brasil. A alta incidência desses

    casos revela a necessidade de estudos para determinar a diversidade de sinais e sintomas dessa

    distribuição espacial, principalmente na cidade de Natal, uma região quente e úmida, com

    muitos casos de escorpionismo. O objetivo desse estudo foi investigar a distribuição espacial e

    temporal, além dos aspectos clínicos e ambientais envolvidos nos acidentes por escorpião no

    município de Natal, no Rio Grande do Norte. Para isso, os dados foram obtidos a partir do

    banco de informações de doenças notificáveis da Secretaria de Estado da Saúde Pública do Rio

    Grande do Norte (SESAP-RN) e do Sistema de Informação de Agravos de Notificação

    (SINAN), entre 2007 e 2018. Na região, 31.368 casos de pessoas afetadas por escorpiões, com

    maior concentração em áreas de maior urbanização e Índice de Desenvolvimento Humano

    (IDH) baixo. Os acidentes ocorreram em regiões predominantemente quentes e úmidas,

    afetando principalmente mulheres em idades economicamente ativas. Além disso, observou-se

    que as primeiras três horas após a picada são cruciais para o prognóstico dos casos. Os quadros

    clínicos mais severos apresentaram forte correlação com crianças de até 9 anos de idade, com

    significativo risco de morte em pacientes que apresentaram dormência. Considerando tratar-se

    de um problema negligenciado, e levando em conta a localização do município, é possível

    perceber como as questões ambientais influenciam a distribuição espacial e a manutenção de

    um ecossistema favorável ao escorpionismo. Com base nos dados coletados sobre a distribuição

    espacial e seus riscos, esta pesquisa pode contribuir significativamente para a formulação de

    estratégias para prevenção de novos acidentes.


  • Mostrar Abstract
  • Accidents caused by venomous animals are considered a public health problem in the state of

    Rio Grande do Norte, located in the northeast of Brazil. The high incidence of cases reveals the

    need for studies to determine the diversity of signs and symptoms in this spatial distribution,

    especially in the city of Natal, a hot and humid region with many cases of scorpion stings. Thus,

    the objective of this study was to investigate the spatial and temporal distribution, in addition

    to the clinical and environmental aspects involved in scorpion sting accidents in the city of

    Natal, in Rio Grande do Norte. To this end, data were obtained from the database of notifiable

    diseases of the State Secretariat of Public Health of Rio Grande do Norte (SESAP-RN) and the

    Information System for Notifiable Diseases (SINAN) between 2007 and 2018. In the region,

    31,368 cases of people affected by scorpions were registered in areas of greater urbanization

    and with a low Human Development Index (HDI). The stings tended to occur in predominantly

    hot and humid regions, mainly affecting women of economically active ages. It was also

    revealed that the first three hours after the sting are extremely important for the prognosis of

    the cases. The most severe clinical pictures had a strong and moderate relationship in children

    up to 9 years of age and a significant risk of death in patients with numbness. Because this is a

    neglected problem and the location of the municipality, it is noticeable how environmental

    issues can influence the spatial distribution and maintenance of an ecosystem favorable to

    scorpionism. Based on the data collected on spatial distribution and its risks, this research can

    be an excellent way to create strategies to prevent new accidents.

2024
Dissertações
1
  • HÉRIKS GOMES RIBEIRO
  •  O PAPEL DOS miRNAS COMO BIOMARCADORES NA CARDIOMIOPATIA CHAGÁSICA: UMA REVISÃO DA LITERATURA E ANÁLISE IN SILICO

     

     
  • Orientador : VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • ISABELLE CRISTINA CLEMENTE DOS SANTOS
  • JULIANA DE ASSIS SILVA GOMES ESTANISLAU
  • Data: 20/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: A cardiomiopatia chagásica (CC) é uma forma grave da doença de
    Chagas (DC) e uma das principais causas de morbidade e mortalidade cardiovascular.
    A desregulação da resposta imune leva à remodelação cardíaca e alterações
    funcionais, resultando em complicações com risco de vida. Os métodos diagnósticos
    convencionais possuem limitações e a avaliação da resposta terapêutica ainda é um
    desafio. MicroRNAs (miRNAs), importantes reguladores da expressão gênica,
    apresentam potencial como biomarcadores para diagnóstico e prognóstico. Objetivo:
    Esta revisão visa resumir os achados experimentais sobre a expressão de diferencial
    de miRNAs na CC e explorar o potencial desses miRNAs como biomarcadores na
    doença de Chagas. Métodos: A busca foi realizada no banco de dados público da
    Biblioteca Nacional de Medicina dos Estados Unidos (MEDLINE/PubMed) usando os
    termos “Chagas cardiomyopathy” OR “Chagas disease” AND “microRNA” OR
    “miRNA” OR “miR”. Além disso, uma análise de bioinformática foi realizada para
    investigar as interações miRNA-alvo e explorar vias de enriquecimento por Ontologia
    Gênica (GO) de processos biológicos e funções moleculares. Resultados: O miR-21,
    miR-146b, miR-146a e miR-155 exibiram consistentemente regulação positiva,
    enquanto o miR-145 foi regulado negativamente na CC. Esses miRNAs específicos
    têm sido associados à fibrose, resposta imune e processos inflamatórios no tecido
    cardíaco. Conclusão: Nesta revisão, destacamos o papel dos miRNAs frequentes nos
    estudos analisados. Além da apresentação das funções biológicas no contexto CC,
    esses miRNAs mostraram-se potenciais biomarcadores para diagnóstico, progressão
    da doença e monitoramento do tratamento antiparasitário.

  • Mostrar Abstract
  • Introduction: Chagas cardiomyopathy (CC) is a severe form of Chagas disease (DC)
    and one of the main causes of cardiovascular morbidity and mortality. Dysregulation
    of the immune response leads to cardiac remodeling and functional changes, resulting
    in life-threatening complications. Conventional diagnostic methods have limitations
    and assessing therapeutic response is still a challenge. MicroRNAs (miRNAs),
    important regulators of gene expression, have potential as biomarkers for diagnosis
    and prognosis. Objective: This review aims to summarize experimental findings on
    the expression of differential miRNAs in CC and explore the potential of these miRNAs
    as biomarkers in Chagas disease. Methods: The search was carried out in the public
    database of the United States National Library of Medicine (MEDLINE/PubMed) using
    the terms “Chagas cardiomyopathy” OR “Chagas Disease” AND “microRNA” OR
    “miRNA” OR “miR”. Furthermore, a bioinformatics analysis was performed to
    investigate miRNA-target interactions and explore Gene Ontology (GO) enrichment
    pathways of biological processes and molecular functions. Results: miR-21, miR-
    146b, miR-146a, and miR-155 exhibited consistently upregulation, whereas miR-145
    was upregulated at CC levels. These specific miRNAs have been associated with
    fibrosis, immune response and inflammatory processes in cardiac tissue. Conclusion:
    In this review, we highlight the role of frequent miRNAs in the studies developed. In
    addition to presenting biological functions in the CC context, these miRNAs were
    shown to be potential biomarkers for diagnosis, disease progression and monitoring of
    antiparasitic treatment.
2
  • ANTONIA PEREIRA ROSA NETA
  • BIOMARCADORES PARA CARDIOMIOPATIA ARRITMOGÊNICA DO
    VENTRÍCULO DIREITO ATRAVÉS DE ANÁLISE BIOINFORMÁTICA
  • Orientador : ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • OTAVIO CABRAL MARQUES
  • Data: 27/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • A cardiomiopatia arritmogênica do ventrículo direito (CAVD) é uma doença
    caracterizada patologicamente pela substituição do tecido cardíaco normal, principalmente no
    ventrículo direito por tecido fibrogorduroso e clinicamente por arritmias ventriculares
    potencialmente fatais em jovens aparentemente saudáveis. A prevalência da doença foi
    estimada em 1:5.000 indivíduos. A CAVD tem um diagnóstico muito difícil devido à
    necessidade de investigar e diferenciar os resultados de vários exames eletrocardiográficos que
    também são comuns a outras cardiopatias. O objetivo deste trabalho é analisar os dados do
    perfil de expressão de miRNA e RNAm de pacientes com CAVD e fornecer esclarecimentos
    sobre a fisiopatologia da CAVD e novas conexões da rede miRNAs-RNAms para uma
    investigação mais aprofundada e triagem de biomarcadores eficientes para CAVD. Para isso,
    bancos de dados de conjuntos de dados GEO e ferramentas de bioinformática foram utilizados
    para rastrear 47 DEGs em CAVD. Em seguida, foi realizada análise de enriquecimento de Gene
    Ontology (GO) e análise de interação proteína-proteína (PPI). Por fim, foram identificadas 3
    pequenas moléculas (hsa-miR-21-5p, hsa-miR-34a-5p, hsa-miR-4443, hsa-miR-486-5p) mais
    importantes que mostram expressão no tecido e no plasma e possuem mecanismos moleculares
    relacionados a doença no ciclo da doença e poderia servir como um biomarcador promissor
    para o CAVD.

  • Mostrar Abstract
  • Arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy (CAVD) is a disease characterized
    pathologically by fibrofatty replacement primarily in the right ventricle of normal heart tissue
    and clinically by potentially fatal ventricular arrhythmias in apparently healthy young people.
    The prevalence of the disease was estimated at 1:5,000 individuals. CAVD has a very difficult
    diagnosis due to the need to investigate and differentiate the results of several
    electrocardiographic tests that are also common to other heart diseases. The aim of this work is
    to analyze miRNA and RNAm expression profile data from patients with CAVD and provide
    insights on the pathophysiology of CAVD and new connections of the miRNAsRNAms
    network for further investigation and screening of efficient biomarkers for CAVD. For this,
    GEO dataset databases and bioinformatics tools were used to track 47 DEGs in CAVD. Then,
    Gene Ontology enrichment analysis (GO) and protein-protein interaction analysis (PPI) were
    performed. Finally, 3 most important small molecules (hsa-miR-21-5p, hsa-miR-34a-5p, hsa
    miR-4443, hsa-miR-486-5p) were identified that show expression in tissue and plasma and have
    disease-related molecular mechanisms in the disease cycle and could serve as a promising
    biomarker for CAVD.
3
  • GABRIELA ROCHA RAMOS
  • PRODUÇÃO DE LIPASE POR PROCESSO BIOTECNOLÓGICO PARA APLICAÇÃO EM FORMULAÇÕES COSMÉTICAS
  • Orientador : CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • CARLOS EDUARDO DE ARAÚJO PADILHA
  • ELISSA ARANTES OSTROSKY
  • ANDRÉ ROLIM BABY
  • Data: 29/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • As lipases são enzimas pertencentes à classe das hidrolases que exibem destaque
    em experimentos biotecnológicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial da
    lipase de Aspergillus terreus produzida (LP) e Rhizopus oryzae comercial (LC) como
    ativos em formulações cosméticas. A produção da lipase foi realizada utilizando o
    fungo Aspergillus terreus e azeite de oliva como agente indutor. A atividade enzimática
    foi realizada utilizando o substrato p-nitrofenil-palmitato (pNpp) e a imobilização da
    lipase produzida foi realizada por adsorção física utilizando sílica gel como suporte.
    As enzimas foram caracaterizadas através de Microscopia Eletronica de Varedura
    (MEV), Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) e
    Difração de Raio X (DRX), Análise da Termogravimetria e Calorimetria Exploratória
    Diferencial (TG/DSC) e avaliação da segurança através de testes de citotoxicidade
    utilizando células de fibroblastos NIH-3T3. Um delineamento composto central
    rotacional foi feito visando encontrar as melhores condições para produção do
    cosmético enzimático. A enzima produzida pelo A. terreus apresentou atividade de
    375,9 U/g e a imobilizada de 99,6 U/g, enquanto a lipase de R.oryzae apresentou
    atividade de 69,91 U/g. O MEV mostrou fraca interação da enzima com sílica na
    imobilização, sendo confirmado pelo FTIR e DRX. TG/DSC mostraram maior
    estabilidade para a lipase de A. terreus imobilizada e lipase comercial de R. oryzae. O
    teste de citotoxicidade mostrou que apenas a lipase de produzida pelo A. terreus foi
    segura para células fibroblastos NIH-3T3. Os testes para avaliação do desempenho
    lipolítico em diferentes temperaturas mostraram que a temperatura ótima para a
    atividade enzimática é 37º C e o pH ótimo 7,0. O delineamento composto central
    rotacional mostrou que o tempo de agitação e concentração enzimática influenciaram
    à resposta potencial zeta, mas apenas o tempo de agitação influenciou à reposta
    atividade enzimática. De acordo com os resultados a enzima produzida pelo fungo A.
    terreus é promissora e segura para a utilização em cosméticos.

  • Mostrar Abstract
  • Lipases are enzymes belonging to the class of hydrolases that stand out in
    biotechnological experiments. The aim of this work was to evaluate the potential of
    lipase from Aspergillus terreus (LP) and commercial Rhizopus oryzae (LC) as active
    ingredients in cosmetic formulations. Lipase production was carried out using the
    fungus Aspergillus terreus and olive oil as an inducing agent. Enzymatic activity was
    determined using the substrate p-nitrophenyl-palmitate (pNpp), and the immobilization
    of the produced lipase was performed by physical adsorption using silica gel as a
    support. The enzymes were characterized through Scanning Electron Microscopy
    (SEM), Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), X-ray Diffraction (XRD),
    Thermogravimetry and Differential Scanning Calorimetry (TG/DSC), and safety
    evaluation through cytotoxicity tests using NIH-3T3 fibroblast cells. A central composite
    rotatable design was employed to find the best conditions for the production of the
    enzymatic cosmetic. The enzyme produced by A. terreus showed activity of 375.9 U/g,
    and the immobilized form showed 99.6 U/g, while the R. oryzae lipase showed activity
    of 69.91 U/g. SEM revealed weak interaction of the enzyme with silica during
    immobilization, confirmed by FTIR and XRD. TG/DSC showed greater stability for the
    immobilized A. terreus lipase and commercial R. oryzae lipase. Cytotoxicity tests
    demonstrated that only the lipase produced by A. terreus was safe for NIH-3T3
    fibroblast cells. Tests for evaluating lipolytic performance at different temperatures
    indicated that the optimal temperature for enzymatic activity is 37°C, and the optimal
    pH is 7.0. The central composite rotatable design revealed that agitation time and
    enzyme concentration influenced the zeta potential response, but only agitation time
    influenced the enzyme activity response. According to the results, the enzyme
    produced by the fungus A. terreus is promising and safe for use in cosmetics.
4
  • HOUSEMBERG DONANVAM DA SILVA FERREIRA
  • PLANEJAMENTO, SÍNTESE E AVALIAÇÃO BIOLÓGICA DE HIDRAZONAS E 1,2,3-
    TRIAZÓIS
  • Orientador : ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • ANA PAULA BARRETO GOMES
  • DANIEL TADEU GOMES GONZAGA
  • Data: 29/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • Heterociclos aromáticos nitrogenados são estruturas químicas ativas biologicamente e
    compreendem a cerca de 80% dos medicamentos comercializados atualmente. Com base
    nessa premissa, o presente trabalho aborda dois grupos de heterociclos aromáticos
    nitrogenados ativos biologicamente conhecidos como triazóis e hidrazonas. O capítulo
    um aborda todo o processo de síntese dos compostos 1,2,3-triazóis derivados de
    aminoácido, que através de quatro etapas de reações partindo do aminoácido fenilalanina
    deu-se a formação de cinco compostos 1,2,3-triazóis inéditos com rendimentos variáveis
    de 22% a 55%, e estes, a partir de estudos de virtual screening, possuem possível
    atividade biológica frente ao vírus causador da hepatite C, entretanto, ainda são
    necessários dados concretos de avaliação biológica para comprovar esta hipótese. No
    segundo capítulo serão abordadas as sínteses dos compostos hidrazônicos partindo do
    fármaco isoniazida, onde a partir de reações com aldeídos aromáticos distintos foram
    formados nove compostos hidrazônicos com rendimentos variáveis de 25% a 92%, e a
    partir de estudos de virtual screening envolvendo as hidrazonas produzidas neste trabalho
    foi formulada a hipótese de que estas moléculas possuem atividade antineoplásica.
    Ademais, devido ao vasto potencial biológico que estas moléculas apresentam foi
    avaliado a atividade modulatória de resistência antimicrobiana a partir de análises em
    cepas resistentes a antimicrobianos comercializados, e foi notado que as moléculas
    produzidas neste trabalho apresentavam efeito sinérgico com os fármacos analisados,
    modulando a resistência das cepas bacterianas, entretanto, dados de IC50 ainda são
    esperados para completar este estudo. Também foi realizado uma nova etapa de reações
    envolvendo os compostos hidrazônicos para a formação dos seus derivados oxadiazólicos
    onde foi obtido um composto com rendimento de 93%.

  • Mostrar Abstract
  • Nitrogenous aromatic heterocycles are biologically active chemical structures and
    comprise around 80% of medicines currently marketed. Based on this premise, the present
    work addresses two groups of biologically active nitrogenous aromatic heterocycles
    known as triazoles and hydrazones. Chapter one covers the entire process of synthesis of
    1,2,3-triazole compounds derived from amino acids, which, through four reaction steps
    starting from the amino acid phenylalanine, resulted in the formation of five new 1,2,3-
    triazole compounds with Yields vary from 22% to 55%, and these, based on virtual
    screening studies, have possible biological activity against the virus that causes hepatitis
    C. However, concrete biological evaluation data are still needed to prove this hypothesis.
    In the second chapter, the syntheses of hydrazonic compounds will be discussed starting
    from the drug isoniazid, where nine hydrazonic compounds were formed from reactions
    with different aromatic aldehydes with yields varying from 25% to 92%, and from virtual
    screening studies involving hydrazones produced in this work, the hypothesis was
    formulated that these molecules have antineoplastic activity. Furthermore, due to the vast
    biological potential that these molecules present, the modulatory activity of antimicrobial
    resistance was evaluated based on analyzes of strains resistant to commercialized
    antimicrobials, and it was noted that the molecules produced in this work had a synergistic
    effect with the drugs analyzed, modulating resistance. of the bacterial strains, however,
    IC50 data is still awaited to complete this study. A new stage of reactions involving
    hydrazonic compounds was also carried out to form their oxadiazole derivatives, where
    a compound was obtained with a yield of 93%.
5
  • BEATRIZ KETLYN DA CUNHA BATISTA
  • OBTENÇÃO DE NANOEMULSÃO CONTENDO EXTRATO DA ESPÉCIE VEGETAL
    Jatropha gossypiifolia E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIDERMONECRÓTICA
    FRENTE A PEÇONHA DE Bothrops erythromelas
  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANGELO RONCALLI ALVES E SILVA
  • JACINTHIA BEATRIZ XAVIER DOS SANTOS
  • MAIRA CONCEIÇÃO JERONIMO DE SOUZA LIMA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 18/03/2024

  • Mostrar Resumo
  • O ofidismo é um Doença Tropical Neglicenciada de categoria A, que acomete cerca de
    2,7 milhões de pessoas por ano, no mundo. No Brasil, o gênero Bothrops possui a maior
    relevância clínica, destacando-se na região Nordeste a espécie Bothrops erythromelas. A
    necrose tecidual é um dos danos locais de maior relevância causado por esse gênero, visto a
    possibilidade de perda de função do membro picado e até mesmo amputação, impactando a
    qualidade de vida da vítima. A ineficácia do soro antiofídico no combate aos danos locais do
    envenenamento estimula a busca por novas terapias complementares, destacando-se as plantas
    medicinais. A espécie Jatropha gossypiifolia (Jg) é utilizada na cultura popular para
    inflamação, feridas e picada de serpentes. Dessa forma, este estudo teve como objetivo o
    desenvolvimento de uma nanoemulsão tópica contendo o extrato hidroetanólico das folhas de
    Jg, para avaliação da atividade cicatrizante e antidermonecrótica. A caracterização fitoquímica
    do extrato de Jg foi realizada por meio de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplado
    a um detector arranjo de fotodiodo (CLAE-DAD), que detectou a presença dos flavonoides
    vitexina e derivados de luteolina e apigenina, e quantificação do teor de fenólicos e flavonoides,
    com 95,08 ± 5,46 mg de ácido gálico/g de extrato e 137,92 ± 0,99 mg de quercetina/g de extrato,
    respectivamente. Em seguida, foi desenvolvida uma nanoemulsão contendo o extrato de Jg
    (NJg) e realizada a caracterização físico-química, em que a NJg (n=2) apresentou tamanho
    médio de 164,96 ± 9,487 nm, PDI de 0,217 ± 0,026, pH de 5,89 ± 0,0281 e teor de fenólicos de
    32,039 ± 14,628 mg de ácido gálico/g de extrato, não apresentando variação de cor ou separação
    de fases. No decorrer de 4 semanas, as características se mantiveram. Para avaliação da
    citotoxicidade in vitro foi realizado o ensaio hemolítico e de cristal violeta, em que o extrato e
    a NJg não apresentaram toxicidade nas concentrações testadas (32,25-250 µg/mL) para
    eritrócitos humanos e fibroblastos murinos (NHI/3T3). Ainda, foi realizada a atividade
    antioxidante do extrato e NJg, atingindo um IC50 de 0,2999 e 0,4646 µg/µL para o radical
    ABTS∙+, respectivamente, e de 0,2899 e 0,4374 µg/µL para o radical DPPH, respectivamente.
    Em seguida, foi avaliada a irritação cutânea da NJg, demonstrando ausência de irritação. Na
    avaliação da atividade cicatrizante in vivo, a NJg apresentou fechamento de ferida significativo
    a partir do 5° dia de tratamento, quando comparado ao grupo não tratado, sendo 45% para a
    NJg e 21% para o grupo não tratado, e no 8° dia chegando a 58%. Além disso, a NJg promoveu
    a redução de nitrito, atividade de mieloperoxidase e citocinas. Também foi realizada avaliação
    da inibição in vitro de fosfolipase A2 (PLA2) e hialuronidase da peçonha de Bothrops
    erythromelas (Pbe), com inibição máxima de 23% (1:100; Pbe:NJg) e 24% (1:0,25; Pbe:NJg),
    respectivamente. Por fim, foi avaliada a inibição in vivo do halo dermonecrótico causado pela
    Pbe, demonstrando que a NJg foi capaz de reduzir a formação desse halo a partir de 24h após a
    indução. Com isso, pode-se sugerir a participação dos compostos do extrato na ação
    farmacológica, em especial os flavonoides, os quais possuem ação antioxidante e anti
    inflamatória, principalmente. Em conclusão, os resultados sugerem que a NJg desenvolvida é
    promissora, podendo estar contribuindo para o tratamento do dano local do ofidismo.

  • Mostrar Abstract
  • Snakebite is a Neglected Tropical Disease of category A, which affects around 2.7
    million people per year worldwide. In Brazil, the genus Bothrops has the greatest clinical
    relevance, with the species Bothrops erythromelas standing out in the Northeast region. Tissue
    necrosis is one of the most relevant local damages caused by this genus, given the possibility
    of loss of function of the bitten limb and even amputation, impacting the victim's quality of life.
    The ineffectiveness of antivenom in combating local damage caused by envenomation
    encourages the search for new complementary therapies, especially medicinal plants. The
    species Jatropha gossypiifolia (Jg) is used in popular culture for inflammation, wounds and
    snakebites. Therefore, this study aimed to develop a topical nanoemulsion containing the
    hydroethanolic extract of Jg leaves, to evaluate the healing and antidermonecrotic activity. The
    phytochemical characterization of the Jg extract was performed using High Performance Liquid
    Chromatography coupled to a photodiode array detector (HPLC-DAD), which detected the
    presence of the flavonoids vitexin, luteolin derivates and apigenin derivatives, and
    quantification of the phenolic content and flavonoids, with 95.08 ± 5.46 mg of gallic acid/g of
    extract and 137.92 ± 0.99 mg of quercetin/g of extract, respectively. Next, a nanoemulsion
    containing Jg extract (NJg) was developed and physicochemical characterization was
    performed, in which NJg (n=2) presented an average size of 164.96 ± 9.487 nm, PDI of 0.217
    ± 0.026, pH of 5.89 ± 0.0281 and phenolic content of 32.039 ± 14.628 mg of gallic acid/g of
    extract, showing no color variation or phase separation. Over the course of 4 weeks, the
    characteristics were maintained. To evaluate in vitro cytotoxicity, the hemolytic and crystal
    violet assay was performed, in which the extract and NJg did not show toxicity at the
    concentrations tested (32.25-250 µg/mL) for human erythrocytes and murine fibroblasts
    (NHI/3T3). Furthermore, the antioxidant activity of the extract and NJg was performed,
    reaching an IC50 of 0.2999 and 0.4646 µg/µL for the ABTS∙+ radical, respectively, and of
    0.2899 and 0.4374 µg/µL for the radical DPPH, respectively. Next, the skin irritation of the
    NJg was evaluated, demonstrating the absence of irritation. In the evaluation of healing activity
    in vivo, NJg presented significant wound closure from the 5th day of treatment, when compared
    to the no treatment group, being 45% for NJg and 21% for the no treatment group, and on the
    8 th day reaching 58%. Besides, NJg promoted the reduction of nitrite, myeloperoxidase activity
    and cytokines. An evaluation of the in vitro inhibition of phospholipase A2 (PLA2) and
    hyaluronidase from Bothrops erythromelas venom (BeV) was also carried out, with maximum
    inhibition of 23% (1:100; BeV:NJg) and 24% (1:0.25; BeV:NJg), respectively. Finally, the in
    vivo inhibition of the dermonecrotic halo caused by Pbe was evaluated, demonstrating that NJg
    was able to reduce the formation of this halo from 24h after induction. Therefore, it can be
    suggested the participation of the extract's compounds in the pharmacological action, especially
    the flavonoids, which mainly have antioxidant and anti-inflammatory actions. In conclusion,
    the results suggest that the developed NJg is promising and may be contributing to the treatment
    of local damage from snakebite.
6
  • FABRICE TAIO
  • COMPLEXO DE INCLUSAO ENTRE OLEO DE COPAIBA (Copaifera multijuga Hayne) E HPGCD: DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZACAO PARA FINS ANTI
    TRYPANOSOMA CRUZI
  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • BOLIVAR PONCIANO GOULART DE LIMA DAMASCENO
  • Data: 10/06/2024

  • Mostrar Resumo
  • A Doença de Chagas é uma enfermidade contagiosa originada por um parasito e transmitida principalmente por meio do inseto conhecido como "barbeiro". A transmissão do agente causador da doença de Chagas aos seres humanos é influenciada por uma série de fatores, incluindo migrações desordenadas, degradação do ambiente, mudanças climáticas e a concentração populacional em áreas urbanas.Sendo assim, é necessário realizar estudos aprofundados para encontrar um tratamento que seja mais eficaz do que os tratamentos existentes.Alternativa para nossa pesquisa foi oleo de copaiba do tipo copaíba multijuga hayne que pertence à família Leguminosae-Caesalpinioideae.O objetivo da pesquisa é incorporar o óleo de copaíba multijuga hayne num polímero como a ciclodextrina do tipo hidroxipropil de γ-ciclodextrina, com o objetivo de aumentar a sua solubilidade e biodisponibilidade para uma melhor interação com as amostras de células cultivadas da cepa de T-cruzi.Óleo de copaíba e hidroxipropil de γ-ciclodextrina ( OLC/HPGCD) foram preparados por métodos de misturas físicas e por malaxagem.Os complexos obtidos foram caracterizados usando métodos físico-químicos apropriados.Os ensaios de Calorimetria Diferencial de varredura (DSC) foram feitos para observar a incorporação do OLC quando inserir no HPGCD.As curvas de DSC apresentaram picos endotérmicos relacionada a perda de água. A HPGCD teve um pico endotérmico a 70°C é atribuído à evaporação de moléculas de água da cavidade da HP-γ-CD enquanto o OLC teve um pico endotérmico a 110°C é atribuído ao seu efeito de volatilização. As curvas de DSC da mistura física e malaxagem tiveram picos de 66°C e 60°C respectivamente, aproximadamente próximo ao pico endotérmico de HPBCD.MF e MLG são praticamente semelhantes à curva de HPGCD e totalmente diferentes do OLC. Os ensaios da Análise de difratometria de raios X (DRX) da HPGCD, MF e MLG deram um resultado chamativo com aparecimento de 3 picos agudos cujo 1 de intensidade máxima e dois de intensidade muito menor. O perfil de difração de HPGCD deu 43,92 °C de pico, MF e MLG deram 43,94°C para intensidade máxima de 1610,1388 e 2102 respectivamente, sendo MLG com pico cuja intensidade é maior. O DRX permitiu observar o aparecimento de amorfas em todas juntas com cristalinas. As curvas da Análise estrutural por espectroscopia infravermelha com transformada de Fourier (FTIR) da HPGCD e OLC mostraram respectivamente 7 bandas e 5 bandas principais.Graça a medição dos pico no eixo X, conseguimos elaborar uma tabela com valores de número de onda nos espectros.Basicamente, os perfis de FTIR da MF e MLG tiveram desaparecimento dos picos de OLC em 800 cm-1, 1449 cm-1,2584 cm-1.Assim as bandas de HPGCD mascararam as do OLC.Assim essas caracterizações físico-química permitiram concluir que houveram interação entre hóspede/hospedeiro (OLC e HPBCD).Futuramente, as amostras serviram para teste in vivo de antiparasitário.

  • Mostrar Abstract
  • Chagas disease is a contagious disease caused by a parasite and transmitted mainly through the
    insect known as "kissing bug". The transmission of the causative agent of Chagas disease to
    humans is influenced by a series of factors, including disordered migration, manipulation of the
    environment, climate change and population concentration in urban areas. Therefore, it is
    necessary to carry out in-depth studies to find a treatment that is more effective than existing
    treatments. The alternative for our research was copaiba oil of the copaiba multijuga hayne type,
    which belongs to the Leguminosae-Caesalpinioideae family. The objective of the research is to
    incorporate the copaiba oil multijuga hayne in a polymer such as cyclodextrin of the
    hydroxypropyl type of γ-cyclodextrin, with the aim of increasing its solubility and bioavailability
    for better interaction with cultured cell samples from the T-cruzi strain. γ-cyclodextrin
    (OLC/HPGCD) were prepared by physical mixing and malaxing methods. The complex results
    were characterized using optimized physicochemical methods.Differential Scanning Calorimetry
    (DSC) tests were carried out to observe the incorporation of OLC when inserted into the HPGCD.
    The DSC curves showed endothermic peaks related to water loss. HPGCD had an endothermic
    peak at 70°C which is attributed to the evaporation of water molecules from the HP-γ-CD cavity
    while OLC had an endothermic peak at 110°C which is attributed to its volatilization effect. The
    DSC curves of physical mixing and malaxing had peaks at 66°C and 60°C respectively,
    approximately close to the endothermic peak of HPBCD. MF and MLG are practically similar to
    the HPGCD curve and totally different from the OLC. The X-ray diffraction analysis (XRD) tests
    of HPGCD, MF and MLG gave a striking result with the appearance of 3 sharp peaks, 1 of which
    was of maximum intensity and two of much lower intensity. The diffraction profile of HPGCD
    gave a peak of 43.92 °C, MF and MLG gave 43.94 °C for maximum intensity of 1610, 1388 and
    2102 respectively, with MLG having a peak whose intensity is higher. The XRD allowed us to
    observe the appearance of amorphous in all joints with crystalline ones.The curves of the
    structural analysis by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) of HPGCD and OLC
    showed 7 bands and 5 main bands respectively. Thanks to the measurement of the peaks on the X
    axis, we were able to create a table with wave number values
    in the spectra. Basically, the FTIR
    profiles of MF and MLG had the disappearance of the OLC peaks at 800, 1449, 2584. Thus, the
    HPGCD bands masked those of the OLC. Thus, these physicochemical characterizations allowed
    us to conclude that there was an interaction between OLC and HPBCD. In the future , the samples
    were used for in vivo antiparasitic testing.
7
  • IAN ANTUNES FERREIRA BAHIA
  • DESVENDANDO SISTEMAS IMUNOFENOTÍPICOS EM LEUCEMIAS AGUDAS:
    SISTEMÁTICA INTEGRATIVA
  • Orientador : GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALDAIR DE SOUSA PAIVA
  • CARLOS RAMON DO NASCIMENTO BRITO
  • GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • Data: 29/07/2024

  • Mostrar Resumo
  • As leucemias agudas (LAs) são distúrbios hematológicos complexos e o
    diagnóstico preciso é crucial para orientar as decisões de tratamento e prever os
    resultados dos pacientes. Embora as mudanças nos níveis dos marcadores celulares
    estejam bem documentadas, o impacto dessas mudanças nas relações dos
    marcadores através de uma abordagem de sistemas integrativos permanece não
    caracterizado. Para resolver essa lacuna, conduzimos um estudo de 12 anos
    investigando 41 marcadores, incluindo marcadores ontogênicos e aqueles usados
    para diagnosticar tipos de leucemia comuns e raras, usando dados de
    imunofenotipagem por citometria de fluxo (ICF) de 1.069 amostras de leucócitos
    obtidas de sangue periférico (LSP). ou aspirados de medula óssea (MO) de pacientes
    com suspeita de LAs. Técnicas de aprendizado de máquina, como Principal
    Component Analysis (PCA) e classificação por Random Forest (RF), demonstraram o
    poder de estratificação dos marcadores celulares. A análise hierárquica de
    agrupamento de marcadores ontogenéticos de leucócitos revelou agrupamentos
    específicos da doença, independentemente do sexo ou tipo de amostra (LSP ou MO).
    Além disso, descobrimos que pacientes com leucemia mieloide aguda (LMA)
    apresentaram leve perturbação nas correlações de marcadores celulares, enquanto a
    desregulação mais significativa foi observada em pacientes com leucemia linfoblástica
    aguda de células T (LLA-T). É importante ressaltar que identificamos alterações de
    correlação ontogênica indicando agrupamentos de marcadores de leucócitos imaturos
    versus maduros, bem como marcadores específicos de linhagem celular que
    influenciam as relações celulares. Estas descobertas sublinham o valor da integração
    de estratégias de sistemas nas análises convencionais pela ICF para melhorar o
    diagnóstico sintético e aprofundar a nossa compreensão da fisiopatologia das LAs.

  • Mostrar Abstract
  • Acute leukemias (ALs) are complex hematological disorders, and accurate
    diagnosis is crucial for guiding treatment decisions and predicting patient outcomes.
    While changes in cell marker levels are well documented, the impact of these changes
    on marker relationships through an integrative systems approach remains
    uncharacterized. To address this gap, we conducted a 12-year study investigating 41
    markers, including ontogenic markers and those used to diagnose both common and
    rare leukemia types, using immunophenotyping flow cytometry (IFC) data from 1,069
    leukocyte samples obtained from peripheral blood leukocytes (PBL) or bone marrow
    (BM) aspirates of patients with suspected ALs. Machine learning techniques, such as
    principal component analysis (PCA) and random forest (RF) classification,
    demonstrated the stratification power of the cellular markers. Hierarchical clustering
    analysis of leukocyte ontogenetic markers revealed disease-specific clusters,
    irrespective of sex or sample type (PBL or BM). Additionally, we found that patients
    with acute myeloid leukemia (AML) showed mild disruption in cell marker correlations,
    whereas the most significant dysregulation was observed in patients with T-cell acute
    lymphoblastic leukemia (T-ALL). Importantly, we identified ontogenic correlation
    changes indicating clusters of immature versus mature leukocyte markers, as well as
    cell lineage-specific markers influencing cellular relationships. These findings
    underscore the value of integrating systems strategies into conventional IFC analyses
    to enhance synthetic diagnosis and deepen our understanding of ALs pathophysiology.
8
  • MARIA IMACULADA CONCEIÇÃO FERREIRA DE CARVALHO
  • PROTEÍNAS PODOCITÁRIAS COMO BIOMARCADORES URINÁRIOS DE
    LESÃO GLOMERULAR EM ESTÁGIO INICIAL: UMA REVISÃO
    SISTEMÁTICA E METANÁLISE
  • Orientador : ADRIANA AUGUSTO DE REZENDE
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANA AUGUSTO DE REZENDE
  • ANA PAULA FERREIRA COSTA
  • MAURICIO GALVAO PEREIRA
  • Data: 23/08/2024

  • Mostrar Resumo
  • O uso proteínas podocitárias como biomarcadores urinários pode ser uma
    ferramenta não invasiva promissora para detectar lesões glomerulares em
    estágio inicial. Após a lesão podocitária, o aparecimento de proteínas dos
    podócitos na urina pode identificar a lesão glomerular antes do início da
    albuminúria. A detecção em fase incial poderá contribuir para a adoção de
    tratamento oportuno, retardando ou reduzindo a progressão da doença. O
    objetivo foi analisar as evidências científicas sobre o uso das proteínas
    podocitárias como biomarcadores urinários de lesão glomerular em estágio
    inicial. Um protocolo foi desenvolvido e publicado no PROSPERO
    (CRD42021265630). Foi realizada uma revisão sistemática seguindo as
    recomendações do PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews
    and Meta-Analyses). A busca foi realizada para artigos publicados até abril de
    2024 nas bases de dados do PubMed, Embase, Web of Science, Scopus e
    Google Scholar, sem restrições de idioma. A pergunta clínica foi elaborada de
    acordo com a estratégia PIRD e foram incluídos estudos observacionais de caso
    controle conforme critérios de elegibilidade. A seleção dos estudos ocorreu de
    forma independente por três autores que extrairam os dados em um formulário
    padronizado desenvolvido e validados pelos autores. O risco de viés foi avaliado
    pela Escala Newcastle-Ottawa (NOS). O software R CORE TEAM, 2020 foi
    utilizado para síntese quantitativa. A estratégia de busca recuperou 3.476, onde
    20 foram lidos na integra e 8 foram incluídos na revisão. Foi utilizada o método
    de Grading of Recommendations Assessment, Development and Evaluation
    (GRADE). Dois estudos apresentaram baixo risco de viés e os outros seis,
    moderado risco. A certeza da evidência para lesão glomerular em estágio inicial
    foi considerada baixa para podocina e muito baixa para nefrina e podocalixina.
    Em conclusão, os estudos analisados demonstram o potencial das proteínas
    nefrina, podocina e podocalixina no diagnóstico de lesão glomerular em grupos
    normoalbuminúricos, permitindo a identificação em estágio inicial da doença.

  • Mostrar Abstract
  • The use of podocyte proteins as urinary biomarkers may be a promising
    noninvasive tool for detecting early-stage glomerular injury. After podocyte injury,
    the appearance of podocyte proteins in urine may identify glomerular injury before
    the onset of albuminuria. Early detection may contribute to the adoption of timely
    treatment, delaying or reducing disease progression. The objective was to
    analyze the scientific evidence on the use of podocyte proteins as urinary
    biomarkers of early-stage glomerular injury. A protocol was developed and
    published in PROSPERO (CRD42021265630). A systematic review was
    performed following the PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic
    Reviews and Meta-Analyses) recommendations. The search was performed for
    articles published until April 2024 in the PubMed, Embase, Web of Science,
    Scopus and Google Scholar databases, without language restrictions. The
    clinical question was formulated according to the PIRD strategy and
    observational case-control studies were included according to the eligibility
    criteria. The studies were selected independently by three authors who extracted
    the data using a standardized form developed and validated by the authors. The
    risk of bias was assessed using the Newcastle-Ottawa Scale (NOS). The R
    CORE TEAM, 2020 software was used for quantitative synthesis. The search
    strategy retrieved 3,476 studies, of which 20 were read in full and 8 were included
    in the review. The Grading of Recommendations Assessment, Development and
    Evaluation (GRADE) method was used. Two studies presented a low risk of bias
    and the other six, a moderate risk. The certainty of evidence for early-stage
    glomerular injury was considered low for podocin and very low for nephrin and
    podocalyxin. In conclusion, the analyzed studies demonstrate the potential of
    nephrin, podocin and podocalyxin proteins in the diagnosis of glomerular injury in
    normoalbuminuric groups, allowing early-stage identification of the disease.
9
  • RENATA KELLY DE FREITAS MANO
  • RELAÇÃO DA VITAMINA D E MARCADORES INFLAMATÓRIOS E ANGIOGÊNICOS NA PRÉ-ECLÂMPSIA: UMA REVISÃO SISTEMÁTICA

  • Orientador : MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JEFFERSON ROMÁRYO DUARTE DA LUZ
  • KARLA SIMONE COSTA DE SOUZA
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • Data: 29/08/2024

  • Mostrar Resumo
  • A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença multifatorial e multissistêmica que tem como critérios de diagnóstico a hipertensão, após 20 semanas de gestação, acompanhada de proteinúria e/ou disfunção de órgão-alvo. A PE está associada a diversas complicações tanto maternas quanto fetais, que podem culminar com o óbito. Assim, a identificação de biomarcadores com poder de diagnóstico pode levar a intervenções precoces, minimizando as complicações. Alguns estudos vêm avaliando a associação da deciciência de Vitamina D com o desenvolvimento e gravidade da PE, além disso, há evidências de que marcadores inflamatórios e fatores envolvidos na angiogênese possam ser utilizados como biomarcadores de PE. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar se há associação da deficiência de vitamina D com marcadores inflamatórios e angiogênicos na PE. Para isto, foi elaborada uma revisão sistemática de acordo com as diretrizes PRISMA e registrada no PROSPERO (CRD42021262723). PubMed; Lilacs; Scopus; Embase; Web of Science; Science Direct; Cochrane Library e Gray-literature: CAPES e Google Scholar, foram as bases de dados utilizadas para a busca de artigos publicados até julho de 2021, sem restrição de idioma. A pergunta clínica foi elaborada de acordo com a estratégia PICOT, sendo elegíveis estudos observacionais (transversais, caso-controle e coorte), que avaliassem concentração sérica de marcadores inflamatórios (IL-6, TNF-α, IL-4 e IL-10) e marcadores angiogênicos (PIGF, VEGF, sFlt-1 e endoglina), bem como a concetração sérica de vitamina D, sendo o desfecho principal a associação desses marcadores com a deficiência de vitamina D. As etapas de seleção por título e resumo, leitura de texto completo e extração de dados foram realizadas por dois pesquisadores de forma independente e um terceiro para decisão de conflitos. No total, 353 artigos foram recuperados pela estratégia de busca e 3 artigos preencheram os critérios de inclusão. A avaliação da qualidade metodológica dos estudos foi feita por meio da escala de Newcastle-Ottawa e todos apresentaram baixo risco de viés. Foi encontrada deficiência de vitamina D em todas as gestantes com PE. Em todos os estudos as gestantes do grupo PE apresentaram níveis plasmáticos de vitamina D mais baixos que as gestantes do grupo controle. Foi observado também que as concentrações de vitamina D foram mais baixas nas gestantes com PE de início precoce que nas gestantes com PE de início tardio, assim como nas gestantes diagnosticadas com PE grave em comparação com as gestantes com PE leve. Dessa forma, a deficiência de vitamina D pode estar fortemente correlacionada com o desenvolvimento e severidade da PE. 


  • Mostrar Abstract
  • Pre-eclampsia (PE) is a multifactorial and multisystemic disease whose diagnostic criteria are hypertension, after 20 weeks of gestation, accompanied by proteinuria and/or target organ dysfunction. PE is associated with several maternal and fetal complications, which can culminate in death. Thus, the identification of biomarkers with diagnostic power can lead to early interventions, minimizing complications. Some studies have evaluated the association of Vitamin D deficiency with the development and severity of PE. Furthermore, there is evidence that inflammatory markers and factors involved in angiogenesis can be used as PE biomarkers. Therefore, the objective of this study was to investigate whether there is an association between vitamin D deficiency and inflammatory and angiogenic markers in PE. For this, a systematic review was prepared in accordance with the PRISMA guidelines and registered in PROSPERO (CRD42021262723). PubMed; Lilacs; Scopus; Embase; Web of Science; Science Direct; Cochrane Library and Gray-literature: CAPES and Google Scholar were the databases used to search for articles published until July 2021, without language restrictions. The clinical question was prepared according to the PICOT strategy, with observational studies (cross-sectional, case-control and cohort) that assessed serum concentrations of inflammatory markers (IL-6, TNF-α, IL-4 and IL-10) being eligible. and angiogenic markers (PIGF, VEGF, sFlt-1 and endoglin), as well as serum vitamin D concentration, with the main outcome being the association of these markers with vitamin D deficiency. The stages of selection by title and abstract, full text reading and data extraction were carried out by two researchers independently and a third to decide conflicts. In total, 353 articles were retrieved by the search strategy and 3 articles met the inclusion criteria. The methodological quality of the studies was assessed using the Newcastle-Ottawa scale and all presented a low risk of bias. Vitamin D deficiency was found in all pregnant women with PE. In all studies, pregnant women in the PE group had lower plasma levels of vitamin D than pregnant women in the control group. It was also observed that vitamin D concentrations were lower in pregnant women with early-onset PE than in pregnant women with late-onset PE, as well as in pregnant women diagnosed with severe PE compared to pregnant women with mild PE. Therefore, vitamin D deficiency may be strongly correlated with the development and severity of PE. 

10
  • SÁVIO GORGÔNIO PAES DE BULHÕES
  • OBTENCAO, CARACTERIZACAO FISICO-QUIMICA E AVALIACAO BIOLOGICA IN VITRO DE DISPERSOES SOLIDAS AMORFAS COM α,β-AMIRENONA.

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • FERNANDA ÍLARY COSTA DUARTE
  • HUGO ALEXANDRE DE OLIVEIRA ROCHA
  • Data: 13/12/2024

  • Mostrar Resumo
  • A obesidade é um grave problema de saúde pública global, frequentemente associada a uma alimentação rica em gorduras e carboidratos, além de sedentarismo. No Brasil, afeta cerca de 25% da população, em sua maioria mulheres. Embora o tratamento convencional, baseado em mudanças no estilo de vida, seja recomendado, ele encontra dificuldades devido às demandas do estilo de vida moderno, o que faz com que os medicamentos e intervenções cirúrgicas se tornem as alternativas mais buscadas. Contudo, os medicamentos utilizados para o tratamento da obesidade apresentam diversos efeitos adversos, o que tem impulsionado a busca por alternativas naturais. Nesse contexto, os triterpenos, como a α,β-amirenona (ABAME), foco deste estudo, demonstram grande potencial antiobesidade. No entanto, sua baixa solubilidade em água limita suas atividades biológicas e compromete sua eficácia oral. Para superar esse desafio, dispersões sólidas (DS) foram preparadas com ABAME utilizando as técnicas de malaxagem (MX) e mistura física (MF) com os polímeros PEG e PVP, visando melhorar sua solubilidade e propriedades farmacológicas. As amostras foram caracterizadas por técnicas como DSC, TG, DRX, FTIR e MEV, o que resultou na indicação de que a interação da ABAME com os polímeros promoveu uma transição do estado cristalino para o amorfo, além de maior estabilidade térmica em comparação ao composto isolado, especialmente nas DS obtidas por MX. A quantificação de ABAME foi realizada por CLAE, atendendo aos critérios da ANVISA e demonstrando êxito no desenvolvimento da DS. Em testes biológicos in vitro, as DS mostraram maior eficácia na inibição da lipase em comparação à ABAME isolada, especialmente as DS preparadas por MX, com IC50 reduzido. Embora os testes antioxidantes revelem resultados moderados, com desempenho inferior nas avaliações de CAT e DPPH, as DS demonstraram um excelente poder redutor. Os dados, embora preliminares, revelam o potencial antiobesidade das DS, destacando-se como uma estratégia promissora em comparação com os tratamentos convencionais, que frequentemente apresentam efeitos adversos.


  • Mostrar Abstract
  • Obesity is a serious global public health problem, frequently associated with a diet high in fats and carbohydrates, as well as sedentary behavior. In Brazil, it affects approximately 25% of the population, predominantly women. Although conventional treatment, based on lifestyle changes, is recommended, it faces challenges due to the demands of modern life, leading to an increased reliance on medications and surgical interventions as the most sought-after alternatives. However, the medications used to treat obesity present various adverse effects, which has driven the search for natural alternatives. In this context, triterpenes, such as α,β-amyrinone (ABAME), the focus of this study, show significant anti-obesity potential. However, its low water solubility limits its biological activity and compromises its oral efficacy. To overcome this challenge, solid dispersions (SD) were prepared with ABAME using malaxation (MX) and physical mixing (FM) techniques with the polymers PEG and PVP, aiming to improve its solubility and pharmacological properties. The samples were characterized by techniques such as DSC, TG, XRD, FTIR, and SEM, which indicated that the interaction of ABAME with the polymers promoted a transition from the crystalline to the amorphous state, as well as improved thermal stability compared to the isolated compound, particularly in the SD obtained by MX. The quantification of ABAME was performed by HPLC, meeting the criteria set by ANVISA, and demonstrated success in the development of the SD. In vitro biological tests showed that the SD exhibited greater efficacy in inhibiting lipase compared to isolated ABAME, especially the SD prepared by MX, with a reduced IC50. Although the antioxidant tests showed moderate results, with lower performance in the CAT and DPPH assays, the SD demonstrated excellent reducing power. Although preliminary, the data reveal the anti-obesity potential of the SD, highlighting them as a promising strategy compared to conventional treatments, which often present adverse effects.

11
  • HÉLIDA MARAVILHA DANTAS E SOUSA ALMEIDA
  • EFEITO ANSIOLITICO DA NANOEMULSAO DE OLEO DE GIRASSOL CONTENDO FITOL EM RATOS FEMEAS WISTAR EXPOSTOS AO LABIRINTO EM CRUZ ELEVADO

  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALIANDA MAIRA CORNELIO DA SILVA
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • DANIELA BAPTISTA DE SOUZA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 19/12/2024

  • Mostrar Resumo
  • O fitol é um diterpeno que possui efeitos no sistema nervoso central. A literatura

    mostra efeitos ansiolíticos deste álcool de cadeia ramificada e insaturada em

    camundongos suíços expostos ao labirinto em cruz elevado. Entretanto, faltam

    estudos que investiguem os efeitos de nanoemulsões desse produto em modelos

    animais de ansiedade, especialmente em fêmeas. Assim, o presente estudo propõe

    investigar os efeitos do fitol, incorporado a uma nanoemulsão de óleo de girassol, em

    ratas expostos ao labirinto em cruz elevado. A formulação foi preparada utilizando o

    método de inversão de fase, com variação da concentração de fitol na fase oleosa. A

    formulação estável contendo a maior concentração do diterpeno foi submetida à

    caracterização físico-química, que incluiu a avaliação do tamanho das gotículas,

    índice de polidispersividade, potencial zeta e pH, por 35 dias. O nanossistema foi

    caracterizado pela Espectroscopia na região do Infravermelho com Transformada de

    Fourier, Microscopia Eletrônica de Transmissão e Análise Cromatográfica. A

    formulação foi submetida a avaliação hemolítica e teste de DPPH in vitro, e avaliada

    quanto a sua biocompatibilidade e entrega no encéfalo usando modelo de embrião de

    galinha. Os efeitos in vivo foram avaliados em ratas Wistar, utilizando o teste do

    labirinto em cruz elevado. Os animais foram divididos em grupos segundo seus

    tratamentos (veículo; Diazepam 2 mg/kg; fitol 25 mg/kg; fitol 75 mg/kg; nanoemulsão

    branca; nanoemulsão fitol 25 mg/kg e nanoemulsão fitol 75 mg/kg) administrados por

    via intraperitoneal. Os dados de caracterização revelaram que a maior concentração

    de fitol para formulação da nanoemulsão foi de 2,5%, apresentando um tamanho

    médio de gotícula de aproximadamente 160 nm, um PDI de 0,235, e um potencial zeta

    negativo de -27 mV, com uma estabilidade de mais de 30 dias. Foi observado uma

    redução significativa do comportamento do tipo ansioso nos animais, com o aumento

    das porcentagens de entrada e permanência nos braços abertos, após o tratamento

    com as nanoemulsões branca e contendo fitol nas duas concentrações em

    comparação com o grupo veículo e fitol livre, na concentração de 25 mg/kg. Os efeitos

    ansiolíticos promissores da formulação sugerem maior eficiência do nanossistema em

    comparação com o fármaco livre.


  • Mostrar Abstract
  • Phytol, a diterpene with notable effects on the central nervous system, has

    demonstrated anxiolytic properties in Swiss mice subjected to the elevated plus maze.

    Despite these findings, limited research has explored the impact of phytol

    nanoemulsions in animal models of anxiety, particularly in females. The present study

    aims to evaluate the effects of phytol incorporated into a sunflower oil nanoemulsion

    on rats exposed to the elevated plus maze. The formulation was developed using the

    phase inversion method, varying phytol concentration within the oil phase. The most

    stable formulation, containing the highest diterpene concentration, underwent

    extensive physicochemical characterization, including droplet size, polydispersity

    index (PDI), zeta potential, and pH over 35 days. Characterization techniques included

    Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), Transmission Electron Microscopy

    (TEM), and chromatographic analysis. Additionally, the formulation was tested for

    hemolytic activity and antioxidant capacity using the DPPH assay and evaluated for its

    biocompatibility and delivery to the brain using a chicken embryo model. In vivo studies

    were performed in Wistar rats, with the animals divided into treatment groups (vehicle;

    diazepam 2 mg/kg; phytol 25 mg/kg; phytol 75 mg/kg; blank nanoemulsion; phytol

    nanoemulsion 25 mg/kg; and phytol nanoemulsion 75 mg/kg) administered via

    intraperitoneal injection. The physicochemical analysis revealed that the highest

    achievable phytol concentration in the nanoemulsion was 2.5%, with an average

    droplet size of approximately 160 nm, a PDI of 0.235, and a negative zeta potential of

    -27 mV, showing stability for over 30 days. Behaviorally, a significant reduction in

    anxiety-like behaviors was observed, as evidenced by increased entries and time

    spent in the open arms of the maze for rats treated with both the blank and phytol

    nanoemulsions at varying concentrations, compared to the vehicle group and the free

    phytol treatment at 25 mg/kg. These findings suggest that the phytol nanoemulsion

    formulation exhibits superior anxiolytic efficacy compared to the free phytol,

    highlighting the potential therapeutic advantage of the nanoemulsion system.

12
  • ERON LINCOLN ALVES PEREIRA
  • NANOEMULSOES CONTENDO COENZIMA Q10 E RESVERATROL COMO POTENCIAL ESTRATEGIA PARA O TRATAMENTO DE HIPERPIGMENTACAO CUTANEA INDUZIDA POR QUIMIOTERAPIA

  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • FABIO ROCHA FORMIGA
  • Data: 20/12/2024

  • Mostrar Resumo
  • O câncer é uma doença altamente incidente e prevalente em todo o mundo e

    possui um tratamento que, embora imprescindível, muitas vezes com toxicidade

    relevante, exibindo efeitos adversos como hiperpigmentação cutânea. Para o manejo

    desse efeito adverso, frequentemente são empregados agentes despigmentantes,

    que possuem ação antioxidante e/ou inibem a enzima tirosinase, tais como coenzima

    Q10 (CoQ10) e resveratrol (RSV). No entanto, essas moléculas possuem os

    inconvenientes biofarmacêuticos como baixa solubilidade aquosa e baixa

    permeabilidade, além de instabilidade química. Nesse contexto, a utilização de

    sistemas nanoemulsionados surge como uma estratégia valiosa para melhoramento

    de formulações a fim de superar esses desafios. Assim, no presente estudo foram

    desenvolvidas nanoemulsões contendo os CoQ10 e RSV pela técnica de inversão de

    fases por composição e foram caracterizadas quanto ao diâmetro hidrodinâmico,

    índice de polidispersão, potencial zeta, pH, espectro de infravermelho, microscopia

    eletrônica de transmissão e reologia. A caracterização evidenciou gotículas em escala

    nanométrica, com tamanhos entre 110 e 250 nm, esféricas, com distribuição uniforme

    (IPd < 0,3) e carga superficial aniônica, em que a reologia evidenciou que a

    viscosidade da fase oleosa influencia na formação do sistema. Estudos acerca do

    perfil antioxidante foram conduzidos, demonstrando a capacidade do sistema em

    manter ou aumentar a capacidade antioxidante dos ativos in vitro. Além disso, foi

    avaliada a segurança das formulações, em que o teste de potencial hemolítico e de

    viabilidade celular evidenciaram a citocompatibilidade dos sistemas. Dessa forma, os

    sistemas foram desenvolvidos, caracterizados e testados, de modo que apresentaram

    atividade e segurança satisfatórias.


  • Mostrar Abstract
  • Cancer is a highly prevalent and incident disease worldwide, with treatments

    that, while essential, often involve significant toxicity, including adverse effects such as

    cutaneous hyperpigmentation. To manage this adverse effect, depigmenting agents

    with antioxidant activity and/or tyrosinase-inhibiting properties, such as coenzyme Q10

    (CoQ10) and resveratrol (RSV), are commonly employed. However, these molecules

    present biopharmaceutical challenges, including low aqueous solubility, poor

    permeability, and chemical instability. In this context, the use of nanoemulsion systems

    emerges as a valuable strategy to improve formulations and overcome these

    limitations. In the present study, nanoemulsions containing CoQ10 and RSV were

    developed using the phase inversion composition technique and characterized in

    terms of hydrodynamic diameter, polydispersity index (PDI), zeta potential, pH, infrared

    spectroscopy, transmission electron microscopy, and rheology. The characterization

    revealed nanoscale droplets ranging from 110 to 250 nm in size, spherical in shape,

    with uniform distribution (PDI < 0.3) and anionic surface charge. Rheological analysis

    demonstrated that the viscosity of the oil phase influences the system's formation.

    Antioxidant profile studies showed that the nanoemulsion systems could maintain or

    enhance the in vitro antioxidant capacity of the active compounds. Furthermore, the

    formulations were evaluated for safety, with haemolytic potential and cell viability tests

    confirming the cytocompatibility of the systems. Thus, the developed systems were

    successfully characterized and tested, demonstrating satisfactory activity and safety.

13
  • SALOME RIBEIRO DA SILVA
  • CARACTERIZACAO FISICA E AVALIACAO IN VIVO DO COMPOSITO DE HIDROXIAPATITA/NIOBIO

  • Orientador : AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • HELLÍADA VASCONCELOS CHAVES
  • NAISANDRA BEZERRA DA SILVA FARIAS
  • Data: 27/12/2024

  • Mostrar Resumo
  • A hidroxiapatita (Hap) é um composto muito estudado e utilizado para uso clínico, devido se tratar de um componente mineral presente na formação dos ossos, sua utilização fornece condições para o crescimento ósseo, permitindo assim, a fixação biológica de enxertos que são amplamente utilizados para reconstruções de tecidos orgânicos, muito pouco se avançou com relação a materiais capazes de cumprirem com excelência a função de um material que fosse capaz de ter a característica de substituição do osso, nesse sentido a busca por novos elementos constituintes das peças enxertadas surge como motivação de estudos, uma vez que fornece ao paciente uma opção de escolha para seus tratamentos. Nesse sentido o objetivo desse trabalho foi a obtenção, carcaterização física e avaliação biológica in vivo de um compósito de Hidroxiapatita/Nióbio como material biocerâmico para substituição do ósso. O compósito de Hidroxiapatita/Nióbio foi caracterizado quanto a sua morfologia [Difração de raios-X (XRD], tensão, trinca e tenacidade e feito analise in vivo em modelo de calota craniana com defeito crítico de 8 mm realizado em ratos wistar, sendo 3 grupos experimentais: Controle (GC) -Grupo I (controle positivo); Grupo II (padrão de hidroxiapatita) e Grupo III (CNb/CPO - Hidroxiapatita/Niobio). Após 90 dias, os animais foram eutanasiados e as amostras avaliadas através de Micro CT, HE e imunohistoquimica. Os dados obtidos foram avaliados pelo teste de ANOVA ou Kruskal-Wall, seguidos pelos pos-testes com nível de significância de 5%. Os resultados mecânicos de DRX mostraram na amostra pura a presença de Hap cristalina hexagonal e um grupo espacial P63/m, já no grupo com Nb observou-se a presença de fosfato β-tricálcio (Ca3(PO4)2) e Fersmita (CaNb2O6), podendo está relacionado com a decomposição da Hap na presença do Nb. Na análise do FRX foi obtido resultados próximos ao da moagem, comprovando que a técnica utilizada foi eficiente. Quanto a presença de indentições e trincas, houve um pequeno aumento na tenacidade à fratura da Hap (0,78 MPa.m1/2) quando comparado a mescla Hap/Nb (0,82 MPa.m1/2). Os resultados in vivo para o micro-CT mostraram aumento do número trabecular (p˂0,001), diminuição das porosidades (%) (p˂0,001) e diminuição da separação trabecular (mm) (p˂0,001) no grupo CNb/CPO em comparação ao grupo GC. Para a analise histopatológica, no grupo CNb/CPO contatou-se a presença de osso novo com diferenciação do tecido conjuntivo, sendo o escore de 3 (3-3,75, p˂0,05), além disso na analise imunohistoquimica constatamos um forte imunoexpressão de osteopontina (p<0,05). Os resultados indicam que a mescla CNb/CPO apresentou resistência à propagação de fissuras e estimulou a formação óssea em defeitos de calvária em ratos.


  • Mostrar Abstract
  • Hydroxyapatite (Hap) is a highly trained compound used for clinical use, due to the treatment of a mineral component present in the formation of bones, its use provides conditions for bone growth, thus allowing the biological fixation of grafts that are widely used for reconstructions of organic tissues, very little progress has been made in relation to materials capable of fulfilling with excellence the function of a material that is capable of having an osseointegration characteristic, in this sense the search for new constituent elements of the grafted pieces appears as a motivation of studies, as it provides the patient with an option to choose their treatments. In this sense, a Hydroxyapatite/Niobium compound was considered as a bioceramic material, it was characterized in terms of its morphology [X-ray diffraction (XRD), tension, cracking and tenacity and analyzed in vivo in a skullcap model with 8 mm critical defect performed in Wistar rats, with 3 experimental groups: Control (GC) -Group I (positive control); Group II (hydroxyapatite standard) and Group III (CNb/CPO - Hydroxyapatite/Niobio). After 90 days, the animals were euthanized and the samples were evaluated using Micro CT, HE and immunohistochemistry. The data obtained were statistically evaluated using the ANOVA test and the results were: In the mechanical results of XRD, the presence of hexagonal crystalline Hap and a P63/m space group was observed in the pure sample, while in the group with Nb, the presence of β-tricalcium phosphate (Ca3(PO4)2) and Fersmite (CaNb2O6), which may be related to the decomposition of Hap in the presence of Nb. In the XRF analysis, results close to those of grinding were obtained, proving that the technique used was efficient. Regarding the presence of indentations and cracks, there was a small increase in fracture toughness from Hap (0.78 MPa.m1/2) to Hap/Nb (0.82 MPa.m1/2). As in vivo results: micro-CT showed an increase in trabecular number (p˂0.001), a decrease in porosities (%) (p˂0.001) and a decrease in trabecular separation (mm) (p˂0.001) in the CNb/CPO group in comparison to the CG group. In the CNb/CPO group, there was the presence of new bone in which the connective tissue differentiates to form or indicate a bone matrix score of 3 (3-3.75, p˂0.05) and strong immunoexpression of osteopontin (p<0, 05). The results indicate that CNb/CPO showed resistance to crack propagation and stimulated bone formation in calvarial defects in rats.

Teses
1
  • KALINA VERUSKA DA SILVA BEZERRA MASSET
  • PROPOSICAO DE INSTRUMENTOS DE AVALIACAO E CRITERIOS PARA
    TRIAGEM DE FATORES DE RISCO CARDIOMETABOLICO EM ADULTOS
    COM EXCESSO DE PESO
  • Orientador : ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • BRENO GUILHERME DE ARAUJO TINOCO CABRAL
  • MARCOS FELIPE SILVA DE LIMA
  • FREDERICO SANTOS DE SANTANA
  • VALDINAR DE ARAÚJO ROCHA JÚNIOR
  • Data: 12/03/2024

  • Mostrar Resumo
  • Pessoas com sobrepeso ou obesidade apresentam mais fatores de risco para o
    desenvolvimento de doenças cardiometabólicas. Entretanto, esses fatores
    apresentam diferentes graus de risco cardiovascular em função do perfil
    metabólico. Considerando as limitações e a escassez de instrumentos e critérios
    de avaliação específicos nesse contexto, os objetivos do presente estudo são:
    1) desenvolver e validar cruzadamente duas equações para estimar a Massa
    Livre de Gordura por análise de bioimpedância: uma para o grupo de pessoas
    com sobrepeso ou obesidade (GSO) e outra, para o grupo de pessoas com
    obesidade unicamente (GO). 2) determinar pontos de corte de índices com
    parâmetros antropométricos e bioquímicos (IPAB) para a triagem de fatores de
    risco cardiometabólico (RCM) para a mesma população; 2) Para o objetivo 1,
    305 pessoas (134 mulheres) se dividiram em dois grupos: desenvolvimento
    (n=206) e validação cruzada (n=99); e para objetivo 2, a amostra foi composta
    por 330 sujeitos (192 mulheres). Para o estudo, foram usados o DXA como
    técnica padrão de composição corporal, a Análise de Impedância Bioelétrica
    (BIA) de monofrequência tetrapolar como equipamento para uso das equações,
    e o índice de Adiposidade Visceral (IAV), o Índice Cardiometabólico (ICM) e o
    Índice Triglicerídeos-Glicose (ITG) como índices com parâmetros
    antropométricos e bioquímicos. Para desenvolver e validar as equações foram
    utilizados os Teste t pareado, regressão múltipla e plotagem de Bland-Altman.
    Para determinar pontos de corte, a curva ROC foi plotada a partir da
    sensicilidade e da especificidade, além da identificação da área sob a curva
    AUC. A concordância diagnóstica foi calculada pela análise de Kappa. A
    equação para GSO apresentou coeficiente de correlação de concordância
    (CCC)=0,971; r2=0,94; erro padrão da estimativa (EPE)=2,69kg; limites de
    concordância (LOA)=-4,4 a 4,3; e 2) e a equação para GO apresentou
    CCC=0,965; r2=0,93; EPE=2,27kg; LOA=-5,5 a 4,7. As mulheres apresentaram
    os seguintes pontos de corte: IAV >4,11 (AUC=0,894), ITG >3.64 (AUC=0.858)
    e ICM>1,02 (AUC=0,912) e os homens: IAV>2,75 (AUC= 0,918), ITG>3.8
    (AUC=0.888) e ICM>1,66 (AUC=0,923). Ao comparar os novos modelos e a
    técnica padrão, não houve diferença no valor da MLG (p>0,05). As duas
    equações derivadas são opções válidas para estimar a MLG de pessoas com as
    características da amostra estudada, assim como todos os IPAB mostraram bons
    resultados para triagem de fatores de RCM.

  • Mostrar Abstract
  • People who are overweight or obese have more risk factors for developing
    cardiometabolic diseases. However, these factors present different degrees of
    cardiovascular risk depending on the metabolic profile. Considering the
    limitations and scarcity of specific assessment instruments and criteria in this
    context, the objectives of the present study are: 1) to develop and cross-validate
    two equations to estimate Fat Free Mass by bioimpedance analysis: one for the
    group of people with overweight or obesity (GSO) and another, for the group of
    people with obesity only (GO). 2) determine cut-off points for indices with
    anthropometric and biochemical parameters (IPAB) for screening
    cardiometabolic risk factors (CMR) for the same population; 2) For objective 1,
    305 people (134 women) were divided into two groups: development (n=206) and
    cross-validation (n=99); and for objective 2, the sample consisted of 330 subjects
    (192 women). For the study, DXA was used as a standard body composition
    technique, the tetrapolar monofrequency Bioelectrical Impedance Analysis (BIA)
    as equipment for using the equations, and the Visceral Adiposity Index (VAI), the
    Cardiometabolic Index (ICM) and the Triglycerides-Glucose Index (ITG) as
    indices with anthropometric and biochemical parameters. To develop and
    validate the equations, the Paired t-test, multiple regression and Bland-Altman
    plot were used. To determine cutoff points, the ROC curve was plotted based on
    sensitivity and specificity, in addition to identifying the area under the AUC curve.
    Diagnostic agreement was calculated using Kappa analysis. The equation for
    GSO presented a correlation coefficient of agreement (CCC)=0.971; r2=0.94;
    standard error of estimate (SPE)=2.69kg; limits of agreement (LOA)=-4.4 to 4.3;
    and 2) and the equation for GO presented CCC=0.965; r2=0.93; EPE=2.27kg;
    LOA=-5.5 to 4.7. Women had the following cutoff points: IAV>4.11 (AUC=0.894),
    ITG>3.64 (AUC=0.858) and ICM>1.02 (AUC=0.912) and men: IAV>2.75 (AUC =
    0.918), ITG>3.8 (AUC=0.888) and ICM>1.66 (AUC=0.923). When comparing the
    new models and the standard technique, there was no difference in the FFM
    value (p>0.05). The two derived equations are valid options for estimating the
    FFM of people with the characteristics of the studied sample, just as all IPAB
    showed good results for screening RCM factors.
2
  • DAISY SOTERO CHACON
  • INTEGRAÇÃO DE DADOS MOLECULARES E QUÍMICOS PARA ANÁLISE DA
    BIOSSÍNTESE DE METABÓLITOS ESPECIALIZADOS EM Erythrina velutina Willd
  • Orientador : RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • JANETTE PALMA FETT
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • WAGNER LUIZ ARAUJO
  • Data: 27/03/2024

  • Mostrar Resumo
  • O estudo das plantas está sob crescente transformação devido á disponibilidade de ferramentas
    moleculares e de bioinformática para entender e apontar potenciais fontes de novas entidades
    químicas bioativas com interesse farmacêutico. Nesse cenário, Erythrina velutina se destaca
    como uma planta medicinal encontrada na região nordeste do Brasil, principalmente no bi
    oma da Caatinga. Esta planta possui notável capacidade de produzir alcaloides e flavonoides,
    que são os principais metabólitos secundários do gênero e estão frequentemente associados a
    atividades farmacológicas, como moduladores do sistema nervoso central (com efeitos anti
    depressivos e ansiolíticos) e ação anti-inflamatória. Apesar de alguns produtos naturais (PN)
    terem sido eficazes como fonte de novos medicamentos, a indústria farmacêutica ainda enfrenta
    desafios na identificação e produção otimizada desses compostos e isso tem levado a uma re
    dução no interesse por medicamentos baseados em PN. Com o objetivo de minimizar essas
    lacunas, este estudo visa integrar dados moleculares e químicos para investigar a biossíntese
    dos principais metabólitos presentes em E. velutina sob três aspectos: avaliar a produção meta
    bólica em plantas coletadas em habitat natural (Caatinga) e em plantas cultivadas submetidas a
    diferentes elicitores (i); identificar genes de referência para normalizar ensaios RT-qPCR para
    a espécie (ii) e avaliar a expressão dos genes alvos responsáveis pela produção de alcaloides
    e flavonoides de potencial bioativo (iii). O estudo se concentra em dados de transcriptoma,
    proteoma e metaboloma obtidos de amostras coletadas em seu habitat natural, além de cultivo
    de plântulas submetidas a fatores de estresse ambientais (temperatura, UV, estresse hídrico, es
    tresse salino e danos mecânicos) e fitormônios (metiljasmonato, ácido salicílico, óxido nítrico
    e ácido abscisico). Como resultado, os flavonoides predominantes observados foram flavonas,
    isoflavonas e flavonóis, juntamente com vários alcaloides isoquinolínicos tanto do dienoides
    quanto do alcenoides. A análise do transcriptoma revelou a presença de enzimas envolvidas nas
    vias de biossíntese de flavonoides e alcaloides, incluindo aquelas expressas diferencialmente,
    como EvCHI, EvIF7GT, EvCHS, EvCOR, EvNMT e EvODM. Entre os tratamentos testados, o
    acúmulo mais significativo de metabólitos ocorreu em resposta ao NO, MeJA, estresse hídrico
    e calor, enquanto o ABA provocou o efeito menos pronunciado. Para normalização dos ensaios
    de RT-qPCR, EvCSTF64, EvRAB7, EvNLE, EvUPF e EvARP4 foram identificados como os
    genes de referência mais estáveis, enquanto EvNADH e EvPBL27 exibiram menor estabilidade.
    Esses genes servem como pontos de referência confiáveis para garantir a normalização pre
    cisa dos dados de expressão gênica em análises subsequentes. Os resultados apontaram o NO
    como crucial no aumento da expressão de CHI e das quantidades de isoflavonas anotadas. O
    estresse hídrico afetou negativamente os primeiros precursores da via dos alcaloides de Eryth
    rina, enquanto o MeJA teve o efeito oposto. A exposição ao calor aumentou as concentrações
    de alcaloides. Esse estudo poderá contribuir significativamente para a compreensão do meta
    bolismo secundário de plantas nas condições ambientais semiáridas/xéricas, características da
    região da Caatinga. Além disso, contribui para aprimorar a produção de moléculas bioativas naespécie e valorizar uma planta da Caatinga do Rio Grande do Norte como fonte de compostos
    com potencial farmacêutico. Essa pesquisa representa o primeiro passo para guiar o manejo
    para produção sustentável de metabólitos bioativos-alvo em E. velutina.

  • Mostrar Abstract
  • The study of plants is under increasing transformation due to the availability of molecular and
    bioinformatics tools to understand metabolism and point out potential sources of new bioactive
    chemical entities with pharmaceutical interest. In this scenario, Erythrina velutina stands out
    as a medicinal plant found in the northeast region of Brazil, mainly in the Caatinga biome. This
    plant has a remarkable ability to produce alkaloids and flavonoids, which are the main secon
    dary metabolites of the genus and are often associated with pharmacological activities, such
    as modulators of the central nervous system (with antidepressant and anxiolytic effects) and
    anti-inflammatory action. Although some natural products (NP) have been effective as a source
    of new drugs, the pharmaceutical industry still faces challenges in the identification and opti
    mized production of these compounds and this has led to a reduction in interest in NP-based
    drugs. In order to minimize these gaps, this study aims to integrate molecular and chemical
    data to investigate the biosynthesis of the main metabolites present in E. velutina under three
    aspects: to evaluate the metabolic production in plants collected in natural habitat (Caatinga)
    and in cultivated plants submitted to different elicitors (ii); identify reference genes that norma
    lize RT-qPCR tests for the species (ii) and evaluate the expression of target genes responsible
    for the production of alkaloids and flavonoids with bioactive potential (iii). The study focuses
    on transcriptome, proteome and metabolome data obtained from samples collected in their natu
    ral habitat, in addition to seedling cultivation subjected to environmental stresses (temperature,
    UV, water stress, salt stress and mechanical damage) and phytohormones (methyljasmonate ,
    salicylic acid, nitric oxide and abscisic acid). As a result, the predominant flavonoids observed
    were flavones, isoflavones, and flavonols, along with several isoquinoline alkaloids from both
    dienoids and alkenoids. Transcriptome analysis revealed the presence of enzymes involved in
    the flavonoid and alkaloid biosynthesis pathways, including those differentially expressed, such
    as EvCHI, EvIF7GT, EvCHS, EvCOR, EvNMT and EvODM. Among the treatments tested, the
    most significant accumulation of metabolites occurred in response to NO, MeJA, water stress
    and heat, while ABA caused the least pronounced effect. For normalization of RT-qPCR assays,
    EvCSTF64, EvRAB7, EvNLE, EvUPF and EvARP4 were identified as the most stable reference
    genes, while EvNADH and EvPBL27 exhibited lower stability. These genes serve as reliable re
    ference points to ensure accurate normalization of gene expression data in subsequent analyses.
    The results pointed to NO as crucial in increasing the expression of CHI and the amounts of
    isoflavones noted. Drought stress negatively affected early precursors of the Erythrina alkaloid
    pathway, while MeJA had the opposite effect. Exposure to heat increased alkaloid concentra
    tions. This study will contribute to the understanding of the secondary metabolism of plants
    in the semi-arid/xeric environmental conditions, characteristic of the Caatinga region. In addi
    tion, may help to improve the production of bioactive molecules in the species and to value a
    plant from the Caatinga of Rio Grande do Norte as a source of compounds with pharmaceutical
    potential. This research represents the first step towards guiding the management for optimaltarget metabolite production in E. velutina.
3
  • LUANA CRISTINA LINS DE MEDEIROS OLIVEIRA
  • DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE UM QUESTIONÁRIO CLÍNICO PARA AVALIAÇÃO DA PREDISPOSIÇÃO A ADESÃO AO TRATAMENTO IMUNOSSUPRESSOR EM PACIENTES DO PRÉ-TRANSPLANTE RENAL
  • Orientador : ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • DAYANI GALATO
  • ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • HÉLADY SANDERS PINHEIRO
  • JOSE BRUNO DE ALMEIDA
  • Data: 27/05/2024

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: A não adesão à terapia imunossupressora após o transplante renal é fator importante para rejeição e perda do enxerto. Identificar a não adesão relacionada ao uso de imunossupressores é essencial para o tratamento, contudo, não é incomum isto ocorrer já com danos irreparáveis ao enxerto. Logo, a identificação prévia de pacientes susceptíveis a esta não adesão possibilitaria a adoção de medidas preventivas. Porém, não foram ainda desenvolvidos instrumentos clínicos com essa finalidade. Objetivo: Desenvolver e validar uma escala psicométrica de predisposição para não adesão ao tratamento imunossupressor em pacientes do pré-transplante renal. Metodologia: Estudo multicêntrico, prospectivo, observacional, transversal, longitudinal e analítico em pacientes candidatos para transplante renal de ambos os sexos, com mais de 18 anos. Para o desenvolvimento da escala psicométrica foi compilado um conjunto de itens refletindo afirmações de pacientes, obtidos por revisão da literatura, grupo focal e um painel de peritos. O questionário piloto foi aplicado em 541 pacientes de 13 centros de saúde, dos quais 154 repetiram a aplicação do questionário cerca de 12 meses depois. O questionário final foi obtido por análise fatorial exploratória e a validação interna incluiu análise de confiabilidade de consistência interna, confiabilidade teste-reteste e validade convergente avaliada por diferenciação por grupos conhecidos. Para a validação externa, foram incluídos 381 pacientes com cirurgia agendada em seis centros de transplante renal, que foram observados no pré-transplante e nos meses 3, 6 e 12 pós-transplante para avaliação da validade de critério, por comparação com duas escalas de não adesão a medicamentos, e validade preditiva de não adesão, avaliada pela combinação de 3 métodos (auto-relato, nível sérico de imunossupressores e retirada de medicamentos da farmácia). Para a validação transcultural foram incluídos 163 pacientes maiores de 18 anos, de ambos os sexos, candidatos a transplante renal, recrutados em 2 centros de transplante renal e 2 centros de diálise na Catalunha, Espanha. A escala foi re-administrada nos primeiros 79 pacientes incluídos após um intervalo de 2 a 4 semanas. A confiabilidade de consistência interna foi avaliada pelo alfa de Cronbach e a teste-reteste pelo coeficiente de correlação intraclasse (CCI); a validade de construto foi avaliada com análise fatorial confirmatória por modelação de equações estruturais. Resultados: O questionário final, denominado Kidney AlloTransplant Immunosuppression Therapy Adherence (KATITA), composto por 25 itens e 3 dimensões não correlacionadas, apresentou boa confiabilidade de consistência interna (alfa de Cronbach 0,81). As 3 dimensões e respectivos alfa de Cronbach foram “Displicência” (14 itens, 0,81), “Ceticismo” (6 itens, 0,57) e “Receio” (5 itens, 0,62). A confiabilidade teste-reteste, apresentou coeficiente de correlação intraclasse de 0,62 (concordância moderada). A escala apresentou validade convergente. O estudo longitudinal confirmou a estrutura multidimensional da escala e validade de critério. A validade preditiva da escala foi confirmada por uma área sob a curva ROC de 0,68 e por sensibilidade de 59,8%, especificidade de 68,2% e valor preditivo positivo de 71,8%. O alfa de Cronbach da versão espanhola foi 0,83 e os alfas das 3 subescalas foram 0,82, 0,74 e 0,52. Na análise da confiabilidade teste-reteste, o CCI foi 0,86. A análise fatorial confirmatória mostrou ajustamento adequado do modelo estrutural. Na sua generalidade, os resultados analíticos foram semelhantes aos obtidos na validação da escala original. Conclusão: O questionário KATITA-25 é o primeiro questionário psicométrico validado para avaliação da predisposição à não adesão à medicação imunossupressora em pacientes candidatos ao transplante renal no cenário do pré-transplante renal.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: Nonadherence to immunosuppressive therapy after kidney transplantation is an important factor for rejection and graft loss. Identifying nonadherence related to use of immunosuppressants is essential for treatment, however, it is not uncommon for this to occur with irreparable damage to the graft. Therefore, the prior identification of patients susceptible to this nonadherence would enable the adoption of preventive measures. However, clinical instruments have not yet been developed for this purpose. Objective: To develop and validate a psychometric scale for the assessment of propensity to nonadherence to immunosuppressant therapy in pre-kidney transplant patients. Methodology: Multicenter, prospective, observational, cross-sectional, longitudinal and analytical study in candidate patients for kidney transplant of both sexes, over 18 years old. To develop the psychometric scale, a set of items expressing patient statements were compiled, obtained through a literature review, focus group and an expert panel. The pilot questionnaire was administered to 541 patients from 13 healthcare centers, of which 154 repeated the questionnaire approximately 12 months later. The final questionnaire was obtained by exploratory factor analysis and internal validation included analysis of internal consistency reliability, test-retest reliability and convergent validity assessed by differentiation by known groups. For external validation, 381 patients with already scheduled surgery were included in six transplant centers and were observed in the pre-transplant and in months 3, 6 and 12 post-transplant for evaluation of criterion validity, by comparison with two medication nonadherence scales, and validity predictive of nonadherence, assessed by a combination of 3 methods (self-report, serum level of immunosuppressants and drug withdrawal from the pharmacy). For cross-cultural validation of the Spanish version, the scale was administered to 163 patients over 18 years-old, of both sexes, candidates for kidney transplantation, recruited from 2 kidney transplant centers and 2 dialysis centers in Catalonia, Spain. The scale was re-administered to the first 79 patients included into the study, after an interval of 2 to 4 weeks. Internal consistency reliability was assessed with Cronbach's alpha and test-retest reliability with the intraclass correlation coefficient (ICC); construct validity was assessed with confirmatory factor analysis using structural equation modeling. Results: The final questionnaire, called Kidney AlloTransplant Immunosuppression Therapy Adherence (KATITA) Questionnaire, consisting of 25 items in 3 uncorrelated dimensions, showed good internal consistency reliability (Cronbach's alpha 0.81). The 3 dimensions and respective Cronbach's alpha were “Carelessness” (14 items, 0.81), “Skepticism” (6 items, 0.57) and “Concern” (5 items, 0.62). Test-retest reliability showed an intraclass correlation coefficient of 0.62 (moderate agreement). The scale showed convergent validity. The longitudinal study included 381 patients and confirmed the multidimensional structure of the scale and criterion validity. The predictive validity of the scale was confirmed by an area under the ROC curve of 0.68, sensitivity of 59,8%, specificity of 68,2%, and positive predictive value of 71,8%. The Cronbach's alpha of the Spanish version was 0.83, and the alphas of the 3 subscales were 0.82, 0.74, and 0.52. In test-retest reliability analysis, the ICC was 0.86. Confirmatory factor analysis showed adequate fit of the structural model. In general, the analytical results were similar to those obtained in the validation of the original scale. Conclusion: The KATITA-25 questionnaire is the first validated psychometric questionnaire assessing predisposition to nonadherence to immunosuppressive medication in candidate patients to kidney transplantation in the pre-kidney transplant setting.

4
  • ALINE MARIA VASCONCELOS QUEIROZ
  • AVALIAÇÃO DE FORMULAÇÕES VACINAIS NO CONTEXTO DO MODELO EXPERIMENTAL DA DOENÇA DE CHAGAS

  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALINE RIMOLDI RIBEIRO
  • DIEGO MARCELO GUERIN AGUILAR
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MICÁSSIO FERNANDES DE ANDRADE
  • VALTER FERREIRA DE ANDRADE NETO
  • Data: 27/06/2024

  • Mostrar Resumo
  • Uma importante condição tropical negligenciada, a doença de Chagas, embora endêmica nas Américas tornou-se uma preocupação de saúde global. Os desafios na terapêutica recordam a urgência do desenvolvimento de vacinas para o controle desta doença. Estudos pré-clínicos expandiram-se em uma gama de plataformas e formulações vacinais a serem testadas. A apresentação de novas formulações vacinais com a utilização de antígenos recombinantes quiméricos do agente etiológico oferece uma consequente melhora na imunogenicidade. Nesta conjuntura, este estudo teve como foco principal a aplicabilidade de vacinas quiméricas com diferentes antígenos do Trypanosoma cruzi em associação ou não com moléculas imunoadjuvantes. Para esse fim, apresentou-se e investigou-se a capacidade imunoadjuvante de três polipeptídeos estruturais de Triatoma virus em forma de mix (VP1+VP2+VP3: VPs), bem como avaliou-se as formulações vacinais com as proteínas (IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4) em mistura antigênica (Mix) associadas ou não com as VPs e adjuvantes conhecidos (Adjuvante Incompleto de Freund - AIF e Hidróxido de alumínio - Alum) por meio da imunidade humoral em diferentes tempos durante os protocolos de imunização com duas e três doses em modelo animal. Com esse intuito, camundongos Balb/c (Mus musculus) fêmeas foram imunizados em protocolo de duas dose e separados em cinco grupos: Mix-IBMP, Mix+AIF, Mix+Alum, Mix+VPs controle negativo. No protocolo de três imunizações os grupos foram: AIF, Alum, Mix-IBMP, Mix+AIF, Mix+Alum e controle negativo. Juntamente foi apresentado um protocolo de infecção experimental com T. cruzi. Os animais de todos os protocolos tiveram os perfis de anticorpos murinos específicos do tipo IgG e seus subtipos: IgG1, IgG2a, IgG2b e IgG3 determinados por teste imunoenzimático a partir das amostras de soros. Os dados demonstram a capacidade das VPs em induzir bons níveis de anticorpos do tipo IgG, IgG2b e IgG3 e não indução de IgG1, caracterizando assim a propriedade imunoestimulatória humoral desses polipeptídeos; sugerem que as proteínas em forma de Mix direcionam uma baixa presença ou ausência total de IgG1, possibilidade interessante para respostas intracelulares; evidenciam o hidróxido de alumínio apresentando desempenho semelhante em diferentes concentrações e por fim, a otimização de dois protocolos de imunização em modelo murino no contexto da doença de Chagas, bem como a importância da dose de reforço. Não obstante, animais imunizados reconhecem o parasita e os infectados reconhecem as IBMPs. Este trabalho apresenta pioneirismo no panorama de quimeras de T. cruzi associadas às VPs e AIF e boa associação com o adjuvante mais utilizado em vacinas. Os achados fornecem insights valiosos para impulsionar o desenvolvimento de vacinas quiméricas para infecções humanas causadas por tripanosomatídeos, como a doença de Chagas.


  • Mostrar Abstract
  • An important neglected tropical condition, the Chagas disease, though endemic to the Americas, has become a global health concern. The challenges in therapeutics highlight the urgency of developing vaccines to control this disease. Preclinical studies have expanded into a range of vaccine platforms and formulations to be tested. The presentation of new vaccine formulations using chimeric recombinant antigens of the etiological agent offers a consequent improvement in immunogenicity. At this juncture, this study's main focus was the applicability of chimeric vaccines with different Trypanosoma cruzi antigens in association or not with immunoadjuvant molecules. Thus, the immunoadjuvant capacity of three structural polypeptides from Triatoma virus in a mix form (VP1+VP2+VP3: VPs) was presented and investigated, as well as vaccine formulations with the proteins (IBMP-8.1, IBMP- 8.2, IBMP-8.3 and IBMP-8.4) in an antigenic mixture (Mix-IBMP) associated or not with VPs and known adjuvants (Freund's Incomplete Adjuvant - FIA and Aluminum Hydroxide - Alum) through humoral immunity at different times during immunization protocols with two and three doses in animal models. For this purpose, female Balb/c mice (Mus musculus) were immunized in a two-dose protocol and separated into five groups: Mix-IBMP, Mix+FIA, Mix+Alum, Mix+VPs and negative control. In the three-immunization protocol, the groups were: FIA, Alum, Mix-IBMP, Mix+FIA, Mix+Alum and negative control. presented together with an experimental infection protocol with T. cruzi. Animals from all protocols had specific murine antibody profiles of the IgG type and its subtypes (IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3) determined by immunoenzymatic testing from serum samples. The data demonstrate the ability of VPs to induce good levels of IgG, IgG2b and IgG3 antibodies and no induction of IgG1, thus characterizing the humoral immunostimulatory property of these polypeptides; suggest that proteins in the Mix form direct a low presence or total absence of IgG1, an interesting possibility for intracellular responses; show that aluminum hydroxide presents similar performance in different concentrations and finally, the optimization of two immunization protocols in a murine model in the context of Chagas disease, as well as the importance of the booster dose. However, immunized animals recognize the parasite and infected animals recognize IBMPs. This work presents a pioneering perspective in the panorama of T. cruzi chimeras associated with VPs and FIA and a good association with the most used adjuvant in vaccines. The findings provide valuable insights to foster the development of chimeric vaccines for human infections caused by trypanosomatids, such as Chagas disease.

5
  • FIAMMA GLÁUCIA DA SILVA
  • AVALIACAO DO POTENCIAL ANTIMICROBIANO E LARVICIDA DE NANOPARTICULAS DE QUITOSANA CONTENDO A PECONHA DA SERPENTE Crotalus durissus cascavella

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • FRANCISCO HUMBERTO XAVIER JUNIOR
  • LETICIA STRECK
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 29/11/2024

  • Mostrar Resumo
  • A resistência antimicrobiana (RAM) representa uma ameaça à população global e pode ser responsável pelo surgimento e reemergência de várias doenças infecciosas. Infecções por patógenos multirresistentes apresentam alta morbidade e mortalidade, o que tem levado à busca incessante por novas alternativas terapêuticas. A cascavel sul-americana, Crotalus durissus, contém em sua peçonha várias proteínas biologicamente ativas com importante ação farmacológica, podendo ser uma valiosa ferramenta na pesquisa de novos fármacos. A fim de garantir um melhor aproveitamento de moléculas biologicamente ativas, nanocarreadores poliméricos vêm sendo investigados como sistemas de liberação para macromoléculas. A quitosana, devido às suas propriedades favoráveis, tem sido extensivamente estudada em formulações de nanocarreadores, particularmente para proteínas e peptídeos. Com esse foco, o presente estudo obteve nanopartículas de quitosana (NPQ), como sistema de liberação sustentada para a peçonha da serpente Crotalus durissus cascavella nas concentrações de 0,5 e 1,0%, bem como avaliou sua biocompatibilidade e potencial antibacteriano, antifúngico, antiparasitário e larvicida. As nanopartículas foram obtidas com sucesso pela técnica de gelificação iônica. A biocompatibilidade foi avaliada em linhagens de células normais (Vero E6, NIH/3T3) e eritrócitos humanos, demonstrando que nas concentrações testadas não evidenciaram efeitos citotóxicos e hemolíticos. Através do ensaio de concentração inibitória mínima, nossos resultados revelaram a capacidade das nanopartículas com e sem a peçonha associada de inibir bactérias gram-positivas e gram-negativas padrões e isolados clínicos multirresistentes, além de inibir diferentes espécies de leveduras do gênero Candida. Nos ensaios antiparasitários, a peçonha bruta e as nanopartículas associadas à peçonha demonstraram citotoxicidade nas formas epimastigota e tripomastigota de Trypanosoma cruzi, apresentando como principal mecanismo de ação a apoptose tardia e baixos níveis de dano mitocondrial. O efeito leishmanicida foi evidenciado principalmente pelas NPQ associadas com peçonha, chegando a quase 100% de efetividade pelas NPQ com a peçonha incorporada a 1,0%. Através do ensaio larvicida foi demonstrado que as NPQ sem e com a peçonha associada também demonstraram efeito promissor frente a larvas do mosquito Aedes aegypti. Dessa forma, neste estudo foi evidenciado o potencial multifuncional de nanopartículas de quitosana associadas ou não a peçonha, bem como da peçonha bruta de C. d. cascavella, podendo ser utilizado como protótipo para obtenção de novos fármacos com aplicação biotecnológica.


  • Mostrar Abstract
  • Antimicrobial resistance (AMR) represents a threat to the global population and may be responsible for the emergence and re-emergence of several infectious diseases. Infections caused by multidrug-resistant pathogens present high morbidity and mortality, which has led to an incessant search for new therapeutic alternatives. The South American rattlesnake (Crotalus durissus) contains in its venom several biologically active proteins with important pharmacological action, which can be a valuable tool in the research of new drugs. In order to ensure better use of biologically active molecules, polymeric nanocarriers have been investigated as delivery systems for macromolecules. Chitosan, due to its favorable properties, has been extensively studied in nanocarrier formulations, particularly for proteins and peptides. With this focus, the present study used chitosan nanoparticles (NPQ) as a sustained release system for the Crotalus durissus cascavella venom snake in concentrations of 0.5 and 1.0%, as well as evaluated its biocompatibility and antibacterial, antifungal, antiparasitic and larvicidal potential. The nanoparticles were successfully obtained by the ionic gelation technique. Biocompatibility was evaluated in normal cell lines (Vero E6, and NIH/3T3) and human erythrocytes, demonstrating that in the tested concentrations there was no evidence of hemolytic nor cytotoxic effects. Through the minimum inhibitory concentration test, our results demonstrate the nanoparticles ability to inhibit standard gram-positive and gram-negative bacteria and multi-resistant clinical isolates, in addition to inhibit different species of the genus Candida. In antiparasitic tests, crude venom and the nanoparticles associated with the venom demonstrated cytotoxicity in the epimastigote and trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi, presenting as main mechanism of action late apoptosis and low levels of mitochondrial damage. The leishmanicidal effect was mainly evidenced by NPQ associated with venom, reaching almost 100% inhibition by NPQ with venom incorporated at 1.0%. Through the larvicide test it was demonstrated that NPQ without and associated with the venom also demonstrated a promising effect against Aedes aegypti larvae. That way, this study demonstrated the multifunctional potential of chitosan nanoparticles associated or not with venom, as well as crude C.d. cascavella venom, which can be used as a prototype to obtain new drugs with biotechnological application.

2023
Dissertações
1
  • ULANA CRISTINA DE ARAÚJO TAVARES
  • Novos curativos biodegradáveis com biopolímeros e triterpeno α, β-Amirenona: Obtenção, caracterização e avaliação da atividade cicatrizante e anti-inflamatória in vivo.

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • EMERSON SILVA LIMA
  • JOSÉ LAMARTINE SOARES SOBRINHO
  • Data: 23/01/2023

  • Mostrar Resumo
  • A α, β-amirenona (ABAME) é um composto natural da classe dos triterpenos, que apresenta grande potencial de atividade antiinflamatória, cicatrizante. Os filmes de quitosana são cada vez mais usados para uso tópico porque permitem uma liberação gradual do medicamento e apresentam muitas vantagens como biodegradáveis, flexíveis, duráveis e resistentes, não se rompem nem rasgam facilmente. Assim, o objetivo deste estudo é desenvolver, caracterizar e avaliar os filmes de quitosana incorporados com a α, β-amirenona, além de analisar a o efeito antiinflamatório e cicatrizante, visando a aplicação tópica no tratamento de lesões cutâneas. Os sistemas de ABAME foram avaliados pelas seguintes técnicas: FTIR, DR-X, DSC, TG e MEV. Na parte in vivo, o modelo animal foram os camundongos, sendo subemtidos a lesões no dorso e acompanhados por 14 dias para avaliação do processo cicatricial da lesão. Após a eutanasia, foram avaliados a quantificação das citocinas, a macroscopia das lesões e a análise histológica. A análise térmica demonstrou a incorporação da amostra e um aumento na estabilidade térmica do ABAME. Os espectros de FTIR dos filmes demonstraram interações ocorrendo entre ABAME e a matriz de quitosana. Os resultados de DRX mostraram picos em halos, característicos de compostos amorfos, indicando a amorfização do ABAME pela quitosana. Imagens de MEV mostraram o protótipo incorporado na matriz de quitosana de forma homogênea e com perda parcial da característica cristalina do ABAME puro. In vivo foi possível observar que a terapia com filmes incorporados com ABAME é bastante eficaz, visto que possui propriedades antiinflamatórias que auxiliaram no processo de cicatrização de lesões cutâneas, possibilitando avaliar esta evolução de forma macroscópica, histológica e com a citocinas dosadas no presente estudo. Neste estudo os fatores analisados sugerem que o curativo de quitosana com ABAME obtiveram um efeito regenerador nos camundongos, minimizando os parâmetros do processo inflamatório e progredindo a cicatrização. Sugere que se desenvolvam estudos observacionais dos efeitos em longo prazo dos curativos, além de outras análises que possam verificar se os mesmos não sofrem alterações ao longo do tempo, do mesmo modo avaliar a eficácia no tecido cicatrizado.


  • Mostrar Abstract
  • α, β-amirenone (ABAME) is a natural compound of the triterpene class, which has great potential for anti-inflammatory and healing activity. Chitosan films are increasingly used for topical use because they allow a gradual release of the drug and have many advantages such as biodegradable, flexible, durable and resistant, they do not break or tear easily. Thus, the objective of this study is to develop, characterize and evaluate chitosan films incorporated with α, β-amyrenone, in addition to analyzing the anti-inflammatory and healing effect, aiming at topical application in the treatment of skin lesions. The ABAME systems were evaluated by the following techniques: FTIR, DR-X, DSC, TG and SEM. In the in vivo part, the animal model was mice, which were subjected to injuries on the back and followed for 14 days to assess the healing process of the injury. After euthanasia, the quantification of cytokines, the macroscopy of the lesions and the histological analysis were evaluated. Thermal analysis demonstrated sample incorporation and an increase in the thermal stability of ABAME. The FTIR spectra of the films demonstrated interactions occurring between ABAME and the chitosan matrix. XRD results showed peaks in halos, characteristic of amorphous compounds, indicating the amorphization of ABAME by chitosan. SEM images showed the prototype homogeneously incorporated into the chitosan matrix and with partial loss of the crystalline characteristic of pure ABAME. In vivo, it was possible to observe that therapy with films incorporated with ABAME is quite effective, since it has anti-inflammatory properties that help in the healing process of skin lesions, making it possible to evaluate this evolution macroscopically, histologically and with the cytokines measured in the present study. In this study, the analyzed factors suggest that the dressing of chitosan with ABAME had a regenerating effect in mice, minimizing the parameters of the inflammatory process and progressing healing. It suggests the development of observational studies of the long-term effects of dressings, in addition to other analyzes that can verify that they do not change over time, as well as evaluating their effectiveness in scar tissue.

2
  • THAIS DO NASCIMENTO PINHEIRO
  • SÍNTESE DE NOVOS NITRÓXIDOS CÍCLICOS COM POTENCIAL ATIVIDADE ANTIOXIDANTE CONTRA SARS-CoV-2 (COVID-19)
  • Orientador : ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JÉSSICA VENÂNCIA FARIA RANGEL
  • ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • Data: 31/01/2023

  • Mostrar Resumo
  • Os nitróxidos são radicais livres que tem recebido devida atenção em função de seu potencial emprego como agente terapêutico, em função de suas propriedades antioxidantes e suas baixas toxicidades. Os nitróxidos reagem com diversos oxidantes e redutores biológicos enquanto estão sendo reciclados na forma do cátion oxamônio e derivados de hidroxilamina. Por estas razões, devido a resultados promissores em outros estudos com nitroxidos, o objetivo é a síntese de derivados nitróxidos para serem testados como antioxidantes in vitro e posteriormente avaliados como candidatos para o tratamento de COVID-19 por meio de culturas de células Vero infectadas. Este trabalho relata o esquema de síntese e identificação dos compostos: 3,5-dibromo-2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-ona (rendimento 97%), 2,2,5,5-tetrametil2,5-dihidro-1H-pirrolina-3-carboxiamida (rendimento 80%), 2,2,5,5-tetrametil-2,5- dihidro-1H-pirrolina-3-carboxiamida-1-oxi (rendimento de 42%), ácido 2,2,5,5- tetrametil-2,5-dihidro-1H-pirrolina-3-carboxiamida-1-oxi (rendimento 97%), 3- (hidroximetil)-2,2,5,5-tetrametil-2,5-dihidro-1H-pirrolina-1-oxi (rendimento 36%), benzenossulfonato de (1-hidroxi-2,2,5,5-tetrametil-2,5-dihidro-1H-pirrolina-3-il)metil (rendimento 26%), 3-(azidometil)-2,2,5,5-tetrametil-2,5-dihidro-1H-pirrolina-1-oxi (rendimento 65%), 3,3’-((1,3-fenilenobis(1H-1,2,3-triazol-4,1- diil))bis(metileno))bis(2,2,5,5-tetrametil-2,5-dihidro-1H-pirrol-1-oxi) (Rendimento 68%). A caracterização estrutural desses antioxidantes foi realizada através de espectroscopia de infravermelho e as reações se mostraram bastante promissoras com a obtenção do produto final planejado.

  • Mostrar Abstract
  • Nitroxides are free radicals that have received due attention due to their potential employment as a therapeutic agent, due to their antioxidant properties and low toxicities. Nitroxides react with various oxidants and biological reducers while being recycled in the form of oxal cation and hydroxylamine derivatives. For these reasons, due to promising results in other nitroxide studies, the objective is the synthesis of nitroxide derivatives to be tested as in vitro antioxidants and later evaluated as candidates for covid-19 treatment through infected Vero cell cultures. This work reports the synthesis and identification scheme of compounds: 3,5-dibromo-2,2,6,6- tetramethylpiperidin-4-none (97% yield), 2,2,5,5-tetramethyl-2,5-dihydro-1H-pyrrole-3- carboxyamide (80% yield), 1-oxi-2,2,5,5-tetramethyl-2,5-dihydro-1H-pyrrole-3- carboxiamide (42% yield), 1-oxi-2,2,5,5-tetramethyl-2,5-dihydro-1H-pyrrole-3- carboxylic acid (97% yield), 3-(hydroxymethil)-2,2,5,5-tetramethil-2,5-dihydro-1Hpyrrol-1-oxi (36% yield), (1-oxi-2,2,5,5-tetramethyl-2,5-dihydro-1H-pyrrol-3-yl) methyl benzensulfonate (26% yield), 3-(azidomethyl)-2,2,5,5-tetramethyl-2,5-dihydro-1Hpyrrol-1-oxi (65% yield), 3,3'-(((1,3-phenylenebis(1H-1,2,3-triazole-4,1-diyl))bis (methylene))bis(2,2,5,5-tetramethyl-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-oxi) (68% yield). The structural characterization of these antioxidants was performed through infrared spectroscopy and the reactions were quite promising by obtaining the planned final product.

3
  • PALOMA KAROLINE DA SILVA BRASIL
  • PLANEJAMENTO DE NOVOS COMPOSTOS DERIVADOS DA
    TEIXOBACTINA POR SCAFFOLD HOPPING
  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • RICARDO OLIMPIO DE MOURA
  • Data: 09/03/2023

  • Mostrar Resumo
  • A resistência bacteriana é um dos assuntos mais discutidos nos últimos anos, em decorrência do uso irracional de antimicrobianos, tornando as “superbactérias” um dos principais assuntos discutidos em diversos países. A Teixobactina foi descoberta em 2015, pelo grupo de pesquisa de Lewis, a qual apresentou atividade antimicrobiana tornando-a uma substância promissora com potencial uso clínico, no entanto, apresenta desafios em sua síntese, onde vários análogos já foram propostos com o intuito de viabilizar a sua utilização comercial. Neste cenário, as ferramentas virtuais são muito utilizadas pela indústria farmacêutica na descoberta de medicamentos e, no presente trabalho, ferramentas como dinâmica molecular, scaffold hopping e o docking molecular, foram empregadas para obter um análogo com interação efetiva com o Lipídeo II. Desta forma, o objetivo deste estudo constituiu-se em construir e estudar o modo de interação da Teixobactina e utilizar esta informação para planejar análogos mais simples. A substituição da estrutura química central por outro padrão molecular foi preconizada. Realizamos uma busca de dados e estudos os quais abordassem os grupos químicos mais importantes para a molécula da Teixobactina e realizamos o docking molecular para obter os melhores complexos de interação entre o ligante e o receptor alvo. A partir dos melhores complexos, realizamos uma simulação de Dinâmica Molecular, a fim de obter o maior número de reproduções. A partir disso, definimos o esqueleto estrutural mais representativo para atividade biológica e realizamos substituições de grupos funcionais toleráveis pela molécula. Um novo docking molecular foi realizado para identificar os complexos de análogos com interações relevantes no receptor alvo. Obtivemos 17 análogos, os quais demonstraram uma boa interação com o lipídeo II comparado a molécula original da Teixobactina.

  • Mostrar Abstract
  • Bacterial resistance is one of the most discussed issues in recent years, due to the irrational use of
    antimicrobials, making “superbugs” one of the main issues discussed in several countries.
    Teixobactin was discovered in 2015 by a group of researchers from NovaBiotic Pharmaceuticals,
    which showed antimicrobial activity making it a promising substance with potential for clinical
    use, however, it presents challenges in its synthesis, where several prototypes have already been
    proposed with the intuitive to enable its commercial use. In this scenario, virtual tools are widely
    used by the pharmaceutical industry in drug discovery and, in the present work, tools such as
    molecular dynamics, scaffold hopping and molecular docking were used to obtain a specific with
    effective interaction with Lipid II. Thus, the objective of this study was to build and study the
    mode of interaction of Teixobactin and use this information to protect the simplest sense.
    Replacement of the central chemical structure by another molecular pattern was advocated. We
    performed a search for data and studies which addressed the most important chemical groups for
    the Teixobactin molecule and performed molecular docking to obtain the best interaction
    complexes between the ligand and the target receptor. From the best complexes, we performed a
    Molecular Dynamics simulation in order to obtain the highest number of reproductions. From
    this, we define the most representative structural skeleton for the biological activity and carry out
    tolerable functional group substitutions for the molecule. A new molecular docking was
    performed to identify receptor complexes with relevant in the target receptor. We obtained 17
    typical ones, which we felt had a good interaction with lipid II compared to the original
    Teixobactin molecule.
4
  • TATIANA MOURA VASCONCELOS HOLANDA
  • CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA, CITOTOXICIDADE E POTENCIAL BIOATIVO DAS MANTEIGAS DE BATI (Ouratea sp.) E UCUUBA (Virola surinamensis)
  • Orientador : FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • KATIA NICOLAU MATSUI
  • SÉRGIO DANTAS DE OLIVEIRA JÚNIOR
  • Data: 31/03/2023

  • Mostrar Resumo
  • A busca de novas fontes vegetais de óleos e gorduras é de grande interesse para diversos setores industriais. As manteigas extraídas das sementes dos frutos do bati (Ochnaceae sp.) e da ucuuba (Virola surinamensis) são amplamente consumidas pela população local. No entanto, suas características físico-químicas, propriedades bioativas e citotoxicidade são pouco estudadas. Diante do exposto, o objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades físico-químicas, bioativas e a citotoxicidade das manteigas de bati e ucuuba. Inicialmente, realizou-se a determinação do perfil dos ácidos graxos por cromatografia gasosa acoplada a espectroscopia de massas (CG-MS) e a caracterização físico-química das amostras. Além disso, as amostras foram analisadas por espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN 1H). A atividade antioxidante foi avaliada pela captura dos radicais DPPH (2,2-difenil-1- picril-hidrazil) e ABTS (2,2´-azinobis 3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico), o perfil dos componentes fenólicos totais pelo método Folin-Ciocalteau e a atividade citotóxica através do ensaio colorimétrico do MTT ([3-(4,5-dimetiltiazol- -2yl) -2,5-difenil brometo de tetrazolina]). Além disso, as atividades antibacteriana e antidiabética in vitro foram determinadas. Quanto ao perfil lipídico e às características físico-químicas, a manteiga de bati apresentou 66,06% de ácidos graxos insaturados, com ácido linoleico em maior proporção (45,36%). Na manteiga de ucuuba, observou-se maior percentual de ácidos graxos saturados (85,75%), com destaque para o ácido láurico (37,80%). A manteiga de bati, por consequência, apresentou índice de iodo mais elevado (23,72 cg I2.g-1) que a de ucuuba (5,33 cg I2.g-1). A manteiga de bati apresentou a CFT de 76,57 mg EAG.kg-1 e a manteiga de ucuuba de 76,25 mg EAG.kg-1. A fração metanólica da manteiga de ucuuba obteve destaque na capacidade antioxidante in vitro no ensaio de captura do radical ABTS, apresentando um IC50 (concentração em que 50% dos radicais foram inibidos) de 2,58 mg. mL-1. Além disso, as duas manteigas e suas respectivas frações metanólicas e seus precipitados insolúveis não apresentaram atividade citotóxica para as linhagens celulares CHO-K1 (células de ovário de hamster chinês) e HepG2 (linhagem de células de hepatocarcinoma humano), com viabilidade celular maior que 70% em todas as amostras. As manteigas de bati e ucuuba não apresentaram ação inibitória sobre o crescimento de Staphylococcus aureus, Burkholderia cepacia e Burkholderia multivorans nas concentrações de 0,08 mg. mL-1 a 5,0 mg. mL-1. Por fim, as amostras apresentaran atividade antidiabética in vitro, com inibição da atividade da α-amilase de 73,83 ± 2,09% para a manteiga de bati e 51,05 ± 1,43% para a de ucuuba. Portanto, os resultados obtidos mostram o potencial das manteigas de bati e ucuuba para aplicações na indústria de alimentos, cosméticos e farmacêutica.

  • Mostrar Abstract
  • The search for new vegetable sources of oils and fats is of great interest to several industrial sectors. The butter extracted from the seeds of bati (Ochnaceae sp.) and ucuuba (Virola surinamensis) fruits are widely consumed by the local population. However, its physicochemical characteristics, bioactive properties and cytotoxicity are poorly studied. Given the above, the objective of this study was to evaluate the physical-chemical, bioactive properties and cytotoxicity of bati and ucuuba butters. Initially, the fatty acid profile was determined by gas chromatography coupled to mass spectroscopy (GC-MS) and the physical-chemical characterization of the samples. In addition, the samples were analyzed by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and hydrogen nuclear magnetic resonance (1H NMR). The antioxidant activity was evaluated by capturing DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) and ABTS (2,2'-azinobis 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radicals, the profile of total phenolic components by the method Folin-Ciocalteau and the cytotoxic activity through the MTT colorimetric assay ([3-(4,5-dimethylthiazol--2yl)-2,5-diphenyl tetrazoline bromide]). Furthermore, in vitro antibacterial and antidiabetic activities were determined. As for the lipid profile and physical-chemical characteristics, bati butter had 66.06% of unsaturated fatty acids, with linoleic acid in greater proportion (45.36%). In ucuuba butter, a higher percentage of saturated fatty acids (85.75%) was observed, especially lauric acid (37.80%). Bati butter, therefore, had a higher iodine index (23.72 cg I2.g-1) than ucuuba butter (5.33 cg I2.g-1). Bati butter had a CFT of 76.57 mg EAG.kg-1 and ucuuba butter had a 76.25 mg EAG.kg-1. The methanolic fraction of ucuuba butter was highlighted in the in vitro antioxidant capacity in the ABTS radical capture assay, presenting an IC50 (concentration at which 50% of the radicals were inhibited) of 2.58 mg.mL-1. In addition, the two butters and their respective methanolic fractions and their insoluble precipitates did not show cytotoxic activity for CHO-K1 cell lines (Chinese hamster ovary cells) and HepG2 (Human hepatocarcinoma cell line), with cell viability greater than 70% on all samples. Bati and ucuuba butters did not inhibit the growth of Staphylococcus aureus, Burkholderia cepacia and Burkholderia multivorans at concentrations of 0.08 mg. mL-1 to 5.0 mg. mL-1. Finally, the samples showed in vitro antidiabetic activity, with inhibition of α-amylase activity of 73.83 ± 2.09% for bati butter and 51.05 ± 1.43% for ucuuba butter. Therefore, the results obtained show the potential of bati and ucuuba butters for applications in the food, cosmetics and pharmaceutical industries.

5
  • NAIANY SILVA DE MEDEIROS
  • AVALIAÇÃO DO POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO DE BACTÉRIAS LÁTICAS PARA PRODUÇÃO DE BIOEMULSIFICANTES, BACTERIOCINAS E LIPASE
  • Orientador : FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • CATHERINE TEIXEIRA DE CARVALHO
  • NATHALIA KELLY DE ARAUJO
  • Data: 09/06/2023

  • Mostrar Resumo
  • As bactérias láticas (BALs) são um grupo diverso de microrganismos que consistem em
    bastonetes ou cocos Gram-positivos, geralmente considerados microrganismos seguros
    (GRAS). Durante a fermentação, as BALs produzem metabólitos que possuem atividades
    antioxidante, antidiabética, antimicrobiana e emulsificante. Portanto, o presente estudo teve por
    objetivo avaliar o potencial biotecnológico de bactérias lácticas quanto a produção de
    biossurfactantes/bioemulsificantes, lipase e bacteriocinas. Inicialmente, realizou-se a triagem
    de quatro linhagens de BALs quanto a capacidade de produzir
    biossurfactantes/bioemulsificantes por Lactobacillus acidophilus NRRL B-4495,
    Lactiplantibacillus plantarum NRRL B-4496, Lacticaseibacillus rhamnosus EM1107 e
    Lacticaseibacillus paracasei Shirota. A linhagem de L. paracasei foi selecionada para o estudo
    das condições de produção de biossurfactantes/bioemulsificantes. Em seguida, um
    delineamento composto central rotacional (DCCR) 22 foi realizado para avaliar a influência da
    concentração de glicerol e pH inicial sobre a densidade ótica a 600 nm (DO600 nm) e índice de
    emulsificação após 24h (IE24%). Os sobrenadantes do cultivo de L. paracasei foram testados
    quanto a atividade antimicrobiana in vitro (contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli,
    Burkholderia cepacia e Burkholderia multivorans), atividade antioxidante in vitro, atividade
    antidiabética in vitro e foram avaliados quanto a atividade da lipase. Além disso, um DCCR 23
    foi realizado para avaliar a influência da concentração de lactose, peptona e pH inicial na
    produção de bacteriocinas. Os resultados do primeiro DCCR mostraram que a concentração de
    glicerol e pH na faixa estudada não interferiram na DO600nm. No que diz respeito ao IE24%, a
    resposta máxima foi obtida com 4,8% de glicerol e pH na faixa de 6 a 7. O teste de atividade
    antimicrobiana demonstrou que os sobrenadantes testados não exibiram atividade frente às
    cepas testadas. Foi observada atividade antioxidante notavelmente alta tanto para os
    sobrenadantes testados quanto para o controle (MRS), indicando a possibilidade da presença de
    algum interferente no meio de cultivo. Além disso, foi observada atividade inibitória para
    amiloglucosidase (20,7% e 23,9%). Foi constatada atividade lipolítica nos sobrenadantes (16,12
    e 19,00 U/mL). Também foi verificado que a variável concentração de peptona, lactose e pH
    influenciaram positivamente na produção de bacteriocinas por L. paracasei. Conclui-se,
    portanto, que L. paracasei pode ser uma fonte viável de metabólitos com atividades
    antidiabética, antimicrobiana (bacteriocinas), bioemulsificantes e lipolíticas.

  • Mostrar Abstract
  • Lactic acid bacteria (LAB) are a diverse group of microorganisms consisting of Gram-positive
    rods or cocci, generally recognized as safe microorganisms (GRAS). During fermentation, LAB
    produces lactic acid as the main product and several bioactive metabolites, which have
    antioxidant, antidiabetic, antimicrobial, and emulsifying activities. Therefore, the present study
    aims to evaluate the biotechnological potential of Lacticaseibacillus paracasei regarding the
    production of biosurfactants/bioemulsifiers, lipase and bacteriocins. Initially, four strains of
    LAB were screened for their ability to produce biosurfactants/bioemulsifiers: Lactobacillus
    acidophilus NRRL B-4495, Lactiplantibacillus plantarum NRRL B-4496, Lacticaseibacillus
    rhamnosus EM1107 and Lacticaseibacillus paracasei Shirota. The strain L. paracasei was
    selected to study the conditions for the production of biosurfactants/bioemulsifiers. Then, a
    central rotational composite design (DCCR) 22 was performed to evaluate the influence of
    glycerol concentration and initial pH on optical density at 600 nm (DO600 nm) and emulsification
    index after 24h (IE24%). Culture supernatants from L. paracasei were evaluated for in vitro
    antimicrobial activity (against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Burkholderia cepacia
    and Burkholderia multivorans), in vitro antioxidant activity, in vitro antidiabetic activity, and
    were also evaluated for the presence of lipolytic activity. In addition, a DCCR 23 was performed
    to evaluate the influence of lactose, peptone concentration and initial pH on bacteriocin
    production. The results showed that glycerol concentration and pH in the studied range did not
    interfere on optical density at 600 nm (DO600 nm). Regarding IE24, the maximum response was
    obtained using 4.8% of glycerol and pH between 6 and 7. The antimicrobial activity test showed
    that the supernatants did not show activity against the tested strains. Remarkably high
    antioxidant activity was observed for both supernatants and the control (MRS), indicating the
    possibility of the presence of some interference in the culture medium. In addition, inhibitory
    activity for amyloglucosidase (20.7% to 23.9%) was observed. The presence of lipolytic
    activity was verified in the supernatants (16,12 and 19,00 U/mL). It was also verified that the
    variables peptone concentration, lactose, and pH positively influenced the production of
    bacteriocins by L. paracasei. Therefore, L. paracasei can be suggested as a viable source of
    metabolites with antidiabetic, antimicrobial (bacteriocins), bioemulsifying, and lipolytic
    activities
6
  • CHRISTIANE CARLOS ARAÚJO DE NEGREIROS
  • COMPETÊNCIA VETORIAL DE TRIATOMA BRASILIENSIS E TRIATOMA PSEUDOMACULATA (HEMIPTERA: REDUVIIDAE) INFECTADOS COM DIFERENTES DTUS (DISCRETE TYPING UNITS) DE TRYPANOSOMA CRUZI

     

  • Orientador : LUCIA MARIA DA CUNHA GALVAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANDRESSA NORONHA BARBOSA DA SILVA
  • LUCIA MARIA DA CUNHA GALVAO
  • NATHALIE DE SENA PEREIRA
  • VAGNER JOSÉ MENDONÇA
  • Data: 15/06/2023

  • Mostrar Resumo
  • O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos biológicos de Triatoma brasiliensis e Triatoma pseudomaculata infectados experimentalmente por diferentes DTUs (Discrete Typing Units) de Trypanosoma cruzi. Ninfas de 3º, 4º e 5º estádios de T. brasiliensis (n=120) e T. pseudomaculata (n=120) foram alimentadas em camundongos infectados com um isolado de T. cruzi ou mistura de isolados do parasito. Um grupo de insetos não infectado foi utilizado como controle. A infecção dos triatomíneos por T. cruzi foi avaliada diariamente e individualmente por análise das excretas até 90 dias após a infecção. Os aspectos biológicos dos triatomíneos como, excreção, ocorrência de ecdise e mortalidade foram avaliados diariamente. O volume de sangue ingerido (μL) e o peso (mg) dos insetos foi verificado 4h após o repasto sanguíneo a cada 15 ou 30 dias. A infecção por T. cruzi foi detectada em todos os grupos de T. brasiliensis, enquanto em T. pseudomaculata foi observada apenas no grupo de infecção única pelo isolado RN02 e nos grupos de infecção mista RN02+RN23 e RN02+RN23+CL-Brener. O percentual médio de infecção em todos os grupos de T. brasiliensis foi de 20% e 22%, em insetos que realizaram repasto sanguíneo em intervalos de 15 e 30 dias, respectivamente. Para T. pseudomaculata o percentual médio de infecção foi de 18% (alimentação a cada 15 dias) e 8% (alimentação a cada 30 dias). O volume de sangue ingerido pelos grupos de T. brasiliensis e T. pseudomaculata com infecção mista foi inferior quando comparado aos grupos com infecção única e o controle. A ocorrência de ecdise foi mais elevada nos grupos de T. brasiliensis com infecção única e no grupo controle de T. pseudomaculata. A mortalidade foi mais elevada nos grupos de T. pseudomaculata com infecção mista, ao passo que não foi observada diferença significativa nos grupos de T. brasiliensis. A excreção foi mais elevada no grupo controle de T. pseudomaculata. A ocorrência de cleptohematofagia em T. brasiliensis foi descrita neste estudo de forma inédita. Esses dados evidenciaram que essas duas espécies são vetores potencialmente eficazes na transmissão de T. cruzi, sendo T. brasiliensis mais susceptível à infecção. Portanto, é fundamental a realização de atividades de controle vetorial de forma contínua e eficiente para reduzir o risco de transmissão de T. cruzi nas áreas endêmicas de ocorrência desses vetores.


  • Mostrar Abstract
  • This study aimed to evaluate the biological aspects of Triatoma brasiliensis and Triatoma pseudomaculata experimentally infected by different DTUs (Discrete Typing Units) of Trypanosoma cruzi. Third, fourth, and fifth instar nymphs of T. brasiliensis (n=120) and T. pseudomaculata (n=120) were fed on mice infected with one or more T. cruzi isolates. A group of uninfected insects was used as control. Infection of triatomines by T. cruzi was evaluated daily and individually by analysis of excreta up to 90 days after infection. Biological aspects of triatomines such as excretion, occurrence of ecdysis and mortality were evaluated daily. The volume of ingested blood (μL) and the weight (mg) of the insects was verified 4h after the blood meal, which occurred every 15 or 30 days. T. cruzi infection was detected in all groups of T. brasiliensis, whereas in T. pseudomaculata the infection was only observed in the group with single infection by the RN02 isolate and in the groups with mixed infection RN02+RN23 and RN02+RN23+CL-Brener. The average percentage of infection in all groups of T. brasiliensis was 20% and 22%, in insects that performed blood meals at intervals of 15 and 30 days, respectively. For T. pseudomaculata the average percentage of infection was 18% (feeding every 15 days) and 8% (feeding every 30 days). The volume of ingested blood by the groups of T. brasiliensis and T. pseudomaculata with mixed infection was lower when compared to the groups with single infection and the control. The occurrence of ecdysis was higher in the groups of T. brasiliensis with single infection and in the control group of T. pseudomaculata. Mortality was higher in T. pseudomaculata groups with mixed infection, whereas no significant difference was observed in T. brasiliensis groups. Excretion was higher in the T. pseudomaculata control group. The occurrence of kleptohematophagy in T. brasiliensis was described for the first time. These data showed that these two species are potentially effective vectors in the transmission of T. cruzi, with T. brasiliensis being more susceptible to infection. Therefore, carrying out vector control activities continuously and efficiently is essential to reduce the risk of T. cruzi transmission in endemic areas where these vectors occur.

7
  • RAFAEL DUARTE LIMA
  • PERFIL IMUNOFENOTÍPICO DAS DOENÇAS LINFOPROLIFERATIVAS CRÔNICAS NO RIO GRANDE DO NORTE
  • Orientador : GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • GUSTAVO HENRIQUE DE MEDEIROS OLIVEIRA
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • Data: 26/06/2023

  • Mostrar Resumo
  • As Doenças Linfoproliferativas Crônicas (DLPC) constituem um grupo de neoplasias linfáticas que se caracterizam pela proliferação de linfócitos maduros neoplásicos. A Imunofenotipagem por Citometria de Fluxo (ICF) é uma prática de rotina no diagnóstico diferencial desses tumores, contribuindo para maior precisão. O objetivo foi demonstrar os perfis imunofenotípicos diagnóstico de pacientes portadores de DLPC no Rio Grande do Norte (RN); Demonstrar a aplicabilidade de painel específico para o diagnóstico de pacientes com Mieloma Múltiplo; Determinar a monoclonalidade das DLPC-B; Implementar base de dados para pesquisas clínicas. Pacientes (n = 927) com DLPC foram investigados pela CF. Além disso, foram reunidas outras informações dos pacientes, como idade, sexo e dados hematológicos. Os resultados mostraram que 85,7% dos casos eram DLPC-B e 14,2%, DLPC-T/NK. A distribuição das DLPC-B foi: 487 Leucemia Linfocítica Crônica; 18 Leucemia Prolinfocítica B; 25 Leucemia de Células Vilosas; 6 Linfoma Folicular; 4 Linfoma Esplênico com Linfócitos Vilosos; 33 Linfoma de Células do Manto; 4 Macroglobulinemia de Waldenstron; 69 Mieloma Múltiplo; 14 Leucemia de Células Plasmáticas; 11 Linfoma de Burkitt e 117 LNH- Leucemizado . A classificação DLPC de T/NK foi: 12 Leucemia de Grandes Linfócitos Granulares; 14 Leucemia Prolinfocítica T; 18 Leucemia de Células T do Adulto; 20 Síndrome de Sézary e 24 Linfoma Periférico T. Os dados demonstram que a imunofenotipagem é uma técnica confiável e segura no esclarecimento diagnóstico dos pacientes portadores de DLPC. Foi possível a detecção de monoclonalidade nas DLPC-B. O diagnóstico de mieloma múltiplo se beneficia da aplicação do painel específico.

  • Mostrar Abstract
  • Chronic Lymphoproliferative Disorders (CLPD) constitute a group of lymphatic neoplasms characterized by the proliferation of mature neoplastic lymphocytes. Flow cytometry immunophenotyping (FCIP) is a routine practice in the differential diagnosis of these tumors, contributing to greater accuracy. The aim of this study was to demonstrate the immunophenotypic diagnostic profiles of patients with CLPD in Rio Grande do Norte (RN); demonstrate the applicability of a specific panel for the diagnosis of Multiple Myeloma patients; determine the monoclonality of CLPD-B; and implement a database for clinical research. Patients (n = 927) with CLPD were investigated using FCIP. Additionally, other patient information such as age, gender, and hematological data were collected. The results showed that 85.7% of the cases were CLPD-B and 14.2% were CLPD-T/NK. The distribution of CLPD-B cases was as follows: 487 Chronic Lymphocytic Leukemia; 18 B-Cell Prolymphocytic Leukemia; 25 Hairy Cell Leukemia; 6 Follicular Lymphoma; 4 Splenic Lymphoma with Villous Lymphocytes; 33 Mantle Cell Lymphoma; 4 Waldenstrom's Macroglobulinemia; 69 Multiple Myeloma; 14 Plasma Cell Leukemia; 11 Burkitt Lymphoma; and 117 Leukemic Non-Hodgkin Lymphoma. The classification of CLPD-T/NK was as follows: 12 Large Granular Lymphocytic Leukemia; 14 T-Cell Prolymphocytic Leukemia; 18 Adult T-Cell Leukemia; 20 Sézary Syndrome; and 24 Peripheral T-Cell Lymphoma. The data demonstrate that immunophenotyping is a reliable and safe technique for the diagnostic clarification of patients with CLPD. Monoclonality was successfully detected in CLPD-B cases. The diagnosis of multiple myeloma benefits from the application of the specific panel.

8
  • LARISSA FERREIRA RIBEIRO DE OLIVEIRA
  • ESTUDO DO POTENCIAL BIOATIVO DAS SEMENTES DE CAJÁ (Spondias mombin L.) E SUA VEICULAÇÃO SIMULTÂNEA COM PROBIÓTICOS
  • Orientador : FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • MARCIA REGINA DA SILVA PEDRINI
  • ESTER RIBEIRO DE ANDRADE
  • Data: 30/06/2023

  • Mostrar Resumo
  • A associação de probióticos e extratos vegetais é uma estratégia promissora para entrega simultânea de compostos funcionais, apresentando inúmeros benefícios à saúde. Nese contexto, o presente estudo objetivou avaliar o potencial bioativo das sementes do cajá (Spondias mombin L.) e sua veiculação simultânea com probióticos, utilizando a fermentação e a coencapsulação como estratégias. Inicialmente, a semente do cajá foi submetida à caracterização físico-química, e avaliada como fonte de compostos fenólicos em diferentes soluções extratoras. O etanol 50% favoreceu maior concentração de fenólicos (293,81 ± 8,50 mg EAG/L) e açúcares totais (21,03 ± 0,34 g/L). Em seguida, este extrato foi avaliado quanto a capacidade de multiplicação de Lactobacillus acidophilus NRRL B-4495 e Lactiplantibacillus plantarum NRRL B-4496. Durante 48 h de fermentação, as populações probióticas apresentaram queda de 1,6 a 2,2 ciclos logarítmicos e mantiveram o conteúdo fenólico total. Com o objetivo de aumentar a estabilidade do produto, L. acidophilus e o extrato da semente do cajá foram coencapsulados por atomização utilizando maltodextrina isoladamente (EPM) ou associada à pectina cítrica (EPMP). O extrato e os microencapsulados foram avaliados quanto às características físico-químicas, atividades antioxidante e antibacteriana. Além disso, a sobrevivência probiótica em condições gastrointestinais simuladas foi investigada. Os microencapsulados EPM e EPMP apresentaram diâmetros médios de 16,37 ± 5,42 μm e 15,18 ± 2,52 μm e eficiência de encapsulação acima de 98%. O EPM apresentou maior concentração de fenólicos totais (121,40 ± 1,22 mg EAG/g) enquanto EPMP apresentou atividades antioxidantes mais elevadas. Em relação atividade antibacteriana, o extrato não apresentou inibição nas concentrações testadas, EPMP apresentou concentração inibitória mínima (CIM) de 250 μg/mL para S. aureus e 500 μg/mL para E. coli enquanto EPM apresentou CIM de 250 μg/mL para S. aureus e E. coli. A taxa de sobrevivência dos encapsulados em condições gastrointestinais simuladas foi maior no líquido gástrico. Diante do exposto, conclui-se que atomização foi uma estratégia viável para coencapsulação de probióticos e extrato da semente de cajá, potencializando as suas atividades biológicas e contribuindo para a diversificação dos produtos probióticos disponíveis no mercado.


  • Mostrar Abstract
  • The association of probiotics and plant extracts is a promising strategy for the simultaneous delivery of functional compounds, conferring numerous health benefits. In this context, the present study aimed to evaluate the bioactive potential of cajá seeds (Spondias mombin L.) and their simultaneous delivery with probiotics, using fermentation and co-encapsulation as strategies. Initially, the cajá seeds were subjected to physical-chemical characterization and evaluated as a source of phenolic compounds in different extracting solutions. Ethanol 50% favored a higher concentration of phenolics (293.81 ± 8.50 mg GAE/L) and total sugars (21.03 ± 0.34 g/L). Then, this extract was evaluated for the multiplication capacity of Lactobacillus acidophilus NRRL B-4495 and Lactiplantibacillus plantarum NRRL B-4496. During 48h of fernentation, probiotic populations descreased by 1.6 to 2.2 logarithimic cycles and maintained the phenolic content. To increase the stability of the product, L. acidophilus and the cajá seeds extract were co-encapsulated by spray-drying using maltodextrin isolated (EPM) or associated with citrus pectin (EPMP). The extract and microcapsules were evaluated for physicochemical characteristics and antioxidant and antibacterial activities. Furthermore, probiotic survival under simulated gastrointestinal conditions was investigated. The EPM and EPMP microcapsules presented mean diameters of 16.37 ± 5.42 μm and 15.18 ± 2.52 μm and encapsulation efficiency above 98%. EPM showed a higher concentration of total phenolics (121.40 ± 1.22 mg GAE/g) while EPMP showed higher antioxidant activities. Regarding antibacterial activity, the extract did not show inhibition at the tested concentrations, EPMP showed a minimum inhibitory concentration (MIC) of 250 μg/mL for S. aureus and 500 μg/mL for E. coli, while EPM showed a MIC of 250 μg/mL for S. aureus and E. coli. The survival rate of encapsulated under simulated gastrointestinal conditions was higher in gastric fluid. Overall, spray-drying was a viable strategy for the co-encapsulation of probiotics and cajá seeds extract, enhancing their biological activities and contributing to the diversification of probiotic products available on the market.

9
  • FÁBIA RAFAELLA SILVA ALVES
  • EXTRAÇÃO DE COMPOSTOS FENÓLICOS DO RESÍDUO DE CAJU (Anacardium occidentale L.) VISANDO APLICAÇÃO COSMÉTICA
  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • CARLOS EDUARDO DE ARAÚJO PADILHA
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • FRANCISCO HUMBERTO XAVIER JUNIOR
  • Data: 31/07/2023

  • Mostrar Resumo
  • O resíduo de caju (Anacardium occidentale L.) é um subproduto agroindustrial com uma composição rica em celulose, hemicelulose, lignina, além de importante fonte de compostos fenólicos, o que abre possibilidades para geração de produtos de valor agregado. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo obter um extrato rico em compostos fenólicos a partir do resíduo de caju (RC), empregando extração assistida por enzima (EAE) como método sustentável para aplicação cosmética. O RC foi submetido aos pré-tratamentos de água quente líquida (AQL) e explosão de vapor (EXP), e caracterizado por FTIR, DRX e composição lignocelulósica. Em seguida, a EAE do RC pré-tratado foi avaliada usando coquetel celulolítico. Os efeitos da carga enzimática, carga de sólidos e tempo de incubação foram investigados e otimizados através do delineamento composto central rotacional 23. Os extratos obtidos foram avaliados quanto à composição fenólica, atividade antioxidante in vitro, atividade antioxidante celular, teor de açúcares e citotoxicidade. Os resultados demonstraram que os pré-tratamentos modificaram a estrutura do resíduo, pela remoção de frações cristalinas, tornando o material mais acessível às enzimas. Ademais, o pré-tratamento por AQL associado ao coquetel enzimático favoreceu a maior liberação de fenólicos da biomassa lignocelulósica (75,13 ± 3,5 mg EAG/L) e maiores atividades antioxidantes, correspondentes a 72,81 ± 0,9% para o sequestro do radical DPPH e 241,04 ± 1,7 μM EQ Trolox/L para sequestro do radical ABTS. O planejamento experimental demonstrou que maior tempo de incubação (80 h) e carga de sólidos (8% e 10%) contribuíram para o aumento do teor de compostos fenólicos, obtendo-se, na condição ótima, a concentração de fenólicos de 150,38 ± 10,0 mg EAG/L. Além disso, o extrato de caju demonstrou atividade antioxidante, avaliada por diferentes mecanismos, com capacidade de quelação de ferro, sequestro de radicais DPPH e ABTS apresentando correlação linear com a concentração de sólidos. Os extratos também apresentaram atividade antioxidante celular, correspondendo a 36,03 ± 2,4% de inibição de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs) para o extrato obtido com 8% de sólidos. Esses resultados são importantes indicativos de uma possível aplicação anti-envelhecimento, abrindo perspectivas para formulações futuras. Além disso, o extrato demonstrou ser atóxico, com viabilidade celular maior que 95% em linhagem celular de fibroblastos MRC-5. Portanto, a extração de compostos fenólicos assistida por enzimas a partir de RC mostrou-se viável e exequível, dada a aplicabilidade do método que atende os requisitos de sustentabilidade. Do ponto de vista mercadológico, esta pesquisa contribui para o desenvolvimento de produtos e processos mais eficientes e ambientalmente sustentáveis, otimizando o emprego de recursos para obtenção de substâncias bioativas para o desenvolvimento de novos produtos cosméticos.


  • Mostrar Abstract
  • Cashew apple bagasse (Anacardium occidentale L.) is an agroindustry by-product with a composition rich in cellulose, hemicellulose, and lignin. In addition, cashew residue (CR) to being an important source of phenolic compounds, which opens up possibilities for the generation of value-added products. In this context, the present work aimed to obtain an extract rich in phenolic compounds from CR, using enzyme-assisted extraction as a sustainable method for cosmetic application. The CR was subjected to liquid hot water (LHW) and steam explosion (SE) pretreatments, and characterized by FTIR, DRX, and lignocellulosic composition. Then, enzyme-assisted extraction (EAE) of pre-treated CR was evaluated using a cellulolytic cocktail. The effects of enzyme load, solids load, and incubation time were investigated and optimized using a rotational central composite design (RCCD) 23. The extracts obtained were evaluated for their phenolic composition, in vitro antioxidant activity, cellular antioxidant activity, sugar content, and cytotoxicity. The results showed that the pretreatments modified the structure of the residue, removing crystalline fractions, and making the material more accessible to enzymes. In addition, the pretreatment by LHW associated with the enzymatic cocktail favored the greater release of phenolics from the lignocellulosic biomass (75,13 ± 3,5 mg GAE/L) and higher antioxidant activities, corresponding to 72.81 ± 0.9% for the kidnapping of the radical DPPH and 241.04 ± 1.7 μM EQ Trolox/L for the kidnapping of the radical ABTS. The experimental design demonstrated that a longer incubation time (80 h) and solid load (8% and 10%) contributed to the increase in the content of phenolic compounds, obtaining, in the best condition, a phenolic concentration of 150.38 ± 10.0 mg GAE/L. Additionally, cashew extract showed antioxidant activity, evaluated by different mechanisms, with iron chelation ability, DPPH and ABTS radical scavenging presenting linear correlation with the concentration of solids. The extracts also showed cellular antioxidant activity, corresponding to 36.03 ± 2.4% of inhibition of Reactive Oxygen Species (ROS) for the extract obtained with 8% solids. These results are important indicators of a possible anti-aging application, opening perspectives for future formulations. Furthermore, the extract proved to be non-toxic, with cell viability greater than 95% in MRC-5 fibroblast cell line. Therefore, enzyme-assisted extraction of phenolic compounds from CR proved to be viable and practicable, given the applicability of the method that meets the sustainability requirements. From a marketing point of view, this research contributes to the development of more efficient products and processes, environmentally sustainable, and optimize the use of resources to obtain bioactive substances for the development of new cosmetic products.

10
  • THAYSE EVELLYN SILVA DO NASCIMENTO
  • CARACTERIZAÇÃO QUÍMICA DOS EXTRATOS DAS FOLHAS DE Licania rigida BENTH E AVALIAÇÃO DE SEUS EFEITOS TERAPÊUTICOS SOBRE A RESPOSTA INFLAMATÓRIA INDUZIDA POR LIPOPOLISSACARÍDEOS
  • Orientador : MARIA DAS GRACAS ALMEIDA THORNTON
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GISELE CUSTODIO DE SOUZA
  • JEFFERSON ROMÁRYO DUARTE DA LUZ
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MARIA DAS GRACAS ALMEIDA THORNTON
  • Data: 18/09/2023

  • Mostrar Resumo
  • A Licania rigida Benth, pertencente à família Chrysobalanaceae e popularmente conhecida como "oiticica", é uma árvore de grande porte de folhagem perene que prevalece na região da caatinga, no semiárido brasileiro. Suas folhas têm sido usadas na medicina tradicional para tratar o Diabetes mellitus e processos inflamatórios. Neste estudo, investigamos as propriedades anti-inflamatórias da Licania rigida Benth como tratamento para processos inflamatórios. Nossas análises envolveram extratos aquosos e hidroalcoólicos das folhas de L. rigida, que foram submetidos à caracterização fitoquímica por meio de Cromatografia Líquida Ultrarrápida acoplada à Espectrometria de Massa (LC-MS/MS). Além disso, avaliamos suas propriedades anti-inflamatórias por meio de modelos de inflamação in vitro e in vivo, usando o Lipopolissacarídeo (LPS) como agente indutor do processo inflamatório.A caracterização fitoquímica revelou a presença significativa de ácido gálico e ácido elágico em ambos os extratos. Além disso, o extrato hidroalcoólico exibiu a presença de isovitexina, ferulato, o aminoácido fenilalanina, feoforbídeo, ácido lático e piridoxina, diferenciando-se assim do extrato aquoso com um perfil fitoquímico mais robusto.Ambos os extratos demonstraram a capacidade de modular a resposta inflamatória tanto in vitro quanto in vivo, reduzindo a secreção de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α, IL-1β e IL-6), inibindo a produção de óxido nítrico (NO) e suprimindo a migração de leucócitos. Este estudo é pioneiro na análise da caracterização dos compostos fitoquímicos das folhas da Licania rigida Benth na literatura.Portanto, com base em nossos dados, esta planta emerge como uma promissora candidata para o desenvolvimento de futuros fitoterápicos destinados ao tratamento e/ou prevenção de doenças inflamatórias.

  • Mostrar Abstract
  • The anti-inflammatory properties of Licania rigida Benth have been evaluated as an alternative drug approach to treating several inflammatory processes. Thereby, in this study, aqueous and hydroalcoholic extracts of L.rigida leaves were analyzed regarding their phytocomposition by Ultra-Fast Liquid Chromatography coupled to a mass spectrometry, and their anti-inflammatory properties were assessed by an in vitro and in vivo inflammation model using Lipopolysaccharide as an inducer of the inflammatory process . The phytochemical profile indicated gallic acid and ellagic acid as an important constituent in both extracts, while isovitexin, ferulate, some bulky amino acids (e.g. phenylalanine), pheophorbide, lactic acid and pyridoxine were detected in hydroalcoholic extracts. The extracts displayed the ability to modulate the in vitro and in vivo inflammatory response by changing the pro-inflammatory (TNF-α, IL-1β, and IL-6) cytokines secretion, also inhibiting the PD-1 secretion and NO production, as well as, inhibiting leukocyte migration. Overall, for the first time, it was characterized by putative compounds from Licania rigida Benth leaves, which can modulate the inflammatory process. Therefore, the data suggests this plant as an option to obtain extracts for phytotherapic formulations to treat and/or prevent chronic diseases.

11
  • TÁSSYO LEANDRO DA SILVA
  • DESENVOLVIMENTO DE FORMULAÇÕES COSMÉTICAS CONTENDO O EXTRATO DE Prosopis juliflora E AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIOXIDANTE E ANTITIROSINASE
  • Orientador : MARCIO FERRARI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JULIANO GERALDO AMARAL
  • MARCIO FERRARI
  • STELLA MARIA ANDRADE GOMES BARRETO
  • Data: 24/11/2023

  • Mostrar Resumo
  • A rica biodiversidade das espécies vegetais no Brasil impulsiona estudos com
    plantas para o desenvolvimento de produtos contendo compostos naturais. Prosopis
    juliflora, conhecida popularmente como algaroba é uma planta trazida do Peru,
    introduziada e disseminou-se pela região semiárida do Nordeste se tornando uma
    espécie invasora na Caatinga. Estudos relatam ações antimicrobiana, antioxidante,
    antimalária, antitumoral, dentre outras, devido à presença de metabólitos
    secundários como os alcaloides, terpenóides, taninos e flavonoides, presentes em
    diferentes partes dessa planta. Alguns destes metabólitos podem ser utilizados pela
    indústria cosmética com diferentes atividades. Este trabalho objetiva avaliar a
    atividade antioxidante e antitirosinase do extrato dos frutos de P. juliflora e
    desenvolver formulações cosméticas para harmonização da coloração da pele. Para
    tanto, o extrato obtido por metodologias previamente padronizadas, foi avaliado
    quanto a concentração de flavonoides totais (1,71 ± 0,26 µg EQ/mg) e 0,21 ± 0,01
    mg EAG/g de compostos fenólicos. Além disso, o extrato em estudo foi caracterizado
    em LC-MS-TOF. A segurança in vitro do extrato foi avaliada por meio de testes de
    citotoxicidade celular e as amostras não apresentaram efeitos citotóxicos. A
    atividade antioxidante in vitro foi avaliada por diferentes metodologias e demostrou
    capacidade de bloquear a cascata de oxidação nas fases de iniciação e propagação.
    A ação antitirosinase foi avaliada por metodologia enzimática e o extrato apresentou
    atividade de inibição de 62,48% ± 2,09 na concentração de 30,00 mg/ml.
    Formulações com Dissodium EDTA, Phenoxyethanol (and) Ethylhexyl Glycerin,
    Distilled Water, Sodium Acrylates Copolymer Lecithin, Polyacrylamide (and) C13-14
    Isoparaffin (and) Laureth-7 e 3,00% do extrato vegetal em estudo foram submetidas
    aos testes de estabilidade preliminar e acelerada. As formulações apresentaram-se
    estáveis nos testes de estabilidade acelerada após o período de 60 dias. Esta
    pesquisa além de contribuir cientificamente demonstrando a utilização de uma planta
    da Caatinga em produtos cosméticos antioxidantes e para homogeneização da
    coloração da pele, também contribuirá para agregar valor à cadeia produtiva de P.
    juliflora, visando valorizar aspectos de responsabilidades ambiental, social e da
    biodiversidade brasileira.

  • Mostrar Abstract
  • The rich biodiversity of plant species in Brazil enables studies for the development of
    products containing natural compounds. Prosopis juliflora, more commonly known as
    mesquite, is a plant that was brought from Peru, and introduced and spread
    throughout the semi-arid region of the northeast, becoming an invasive species in the
    Caatinga. Studies report antimicrobial, antioxidant, antimalarial, and antitumor
    actions among others, due to the presence of secondary metabolites such as
    alkaloids, terpenoids, tannins, and flavonoids, present in different parts of this plant.
    Some of these metabolites can be used by the cosmetic industry for different
    activities. This work aims to evaluate the antioxidant and antityrosinase activity of P.
    juliflora fruit extract and develop cosmetic formulations to harmonize skin color. To
    this end, the extract obtained using previously standardized methodologies was
    evaluated for the concentration of total flavonoids (1.71 ± 0.26 µg EQ/mg) and 0.21 ±
    0.01 mg EAG/g of phenolic compounds. Furthermore, the extract studied was
    characterized by LC-MS-TOF. The in vitro safety of the extract was evaluated using
    cellular cytotoxicity tests and the samples did not show cytotoxic effects. The in vitro
    antioxidant activity was evaluated using different methodologies and demonstrated
    the ability to block the oxidation cascade in the initiation and propagation phases.
    The antityrosinase action was evaluated using enzymatic methodology and the
    extract showed an inhibition activity of 62.48 ± 2.09 at a concentration of 30.00
    mg/ml. Formulations with Disodium EDTA, Phenoxyethanol (and) Ethylhexyl
    Glycerin, Distilled Water, Sodium Acrylates Copolymer Lecithin, Polyacrylamide (and)
    C13-14 Isoparaffin (and) Laureth-7 and 3.00% of the studied plant extract were
    subjected to preliminary and accelerated stability tests. The formulations were stable
    in accelerated stability tests after a period of 60 days. This research, in addition to
    contributing scientifically by demonstrating the use of a Caatinga plant in antioxidant
    cosmetic products and for homogenizing skin color, will also contribute to adding
    value to the P. juliflora production chain, giving value to aspects of Brazilian
    environmental, social and biodiversity responsibilities.
12
  • BRUNA LORENA MENESES MARQUES
  • NANOPARTÍCULAS CONTENDO ÓLEO DE QUINOA (CHENOPODIUM QUINOA WILLD.): SÍNTESE, CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA, AVALIAÇÃO IN VITRO DA TOXICIDADE E DO POTENCIAL BIOATIVO
  • Orientador : CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • LUCIANA GUIMARAES ALVES FILGUEIRA
  • SÉRGIO DANTAS DE OLIVEIRA JÚNIOR
  • THAIS SOUZA PASSOS
  • Data: 15/12/2023

  • Mostrar Resumo
  • O óleo de quinoa (Chenopodium quinoa Willd.) é rico em ácidos graxos insaturados e
    vitamina E. O nanoencapsulamento de componentes lipofílicos têm se mostrado uma
    estratégia promissora para solubilização em matriz aquosa, preservação de
    compostos bioativos, melhoria na incorporação em produtos industrializados,
    aumento da biodisponibilidade e preservação das propriedades bioativas do óleo. O
    objetivo desse trabalho foi encapsular o óleo de quinoa , caracterizar as formulações
    e avaliar o potencial bioativo do óleo e dos encapsulados. As nanoemulsões foram
    produzidas pela técnica de emulsificação óleo/água utilizando gelatina suína (OG) e
    proteína isolada do soro do leite (OPG) como agentes encapsulantes e Tween 20
    como tensoativo. A caracterização das nanopartículas foi realizada por meio de
    técnicas como Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Espalhamento Dinâmico
    de Luz (DLS), Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR),
    Ensaio de Dispersibilidade, Termogravimetria (TG) e Calorimetria Exploratória
    Diferencial (DSC), avaliação do Potencial Zeta em diferentes valores de pH, eficiência
    de encapsulação (%) e dispersibilidade em agua. A citotoxicidade do óleo de quinoa
    livre e nanoencapsulado foi avaliada in vitro utilizando células do ovário de hamster
    chinês (CHO) e células de hepatocarcinoma humano (HepG2), por meio do ensaio
    com brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT). A capacidade
    antioxidante foi determinada pela Capacidade Antioxidante Total (CAT) e pelo teste
    de quelação de íons metálicos. A atividade antibacteriana foi avaliada por meio da
    determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) contra bactérias Gram
    negativas e Gram-positivas. A inibição de enzimas relacionadas ao metabolismo da
    glicose foi investigada por meio de testes de inibição da α-amilase e da
    amiloglucosidase. Além disso, foram realizados testes de viabilidade celular em
    células epiteliais utilizando o ensaio de vermelho neutro com células HaCat e NIHT3T.
    O MEV apresentou as nanopartículas OG e OPG com superfícies lisas e sem
    rachaduras e o DLS analisando o tamanho médio das partículas variando entre 160
    e 264 nm. A eficiência de encapsulamento obtida foi de 74,137% e 83,085% para as
    nanoformulações OPG e OG, respectivamente. A análise de citotoxicidade revelou
    que tanto o óleo de quinoa livre quanto o nanoencapsulado não apresentaram efeito
    citotóxico em células CHO-K1 e HePG2, com uma viabilidade celular superior a 70%.
    Em relação à atividade antioxidante, as nanoformulações apresentaram maior
    atividade que o óleo puro. Não houve inibição do crescimento das bactérias analisadas nesse estudo. As nanoformulações OG e OPG apresentaram capacidade
    de inibir as enzimas α-amilase e amiloglucosidase superior quando comparadas ao
    óleo bruto. Em relação ao ensaio de viabilidade com as células epiteliais as
    nanoformulações apresentaram viabilidade celular acima de 70% na maioria das
    concentrações utilizadas nos testes do vermelho neutro. O óleo de quinoa e a OPG
    quando testadas no teste de MTT mostraram aumento da proliferação celular
    (aproximadamente 50%). Os resultados indicam que a encapsulação do óleo de
    quinoa aumenta as propriedades biológicas do óleo, potencializando o efeito e
    apresentando potencial para uma futura utilização nas indústrias farmacêuticas, de
    alimentos ou cosméticas.

  • Mostrar Abstract
  • Quinoa oil (Chenopodium quinoa Willd.) is rich in unsaturated fatty acids and vitamin
    E. Nanoencapsulation of lipophilic components has emerged as a promising strategy
    for solubilization in an aqueous matrix, preservation of bioactive compounds, improved
    incorporation in processed products, increased bioavailability, and preservation of the
    oil's bioactive properties. The aim of this study was to encapsulate quinoa oil,
    characterize the formulations, and evaluate the bioactive potential of the oil and
    encapsulated forms. Nanoemulsions were produced using an oil-in-water
    emulsification technique, with swine gelatin (OG) and whey protein isolate (OPG) as
    encapsulating agents and Tween 20 as a surfactant. Characterization of the
    nanoparticles was performed using techniques such as Scanning Electron Microscopy
    (SEM), Dynamic Light Scattering (DLS), Fourier Transform Infrared Spectroscopy
    (FTIR), Dispersibility Assay, Thermogravimetry (TG), Differential Scanning
    Calorimetry (DSC), evaluation of Zeta Potential at different pH values, encapsulation
    efficiency (%), and dispersibility in water. The cytotoxicity of free and
    nanoencapsulated quinoa oil was evaluated in vitro using Chinese hamster ovary
    (CHO) and human hepatocarcinoma (HepG2) cells through the 3-(4,5-dimethylthiazol-
    2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The antioxidant capacity was
    determined by Total Antioxidant Capacity (TAC) and metal ion chelation tests.
    Antibacterial activity was assessed by determining the Minimum Inhibitory
    Concentration (MIC) against Gram-negative and Gram-positive bacteria. Inhibition of
    glucose-metabolizing enzymes was investigated using α-amylase and
    amylglucosidase inhibition tests. Additionally, tests of activity in epithelial cells were
    carried out using the Neutral Red assay with HaCat and NIH-3T3 cells. SEM analysis
    showed smooth and crack-free surfaces of the OG and OPG nanoparticles, while DLS
    revealed an average particle size ranging from 160 to 264 nm. The encapsulation
    efficiency was 74.137% for OPG and 83.085% for OG nanoformulations. Cytotoxicity
    analysis revealed that both free and nanoencapsulated quinoa oil did not exhibit
    cytotoxic effects on CHO and HepG2 cells, with a cell viability higher than 70%.
    Regarding antioxidant activity, the nanoformulations showed greater activity than pure
    oil. There was no inhibition of bacterial growth at the tested concentrations for all
    samples. The nanoformulations OG and OPG demonstrated greater capacity to inhibit
    α-amylase and amylglucosidase enzymes compared crude oil. In the viability assay
    with epithelial cells, the nanoformulations showed cell viability above 70% at most tested concentrations in the Neutral Red assay. Quinoa oil and OPG showed
    increased cell proliferation in the MTT assay (approximately 50%). These results
    indicate that encapsulation of quinoa oil enhances its biological properties and shows
    potential for future use in pharmaceutical, food, or cosmetic industries.
13
  • ROSANA KARLA AIRES DE MACEDO
  • ESTUDO SOROLÓGICO EXPLORATÓRIO DA PRESENÇA DE ANTICORPOS ANTI-Leishmania spp. EM GATOS DOMÉSTICOS (Felis catus) NA CIDADE DE NATAL RN
  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GABRIELA SANTOS-GOMES
  • DANILO JOSE AYRES DE MENEZES
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • Sílvia Donato
  • Data: 19/12/2023

  • Mostrar Resumo
  • Em felinos domésticos, o número de doenças causadas por parasitas do gênero Leishmania
    torna-se cada vez mais significativo, embora ainda não esteja claro o papel dos gatos nesse
    ciclo. As leishmanioses são enfermidades causadas pelo protozoário Leishmania spp. que
    acomete os homens, animais selvagens e domésticos, sendo considerada uma zoonose.
    Possui como hospedeiro vertebrados e reservatório os cães domésticos e selvagens, contudo
    há casos relatados em outras espécies, dentre elas os gatos domésticos (Felis catus). O
    parasita é transmitido vetorialmente através do repasto sanguíneo das fêmeas de
    flebotomíneos, prevalecendo no Brasil, a Lutzomya longipalpis. Nos gatos, estudos
    anteriores relataram que esses animais são acometidos por leishmaniose visceral (LV),
    podendo se infectar e desenvolver essa doença manifestando sinais clínicos variáveis. Dessa
    forma, a maioria dos estudos são limitados a cães e poucos são focados na investigação de
    Leishmania sp. em outros mamíferos. O objetivo desta pesquisa consistiu em identificar a
    soroprevalência de anticorpos contra Leishmania spp. por meio do teste ELISA indireto e
    estabelecer um protocolo padronizado de teste ELISA in house utilizando antígenos de
    Leishmania infantum, L. amazonenses, L.brasiliensis e T.cruzi nas amostras sorológicas de
    felinos domésticos provenientes de abrigos localizados em Natal e Parnamirim e do
    programa de mutirão de esterilização conduzido pela UVZ (Unidade de Vigilância e
    Zoonoses) em Natal, localizado no estado do Rio Grande do Norte. Ao todo foram avaliados
    130 felinos domésticos, os quais passaram por exame clínico e coletadas amostras de sangue
    através da veia jugular ou cefálica. Os resultados do teste ELISA in house indicaram que 28
    felinos domésticos (21,54%) apresentaram potencial sororeatividade, 9 felinos domésticos
    (6,92%) demonstraram não sororeatividade e 93 felinos domésticos (71,53%) foram
    sorologicamente inconclusivos para IgG anti-Leishmania infantum. Devido à expansão dos
    casos notificados de leishmaniose em animais no Brasil e tendo em vista a endemicidade da
    região Nordeste, torna-se necessário mais estudos voltados para o aprimoramento e
    padronização de testes ELISA para o diagnóstico de leishmaniose felina. Dessa forma, esse
    estudo pôde demonstrar a participação e a exposição dos felinos de Natal-RN a esta zoonose
    e sua possível participação na cadeia epidemiológica de transmissão da leishmaniose
    visceral.

  • Mostrar Abstract
  • In domestic felines, the number of diseases caused by parasites of the genus Leishmania is
    becoming increasingly significant, although the role of cats in this cycle is still unclear.
    Leishmaniasis is an illness caused by the protozoan Leishmania spp., which affects humans,
    wild and domestic animals, and is considered a zoonosis. Its vertebrate hosts and reservoirs are
    domestic and wild dogs, although cases have been reported in other species, including domestic
    cats (Felis catus). The parasite is vector-borne and transmitted through the blood meal of female
    sandflies, with Lutzomya longipalpis being prevalent in Brazil. Previous studies in cats have
    reported that these animals are affected by visceral leishmaniasis (VL) and can become infected
    and develop the disease, exhibiting variable clinical signs. Consequently, most studies are
    limited to dogs, and few focus on investigating Leishmania sp. in other mammals.The objective
    of this research was to identify the seroprevalence of antibodies against Leishmania spp.
    through the indirect ELISA test and establish a standardized in-house ELISA protocol using
    antigens from Leishmania infantum, L. amazonensis, and T. cruzi in serological samples from
    domestic felines from the sterilization outreach program conducted by the Vigilance and
    Zoonosis Unit (UVZ) in Natal, located in the state of Rio Grande do Norte. A total of 130
    domestic felines underwent clinical examination, and blood samples were collected from the
    jugular or cephalic vein. The results of the in-house ELISA test indicated that 28 domestic
    felines (21.54%) showed potential seroreactivity, 9 domestic felines (6.92%) demonstrated
    non-seroreactivity, and 93 domestic felines (71.53%) were serologically inconclusive for anti
    Leishmania infantum IgG. Due to the increasing number of reported cases of leishmaniasis in
    animals in Brazil, particularly considering the endemicity of the Northeast region, further
    studies are necessary to improve and standardize ELISA tests for the diagnosis of feline
    leishmaniasis. Thus, this study was able to demonstrate the involvement and exposure of felines
    in Natal, Rio Grande do Norte, to this zoonosis and their potential participation in the
    epidemiological chain of visceral leishmaniasis transmission.
14
  • EMILY THAYS DA SILVA RODRIGUES
  • ESTUDO PROSPECTIVO DE POTENCIAIS CANDIDATOS ANTIGÊNICOS PARA
    O DESENHO RACIONAL DE VACINAS PARA O MODELO EXPERIMENTAL DA
    DOENÇA DE CHAGAS
  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • ARIANE FERREIRA LACERDA
  • TAFFAREL MELO TORRES
  • Data: 20/12/2023

  • Mostrar Resumo
  • A Doença de Chagas, causada pelo parasito Trypanosoma cruzi (T. cruzi), é uma
    doença tropical negligenciada amplamente disseminada na América Latina. Apesar
    das estratégias para controle do vetor, outras formas de transmissão continuam
    desempenhando um papel crucial na disseminação da doença. O tratamento atual
    com benzonidazol enfrenta desafios devido a reações adversas, enfatizando a
    necessidade urgente de uma abordagem mais eficaz. Nesse contexto, este estudo
    tem como objetivo identificar epítopos conservados e imunogênicos em proteínas
    chave do T. cruzi e planejar um protótipo antigênico multiepítopo por meio de
    técnicas de imunoinformática e modelagem molecular. Os resultados preliminares
    destacam epítopos promissores em proteínas como a Cruzipaína, Glutationa S
    transferase (Tc52), Prolyl Oligopeptase (Tc80) e Trans-sialidase (TS).
    Adicionalmente, um protótipo antigênico foi concebido, destacando-se por suas
    propriedades físico-químicas que favorecem estabilidade, eficácia e a capacidade de
    induzir uma resposta imunológica apropriada. No entanto, é crucial enfatizar a
    necessidade premente de validação experimental a fim de assegurar a eficácia e
    segurança do protótipo antigênico predito. Portanto, este estudo não apenas
    expande o conhecimento sobre a resposta imunológica ao T. cruzi, mas também
    reacende a esperança de uma vacina eficaz capaz de controlar efetivamente a
    disseminação da doença de Chagas. Essa perspectiva promissora não só melhora a
    qualidade de vida das populações afetadas, mas também contribui para o combate
    das doenças negligenciadas.

  • Mostrar Abstract
  • Chagas Disease, caused by the parasite Trypanosoma cruzi, is a widely neglected
    tropical disease in Latin America. Despite vector control strategies, new transmission
    mechanisms continue to play a crucial role in the disease's spread. Current treatment
    with benznidazole faces challenges due to adverse reactions, emphasizing the
    urgent need for a more effective approach. In this context, this study aims to identify
    conserved and immunogenic epitopes in key T. cruzi proteins and to plan a multi
    epitope antigen prototype through immunoinformatics and molecular modeling
    techniques. Preliminary results highlight promising epitopes in proteins such as
    Cruzipain, Glutathione S-transferase (Tc52), Prolyl Oligopeptidase (Tc80), and
    Trans-sialidase (TS). Additionally, an antigen prototype has been designed,
    distinguished by its physicochemical properties that favor stability, effectiveness, and
    the ability to induce an appropriate immune response. However, it is crucial to
    emphasize the pressing need for experimental validation to ensure the effectiveness
    and safety of the predicted antigen prototype. Therefore, this study not only expands
    the understanding of the immune response to T. cruzi but also rekindles hope for an
    effective vaccine capable of effectively controlling the spread of Chagas disease.
    This promising perspective not only improves the quality of life for affected
    populations but also contributes to the fight against neglected diseases.
Teses
1
  • VICENTE TOSCANO DE ARAÚJO NETO
  • INFECÇÃO NATURAL E ANÁLISE MOLECULAR DE TRIPANOSOMATÍDEOS EM DIFERENTES ESPÉCIES ANIMAIS NO ESTADO DO RIO GRANDE DO NORTE

  • Orientador : ANTONIA CLAUDIA JACOME DA CAMARA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIA CLAUDIA JACOME DA CAMARA
  • CARLOS ROBERTO ALVES
  • DANIELLA REGINA ARANTES MARTINS SALHA
  • DAVID SOEIRO BARBOSA
  • LUCIA MARIA DA CUNHA GALVAO
  • VAGNER JOSÉ MENDONÇA
  • Data: 17/03/2023

  • Mostrar Resumo
  • O estudo avaliou a ocorrência da infecção natural por Trypanosoma cruzi e Leishmania spp.
    usando marcadores moleculares e análise filogenética em animais domesticados no estado do
    Rio Grande do Norte. As amostras de coágulo de sangue foram coletadas em 163 amostras de
    sangue de ovinos, caprinos, equinos, bovinos e cães e 64 aspirados de linfonodos de poplíteo
    de cães em nove municípios no estado do Rio Grande do Norte (RN). Inicialmente a infecção
    natural por T. cruzi usando o 18S e kDNA foi observada em amostras de coágulos sanguíneos
    de ovinos, caprinos e equinos e identificaram o parasito em 28,3% (17/60), 22,7% (5/22) e
    15,4% (2/14) das amostras, respectivamente. Esses animais estavam distribuídos nas três
    mesorregiões estudadas em todo o estado do RN. Neste momento, a infecção em equinos foi
    descrita pela primeira vez no Brasil. Em seguida, o relato de um cão na fase aguda da infecção
    pelo T. cruzi foi relacionado a aspectos clínicos, hematológicos, bioquímicos e parasitológicos
    e caracterização o isolado por métodos biológicos, molecular e filogenético. Um animal jovem
    aparentemente assintomático apresentou prolongado período de parasitemia patente, anemia
    normocítica e hipocrômica. Associado a isto o dano cardíaco deste animal foi observado pela
    elevada concentração dos biomarcadores como troponina I, NT-ProBN e a hipocinesia
    segmentar qualitativa. Outras amostras de coágulos de sangue de cães também foram
    submetidas à amplificação do kDNA do T. cruzi e apresentaram 10,9% (7/64) de positividade.
    A análise filogenética de amostra de coagulo sanguíneo de ovino revelou sequência de DNA
    com grande correlação com amostras de DTU II. Enquanto que o parasito isolado de cão em
    fase aguda foi caracterizado geneticamente por três marcadores e análise filogenética como
    sendo TcIII. A DTU III inicialmente descrita em ambiente silvestre, está cada vez mais presente
    no ciclo domiciliar no semiárido brasileiro. As amostras de aspirados de poplíteo foram
    adicionados em cultura e os isolados foram analisados também por marcadores moleculares e
    analise filogenética. Os dados com amostras de cães revelaram que as culturas do poplíteo em
    meio bifásico foram 12,5% (8/64) das amostras positivas com formas flageladas semelhantes a
    promastigotas. O Sequenciamento e análise filogenética de oito amostras da cultura
    apresentaram semelhança acima de 99% com as sequencias de Leishmania infantum. A ampla
    distribuição da infecção por T. cruzi e Leishmania infantum em animais domesticados contribui
    para a expansão do cenário epidemiológico e da necessidade de melhor entender o papel desses
    animais no ciclo de transmissão como reservatórios e/ou sentinela de infecções em humanos.

  • Mostrar Abstract
  • The study evaluated the occurrence of natural infection by Trypanosoma cruzi and Leishmania
    spp. using molecular markers and phylogenetic analysis in domesticated animals in the state of
    Rio Grande do Norte. Blood clot samples were collected from 163 blood samples from sheep,
    goats, horses, cattle and dogs and 64 aspirates from popliteal lymph nodes from dogs in nine
    municipalities in the state of Rio Grande do Norte (RN). Initially, natural infection by T. cruzi
    using 18S and kDNA was observed in samples of blood clots from sheep, goats and horses and
    identified the parasite in 28.3% (17/60), 22.7% (5/22) and 15.4% (2/14) of the samples,
    respectively. These animals were distributed in the three mesoregions studied throughout the
    state of RN. At this time, infection in horses was reported for the first time in Brazil. Then, the
    report of a dog in the acute phase of T. cruzi infection was related to clinical, hematological,
    biochemical and parasitological aspects and characterization of the isolate by biological,
    molecular and phylogenetic methods. An apparently asymptomatic young animal showed a
    prolonged period of patent parasitemia, normocytic and hypochromic anemia. Associated with
    this, the cardiac damage of this animal was observed by the high concentration of biomarkers
    such as troponin I, NT-ProBN and qualitative segmental hypokinesia. Other samples of blood
    clots from dogs were also subjected to T. cruzi kDNA amplification and showed 10.9% (7/64)
    positivity. Phylogenetic analysis of ovine blood clot sample revealed DNA sequence with high
    correlation with DTU II samples. While the parasite isolated from dogs in the acute phase was
    genetically characterized by three markers and phylogenetic analysis as being TcIII. DTU III,
    initially described in a wild environment, is increasingly present in the home cycle in the
    Brazilian semi-arid region. Samples of popliteal aspirates were added in culture and the isolates
    were also analyzed by molecular markers and phylogenetic analysis. Data with samples from
    dogs revealed that cultures of the popliteus in biphasic medium were 12.5% (8/64) of positive
    samples with flagellated forms similar to promastigotes. The sequencing and phylogenetic
    analysis of eight culture samples showed a similarity above 99% with the Leishmania infantum
    sequences. The wide distribution of infection by T.cruzi and Leishmania chagasi in
    domesticated animals contributes to the expansion of the epidemiological scenario and the need
    to better understand the role of these animals in the transmission cycle as reservoirs and/or
    sentinels of infections in humans.
2
  • ISABELLE CRISTINA CLEMENTE DOS SANTOS
  • ESTUDO DE ASSOCIAÇÃO DE SNPs COM A PREDISPOSIÇÃO, PROTEÇÃO E
    PROGNÓSTICO DO CÂNCER DE TIREOIDE NA POPULAÇÃO DO ESTADO DO RIO
    GRANDE DO NORTE
  • Orientador : VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CARINA CARVALHO DOS SANTOS
  • Gisele Medeiros Bastos
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MARIA DE FATIMA PAIVA BARACHO
  • VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • Data: 16/06/2023

  • Mostrar Resumo
  • O câncer de tireoide (CT) é o tumor endócrino mais comum e representa 1% de todas as
    neoplasias malignas. Os estudos de genotipagem buscam identificar polimorfismos de
    único nucleotídeo (SNPs) que podem estar relacionados ao aumento do risco de CT e
    prognóstico. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar se um painel de SNPs
    estaria associado à predisposição e prognóstico de CT em uma população heterogênea,
    proveniente do Estado do Rio Grande do Norte/Brasil. Biópsias de tireoide foram
    selecionadas de 279 pacientes com CT e amostras de sangue periférico foram coletadas
    de 301 doadores de sangue saudáveis. A genotipagem de um painel de 84 SNPs foi
    realizada em ambos os grupos usando o sistema MassARRAY SNP. Os SNPs
    rs10759944, rs7850258, rs116909374 e rs34566348 foram associados ao risco de
    desenvolver CT. Em relação aos fatores associados ao prognóstico de CT, observou-se
    que o rs2236487 foi associado ao risco de carcinoma papilífero e o rs1571443 foi
    associado ao risco de carcinoma folicular. O rs31872 foi associado à proteção contra o
    desenvolvimento de tumores ≤ 2 cm. Ao avaliar a associação dos SNPs com o
    estadiamento do tumor, o rs10238549 foi associado ao risco de desenvolvimento dos
    estágios I e II. Por outro lado, o rs7800391 foi associado à proteção contra o
    desenvolvimento dos estágios I e II. Além disso, o rs949908 foi associado ao risco de CT
    persistente e o rs487880 foi associado ao risco de desenvolvimento de carcinoma
    metastático. O presente estudo, pioneiro em população mista do nordeste brasileiro,
    sugere a associação de SNPs como marcadores de predisposição e prognóstico de CT
    nessa população.

  • Mostrar Abstract
  • Thyroid cancer (TC) is the most common endocrine tumor and accounts for 1% of all
    malignant neoplasms. Genotyping studies look for single nucleotide polymorphisms
    (SNPs) that may be related to increased risk of TC and worst prognosis. Therefore, this
    study aimed to evaluate a panel of SNPs would be associated with TC predisposition and
    prognosis in a heterogeneous population from the State of Rio Grande do Norte/Brazil.
    Thyroid biopsies were selected from 279 TC patients and peripheral blood samples were
    collected from 301 healthy donor volunteers from the blood. Genotyping of a panel of 84
    SNPs was performed in both groups using the MassARRAY SNP system. The SNPs
    rs10759944, rs7850258, rs116909374 and rs34566348 were associated with the risk of
    developing TC. Regarding the factors associated with TC prognosis, It was observed that
    rs2236487 was associated with risk of papillary carcinoma and the rs1571443 was
    associated with risk of follicular carcinoma. The rs31872 was associated with protection
    from the development of tumors ≤ 2 cm. When evaluating the association of SNPs with
    tumor staging, the rs10238549 was associated with the risk of developing stages I and II.
    On the other hand, the rs7800391 was associated with protection from stage I and II
    development. Furthermore, the rs949908 was associated with a risk of persistent TC, and
    rs487880 were associated with a risk of developing metastasis. The present study, a
    pioneer in a mixed population of northeastern Brazil, suggests the association of SNPs as
    markers of predisposition and prognosis of TC in this population.
3
  • JACINTHIA BEATRIZ XAVIER DOS SANTOS
  • EFICÁCIA NÃO-CLÍNICA DO GEL CONTENDO O EXTRATO VEGETAL DE Ipomoea pes-caprae NA INIBIÇÃO DA TOXICIDADE LOCAL PRODUZIDA PELA PEÇONHA DA SERPENTE Bothrops erythromelas
  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALICE MARIA COSTA MARTINS
  • BOLIVAR PONCIANO GOULART DE LIMA DAMASCENO
  • JULIANA FELIX DA SILVA
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • RAQUEL DE MELO BARBOSA
  • Data: 27/06/2023

  • Mostrar Resumo
  • O ofidismo é um relevante problema de saúde pública, incluso pela Organização Mundial de Saúde na lista de Doenças Tropicais Negligenciadas. O gênero de maior relevância clínica é o Bothrops. Eventos como edema local, miotoxicidade, hemorragia e dermonecrose caracterizam os acidentes e podem levar a danos severos aos pacientes. A baixa eficácia da soroterapia antiveneno frente a estes eventos instiga a busca por terapias complementares. Plantas medicinais são utilizadas há anos na medicina tradicional em acidentes ofídicos. A espécie vegetal Ipomoea pes-caprae (Ipc), conhecida como “salsa-da-praia”, é usada na medicina tradicional no tratamento de inflamações, dores e picadas de serpentes. Dessa forma, este estudo focou no desenvolvimento e avaliação de um gel tópico contendo extrato da Ipc quanto ao seu potencial antiofídico. O extrato hidroetanólico de Ipc foi obtido por maceração. Através de Cromatografia em Camada Delgada e análise por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, identificou-se a presença majoritária de compostos fenólicos no extrato. Através do fracionamento do extrato por XAD-4, obteve-se a fração enriquecida (FrEtOH), concentrando os compostos fenólicos presentes no extrato de Ipc. O extrato Ipc e FrEtOH não apresentaram citotoxicidade in vitro significativa frente às células de macrófagos murinos (RAW 267.3) e de fibroblastos embrionários de camundongo (NIH/3T3). As atividades enzimáticas in vitro frente a toxinas da peçonha de Bothrops erythromelas (Ber) (fosfolipásica, proteolitica e hialuronidase) foram inibidas de maneira semelhante pelo extrato bruto e a fração de Ipc. O extrato e a FrEtOH nas concentrações de 5% e 1%, respectivamente, foram incorporados a um gel de Poloxamer e HPMC previamente desenvolvido pelo grupo de pesquisa. Após 180 dias do estudo da estabilidade térmica, as formulações com o extrato apresentaram-se estáveis quanto às propriedades organolépticas e físico-químicas, assim como o teor de fenólicos variando menos de 10%, o que se encontra dentro das especificações de acordo com a legislação brasileira. As atividades in vivo frente os efeitos locais produzidos pela peçonha de Ber (edematogênica, hemorrágica e dermonecrose) foram reduzidas pelo tratamento com o gel Ipc, assim como foi visualizado um melhor efeito quando utilizou o gel Ipc associado ao soro antiofídico. O tratamento com o gel FrEtOH inibiu a atividade edematogênica. As inibições observadas foram promissoras, apresentando uma ação direta do extrato inibindo toxinas da peçonha quanto indireta através da inibição de mediadores endógenos envolvidos no envenenamento. Além disso, é possível propor a participação ativa na ação farmacológica dos compostos presentes no extrato, com destaque para os fenólicos que atuam fortemente como anti-inflamatórios, antioxidantes e quelante de metais. Em conclusão, os resultados obtidos apontam o potencial antiofídico do extrato de Ipc, o que pode justificar seu uso medicinal em picadas de serpente, como também contribuir na sua utilização como matéria-prima no desenvolvimento de novos produtos fitoterápicos no mercado para o tratamento dos efeitos locais do envenenamento botrópico.

  • Mostrar Abstract
  • Snakebite is a relevant public health problem, included by the World Health Organization in the list of Neglected Tropical Diseases. The most clinically relevant genus is Bothrops. Events such as local edema, myotoxicity, hemorrhage and dermonecrosis characterize accidents and can lead to severe damage to patients. The low efficacy of antivenom serum therapy in the face of these events instigates the search for complementary therapies. Medicinal plants have been used for years in traditional medicine for snakebites. The plant species Ipomoea pes-caprae (Ipc), known as “salsa-da-praia”, is used in traditional medicine to treat inflammation, pain and snake bites. Thus, this study focused on the development and evaluation of a topical gel containing Ipc extract for its antivenom potential. The hydroethanolic extract of Ipc was obtained by maceration. Through Thin Layer Chromatography and analysis by High Performance Liquid Chromatography, the majority presence of phenolic compounds in the extract was identified. Through fractionation of the extract by XAD-4, the enriched fraction (FrEtOH) was obtained, concentrating the phenolic compounds present in the Ipc extract. The Ipc extract and FrEtOH did not show significant in vitro cytotoxicity against murine macrophage cells (RAW 267.3) and mouse embryonic fibroblasts (NIH/3T3). The in vitro enzymatic activities against Bothrops erythromelas (Ber) venom toxins (phospholipase, proteolytic and hyaluronidase) were similarly inhibited by the crude extract and the Ipc fraction. The extract and FrEtOH at concentrations of 5% and 1%, respectively, were incorporated into a Poloxamer and HPMC gel previously developed by the research group. After 180 days of the thermal stability study, the formulations with the extract were stable in terms of organoleptic and physical-chemical properties, as well as the phenolic content varying less than 10%, which is within the specifications according to the Brazilian legislation. The in vivo activities against the local effects produced by the Ber venom (edematogenic, hemorrhagic and dermonecrosis) were reduced by the treatment with the Ipc gel, as well as a better effect was visualized when using the Ipc gel associated with the antivenom. Treatment with the FrEtOH gel inhibited the edematogenic activity. The observed inhibitions were promising, showing a direct action of the extract inhibiting venom toxins and indirect action through the inhibition of endogenous mediators involved in envenomation. In addition, it is possible to propose the active participation in the pharmacological action of the compounds present in the extract, with emphasis on the phenolics that act strongly as anti-inflammatories, antioxidants and metal chelator. In conclusion, the results obtained point to the antiophidic potential of the Ipc extract, which may justify its medicinal use in snake bites, as well as contribute to its use as a raw material in the development of new herbal products on the market for the treatment of the effects sites of bothrops envenoming.

4
  • RAMON WEYLER DUARTE LEOPOLDINO
  • DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE INSTRUMENTO PARA PREDIÇÃO DE REAÇÕES ADVERSAS A MEDICAMENTOS EM NEONATOS INTERNADOS EM UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA

     

  • Orientador : RAND RANDALL MARTINS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • HILRIS ROCHA E SILVA
  • PABLO DE MOURA SANTOS
  • RAND RANDALL MARTINS
  • RICARDO NEY OLIVEIRA COBUCCI
  • Data: 12/07/2023

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: As Reações Adversas a Medicamentos são comuns em neonatos hospitalizados, porem sua detecção é dificultada nestes indivíduos pela gravidade do estado de saúde e rápida mudanças fisiologias relacionada a maturação dos órgãos. Os instrumentos preditivos de RAM são as melhores estratégias de cuidados. Entretanto, estes instrumentos ainda não estão disponíveis a população neonatal. Objetivo: Desenvolver e validar instrumento para predição de RAM em neonatos internados em Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN). Métodos: Este é um estudo caso-controle aninhado numa coorte aberta conduzido de janeiro de 2019 a janeiro de 2022 com neonatos internados na UTIN de uma maternidade pública de Natal/Brasil. Todos os neonatos com mais de 24 horas de internação na UTIN foram incluídos no estudo. As RAM foram detectadas por busca ativa em prontuários eletrônicos e análise de notificações espontâneas. Para a coorte, as RAM foram caracterizadas quanto a incidência, prevalência e fatores de risco via modelo multivariado. Posteriormente, os pacientes com RAM foram pareados aleatoriamente com dois controles, permitindo o desenvolvimento de modelo preditivo de RAM por regressão logística multivariada. A capacidade discriminativa do modelo foi avaliada pela área sob curva ROC por estatística-c ajustada com bootstrap. A partir de uma amostra de casos de RAM, o desempenho dos algoritmos de Du e Naranjo foi analisado por três avaliadoras independentes. Para estas ferramentas, foram calculadas a concordância intravaliadoras, interavaliadoras e entre ferramentas (coeficiente kappa). Resultados: Com uma coorte de 600 neonatos, a prevalência de RAM foi 19,7% (IC95% 16,7 - 23,0%) e incidência de 310 casos por 1.000 neonatos (IC95% 267,8 – 357,0). As reações mais frequentes foram taquicardia (30,6%), poliúria (9,1%) e hipocalemia (8,6%). O tempo de hospitalização longo (OR 1,025 IC95% 1,011 – 1,038; p < 0,01) e polifarmácia (OR 1,121 IC95% 1,057 – 1,189; p < 0,01) foram fatores associados a RAM. Para o desenvolvimento do instrumento preditivo, 450 neonatos (150 casos e 300 controles) foram incluídos na análise. O instrumento inseriu quatro condições do neonato (ventilação mecânica, frequência cardíaca ≥ 178 bpm, medicamentos intravenosos, 5 ou mais medicamentos) e um da mãe (hipertensão gestacional) para predição de RAM e obteve área sob a curva ROC de 0,74 (IC95% 0,68 - 0,80). No desempenho dos algoritmos Du e Naranjo, o primeiro mostrou boa capacidade para identificar RAM definidas (≈60%), mas teve baixa reprodutibilidade (k global = -0,031; IC95% -0,049 – 0,065). Os resultados dos algoritmos não foram equivalentes (k global = -0,031; IC95% -0,049 – 0,065). Conclusão: As RAM frequentemente observadas na UTIN foram a taquicardia, hipertermia, poliúria e hipocalemia. Com base em cinco variáveis comumente monitoradas na UTIN, foi construído um instrumento preditivo simples, bem calibrado e com capacidade discriminativa adequada. Em relação ao desempenho dos algoritmos de causalidade, o algoritmo de Du mostrou-se promissor para identificação de RAM em UTIN devido a boa capacidade de classificar as reações como definidas.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: The Adverse Drug Reactions (ADR) are common in hospitalized neonates, but their detection is made more difficult in these individuals by the severe health status and rapid physiological changes related to organ maturation. The ADR predictive tools are the best care strategies. However, these instruments are not yet available to the neonatal population. Objectives: To develop and validate an instrument for predicting ADR in neonates admitted to a Neonatal Intensive Care Unit (NICU). Methods: This is a nested case-control study in an open cohort conducted from January 2019 to January 2022 with neonates admitted to the NICU of a public maternity hospital in Natal/Brazil. All neonates admitted to the NICU for more than 24 hours were included in the study. ADR were detected by actively searching electronic medical records and analyzing spontaneous notification. For the cohort, ADR were characterized for incidence, prevalence, and risk factors via a multivariate model. Subsequently, patients with ADR were randomly matched with two controls in a 1:2 ratio, allowing the development of a predictive model of ADR by multivariate logistic regression. The discriminative ability of the model was assessed by the area under the ROC curve by bootstrap adjusted c-statistic. From a sample of ADR cases, the performance of the Du and Naranjo algorithms was analyzed by three independent assessors. For these tools, inter-rater, inter-rater and inter-tool agreement (kappa coefficient) were calculated. Results: With a cohort of 600 neonates, the prevalence of ADR was 19.7% (95% CI 16.7 - 23.0%) and incidence of 310 cases per 1,000 neonates (95% CI 267.8 - 357.0). The most frequent reactions were tachycardia (30.6%), polyuria (9.1%) and hypokalemia (8.6%). The long hospital stay (OR 1.025 95%CI 1.011 - 1.038; p < 0.01) and polypharmacy (OR 1.121 95%CI 1.057 - 1.189; p < 0.01) were factors associated with ADR. For the development of the predictive instrument, 450 neonates (150 cases and 300 controls) were included in the analysis. The instrument entered four conditions from the neonate (mechanical ventilation, heart rate ≥ 178 bpm, intravenous medications, 5 or more medications) and one from the mother (gestational hypertension) for ADR prediction and obtained an area under the ROC curve of 0.74 (95% CI 0.68 - 0.80). In the performance of the Du and Naranjo algorithms, the former showed good ability to identify defined ADR (≈60%), but had low reproducibility (overall k = -0.031; 95%CI -0.049 - 0.065). The results of the algorithms were not equivalent (overall k = -0.031; 95% CI -0.049 - 0.065). Conclusion: The ADR frequently observed in the NICU were tachycardia, hyperthermia, polyuria, and hypokalemia. Based on five variables commonly monitored in the NICU, a simple, well-calibrated predictive instrument with adequate discriminative capacity was constructed. Regarding the performance of the causality algorithms, Du's algorithm showed promise for identifying ADR in NICU due to its good ability to classify reactions as defined.

5
  • CEZAR SILVINO GOMES
  • EXPLORANDO A EPIDEMILOGIA BASEADA NO ESGOTO COMO FERRAMENTA DE AVALIAÇÃO DO CONSUMO DE DROGAS ILÍCITAS NO NORDESTE BRASILEIRO
  • Orientador : CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • HADASSA DE SOUZA RAMOS PONTES MOURA
  • ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • ALEXANDRO MANGUEIRA LIMA DE ASSIS
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • FERNANDO FABRIZ SODRÉ
  • FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
  • Data: 21/11/2023

  • Mostrar Resumo
  • As drogas ilícitas e outras substâncias consumidas pelo ser humano são metabolizadas e
    eliminadas pela urina e podem ser dosadas no esgoto por SPE e LC-MS/MS. Conhecendo-se o
    tamanho da população, o volume de esgoto amostrado e as taxas de excreção dos metabólitos
    é possível calcular a quantidade consumida de droga a partir da dosagem desses metabólitos.
    Esse método, conhecido como Epidemiologia Baseada no Esgoto – EBE, foi usado com o
    objetivo de diagnosticar o uso de cocaína e MDMA em Natal – RN e João Pessoa – PB. A
    pesquisa também evidenciou algumas das vantagens e desvantagens da ferramenta EBE. A EBE
    é capaz de trazer à luz informações úteis para saúde e segurança públicas e tem repercussão
    direta em campanhas públicas de prevenção e mitigação de danos associados à drogadição e
    poluição ambiental. As curvas de calibração foram construídas através de regressões lineares
    utilizando padrões internos deuterados. Foram utilizados testes estatísticos para eliminar
    valores aberrantes, avaliar a homocedasticidade (Cochran) e a adequação do modelo e da faixa
    de trabalho (lack-of-fit). Os resultados mostraram um consumo médio de 263 mg/1000 hab/dia
    para cocaína e de 18 mg/1000 hab/dia para MDMA no Carnatal (2019) e 3400 mg/1000 hab/dia
    de cocaína e 60 mg/1000 hab/dia de MDMA no Carnaval (2020). Nos eventos festivos o
    consumo aumentou em aproximadamente duas vezes em relação à semana anterior. O consumo
    de cocaína no Carnaval de Natal em 2020 oscilou entre 1,6 e 5,8 g/dia/1000hab e em uma
    semana típica de 2022 o consumo oscilou entre 1,3 e 4,6 g/dia/1000 hab. O consumo
    concomitante de álcool e cocaína também foi evidenciado pela presença do metabólico
    cocaetileno, substância com maior toxicidade que a cocaína e o etanol e que deve ser
    preocupação para a saúde pública. Nas festividades natalinas e na virada do ano de 2021-2022
    foi detectado no esgoto a presença da mitraginina e do 25I-NBOH. No período de abril de 2022
    o consumo de cocaína em João Pessoa – PB foi oscilou entre 2,1 e 2,7 g/1000hab./dia. O estudo
    proporcionou informações relevantes para os gestores de saúde e segurança pública,
    demonstrando a aplicabilidade quase em tempo real da técnica, bem como evidenciou
    limitações associadas ao preparo das amostras. A pesquisa demonstrou, sobretudo, a validade
    do uso complementar da ferramenta EBE no monitoramento do consumo de substâncias ilícitas.

  • Mostrar Abstract
  • Illicit drugs and other substances consumed by humans are metabolized and excreted in urine,
    and they can be quantified in wastewater through Solid Phase Extraction (SPE) and Liquid
    Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS). By knowing the population size,
    the sampled wastewater volume, and the excretion rates of their metabolites, it is possible to
    calculate the amount of drug consumed from the measurement of these metabolites. This
    method, known as Wastewater-Based Epidemiology (WBE), was used to diagnose the use of
    cocaine and MDMA in Natal, RN, and João Pessoa, PB. The research highlights some of the
    advantages and disadvantages of the WBE tool. WBE can bring valuable insights to public
    health and safety and directly impact public campaigns for drug addiction prevention and the
    mitigation of associated environmental pollution. Calibration curves were constructed through
    linear regressions using deuterated internal standards. Statistical tests were utilized to eliminate
    outliers, assess homoscedasticity (Cochran test), and evaluate the model's adequacy and work
    range (lack-of-fit). The results showed an average consumption of 263 mg/1000 inhabitants/day
    for cocaine and 18 mg/1000 inhabitants/day for MDMA during Carnatal (2019) and 3400
    mg/1000 inhabitants/day for cocaine and 60 mg/1000 inhabitants/day for MDMA during
    Carnival (2020). During festive events, consumption increased by approximately two times
    compared to the previous week. Cocaine consumption during the 2020 Carnival in Natal ranged
    between 1.6 and 5.8 g/day/1000 inhabitants, and in a typical week in 2022, it ranged between
    1.3 and 4.6 g/day/1000 inhabitants. The concomitant consumption of alcohol and cocaine was
    also evidenced by the presence of the metabolite cocaethylene, a substance more toxic than
    cocaine and ethanol, which should be a concern for public health. During the Christmas
    festivities and the 2021-2022 New Year's Eve, the presence of mitragynine and 25I-NBOH was
    detected in wastewater. In April 2022, cocaine consumption in João Pessoa, PB, fluctuated
    between 2.1 and 2.7 g/1000 inhabitants/day. The study provided relevant information for health
    and public safety managers, demonstrating the almost real-time applicability of the technique,
    while also highlighting limitations associated with sample preparation. Above all, the research
    demonstrated the validity of using the WBE tool as a complementary means to monitor the
    consumption of illicit substances.
6
  • ANNE EMMANUELLE CÂMARA DA SILVA MELO
  • CURATIVO BIOLÓGICO A BASE DE QUITOSANA CARREGADO COM PAPAÍNA: CARACTERIZAÇÃO, PROPRIEDADES IN VITRO E IN VIVO
  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANA AUGUSTO DE REZENDE
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • CAROLINE ADDISON CARVALHO XAVIER DE MEDEIROS
  • LUIZ ALBERTO LIRA SOARES
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • RENATA FERREIRA DE CARVALHO LEITÃO
  • Data: 23/11/2023

  • Mostrar Resumo
  • A cicatrização é um evento complexo e dinâmico que visa restaurar a integridade tecidual, mas
    uma possível intensa resposta inflamatória pode atrasar e dificultar o sucesso de seu tratamento.
    As feridas crônicas constituem um problema de saúde pública, principalmente quando
    associado a um grupo de risco como diabéticos, se tornando um grande desafio clínico. A
    papaína é uma enzima extraída do mamão (Carica papaya) com propriedades cicatrizantes, e é
    largamente utilizada no desbridamento químico de feridas cônicas, mas o seu uso em altas
    quantidades ou doses traz limitações à sua aplicação. Neste contexto, a quitosana é um
    copolímero obtido de fontes naturais que possui ação cicatrizante e antimicrobiana, o qual pode
    ser utilizado para imobilização de enzimas para o aumento de sua atividade. A presente tese de
    doutorado aborda como principal hipótese a o uso de curativos biológicos a base de quitosana
    (Ch) como alternativa para aplicação cutânea de papaína no tratamento de feridas. Para isto,
    membranas de quitosana contendo diferentes concentrações de papaína (Ch / Ch Pap 2,5%/ Ch
    Pap 5%) foram obtidas pelo método de evaporação do solvente os dispositivos foram
    caracterizados por microscopia de força atômica (MFA), microscopia eletrônica de varredura
    (MEV), difração de raio-X (DRX), espectroscopia de absorção na região de infravermelho com
    transformada de Fourier (FTIR) e análise térmica (DSC e ATG/DTG). Outros estudos incluíram
    determinação do pH, estudo do intumescimento, molhabilidade, ensaio de tração, análise
    quantitativa, a atividade enzimática, liberação enzimática in vitro e perfil de
    citocompatibilidade e biocompatibilidade. O efeito cicatrizante foi realizado no modelo in vivo
    em camundongos swiss e as lesões foram observadas em grupos de 7 e 14 dias As membranas
    apresentaram características adequadas pera o seu uso como aspecto transparente e rugoso e
    propriedades mecânicas A papaína foi incorporada com sucesso, as propriedades físico
    químicas demontraram interações eletrostática entre a papaína e o copolímero, com pH entre
    7,1 a 7,5 O biocurativo apresentou citocompatibilidade e biocompatibilidade, o qual aumentou
    a atividade enzimática da papaína livre em 250 vezes. A liberação in vitro, indicou que a
    membrana modulou a liberação da papaína de forma controlada, ajustada pelo modelo cinético
    de Higuchi. As análises in vivo realizadas demonstraram reepitelização, estímulo angiogênico,
    deposição de colágeno e expressão de proteínas que auxiliam no processo de cicatrização em
    proporção significativa nos grupos tratados com a membrana papaína 2,5% e 5% comparado
    aos grupos sem tratamento. Os resultados experimentais corroboram com a hipótese do
    trabalho, os sistemas de membranas com papaína possuem potencial de bioatividade efetiva,
    sendo uma alternativa promissora para o uso de fechamento de feridas e, devido a sua liberação
    prolongada, revelando potencial efeito benéfico no tratamento de feridas crônicas.

  • Mostrar Abstract
  • Healing is a complex and dynamic event that aims to restore tissue integrity, but a possible
    intense inflammatory response can delay and hinder the success of its treatment. Chronic
    wounds are a public health problem, especially when associated with a risk group such as
    diabetics, becoming a major clinical challenge. Papain is an enzyme extracted from papaya
    (Carica papaya) with healing properties, and is widely used in the chemical debridement of
    conical wounds, but its use in high quantities or doses brings limitations to its application. In
    this context, chitosan is a copolymer obtained from natural sources that has healing and
    antimicrobial action, which can be used to immobilize enzymes to increase their activity. The
    main hypothesis of this doctoral thesis is the use of chitosan (Ch)-based biological dressings as
    an alternative for cutaneous application of papain in the treatment of wounds. For this, chitosan
    membranes containing different concentrations of papain (Ch / Ch Pap 2.5% / Ch Pap 5%) were
    obtained by the solvent evaporation method and the devices were characterized by atomic force
    microscopy (MFA), scanning electron microscopy (SEM), X-ray diffraction (XRD), absorption
    spectroscopy in the infrared region with Fourier transform (FTIR) and thermal analysis (DSC
    and ATG/DTG). Other studies included pH determination, swelling study, wettability, tensile
    assay, quantitative analysis, enzyme activity, in vitro enzyme release, and cytocompatibility
    and biocompatibility profile. The healing effect was performed in the in vivo model in swiss
    mice and the lesions were observed in groups of 7 and 14 days The membranes showed
    adequate characteristics for their use such as transparent and rough appearance and mechanical
    properties Papain was successfully incorporated, the physicochemical properties demonstrated
    electrostatic interactions between papain and the copolymer, with pH between 7.1 and 7.5 The
    biodressing showed cytocompatibility and biocompatibility, which increased the enzymatic
    activity of free papain by 250 times. In vitro release indicated that the membrane modulated
    papain release in a controlled manner, adjusted by Higuchi's kinetic model. The in vivo analyses
    performed demonstrated re-epithelialization, angiogenic stimulation, collagen deposition and
    expression of proteins that aid in the healing process in a significant proportion in the groups
    treated with the papain membrane 2.5% and 5% compared to the groups without treatment. The
    experimental results corroborate the hypothesis of the study, membrane systems with papain
    have the potential for effective bioactivity, being a promising alternative for the use of wound
    closure and, due to its prolonged release, revealing a potential beneficial effect in the treatment
    of chronic wounds.
2022
Dissertações
1
  • NATALIA VITORIA PEGADO DE MEDEIROS
  • ESTUDOS IN SILICO DE INIBIDORES ALOSTÉRICOS DO DOMÍNIO AMINO TERMINAL DE RECEPTORES NMDA QUE CONTENHAM A SUBUNIDADE GLUN2B

  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • EDILSON BESERRA DE ALENCAR FILHO
  • ELAINE CRISTINA GAVIOLI
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • Data: 11/01/2022

  • Mostrar Resumo
  • O receptor NMDA é um receptor ionotrópico do glutamato, esse canal de íons Ca2+ possui 4 subunidades estruturalmente semelhantes entre si. Este é composto usualmente por duas subunidades de GluN1 (subunidade de ligação da glicina) e duas de GluN2 (subunidade de ligação do glutamato). As subunidades GluN2 variam entre GluN2A até GluN2D. Antagonistas de receptor NMDA-GluN2B tem se mostrado promissores no tratamento de diversas doenças que acometem o SNC, com menores incidências de efeitos adversos que os antagonistas não competitivos como a cetamina. Dessa forma, foi feita uma vasta pesquisa na literatura por moléculas já sintetizadas da classe, a fim de se fazer estudos in sílico. Primeiramente as moléculas foram separadas em grupo de acordo com sua similaridade, nesse trabalho foi empregado a similaridade de tanimoto com o auxílio do programa Gefhi, para ser gerados clusters. Duas networks foram construídas com esse programa: uma mostrando os dados de afinidade em pKi e outra em pIC50. Os clusters mais relevantes gerados foram avaliados em simulações de dinâmica molecular, a fim de descobrir a melhor forma de encaixe delas dentro do sítio ativos dos inibidores alostéricos de receptores NMDA. Alguns resíduos foram observados como primordiais, os resíduos da Tyr109 e a Phe114 devido a interação de empilhamento π se mostraram extremamente necessários para a interação e por consequência um anel aromático na porção distal se torna obrigatório para a relação estrutura atividade da molécula. Na porção oposta também se faz necessário um grupo benzil, pois resíduos como Pro177 e Phe176 acompanham o movimento desses anéis para realizar, também, interações do tipo π, e juntamente desse anel a presença de um grupo doador ou aceptor de ligação de hidrogênio é importante para a estabilização da molécula no sítio, os aminoácidos Glu236, Ser132, e Thr174 são os principais envolvidos. Um estudo de QSAR-3D serviu para corroborar com as teorias propostas com os resultados da dinâmica. Dois resultados principais foram obtidos, a necessidade de um anel benzênico na porção distal da molécula, na qual se liga em um bolso hidrofóbico, essa cadeia muito curta ou muito longa provoca queda de atividade. Alguns descritores demonstraram a necessidade de substituintes em porções específicas das moléculas, o que ajudou a planejar novos inibidores com grande potência teórica. Esses estudos podem abrir horizontes a descoberta de futuros medicamentos para atuarem nesse receptor e gerarem efeitos terapêuticos para os mais diversos transtornos que acometem o sistema nervoso central.


  • Mostrar Abstract
  • The NMDA receptor is an ionotropic glutamate receptor, this Ca2+ ion channel has 4 structurally similar subunits. It is usually composed of two GluN1 (glycine binding subunit) and two GluN2 (glutamate binding subunit) subunits. The GluN2 subunits range from GluN2A to GluN2D. NMDA-GluN2B receptor antagonists have shown promise in the treatment of several diseases that affect the CNS, with lower incidences of adverse effects than non-competitive antagonists such as ketamine. Thus, a vast literature search was carried out for molecules already synthesized in the class, in order to carry out in silico studies. First, the molecules were separated into groups according to their similarity. In this work, the similarity of tanimoto was used with the aid of the Gefhi program, to generate clusters. Two networks were built with this program: one showing the affinity data measured in PKi and the other in PIC50. The most relevant groups were evaluated in molecular dynamics simulations, in order to discover the best way to fit them into the active site of allosteric inhibitors of NMDA receptors. Some residues have been observed as primordial, the residues of Tyr109 and Phe114, due to the π-stacking interaction, were extremely necessary for the interaction and, consequently, an aromatic ring in the distal portion becomes mandatory for the structure-activity relationship of the molecule. In the opposite portion, a benzene ring is also needed, residues like Pro177 and Phe176 accompany the movement of that ring and also make π-type interactions, and the presence of a hydrogen bond donor or acceptor group becomes importance for the stabilization of the molecule in the site, the amino acids Glu236, Ser132, and Thr174 are the main ones involved. The QSAR-3D study served to corroborate the proposed theories with the dynamics results. Two main results have been obtained; the need for a benzene ring in the distal portion of the molecule, in which it binds in a hydrophobic pocket, this very short or very long chain causes a drop-in activity. Some descriptors show better values when carbon number 5 or 6 had, as a substituent, either hydrogen bond donor groups or a methoxy group. These studies confirm and open the horizons for the rational design of drugs for this active site, facilitating the discovery of future drugs to act on this receptor and generate therapeutic effects for the most diverse disorders that affect the central nervous system.

2
  • FRANCISCO AYRTON SENNA DOMINGOS PINHEIRO
  • CARACTERIZACAO ESTRUTURAL DE COMPOSTOS FENOLICOS DE Erythrina velutina Willd. POR ESPECTROMETRIA DE MASSAS ASSOCIADA AS REDES MOLECULARES (MOLECULAR NETWORKING)

  • Orientador : LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • PAULA CAROLINA PIRES BUENO
  • Data: 26/01/2022

  • Mostrar Resumo
  • A identificação, caracterização e estudo de compostos bioativos podem abrir portas para o entendimento de inúmeras aplicações de interesse para pesquisas. A espécie arbórea Erythrina velutina Willd., conhecida popularmente como “mulungu”, pertencente à família Fabaceae e subfamília Papilionoideae, distribui-se por todo o Nordeste brasileiro. Suas folhas, sementes e principalmente casca dos troncos são utilizadas na medicina popular na forma de chás para tratamento de distúrbios do sono e desordens do sistema nervoso central (SNC). Trabalhos anteriores com a espécie relacionam suas propriedades farmacológicas, ansiolíticas e sedativas, principalmente à presença de flavonoides e alcaloides benzilisoquinolínicos. Diante do exposto, a proposta do estudo visou a caracterização dos compostos fenólicos presentes nas folhas e sementes na espécie coletada em quatro diferentes locais na região Seridó do Rio Grande do Norte. A desreplicação do extrato etanólico bruto das sementes e folhas de diferentes populações ocorreu com o auxílio da plataforma GNPS (Global Natural Product Social Molecular Networking), baseado em dados de massa e padrões de fragmentação obtidos pela análise por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (CL-EM), que levou formação de uma rede molecular que apresentou clusters atribuídos a compostos fenólicos. Um total de 136 compostos foram anotados, sendo 32 flavonoides, 2 cumarinas, 2 antocianinas, uma aurona e uma chalcona anotadas pela biblioteca da plataforma. A análise dos metabólitos não anotados indicou semelhanças no padrão de fragmentação as quais podem ser relacionados às agliconas presentes na amostra com algumas variações presentes nos substituintes. A análise de componentes principais (PCA) para as substâncias anotadas e presentes nas amostras de diferentes populações de E. velutina possibilitou evidenciar quais são os compostos que permitem diferenciar os órgãos estudados, sementes e folhas. Além disso, a análise de PCA para as amostras de sementes permitiu evidenciar a separação das amostras de acordo com a região de coleta. Também foram desenvolvidas e padronizadas metodologias complementares para análise de metabólitos por cromatografia gasosa as quais permitiram identificar diversos ácidos graxos como ácido palmítico, linoleico, oleico e esteárico presentes nas sementes da Erythrina, através da reação de esterificação, assim como foram observadas outras substâncias, como fitoesterois, ácidos graxos sililados e alcaloides, pela reação sililação com agente de derivatizante BSTFA. Assim, o presente trabalho contribui para um maior conhecimento sobre o perfil dos compostos fenólicos presentes em E. velutina, além de padronizar técnicas que futuramente podem contribuir para compreensão do metaboloma desta espécie.


  • Mostrar Abstract
  • The identification, characterization, and study of bioactive compounds can open doors to understanding numerous applications of interest for research. The arboreal species Erythrina velutina Willd., popularly known as “mulungu,” belonging to the Fabaceae family and the Papilionoideae subfamily, is distributed throughout the Brazilian Northeast. Its leaves, seeds, and mainly trunk bark are used in folk medicine in teas to treat sleep disorders and central nervous system (CNS) conditions. Previous works with the species relate its pharmacological, anxiolytic, and sedative properties, mainly to the presence of flavonoids and benzylisoquinoline alkaloids. Given the above, the study proposal aimed to characterize the phenolic compounds present in the leaves and seeds of the species collected in four different locations in the Serido region of Rio Grande do Norte. Dereplication of the crude ethanol extract of seeds and leaves from different populations occurred with the aid of the GNPS (Global Natural Product Social Molecular Networking) platform, based on mass data and fragmentation patterns obtained by analysis by liquid chromatography coupled with mass spectrometry (LC-MS), which led to the formation of a molecular network that presented clusters attributed to phenolic compounds. A total of 136 compounds were annotated, being 32 flavonoids, two coumarins, two anthocyanins, an aurone, and a chalcone annotated by the platform library. The analysis of unannotated metabolites indicated similarities in the fragmentation pattern related to the aglycones present in the sample with some variations present in the substituents. Principal component analysis (PCA) for the substances noted, and present in samples from different populations of E. velutina made it possible to evidence which compounds allow the differentiation of the studied organs, seeds and leaves. In addition, the PCA analysis for the seed samples allowed to evidence the separation of the samples according to the collection region. Complementary methodologies were also developed and standardized for the analysis of metabolites by gas chromatography, which allowed the identification of different fatty acids such as palmitic, linoleic, oleic and stearic acids present in Erythrina seeds, through the esterification reaction, as well as other substances, such as phytosterols, silylated fatty acids and alkaloids, by silylation reaction with a derivatizing agent BSTFA. Thus, this work contributes to a greater understanding of the profile of phenolic compounds present in E. velutina and standardizing techniques that may contribute to the knowledge of the metabolome of this species in the future.

3
  • AMANDA ROSEANE FARIAS DO NASCIMENTO
  • MACHINE LEARNING PARA PREDIÇÃO DE REAÇÃO ADVERSA AO MEDICAMENTO: APLICAÇÃO A NEONATOS EM TERAPIA INTENSIVA

  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANNE MAGALY DE PAULA CANUTO
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • YONARA MONIQUE DA COSTA OLIVEIRA
  • Data: 31/01/2022

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: O tratamento intensivo de neonatos associa -se a um grande volume de dados em seus prontuários. O tratamento desses dados pode ser feito através de Machine Learning: ferramenta capaz de auxiliar na detecção e na tomada de decisões de uma ampla gama de condições médicas, incluindo reações adversas ao medicamento (RAM). Objetivo: Treinar modelo de predição para auxiliar na detecção de reações adversas aos medicamentos em neonatos internados em uma UTI. Metodologia: estudo observacional desenvolvido na Unidade de Terapia Intensiva Neonatal de um hospital de ensino no Brasil. Dados clínicos foram coletados a partir do seguimento farmacoterapêutico diário, processados e analisados por machine learning através de bibliotecas escritas em linguagem Python. Resultados: Oitocentos e três neonatos foram incluídos no estudo, com média de idade gestacional 32,2 ± 4,2 semanas e peso ao nascer médio de 1807,2 ± 936,6g. A incidência de RAM foi de 10,8%. Antimicrobianos, especialmente os aminoglicosídeos, foram os medicamentos mais prescritos nessa população. Um algoritmo foi treinado e testado na predição de RAM em UTI neonatal, cujas métricas foram precision (0,35) e recall (0,823), com especificidade (80%) e sensibilidade (67%). Conclusão: Existe um alto potencial no método de machine learning na predição de RAM em neonatos internados em uma UTI.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: The intensive care of newborns is associated with a large volume of data in their medical records. The processing of these data can be done through Machine Learning: a tool capable of assisting in the detection and decision-making of a wide range of medical conditions, including adverse drug reactions (ADR). Purpose: Train prediction model to help detect adverse drug reactions in neonates admitted to an intensive care unit (ICU) . Methods: observational study developed in the Neonatal Intensive Care Unit of a teaching hospital in Brazil. Clinical data were collected from the daily pharmacotherapeutic follow-up, processed and analyzed by machine learning through libraries written in Python language. Results: Eight hundred and three newborns were included in the study, with a mean gestational age of 32.2 ± 4.2 weeks and a mean birth weight of 1807.2 ± 936.6g. The incidence of ADR was 10.8%. Antimicrobials, especially aminoglycosides, were the most prescribed drugs in this population. An algorithm was trained and tested in the prediction of ADR in NICU, whose metrics were precision (0.35) and recall (0.823), with specificity (80%) and sensitivity (67%). Conclusion: There is a high potential in the machine learning method for predicting ADR in newborns admitted to an ICU.

4
  • LUANA MEIRINHO DECOSIMO
  • ALCALOIDES DE Erythrina velutina COMO POSSÍVEIS AGENTES BIOATIVOS PARA TRANSTORNOS COGNITIVOS

  • Orientador : RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA CAROLINA LUCHIARI
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • FABIANO PERES MENEZES
  • PERCILIA CARDOSO GIAQUINTO
  • Data: 21/02/2022

  • Mostrar Resumo
  • A doença de Alzheimer (DA) caracteriza-se por um transtorno neurodegenerativo que causa a perda irreversível de memória, sendo a principal causa de demência na população idosa. A patologia não é plenamente compreendida, mas apresenta como principais causas algumas alterações metabólicas que resultam nos sinais característicos da doença, incluindo a deposição de placas de proteínas beta-amiloide e formação de emaranhados neurofibrilares na região do hipocampo e no córtex cerebral, além de disfunção simpática com redução na atividade colinérgica. Atualmente, o arsenal terapêutico desta doença limita-se a algumas substâncias com ação na inibição da enzima colinesterase que bloqueia os efeitos da redução da acetilcolina, resultando em um efeito neuroprotetor. Esta terapia apenas tem a capacidade de melhorar a qualidade de vida, mas não evita a progressão da doença. Por isso, novas opções de produtos naturais tornam-se interessantes. Devido à grande biodiversidade de plantas medicinais encontradas no Brasil, principalmente no bioma da Caatinga exclusivo do território brasileiro. Uma dessas plantas com potencial bioativo é a Erythrina velutina, que apresenta uso popular terapêutico consagrado e possui em sua composição alcaloides isoquinolínicos que demonstraram atividades psicoativas. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar o potencial biológico in vivo de frações enriquecidas em alcaloides de sementes de E. velutina utilizando como modelo experimental o zebrafish (Danio rerio). As sementes foram trituradas e submetidas à extração hidroetanólica por maceração estática, posteriormente à filtração e secagem do extrato, foi realizada uma extração ácido-base para obtenção da fração enriquecida em alcaloides. Através da cromatografia gasosa foi obtido um cromatograma com dois picos majoritários, ambos os picos foram analisados pela espectrometria de massas onde o pico I com tempo de retenção em 28.293 min corresponde ao alcaloide erisodina e o pico II com tempo de retenção em 31.682 min corresponde ao alcaloide erisovina. Essa amostra foi utilizada nos testes biológicos em zebrafish para avaliação toxicológica em embriões e adultos. A fração tem concentração letal para embriões em 17,40ug/ml, mas não é toxica para adultos. Em adultos, a fração causou resposta de diminuição de comportamento tipo-ansioso. Em testes de memória de curta duração, o tratamento com a fração melhorou o desempenho dos animais, mas não foi observada ação da fração para a memória de longa duração. Ao final deste trabalho observamos que a fração enriquecida em alcaloides apresenta potencial ansiolítico e melhora a resposta mnemônica de curto prazo, mostrando assim potencial bioativo frente a aspectos relacionados à Doença de Alzheimer.


  • Mostrar Abstract
  • Alzheimer’s disease (AD) is characterized by a neurodegenerative disorder that causes irreversible memory loss, being the main cause of dementia in the elderly population. The pathology is not fully understood but presents as main causes some metabolic changes that result in the characteristic signs of the disease, including deposition of beta-amyloid protein plaques and formation of neurofibrillary tangles in the hippocampus region and cerebral cortex, as well as sympathetic dysfunction with reduced cholinergic activity. Currently, the therapeutic arsenal of this disease is limited to some substances with action in the inhibition of the enzyme cholinesterase that blocks the effects of acetylcholine reduction, resulting in a neuroprotective effect. This therapy has only the ability to improve the quality of life, but does not prevent the progression of the disease. Therefore, new natural product options become interesting. Due to the great biodiversity of medicinal plants found in Brazil, mainly in the biome of the Caatinga exclusive to the Brazilian territory. One of these plants with bioactive potential is Erythrina velutina, which has a popular therapeutic use and has in its composition isoquinolinic alkaloids that have demonstrated psychoactive activities. Thus, the objective of the study was to evaluate the in vivo biological potential of fractions enriched in E. velutina seed alkaloids using zebrafish (Danio rerio) as an experimental model. The seeds were crushed and subjected to hydroethanolic extraction by static maceration, after filtration and drying of the extract, an acid-base extraction was performed to obtain the fraction enriched in alkaloids. A chromatogram with two main peaks was obtained by gas chromatography, Both peaks were analyzed by mass spectrometry where peak I with retention time at 28,293 min corresponds to the erythsodine alkaloid and peak II with retention time at 31,682 min corresponds to the erythrocyte alkaloid. This sample was used in zebrafish biological tests for toxicological evaluation in embryos and adults. The fraction has a lethal concentration for embryos at 17.40ug/ml, but is not toxic to adults. In adults, the fraction caused a response of decrease to anxiety-type behavior. In short-term memory tests, treatment with the fraction improved the performance of the animals, but no action of the long-term memory fraction was observed.

5
  • MÁRCIA NATÁLIA DA SILVEIRA PINTO
  • DESENVOLVIMENTO DE METODOLOGIA ANALITICA PARA QUANTIFICAÇÃO DE DERIVADOS ACILHIDRAZÔNICOS E ESTUDOS DE DEGRADAÇÃO FORÇADA
  • Orientador : CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARTUR DE SANTANA OLIVEIRA
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • LILIAN GRACE DA SILVA SOLON
  • Data: 24/02/2022

  • Mostrar Resumo
  • As hidrazonas são um grupo de moléculas bastante versáteis e promissoras, pois
    apresentam inúmeras atividades biológicas já relatadas na literatura. Sob essa ótica,
    dependendo do tipo de substituição feita na estrutura, podem apresentar atividade
    anticancerígena, anti-inflamatória, antiviral, antimicrobiana, dentre outras. Diante desse
    contexto três substâncias pertencentes a essa classe: ISVAN, ISBEN e ISANI foram
    caracterizadas por diferentes técnicas analíticas como espectroscopia no infravermelho
    com transformada de Fourier (FTIR), difração de raio X (DRX), termogravimetria (TG)
    e cromatografia liquída de ultra eficiência (UHPLC), além disso, foi desenvolvido um
    método indicativo de estabilidade por cromatografia liquida de ultraeficiência com o
    auxílio de um planejamento fatorial do tipo Box-Behenken de 33 com o objetivo de
    desenvolver um método otimizado para quantificação e identificação das substâncias de
    forma simultânea. Com os resultados obtidos do DRX e FTIR foi possível identificar a
    natureza cristalina das moléculas e confirma a presença dos principais grupos funcionais
    presente na estrutura das substâncias, garantindo assim a identidade molecular. Com
    relação a técnica termoanalítica, essa permitiu conhecer o comportamento térmico dos
    três derivados acilhidrazônicos e para isso foi utilizado quatro razões de aquecimento
    (5,10,15 e 20 ºC min-1) sob atmosfera de nitrogênio, o perfil da curva DTG sugere que a
    perda de massa para ISVAN e ISBEN acontece em uma única etapa, enquanto que para
    ISANI a curva DTG sugere perda de massa em três etapas, com a curvas
    termogravimétricas também foi possível realizar o estudo de cinética do tipo dinâmico
    através do método Ozawa e com resultado foi visto que ISVAN apresenta maior
    estabilidade uma vez que apresenta maior energia de ativação. Também foi realizado o
    estudo de degradação forçada nas condições hidrolítica acida e básica, oxidativa,
    fotoestabilidade, e termoanalítica, como um dos parâmetros para validação do método
    cromatográfico desenvolvido, bem como para conhecimento da estabilidade intrínseca
    das substâncias e sua rota de degradação.

  • Mostrar Abstract
  • Hydrazones are a group of very versatile and promising molecules, asthey have numerous
    biological activities already reported in the literature. From this perspective, depending
    on the type of replacement made in the structure, they may have anticancer, anti
    inflammatory, antiviral, antimicrobial activity, among others. In this context, three
    substances belonging to this class: ISVAN, ISBEN and ISANI were characterized by
    different analytical techniques such as Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR),
    X-ray diffraction (XRD), thermogravimetry (TG) and ultraviolet liquid chromatography.
    efficiency (UHPLC), in addition, an indicative method of stability was developed by
    ultra-efficiency liquid chromatography with the aid of a 33 Box-Behenken factorial
    design with the objective of developing an optimized method for quantification and
    identification of substances in an efficient way. simultaneous. With the results obtained
    from XRD and FTIR, it was possible to identify the crystalline nature of the molecules
    and confirm the presence of the main functional groups present in the structure of the
    substances, thus guaranteeing the molecular identity. Regarding the thermoanalytical
    technique, it allowed to know the thermal behavior of the three acylhydrazonic derivatives
    and for that, four heating rates were used (5,10,15 and 20 ºC min-1) under nitrogen
    atmosphere, the profile of the DTG curve suggests that the mass loss for ISVAN and
    ISBEN happens in a single step, while for ISANI the DTG curve suggests mass loss in
    three steps, with the thermogravimetric curves it was also possible to carry out the
    dynamic type kinetics study through the Ozawa method and with result was seen that
    ISVAN has greater stability since it has higher activation energy. A forced degradation
    study was also carried out under acidic and basic hydrolytic, oxidative, photostability,
    and thermoanalytical conditions, as one of the parameters for validating the
    chromatographic method developed, as well as for knowing the intrinsic stability of
    substances and their degradation route.
6
  • MIKAELI MEDEIROS DANTAS
  • POTENCIAL DO EXTRATO HIDROETANÓLICO DAS CASCAS DO CAULE DE Commiphora leptophloeos: TOXICIDADE SUBCRÔNICA E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTINOCICEPTIVA EM CAMUNDONGOS

  • Orientador : GERLANE COELHO BERNARDO GUERRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GERLANE COELHO BERNARDO GUERRA
  • AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • JULIANA KÉSSIA BARBOSA SOARES
  • Data: 04/03/2022

  • Mostrar Resumo
  • A espécie vegetal Commiphora leptophloeos (Mart.) J.B. Gillett (Burseraceae), destaca-se por
    ser uma planta utilizada na medicina popular no tratamento condições inflamatórias em geral.
    Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antinociceptiva e a
    toxicidade subcrônica do extrato hidroetnólico das cascas do caule de C. leptophloeos em
    camundongos. Inicialmente, a toxicidade subcrônica foi avaliada durante 28 dias em três
    diferentes doses (200, 400 e 800 mg/kg) por via oral e relizada analises comportamentais
    (screening hipocrático, teste Campo Aberto e Rotarod), mortalidade, alteração dos parâmetros
    hematológicos, alterações macroscópica e histopatológica dos órgãos (coração, fígado, baço e
    rins), e avaliação de marcadores da inflamação e do extresse oxidativo (MPO e MDA). A
    atividade antinociceptiva do EHCL (100, 200 e 400 mg/kg) foi avaliado in vivo através de
    modelos de dor induzidas por agentes químicos e termíco, como os testes de contorções
    abdominais induzidas por ácido acético, da formalina e placa quente, respectivamente. Com
    intuito de avaliar a participação de receptores opióides, dos canais de K+ sensíveis a ATP e da
    via L-arginina-NO na ação antinociceptiva, realizou-se pré-tratamento com naloxona,
    glibenclamida ou azul de metileno, respectivamente, antes da administração da dose de 400
    mg/kg. O estudo de toxicidade subcrônica mostrou que o extrato por via oral nas doses de 200,
    400 e 800 mg/kg não apresentou alterações significativas aos parâmetros comportamentais,
    locomotor e hematológico. No entanto, na análise histopatológica, a dose de 800 mg/kg mostrou
    sinais indicativos de nefrotoxicidade. O EHCL na dose de 100 e 200 mg/kg demonstrou possuir
    efeito antinociceptivo contra estímulo químico, enquanto a dose de 400 mg/kg apresentou efeito
    antinociceptivo frente aos estímulos químicos e térmico. A glibenclamida associada ao EHCL
    reduziu de forma parcial o efeito antinociceptivo do extrato, demonstrando possível
    envolvimento com os canais de K+ sensível ao ATP. A administração do azul de metileno com
    o EHCL causou uma potencialização do efeito antinociceptivo do extrato, indicando
    envolvimento na via cGMP. A utilização da naloxona juntamente com o extrato resultou na
    inibição do efeito analgésico do EHCL, demonstrando que o extrato esta envolvido no sistema
    opioide. Finalmente, os resultados obtidos nesse trabalho justificam uso das cascas do caule de
    C. leptophloeos na medicina popular para tratamento da dor e contribuiem para o
    desenvolvimento de um possível fitoterápico eficaz e seguro com propriedades analgésicas.

  • Mostrar Abstract
  • The plant species Commiphora leptophloeos (Mart.) J.B. Gillett, stands out for being a
    medicinal plant used in the treatment of inflammation in general. Therefore, this work aims to
    evaluate the antinociceptive activity and subchronic toxicity of the hydroethnolic extract of the
    stem bark of C. leptophloeos in mice. Initially, subchronic toxicity was evaluated for 28 days at three
    different doses (200, 400 and 800 mg/kg) orally and behavioral analyzes were performed (Hippocratic
    screening, Campo Aberto test and Rotarod), mortality, alteration of hematological parameters,
    alterations macroscopic and histopathological analysis of organs (heart, liver, spleen and kidneys), and
    evaluation of markers of inflammation and oxidative stress (MPO and MDA).The potential
    antinociceptive effect of the EHCL (100, 200 and 400 mg/kg) was evaluated in vivo through
    models of pain induced by chemical and thermal agents, such as the abdominal writhing tests
    induced by acetic acid, formalin and hot plate, respectively. In order to evaluate the participation
    of opioid receptors, ATP-sensitive K+ channels and the L-arginine-NO pathway in the
    antinociceptive action, pre-treatment with naloxone, glibenclamide or methylene blue was
    performed, respectively, before the administration of the dose of 400 mg/kg. The subchronic
    toxicity study showed that the oral extract at doses of 200, 400 and 800 mg/kg did not present
    significant changes in behavioral, locomotor and hematological parameters. However, on
    histological analysis, the dose of 800 mg/kg showed signs that indicate nephrotoxicity. The
    EHCL at doses of 100 and 200 mg/kg showed an antinociceptive effect against chemical
    stimuli, while the dose of 400 mg/kg showed an antinociceptive effect against chemical and
    thermal stimuli. Glibenclamide associated with EHCL partially reduced the antinociceptive
    effect of the extract, demonstrating possible involvement with ATP-sensitive K+ channels. The
    administration of methylene blue with EHCL caused a potentiation of the antinociceptive effect
    of the extract, indicating involvement in the cGMP pathway. The use of naloxone together with
    the extract resulted in the inhibition of the analgesic effect of EHCL, demonstrating that the
    extract is involved in the opioid system. Finally, the results obtained in this work justify the use
    of C. leptophloeos stem bark in folk medicine to treat pain and contribute to the development
    of a possible safe and effective herbal medicine with analgesic properties.
7
  • VICTOR DE LIMA SOARES
  • AVALIAÇÃO DO PERFIL IMUNOMOLECULAR DE PACIENTES DIAGNOSTICADOS COM LEUCEMIA LINFOIDE AGUDA PHILADELPHIA POSITIVA

  • Orientador : GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • GUSTAVO HENRIQUE DE MEDEIROS OLIVEIRA
  • Data: 18/04/2022

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) é uma doença maligna do sistema linfo-hematopoético caracterizada pelo acúmulo de precursores linfóides neoplásicos (linfoblastos) de origem B ou T na medula óssea (MO)e/ou sangue periférico (SP). O diagnóstico e classificação, dessas leucemias, ocorre pela classificação morfológica Franco-Americana-Britânica (L1, L2 ou L3) associada a características do perfil imunológico de malignidade de células T ou B, com base no perfil de expressão de anticorpos monoclonais (AcMo) dirigidos contra os antígenos de diferenciação celular por citometria de fluxo (CF). Vários estudos têm demonstrado que imunofenótipos de células blásticas nem sempre exibem característica de diferenciação linfóide normais, mas exibem imunofenótipos aberrantes. Assim, blastos de alguns casos de LLA B podem possuir antígenos T ou mielóides assim como de células T de LLA podem possuir antígenos B ou mielóides. Objetivos: Determinar o perfil imunofenotípico pela CF em 88 pacientes com LLA (linhagem B ou T) diagnosticados no Laboratório de Citometria de Fluxo do Hemocentro Dalton Cunha – HEMONORTE, do estado do Rio Grande do Norte, Basil. Metodologia: Todas as amostras de SP e/ou MO foram submetidasà imunofenotipagem por CF usando um painel de AcMo específico para o diagnóstico de leucemias agudas (LA) diretamente conjugados a fluorocromos. Resultados: A faixa etária dos pacientes variou de 1 mês a 84 anos, com mediana de 13 anos sendo 62,5% do sexo masculino. A cepa observada mais frequente foi a B e o subtipo mais evidente foi a LLA Pré-B Comum. Dentre os marcadores celulares avaliados, os mais expressos na linhagem B foram CD19, CD10 e cCD79a e os antígenos mais expressos na linhagem T foram CD3, CD7, CD5 e CD2. Uma pequena porcentagem (6,8%) eram células T duplamente positivas. Conclusão: Conclui-se que os indivíduos com LLA neste estudo apresentam características demográficas, clínicas e imunofenotípicas semelhantes às observadas em outros estudos, demonstrando que a CF é uma metodologia essencial no diagnóstico e seguimentos dessas leucemias.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) is a malignant disease of the lympho-hematopoietic system characterized by the accumulation of neoplastic lymphoid precursors (lymphoblasts) of origin B or T in the bone marrow (BM) and/or peripheral blood (PB). The diagnosis and classification of these leukemias occurs by the French-American-British morphological classification (L1, L2 or L3) associated with characteristics of the immune profile of T or B cell malignancy, based on the expression profile of monoclonal antibodies (MoAb) directed against cell differentiation antigens by flow cytometry (FC). Several studies have found that blast cell immunophenotypes do not always have the characteristics of normal lymphoid differentiation, but exhibit aberrant immunophenotypes. Thus, the blasts of some cases of ALLB may have T or myeloid antigens, as well as T cells of ALL may have B or myeloid antigens. Objectives: To determine the immunophenotypic profile by FC in 88 patients with ALL (lineage B or T) diagnosed at the Flow Cytometry Laboratory of the Hemocentro Dalton Cunha - HEMONORTE, in the state of Rio Grande do Norte, Brasil. Methodology: The samples, such as PB and/or BM, were subjected to FC immunophenotyping using a specific MoAb panel for the diagnosis of acute leukemia (AL) directly conjugated to fluorochromes. Results: The age of patients ranged from 1 month to 84 years, with amedian of 13 years, with 62.5% being male. The most frequent strain observed was B and the most evident subtype was the Common Pre-B ALL. Among the cell markers emitted, the most expressed in lineage B were CD19, CD10, HLADR and cCD79a and the most expressed antigens in lineage T were CD3, CD7, CD5 and CD2. A small percentage (6.8%) was doubly positive T cells. Conclusion: It is concluded that theindividuals with ALL in this study have demographic, clinical and immunophenotypic characteristics similar to those observed in other studies, demonstrating that FC is an essential methodology in the diagnosis and follow-up of these leukemias.

8
  • ALEPH MATTHEWS DA SILVA SOUZA
  • MICROEMULSÃO TÓPICA CONTENDO ANFOTERICINA B VISANDO O TRATAMENTO DE ONICOMICOSES
  • Orientador : ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANSELMO GOMES DE OLIVEIRA
  • ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • Data: 07/07/2022

  • Mostrar Resumo
  • O tratamento tópico da onicomicose é desafiador devido a complexidade etiológica da doença, que requer uma formulação de uso tópico com parâmetros adequados e um antifúngico potente. Neste estudo, buscou-se desenvolver uma formulação microemulsionada otimizada contendo AmB para aplicação tópica em matriz ungueal visando o tratamento de onicomicoses. Inicialmente, o método de incorporação de AmB na formulação microemulsionada de base foi otimizado com a adição do solvente orgânico e promotor de permeação dimetilsulfóxido. Subsequentemente, planejamentos fatoriais foram realizados para determinação de um par de antioxidantes (ácido ascórbico e beta-caroteno) e suas respectivas concentrações de uso que fotoestabilizasse a AmB na formulação. Além disso, um agente estruturante de fase externa (carboximetilcelulose) foi adicionado a formulação visando ganho de viscosidade e melhorias nas propriedades de aplicação tópica ungueal. A partir destas alterações, parâmetros de estabilidade a 5 ± 2 ºC durante 90 dias como teor de AmB, pH, condutividade elétrica, distribuição de tamanho de gotícula, potencial zeta, conteúdo não-volátil e adesividade foram estudados. Adicionalmente a performance biológica do nanocarreador desenvolvido foi avaliada pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM), estudo de permeação e retenção ex vivo e toxicidade in vitro. Os resultados evidenciaram que a AmB permanece com 100 % do seu teor, pH em torno de 5,21 ± 0,01 e condutividade elétrica de 39,23 ± 0,17 mS/cm ao longo de todo tempo estudado. O mesmo foi observado para o tamanho de gotícula, índice de polidispersão e potencial zeta (24,20 ± 1,65 nm, 0,31 ± 0,02, 26,41 ± 1,66 mV respectivamente). Adicionalmente, o estudo de conteúdo não-volátil e adesão mostraram-se apropriados e a microemulsão otimizada apresentou CIM de 2,50 até 5,00 μg/mL frente a diferentes cepas de Candida spp. Finalmente o estudo de permeação revelou que o nanocarreador consegue permear sobre uma matriz ungueal liberando até 25,50 ± 1,21 % da AmB presente no nanocarreador, atingido, portando, uma concentração superior à CIM. Qualitativamente, foi possível observar indicativos de retenção da formulação nas membranas ungueais avaliadas. Por fim, estudos de toxicidade in vitro em hemácias humanas indicaram que a formulação foi capaz de liberar o íon potássio intracelular e não foi capaz de liberar hemoglobina, parâmetros que, juntos, sugerem que a formulação não apresentou toxicidade celular in vitro no modelo celular avaliado.

  • Mostrar Abstract
  • Abstract: Onychomycosis induced by Candida spp. has several limitations regarding its treatment.
    Nail lacquers display the potential to overcome these drawbacks by providing therapeutic com
    pliance and increasing local drug bioavailability. Thus, this work aimed to produce a nail lacquer
    loaded with Amphotericin B (AmB) and evaluate its performance. The AmB-loaded nail lacquer
    was produced and preliminarily characterized. An AmB quantifification method was developed.
    Stability, drug release, permeability and anti-Candida activity assays were conducted. The analytical
    method validation met the acceptance criteria. The drug loading effificiency was 100% (0.02 mg/g
    of total product), whereas the AmB stability was limited to ∼ =7 days (∼=90% remaining). The nail lacquer displayed a drying time of 187 s, non-volatile content of around 20%w/w, water-resistance of approximately 2%w/w of weight loss and satisfactory in vitro adhesion. Moreover, the in vitro antifungal activity against different Candida spp. strains was confifirmed. The AmB release and the ex vivo permeability studies revealed that AmB leaves the lacquer and permeates the nail matrix
    in 47.76 ± 0.07% over 24 h. In conclusion, AmB-loaded nail lacquer shows itself as a promising
    extemporaneous dosage form with remarkable anti-Candida activity related to onychomycosis.
9
  • DEBORA ARAUJO OTHON DE AQUINO
  • DESENVOLVIMENTO DE ANTISSÉPTICO BUCAL EM PASTILHA PARA PREVENÇÃO DA CÁRIE DENTAL
  • Orientador : MARCIO FERRARI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA PAULA BARRETO GOMES
  • MARCIO FERRARI
  • THAIS NOGUEIRA BARRADAS
  • Data: 21/07/2022

  • Mostrar Resumo
  • A presente pesquisa teve como objetivo o desenvolvimento de pastilha antisséptica bucal contendo cloreto de cetilpiridínio (CCP), utilizando a tecnologia de compressão direta. Para tanto, foi realizada a análise dos excipientes farmacêuticos e a avaliação das características das formulações. Foi realizado estudo de pré-formulação com avaliação de compatibilidade do ingrediente farmacêutico ativo (IFA) com os excipientes utilizados por meio de técnicas termoanalíticas: calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TG) e análise térmica diferencial (DTA); e espectroscopia no infravermelho médio (FTIR) e próximo (FT-NIR). Também foram avaliadas as características farmacotécnicas da mistura dos componentes na forma de pó e características físico-químicas e organolépticas das pastilhas obtidas por compressão direta. Foram realizados estudos de estabilidade preliminar e acelerada em condições diferentes de armazenamento e de material de acondicionamento. Os resultados de DSC, TG e DTA apontam para interações entre o IFA e o mentol, com alteração do ponto de fusão do IFA; os dados obtidos por FTIR e FT-NIR demonstraram uma interação física comprovada por meio de análise estatística de correlação de Pearson. Foi obtido um produto com características farmacotécnicas adequadas quanto ao fluxo e compressibilidade, considerando as avaliações de características de Índice de Carr (IC), Razão de Hausner (RH), distribuição granulométrica das partículas, velocidade de escoamento, ângulo de repouso e umidade. As pastilhas obtidas após compressão atenderam as características de peso, dureza, espessura, friabilidade, desintegração, características organolépticas e análise do valor de pH. Os estudos de estabilidade apontaram que o produto é estável nas condições estudadas quando armazenados em frascos de vidro ou polietileno tereftalato (PET). Assim, pode-se considerar que pastilhas de CCP com características farmacotécnicas e estabilidade adequadas foram obtidas.

  • Mostrar Abstract
  • The present research aimed to develop an oral antiseptic lozenge containing
    cetylpyridinium chloride (CPC), using direct compression technology. Therefore, the
    analysis of pharmaceutical excipients and the evaluation of the characteristics of the
    formulations were carried out. A preformulation study was carried out to assess the
    compatibility of the active pharmaceutical ingredient (API) with the excipients using
    thermoanalytical techniques: differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry
    (TG) and differential thermal analysis (DTA); and mid-infrared (FTIR) and near-infrared
    (FT-NIR) spectroscopy. The pharmacotechnical characteristics of the mixture of the
    components in powder form and the physicochemical and organoleptic characteristics of
    the tablets obtained by direct compression were also evaluated. Preliminary and
    accelerated stability studies were carried out under different conditions of storage and
    packaging material. The DSC and TG results points to interactions between API and
    menthol, with change in the melting point of API. The data obtained by FTIR and FT-NIR
    demonstrated a physical interaction proven through statistical analysis of Pearson's
    correlation. A product with adequate pharmacotechnical characteristics in terms of flow
    and compressibility was obtained, considering the evaluations of characteristics of Carr
    Index (CI), Hausner Ratio (RH), particle size distribution, flow velocity, angle of repose
    and humidity. The lozenges obtained after direct compression met the characteristics,
    considering weight, hardness, thickness, friability, disintegration, organoleptic
    characteristics and pH value for evaluation. Stability studies showed that the product is
    stable under the conditions studied when stored in glass or polyethylene terephthalate
    (PET) bottles. Thus, it can be considered that CPC lozenges with adequate
    pharmacotechnical characteristics and stability were obtained.
10
  • TALITA AZEVEDO AMORIM
  • NANOCÁPSULAS FURTIVAS DE ÓLEO DE COPAÍBA CONTENDO ANFOTERICINA B: UM SISTEMA PROMISSOR NO TRATAMENTO DE INFECÇÕES FÚNGICAS SISTÊMICAS
  • Orientador : ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • MARIANE CAJUBÁ DE BRITTO LIRA NOGUEIRA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 25/07/2022

  • Mostrar Resumo
  • As infecções causadas por Candida spp. apresentam ampla incidência mundial sendo consideradas um grande desafio para a saúde pública devido a sua alta morbimortalidade. A anfotericina B embora seja utilizada no tratamento de infecções fúngicas, apresenta relevante toxicidade associada. Baseado nisso, inúmeras estratégias têm sido desenvolvidas com o intuito de reduzir a toxicidade e os riscos causados por esta molécula. Atualmente, os nanossistemas têm ganhado destaque especialmente quando associadas à produtos naturais de relevância terapêutica, dentre os nanossistemas as nanocápsulas se caracterizam por possuírem um núcleo com capacidade de veiculação envolto por uma matriz polimérica. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver nanocápsulas poliméricas furtivas utilizando como matriz polimérica o etil-2-cianoacrilato (ETCA) contendo óleo resina de copaíba e anfotericina B em seu núcleo e funcionalizadas com albumina para potencial utilização no tratamento de doenças fúngicas sistêmicas. Inicialmente, o óleo-resina de copaíba foi caracterizado utilizando CG-EM, onde o ácido copálico, β-bisaboleno, β-cariofileno e α-bergamoteno foram identificados como compostos majoritários. Posteriormente, a modelagem molecular in silico foi realizada a fim de verificar uma possível ação antifúngica dos compostos do óleo de copaíba com proteínas fúngicas. Uma forte interação entre os compostos e o sítio proteico da Δ-14-esterol foi observada indicando a atividade antifúngica através da inibição da síntese de ergosterol. Em seguida, foram desenvolvidas pela técnica de polimerização interfacial duas nanocápsulas: uma contendo o Pluronic® F-68 como estabilizante polimérico (NF1), e outra à base de quitosana de baixo peso molecular (NF2). A NF1 apresentou tamanho médio de 255,1 ± 1,1 nm, índice de polidispersão (PdI) de 0,144 ± 0,020 e potencial zeta de - 27,6 ± 0,15 mV. Já a NF2 apresentou tamanho médio de 342,6 ± 4,5 nm, PdI de 0,162 ± 0,022 e potencial zeta de + 20,2 ± 0,68 mV. A fim de otimizar o sistema NF2 foi realizado um planejamento experimental do tipo 32 utilizando o óleo de copaíba, ETCA e a quitosana como variáveis independentes. Após a análise, foi selecionada a formulação correspondente ao tamanho 239,7 ± 4,4 nm, PdI 0,160 ± 0,022 e potencial zeta de + 43,1 ± 1,62 mV (NFO). Por fim, para a funcionalização do sistema, a albumina (1 mg/mL) foi ligada na superfície das NFO contendo anfotericina B encapsulada (NFAMB 0,2) com eficiência de encapsulamento de 12,57 %, apresentando tamanho de 142,5 ± 5,0 nm, PdI de 0,198 ± 0,003 e potencial zeta de + 23,6 ± 1,51 mV. Os resultados de calorimetria de titulação isotérmica (ITC) confirmam a ligação entre a albumina e a superfície das nanopartículas conduzidas pela entalpia associada ao mecanismo de atração eletrostática e ligações de hidrogênio. Em conclusão, os ensaios realizados permitiram o desenvolvimento de nanocápsulas contendo anfotericina B e óleo de copaíba, sendo estas funcionalizadas com albumina com características furtivas apresentando-se como um potencial sistema para o tratamento de infecções fúngicas sistêmicas.

  • Mostrar Abstract
  • Infections caused by Candida spp. have a worldwide incidence and are considered a
    major challenge for public health due to its high morbidity and mortality. Although
    amphotericin B is used in the treatment of fungal infections, it has relevant associated
    toxicity. Based on that, several strategies have been developed to reduce the toxicity
    and risks caused by this molecule. Currently, nanosystems have assumed prominence
    especially when associated with natural products of therapeutic relevance among them
    nanocapsules provide a unique structure with polymeric shell and a core with a
    potential drug delivery. Thus, the aim of this work was to develop polymeric
    nanocapsules using ethyl-cyanoacrylate (ETCA) as matrix with a stealth shell
    containing copaiba oil-resin and amphotericin B core as a promising system for the
    treatment of systemic fungal infections. Then, the copaiba oil-resin was characterized
    using GC-MS and, copalic acid, β-bisabolene, β-caryophyllene and α-bergamothene
    were identified as major compounds. Subsequently, in silico molecular modeling was
    carried out to verify a possible antifungal activity from copaiba oil compounds and
    fungal proteins. A strong interaction between the compounds and the Δ-14-sterol
    protein site indicating antifungal activity through inhibition of ergosterol synthesis. Two
    systems were developed: one containing Pluronic® F-68 as a polymeric stabilizer
    (NF1) and the other containing low molecular weight chitosan (NF2). NF1 had a particle
    mean size of 255.1 ± 1.1 nm, polydispersivity index (PdI) of 0.144 ± 0.020 and zeta
    potential of - 27.6 ± 0.15 mV. NF2 system had a particle mean size of 342.6 ± 4.5 nm,
    PdI of 0.162 ± 0.022 and zeta potential of + 20.2 ± 0.68 mV. To optimize the NF2
    system, an experimental design approach was carried out using as variables, copaiba
    oil, ETCA and chitosan, then it was possible to analyze the influence of the variables
    individually and relating them to each other, so the levels corresponding to particle
    mean size of 239.7 ± 4.4 nm, PdI of 0.160 ± 0.022 and zeta potential of + 43.1 ± 1.62
    mV was selected (NFO). Thus, aiming the functionalization of the system, albumin (1
    mg/mL) was bound on the surface of NFO system containing encapsulated
    amphotericin B (NFAMB 0.2) (%EE = 12.57 %) with particle mean size of 142.5 ± 5.0
    nm, PdI of 0.198 ± 0.003 and zeta potential of + 23.6 ± 1.51 mV. ITC results confirm
    the interaction between albumin and the surface of the nanoparticles conducted by
    enthalpy due to the mechanism of electrostatic attraction and hydrogen bonds. Tests
    carried out allowed the development of polymeric nanocapsules containing
    amphotericin B and copaiba oil, which were functionalized with albumin presenting
    stealth properties as a potential system for the treatment of systemic fungal infections.
11
  • CARLA CAROLINE RIBEIRO DE MENDONÇA
  • MODELAGEM MOLECULAR DE INIBIDORES DOS CANAIS DE TRPM8
  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • EDEILDO FERREIRA DA SILVA JUNIOR
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • Data: 27/10/2022

  • Mostrar Resumo
  • Neste trabalho, 53 α-fenilglicina amidas descritas por KOBAYASHI e colaboradores (2016) e (2021) foram submetidas a análises por uma diversa gama de abordagens in silico como activity cliff, docking molecular, dinâmica molecular e construção de modelos de QSAR-3D. Isso com o objetivo de otimizar sua estrutura para elaboração de protótipos mais assertivos para inibir o TRPM8. Ele é um canal iônico não seletivo, com ativação polimodal, que possui relação com algumas doenças como enxaqueca, bexiga hiperativa e câncer de próstata. As estruturas possuem rota sintética consolidada, assim como os protótipos propostos. Os estudos in silico foram utilizados para prever as propriedades 3D das estruturas derivadas das existentes com o modelo de QSAR híbrido que apresentou aceitáveis resultados estatísticos (R2 Adj = 0.87, Q2 loo = 0.86, Q2 ext = 0.75). Logo, os resultados obtidos indicam que ele pode descrever a relação entre a estrutura e atividade. Com todas as informações, foi visto que quatro protótipos por possuírem pIC50 preditivo > 7.0, com um em destaque por possuir pIC50 preditivo > 8.1, e outras propriedades farmacocinéticas interessantes, são opções de otimização do composto mais promissor de atividade pIC50= 6.68 descrito por KOBAYASHI e colaboradores (2021). Logo, tais compostos podem ser sintetizados e estudados para o desenvolvimento de novos fármacos.

  • Mostrar Abstract
  • In this work, 53 α-phenylglycine amides described by KOBAYASHI et al. (2016)
    and (2021) were subjected to analysis by a diverse range of in silico approaches such
    as activity cliff, molecular docking, molecular dynamics and QSAR-3D model building.
    This with the objective of optimizing its structure for the elaboration of more assertive
    prototypes to inhibit TRPM8. It is a non-selective ion channel, with polymodal
    activation, which is related to some diseases such as migraine, overactive bladder and
    prostate cancer. The structures have a consolidated synthetic route, as well as the
    proposed prototypes. In silico studies were used to predict the 3D properties of
    structures derived from existing ones with the hybrid QSAR model that presented
    acceptable statistical results (R2 Adj = 0.87, Q2 loo = 0.86, Q2 ext = 0.75). Therefore, the
    results obtained indicate that it can describe the relationship between structure and
    activity. With all the information, it was seen that four prototypes for having predictive
    pIC50 > 7.0, with one highlighted for having predictive pIC50 > 8.1, and other interesting
    pharmacokinetic properties, are options for optimizing the most promising compound
    of pIC50 = 6.68 activity described by KOBAYASHI and collaborators (2021). Therefore,
    such compounds can be synthesized and studied for the development of new drugs.
12
  • ANNAMAIRLLA DO NASCIMENTO OLIVEIRA
  • AVALIAÇÃO DA RESPOSTA IMUNE HUMORAL EM ANIMAIS IMUNIZADOS COM ANTÍGENOS TOTAIS DE Leishmania amazonensis ASSOCIADOS A DIFERENTES ADJUVANTES VACINAIS
  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DIEGO MARCELO GUERIN AGUILAR
  • GABRIELA SANTOS GOMES
  • LUIZ FELIPE DOMINGUES PASSERO
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • Data: 28/11/2022

  • Mostrar Resumo
  • As doenças tropicais negligenciadas (DTNs), são um grande desafio para a saúde pública. As
    leishmanioses, exemplo clássico dessas DTNs, acometem milhões de pessoas em todo mundo,
    principalmente aquelas em situação de pobreza e vunerabilidade. Seu tratamento consiste no
    uso de medicamentos tóxicos e de custo elevado. Atualmente, o meio de prevenção a
    leishmaniose é através do controle vetorial. Porém, tais medidas são ineficientes, tornando
    urgente o desenvolvimento de uma alternativa segura, eficaz e abrangente. Neste cenário a
    vacina apresenta-se como uma ótima alternativa, não apenas como profilaxia, mas também
    para tratamento. Portanto, o presente estudo objetivou caracterizar a capacidade
    imunoestimulatória envolvendo antígenos totais de Leishmania amazonensis e, paralelamente,
    avaliar o potencial imunoadjuvante de proteínas estruturais de Triatoma-virus (VP1, VP2 e
    VP3) comparando sua atividade a outros adjuvantes já estabelecidos na literatura, como o
    adjuvante de Freund e hidróxido de alumínio. Inicialmente, foi realizado o cultivo das formas
    promastigotas de L. amazonensis; obtenção e quantificação do extrato proteico total e
    posterior caracterização do perfil eletroforético. Posto esses processos, os camundongos
    BALB/c (Mus musculus) foram distribuídos em cinco grupos: PBS (controle negativo),
    extrato de L. amazonensis, extrato + adjuvante de Freund, extrato + hidróxido de alumínio,
    por fim, extrato + VPs. Os grupos foram submetidos a imunização primária (100µg), e
    secundária(100µg), com intervalo de 30 dias entre elas. Amostras de soro foram obtidas 15 e
    30 dias posterior a imunização primária, e 7, 15, 30, 40, 50 e 60 dias posterior a dose de
    reforço. Após esse processo, foi realizado a caracterização da resposta imune humoral, em que
    foi levado em consideração o perfil de anticorpos específicos IgG total a e seus isotipos IgG1,
    IgG2a, IgG2b e IgG3 anti-L. amazonensis, bem como o perfil de IgG total anti-Proteínas
    estruturais (VP1, VP2 e VP3). Para a caracterização da resposta imune celular, inicialmente
    foi realizada a Reação de Hipersensibilidade Tardia (DTH), seguida do ensaio de
    imunoproliferação para quantificação de citocinas. Os resultados obtidos demonstraram o
    caráter imunoestimulatório dos adjuvantes empregados nesta pesquisa, bem como, o potencial
    imunomodulatório das VPs estudadas, uma vez que as análises demonstraram seu potencial
    em induzir preferencialmente títulos de IgG2b e IgG3 quando associadas ao extrato de L.
    amazonensis. O perfil de anticorpos IgG3 anti-Leishmania amazonensis foi mais acentuado
    no grupo de animais imunizados com as VPs quando comparado aos demais grupos do
    estudo. Os títulos de IgG total anti-proteínas estruturais, evidenciou os maiores títulos dessa
    imunoglobulina para a VP1, o que sugere sua atividade imunoadjuvante potencializada frente a VP2 e VP3 quando associadas ao extrato total de L. amazonensis. Através da análise do
    ensaio de DTH, é sugerido o potencial imunoestimulatório das formulações vacinais
    propostas por este estudo. Em conjunto, os resultados obtidos demostram ser promissores para
    elucidação das VPs como adjuvantes em preparações vacinais. Contudo, estudos futuros,
    permitirão atestar os presentes resultados.

  • Mostrar Abstract
  • Neglected tropical diseases (NTDs) are a major public health challenge. Leishmaniasis, a
    classic example of these NTDs, affects millions of people around the world, especially those
    in poverty and vulnerability. Its treatment consists of the use of toxic and expensive drugs.
    Currently, the means of preventing leishmaniasis is through vector control. However, such
    measures are inefficient, making it necessary to develop a more safe and effective alternative.
    In this scenario, the vaccine presents themselves an alternative, not only for prophylaxis, but
    also for treatment. Therefore, the present study aimed to characterize the immunostimulatory
    capacity of total Leishmania amazonensis antigens, parallel to the evaluation of the Triatoma
    virus’s structural proteins (VP1, VP2, and VP3) immunoadjuvant potential comparing their
    activity to adjuvants estabilished in the literature, such as: Freud’s adjuvante and aluminum
    hydroxide. Initially, promastigotes of L. amazonensis were cultivated; a total protein extract
    was obtained and the electrophoretic profile was characterized. After these processes,
    BALB/c mice (Mus musculus) were divided into five groups: PBS (negative control), L.
    amazonensis extract, extract + Freund's adjuvant, extract + aluminum hydroxide, and finally,
    extract + VPs. The groups were submitted to primary (100µg) and secondary (100µg)
    immunization, with an interval of 30 days between them. Serum samples were obtained 15
    and 30 days after the primary immunization, and 7, 15, 30, 40, 50 and 60 days after the
    booster dose. After this process, the characterization of the humoral immune response was
    carried out, in which the profile of specific antibodies total IgG a and its isotypes IgG1,
    IgG2a, IgG2b and IgG3 anti-L. amazonensis was taken into account, as well as the profile of
    total IgG anti-Structural Proteins (VP1, VP2 and VP3). To characterize the cellular immune
    response, the Delayed Hypersensitivity Reaction (DTH) was initially performed, followed by
    the immunoproliferation assay to quantify cytokines. The results obtained demonstrated the
    immunostimulatory character of the adjuvants used in this research, as well as the
    immunomodulatory potential of the studied VPs, since the analyzes demonstrated their
    potential to preferentially induce IgG2b and IgG3 titers when associated with the L.
    amazonensis extract. The profile of IgG3 anti-Leishmania amazonensis antibodies was more
    pronounced in the group of animals immunized with VPs when compared to the other groups
    in the study. The titers of total IgG anti-structural proteins showed the highest titers of this
    immunoglobulin for VP1, which suggests its potentiated immunoadjuvant activity against
    VP2 and VP3 when associated with the total extract of L. amazonensis. Through the analysis
    of the DTH assay, the immunostimulatory potential of the vaccine formulations proposed by this study is suggested. Taken together, the results obtained show promise for the elucidation
    of VPs as adjuvants in vaccine preparations. However, future studies will allow attesting to
    the present results.
13
  • PRISCILLA KARILLINE DO VALE BEZERRA
  • PROBLEMAS RELACIONADOS A MEDICAMENTOS EM GESTANTES DE ALTO RISCO
  • Orientador : RAND RANDALL MARTINS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • IVONETE BATISTA DE ARAUJO
  • RAND RANDALL MARTINS
  • YONARA MONIQUE DA COSTA OLIVEIRA
  • Data: 28/11/2022

  • Mostrar Resumo
  • As gestantes são particularmente vulneráveis a problemas relacionados a medicamentos (PRMs), principalmente as de alto risco. Apesar da sua relevância, são escassos dados sobre frequência, tipo, causa, e fatores associados nessa população. Na América Latina, até onde sabemos, inexistem estudos com essa temática. O objetivo desse estudo foi caracterizar os PRMs em gestantes de alto risco com quadros de hipertensão gestacional (HG) e diabetes mellitus gestacional (DMG) segundo frequência, tipo, causa, e fatores associados à sua ocorrência no âmbito hospitalar. Estudo observacional, longitudinal e prospectivo que incluiu 571 gestantes hospitalizadas com quadros HG e DMG em uso de pelo menos um medicamento. Os PRMs foram classificados de acordo com Classification for Drug-Related Problems (PCNE V9.00). Além da estatística descritiva, modelo de regressão logística multivariada foi empregado para determinação dos fatores associados aos PRMs. Resultados preliminares apontam um total de 873 PRMs identificados. Os PRMs frequentes foram relacionados à inefetividade terapêutica (72,2%) e ocorrência de eventos adversos (27,0%) e as principais classes farmacológicas envolvidas foram insulinas e metildopa. Logo, os cinco primeiros dias de tratamento, destaca-se a inefetividade da insulina (24,6%), associada à subdose (12,9%) ou frequência de administração insuficiente (9,5%) e a metildopa associada à ocorrência de reações adversas (40,2%) nas primeiras 48h. Menor idade materna (OR 0,966, CI95% 0,938 – 0,995, p = 0,022), menor idade gestacional (OR 0,966, IC95% 0,938 – 0,996, p = 0,026), relato de hipersensibilidade a medicamentos (OR 2,295, CI95% 1,220 – 4,317, p = 0,010), o maior tempo de tratamento (OR 1,237, IC 95%: 1,147 – 1,333, p = 0,001) e número de medicamentos prescritos (OR 1,211, IC 95%: 0,240 – 5,476, p = 0,001) foram fatores de risco para ocorrência de PRMs. Em suma, os PRMs são frequentes em gestantes com quadros de HG e DMG, predominando a inefetividade terapêutica associada a dose insuficiente de
    insulina e ocorrência de eventos adversos, sobretudo a reações adversas da metildopa nas primeiras 48h de tratamento, com tendência a decréscimo até o 5º dia.

  • Mostrar Abstract
  • Pregnant women are particularly vulnerable to medication-related problems (DRPs),
    especially those at high risk. Despite their relevance, data on frequency, type, cause,
    and associated factors in this population are scarce. In Latin America, as far as we
    know, there are no studies on this topic. The aim of this study was to characterize the
    PRMs in high-risk pregnant women with gestational hypertension (GH) and gestational
    diabetes mellitus (GDM) according to frequency, type, cause, and factors associated
    with their occurrence in the hospital setting. This was an observational, longitudinal,
    prospective study that included 571 hospitalized pregnant women with GH and GDM
    conditions using at least one medication. The PRMs were classified according to
    Classification for Drug-Related Problems (PCNE V9.00). In addition to descriptive
    statistics, a multivariate logistic regression model was used to determine the factors
    associated with the PRMs. Preliminary results indicate a total of 873 identified DRPs.
    The most frequent DRPs were related to therapeutic ineffectiveness (72.2%) and
    occurrence of adverse events (27.0%), and the main pharmacological classes involved
    were insulins and methyldopa. Then, the first five days of treatment, the ineffectiveness
    of insulin (24.6%), associated with underdose (12.9%) or insufficient frequency of
    administration (9.5%) and methyldopa associated with the occurrence of adverse
    reactions (40.2%) in the first 48h, stand out. Lower maternal age (OR 0.966, 95% CI
    0.938 - 0.995, p = 0.022), lower gestational age (OR 0.966, 95% CI 0.938 - 0.996, p =
    0.026), report of drug hypersensitivity (OR 2.295, 95% CI 1.220 - 4.317, p = 0.010),
    the longer treatment time (OR 1.237, 95% CI: 1.147 - 1.333, p = 0.001) and number of
    prescribed medications (OR 1.211, 95% CI: 0.240 - 5.476, p = 0.001) were risk factors
    for occurrence of DRPs. In summary, the DRPs are frequent in pregnant women with
    GH and GDM, predominantly therapeutic ineffectiveness associated with insufficient
    insulin dose and occurrence of adverse events, especially methyldopa adverse
    reactions in the first 48h of treatment, with a tendency to decrease until the 5th day.
14
  • KYVIA REGINA FERNANDES VARELA
  • DESENVOLVIMENTO DE NANOFORMULAÇÕES DE PROTÓTIPOS DE VACINAS DE DNA E AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS FÍSICO-QUÍMICOS E BIOLÓGICOS
  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • SUSANA MARGARIDA GOMES MOREIRA
  • WENDY MARINA TOSCANO QUEIROZ DE MEDEIROS
  • Data: 29/11/2022

  • Mostrar Resumo
  • As vacinas de DNA, também denominadas de vacinas gênicas, baseiam-se no uso de
    plasmídeos que codificam sequencias gênicas do patógeno como candidatado antigênico para
    indução da imunidade. As vacinas de DNA possuem inúmeras vantagens quando comparadas
    a outras vacinas, nomeadamente, serem de fácil desenvolvimento, baixo custo de produção,
    segurança e indução de resposta imune celular e humoral. Entretanto, a principal desvantagem
    é uma reduzida taxa de transfecção celular e consequentemente baixa produção endógena do
    antígeno de interesse. Esta desvantagem é devida principalmente à degradação dos plasmídeos
    por nucleases presentes nos tecidos e no interior das células. Dessa maneira, o objetivo deste
    trabalho consiste no desenvolvimento de um nanosistema contendo plasmídeos utilizados em
    modelos de vacinas de DNA. Especificamente os plasmídeos, pVAX1, pVAX1lacZ e
    nTSApVAX1, incorporados à nanopartículas poliméricas de ácido poli-lático (PLA), com e
    sem presença de polietilenoimina (PEI), que consigam proteger e aumentar os níveis de
    transferência gênica dos plasmídeos, e assim construir protótipos vacinais eficientes. Portanto,
    após a formulação, os parâmetros físico-químicos dos sistemas foram avaliados a partir do
    diâmetro médio das partículas, índice de polidispersão (PDI) e potencial zeta. Adicionalmente
    foram realizados, testes de performances, como ensaio de estabilidade físico-química, retardo
    da mobilidade eletroforética, proteção contra degradação enzimática, para diferentes fontes e
    tipos de enzimas, e viabilidade celular in vitro. As nanoformulações produzidas, apresentaram
    tamanho médio em torno de 250 nm e PDI <0,3. Além disso, os sistemas catiônicos (PLA +
    PEI + pDNA) mostraram uma complexação eficiente entre polímeros e pDNAs, caracterizada
    pelo não aparecimento de bandas nos ensaios de eletroforese, mesmo estando frente às enzimas
    de degradação, o que sugere também um grau de proteção das nanopartículas. Entretanto, o
    mesmo perfil não foi observado com as nanoformulações aniônicas (PLA + pDNA), na qual
    houve o aparecimento das bandas referentes aos pDNAs, indicando uma ligação não tão
    eficiente entre os componentes da formulação. Ademais, os sistemas produzidos apresentaram
    uma boa estabilidade físico-química durante seis semanas, bem como viabilidade celular
    adequada (>70%), não apresentando uma relevante citotoxicidade. Dessa forma, os pDNAs
    nanoformulados, demonstram-se como carreadores promissores e seguros, no desenvolvimento
    de protótipos de vacinas de DNA.

  • Mostrar Abstract
  • DNA vacines, also called genetic vacines, are based on the use of plasmids that encode
    pathogen gene sequences as an antigenic candidate for inducing immunity. These vaccines have
    numerous advantages when compared to other vaccines; are easy to develop, low cost of
    production, safety and induction of cellular and humoral immune response. However, its main
    disadvantage is a reduced rate of cell transfection and consequently low endogenous production
    of the antigen of interest. This disadvantage is mainly due to the degradation of plasmids by
    nucleases present in tissues and inside cells. Thus, this study aims to develop a nanosystem
    containing plasmids used in DNA vaccine models. Specifically plasmids pVAX1, pVAX1lacZ
    and nTSApVAX1, incorporated into polymeric polylactic acid (PLA) nanoparticles, with and
    without the presence of polyethyleneimine (PEI), which can protect and increase the levels of
    gene transfer of the plasmids, thus, building efficient vaccine prototypes. Therefore, after
    formulation, the physicochemical parameters of the systems were evaluated from the mean
    particle diameter, polydispersity index (PDI) and zeta potential. Additionally, performance tests
    were performed, such as: physical-chemical stability, electrophoretic mobility delay, protection
    against enzymatic degradation on different sources and types of enzymes, and in vitro cell
    viability. The nanoformulations produced had an average size around 250 nm, PDI <0.3. The
    cationic nanoformulations (PLA + PEI + pDNA) showed good complexation between polymers
    and pDNA, as there was no appearance of bands in the electrophoresis assays, even against the
    degradation enzymes, also suggesting protection. The same profile was not observed with the
    anionic nanoformulations (PLA + pDNA), in which bands referring to the pDNAs appeared,
    indicating a not so efficient binding between the componentes. Moreover, all systems showed
    good physicalchemical stability during a six weeks period, as well asan adequate cell viability
    (>70%), not showing any relevant citotoxicity. Thus, nanoformulated pDNAs are shown to be
    promising and safe carriers in the development of DNA vaccine prototypes.
15
  • MARIA CLARA DA CRUZ CARVALHO
  • RELAÇÃO DAS VITAMINAS “A” & “E” NA INFECÇÃO POR SARS-CoV-2

  • Orientador : VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • TATIANA SADALLA COLLESE
  • BRUNA ZAVARIZE REIS
  • KARLA DANIELLY DA SILVA RIBEIRO RODRIGUES
  • VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • Data: 30/11/2022

  • Mostrar Resumo
  • A COVID-19 é uma doença causada pela SARS-CoV-2, um novo coronavírus identificado pela primeira vez em Wuhan (China) e se espalhou rapidamente em todo o mundo, que afeta o sistema imunológico causando uma inflamação exacerbada. As infecções virais podem levar a depleção dos níveis de algumas vitaminas, como as vitaminas A e E, e níveis de nutrientes inadequados podem ser prejudiciais à saúde. O objetivo deste estudo foi investigar se a COVID-19 afeta os níveis dessas vitaminas e como elas podem ajudar no combate à infecção. Foram realizados dois trabalhos: uma revisão sistemática e um estudo experimental . A revisão sistemática foi realizada de acordo com a declaração do PRISMA, utilizando três bases de dados diferentes. Os dados dos artigos foram coletados e analisados por dois pesquisadores independentes. A qualidade dos estudos in vivo também foi avaliada. Foram identificados 4.572 artigos, dos quais 10 preencheram os critérios de inclusão. Três deles estavam relacionados com vitamina A, dois com vitamina E e cinco relacionando ambas as vitaminas à COVID-19. O estudo experimental de caracteristica transversal foi realizado entre maio e outubro de 2020. Os dados clínicos foram coletados por entrevistas presenciais ou por contato telefônico e pelo acesso aos prontuários dos pacientes hospitalizados. Os participantes foram alocados em dois grupos de acordo com a gravidade, com um grupo de pacientes leves (n = 88) ou críticos (n = 106) e um grupo controle (n = 46). Os dados foram transferidos para o Research Electronic Data Capture e analisados pelo Statistical Package for the Social Sciences. Valores de P menores de 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Como resultados, deste estudo pacientes com COVID-19 apresentaram redução das concentrações de vitamina A e E, sendo abaixo ou próximo dos valores de referência para deficiência. A suplementação dessas vitaminas esteve associada a um melhor prognóstico (p<0,001). Baixas concentrações de vitamina A (<0,7 mmol/L) foram associadas a maior chances de sintomas persistentes após 90 dias. Estudos experimentais têm demonstrado que estas vitaminas podem ser alvos contra a infecção por SARS-CoV-2 e o gene I induzível com ácido retinóico (RIG-I) tem um papel importante no combate à doença por meio de diferentes mecanismos. No entanto, a capacidade terapêutica dessas vitaminas requer validação biológica adicional através de estudos mais robustos, como ensaios clínicos randomizados e avaliação da ingestão alimentar dessas vitaminas. Além disso, também são necessários estudos que avaliem os níveis séricos destas vitaminas antes da infecção.

  • Mostrar Abstract
  • COVID-19 is a disease caused by SARS-CoV-2, a new coronavirus first identified in Wuhan (China) and rapidly spread throughout the world that affects the immune system causing exacerbated inflammation. Viral infections can lead to the depletion of levels of some vitamins, such as vitamins A and E, and inadequate nutrient levels can be harmful to health. This study aims to investigate whether COVID-19 affects levels of these vitamins and how they can help fight infection. Two studies were carried out: an experimental study and a systematic review. The systematic review was performed according to the PRISMA declaration, using three different databases. Data from articles were collected and analyzed by two independent researchers. The quality of in vivo studies was also evaluated. We identified 4,572 articles, of which 10 met the inclusion criteria. Three of them were related to vitamin A, two to vitamin E, and five related both vitamins to COVID-19. The cross-sectional study was conducted between May and October 2020. Clinical data were collected by face-to-face interviews or by telephone contact and by access to the medical records of hospitalized patients. Participants were allocated into two groups according to severity, with a group of mild (n = 88) or critical (n = 106) patients and a control group (n = 46). The data were transferred to the Research Electronic Data Capture (Redcap, Vanderbilt University) and analyzed by the Statistical Package for the Social Sciences (IBM SPSS Statistics 26). P values <0.05 were considered statistically significant. Patients with COVID-19 presented a reduction in vitamin A and E concentrations, being below or close to the reference values for deficiency. Supplementation of these vitamins was associated with a better prognosis (p<0.001). Low vitamin A levels (<0.7 mmol/L) were associated with higher chances of persistent symptoms after 90 days. Experimental studies have shown that these vitamins can be targets against SARS-CoV-2 infection and the retinoic acid-inducible I gene (RIG-I) plays an important role in combating the disease through different mechanisms. However, the therapeutic capacity of these vitamins requires additional biological validation through more robust studies, such as randomized clinical trials and the evaluation of the food intake of these vitamins. In addition, studies are also needed to assess serum levels of these vitamins before infection.

16
  • STPHANNIE JAMYLA DE ARAÚJO BARBOSA
  • EFEITO PROTETOR DE Lacticaseibacillus casei NO MODELO DE MUCOSITE INTESTINAL INDUZIDA POR 5-FLUOROURACIL EM CAMUNDONGOS
  • Orientador : AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • LUIZ ALBERTO LIRA SOARES
  • NAISANDRA BEZERRA DA SILVA FARIAS
  • Data: 01/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • A mucosite no trato gastrointestinal é uma inflamação da mucosa que tem como uma das duas causas a administração de 5-Fluouracil (5FU) na terapia anticâncer. Ainda não há um tratamento elucidado para cura ou profilaxia da mucosite. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da administração oral de Lactocaseibacilus casei (L. casei) em um modelo de animal de mucosite intestinal. Inicialmente, L.casei (1x109 UFC/mL) ou solução salina foram administrados por via oral em camundongos Swiss começando 15 dias antes da indução da mucosite por administração única intraperitoneal de 5FU (450mg/kg). Após a eutanásia, no dia 18, amostras de tecido do cólon e de cada segmento do intestino delgado foram coletadas para histopatologia. Os tecidos jejunais foram avaliados quanto à imunoexpressão de iNOS e TNF-α, níveis de IL-1β, IL-6 e TNFα, acúmulo de malondialdeído (MDA) e expressão gênica do fator nuclear kappa B (NFkb-P65), Receptor toll-like 4 (TLR-4), mucina-2 (MUC-2), ocludina (OCLN) e zonula ocludente-1 (ZO-1). L. casei reduziu a inflamação induzida por 5FU no cólon e intestino delgado (p<0,05), reduziu níveis de TNF-α, IL-1beta, IL-6 (p<0,05) e MDA (p<0,05), bem como a expressão das proteínas iNOS e TNF-α (p<0,05). Além disso, a expressão gênica de OCLN, MUC-2 e ZO-1 sofreu uma regulação positiva (p<0,05), em contrapartida a expressão gênica de NFkb-P65 e TLR4 (p<0,05) sofreu uma regulação negativa. O grupo L.casei também apresentou uma maior população de bactérias lácticas (p<0,05) quando comparado aos grupos controles. Dessa forma, a administração oral de L.casei demonstrou potencial efeito protetor contra a mucosite intestinal induzida por 5FU em camundongos Swiss.


  • Mostrar Abstract
  • Mucositis in the gastrointestinal tract is an inflammation of the mucosa that has as one of the causes the administration of 5-Fluorouracil (5FU) in anticancer therapy. There is still no elucidated treatment for the cure or prophylaxis of mucositis. In this context, the present work's objective was to evaluate the effect of oral administration of Lactocaseibacilus casei (L. casei) in an animal model of intestinal mucositis. Initially, Lactocaseibacilus casei (1x109 CFU/mL) or saline was orally administered to Swiss mice starting 15 days before induction of mucositis by a single intraperitoneal administration of 5-FU (450mg/kg). After euthanasia, on day 18th, tissue samples from the colon and each segment of the small intestine were collected for histopathology. The jejunal tissues present iNOS and TNF-α immunoexpression, IL-1β, IL-6, and TNF-α levels, malondialdehyde (MDA) accumulation, and nuclear factor kappa B gene expression (NFkb-P65), toll receptor -like 4 (TLR-4), mucin-2 (MUC-2), occludin (OCLN) and zonula occludent-1 (ZO-1). L. casei reduced 5-FU-induced inflammation in the colon and small intestine (p<0.05), the levels of TNF-α, IL-1beta, IL-6 (p<0.05), and MDA (p< 0.05), as well as the expression of iNOS and TNF-α proteins (p<0.05). Furthermore, the gene expression of OCLN and ZO-1 was upregulated (p<0.05). In contrast, the gene expression of NFkb-P65 and TLR4 (p<0.05) was downregulated. The L.casei group also showed a higher population of lactic acid bacteria (p<0.05) compared to the control groups. Thus, the oral administration of L.casei demonstrated a potential protective effect against 5-FU-induced intestinal mucositis in Swiss mice.

17
  • VICTORIA LOUISE PINTO FREIRE
  • NANOEMULSÕES CONTENDO FITOL COMO ALTERNATIVA FARMACOLÓGICA PARA O TRATAMENTO DA LEISHIMANIOSE CUTÂNEA
  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • DOUGLAS DOURADO OLIVEIRA
  • EDNALDO GOMES DO NASCIMENTO
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • VALTER FERREIRA DE ANDRADE NETO
  • Data: 12/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • A leishmaniose é considerada uma das principais doenças negligenciadas no mundo, com
    grandes números de casos anualmente, é causada por protozoários do gênero Leishmania spp.
    e atinge principalmente populações de países mais pobres. O tratamento da doença é bastante
    limitado, tóxico ao paciente, de alto custo e o parasito apresenta resistência aos quimioterápicos.
    Desta maneira, tentando solucionar os problemas como os efeitos colaterais dos medicamentos
    já em uso, diminuir a resistência a droga e melhorar os tratamentos já existentes, surge a
    nanotecnologia farmacêutica com sistemas de liberação de fármacos em escala nanométrica,
    como é o caso das nanoemulsões (NE). Paralelo a isto, tem se procurado outros princípios ativos
    leishimanicidas alternativos para tratamento da doença como o fitol, que se trata de um
    componente da clorofila da classe dos diterpenos, que é encontrado abundantemente na
    natureza e tem ampla gama de atividades biológicas comprovadas. Desta maneira, o presente
    estudo tem como objetivo desenvolver NE contendo fitol biocompatíveis pela técnica de
    emulsificação por inversão de fases, , avaliar o efeito da composição nos parâmetros físico
    químicos das nanoemulsões, observar a estabilidade a longo prazo e acelerada dos sistemas
    obtidos com e sem o ativo, observar também o perfil citocompatível em células e hemolítico e
    a capacidade in vitro desses sistemas antileishmanicida. Assim, foi observado que as NE
    desenvolvidas se apresentaram estáveis a longo prazo e em condições aceleradas, com os
    parâmetros macroscópicos e físico-químicos adequados, apresentando também um perfil
    citocompatível com a linhagem celular testada e no teste de hemólise, sendo sugestivo de
    segurança para administração do sistema em estudo in vivo. Observou-se também que a NE
    desenvolvida teve uma boa atividade antipasitária e superior ao fármaco livre. Portanto, a NE
    produzida mostrou-se um promissor fármaco para o tratamento da leishmaniose cutânea,
    mostrando-se segura e eficaz.

  • Mostrar Abstract
  • Leishmaniasis is considered one of the main neglected diseases in the world, with large numbers
    of cases annually, it is caused by protozoa of the genus Leishmania spp. and affects mainly
    populations in poorer countries. The treatment of the disease is very limited, toxic to the patient,
    high cost and the parasite is resistant to chemotherapy. In this way, trying to solve problems
    such as the side effects of drugs already in use, reducing drug resistance and improving existing
    treatments, pharmaceutical nanotechnology appears with drug delivery systems on a
    nanometric scale, as is the case of nanoemulsions (NE). At the same time, alternative
    leishmanicidal active principles have been sought to treat the disease, such as phytol, which is
    a component of chlorophyll from the diterpene class, which is found abundantly in nature and
    has a wide range of proven biological activities. Thus, the present study aims to develop NE
    containing biocompatible phytol by the phase inversion emulsification technique, to evaluate
    the effect of the composition on the physical-chemical parameters of the nanoemulsions, to
    observe the long-term and accelerated stability of the systems obtained with and without the
    active, also observe the cytocompatible profile in cells and hemolytic and the in vitro capacity
    of these antileishmanial systems. Thus, it was observed that the EN developed were stable over
    the long term and under accelerated conditions, with adequate macroscopic and
    physicochemical parameters, also presenting a cytocompatible profile with the cell line tested
    and in the hemolysis test, suggesting safety for system administration in in vivo study. It was
    also observed that the developed NE had a good antiparasitic activity and superior to the free
    drug. Therefore, the NE produced proved to be a promising drug for the treatment of cutaneous
    leishmaniasis, proving to be safe and effective.
18
  • MARCIA GABRIELE DE SOUZA JIMENEZ
  • IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR, CARACTERIZAÇÃO DOS FATORES DE VIRULÊNCIA E PERFIL DE SUSCEPTIBILIDADE ANTIFÚNGICA DE ISOLADOS DE Trichosporon spp. OBTIDOS DE PACIENTES COM PIEDRA BRANCA
  • Orientador : GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FELIPE QUEIROGA SARMENTO GUERRA
  • GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • VANIA SOUSA ANDRADE
  • Data: 21/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • As leveduras pertencentes ao gênero Trichosporon surgem como patógenos emergentes com altas
    taxas de morbidade e mortalidade. Primariamente, espécies de Trichosporon são agentes etiológicos
    de “piedra” branca, uma infecção fúngica caracterizada por nódulos aderidos à região extrafolicular
    do fio do cabelo. Entretanto nas recentes décadas, Trichosporon spp. têm sido consideradas
    patógenos oportunistas responsáveis por infecções graves, principalmente em pacientes
    imunocomprometidos e com doenças hematológicas. Os objetivos deste estudo foram realizar a
    identificação molecular (região IGS1 do rDNA) de cepas de Trichosporon spp. obtidas de “piedra”
    branca, bem como determinar a expressão de fatores de virulência “in vitro”, incluindo: Atividade
    de DNAses, hemolisinas e fosfolipases, capacidade de adesão a células epiteliais, hidrofobicidade
    de superfície celular, produção de melanina e produção de biofilme, além de avaliar o crescimento
    fúngico na presença de estressores celulares. Determinou-se também o perfil de susceptibilidade
    antifúngica de isolados clínicos de Trichosporon spp. e os resultados foram comparados a cepas
    obtidas de infecção sistêmica. Foram identificados 4 isolados de T. asahii, 17 isolados de T. inkin, 2
    de T. faecale e 2 de T. asteroides. A análise filogenética revelou maior grau de relacionamento
    genético (alto valor de “bootstrap”) entre T. asahii, T. asteroides e T. faecale, sendo que T. inkin foi
    considerada a espécie menos intimamente relacionada. Os isolados de T. inkin foram mais
    prevalentes em amostras clínicas obtidas de pacientes com “piedra” branca, além de apresentarem
    maior capacidade de adesão às células epiteliais bucais humanas. Os isolados de T. asahii
    apresentaram maior capacidade de formação de biofilme, hidrofobicidade da superfície celular e
    índice hemolítico. Todos os isolados avaliados foram capazes de produzir hemolisinas e DNAses,
    enquanto que a produção de melanina em Ágar Semente de Níger não foi detectada. A produção de
    fosfolipases foi negativa para todos os isolados testados, exceto para duas cepas de T. inkin, que
    apresentaram alto valor de Pz (baixa produção da enzima). Vários isolados avaliados apresentaram
    concentrações inibitórias mínimas e valores de “cut-off” epidemiológicos elevados, com tendência à
    multirresistência aos azólicos (cetoconazol, itraconazol e fluconazol) e anfotericina B. Embora o
    presente estudo tenha compreendido poucos isolados de T. asahii, observou-se que essa espécie, de
    modo geral, se destaca na expressão de fatores de virulência e resistência aos antifúngicos
    reforçando sua importância nas tricosporonoses invasivas.

  • Mostrar Abstract
  • Yeasts belonging to the genus Trichosporon emerge as emerging pathogens with high rates of
    morbidity and mortality. Primarily, Trichosporon species are etiological agents of white piedra, a
    fungal infection characterized by nodules adhered to the extrafollicular region of the hair shaft.
    However, in recent decades, Trichosporon spp. have been considered an opportunistic pathogen
    responsible for severe infections, mainly in immunocompromised patients with hematological
    diseases. The objectives of this study were to carry out the molecular identification (IGS1 region of
    the rDNA) of Trichosporon spp. obtained from white piedra, as well as to determine the in vitro
    expression of virulence factors, including: DNAses, hemolysins and phospholipases activity, ability
    to adhere to epithelial cells, cell surface hydrophobicity, melanin production and biofilm
    production, in addition to to evaluate fungal growth in the presence of cellular stressors. The
    antifungal susceptibility profile of clinical isolates of Trichosporon spp. results were compared to
    strains obtained from systemic infection. We identified 4 T. asahii isolates, 17 T. inkin isolates, 2 T.
    faecale and 2 T. asteroides isolates. Phylogenetic analysis revealed a higher degree of genetic
    relatedness (high bootstrap value) between T. asahii, T. asteroides and T. faecale, with T. inkin
    being considered the least closely related species. T. inkin isolates were more prevalent in clinical
    samples obtained from patients with white piedra, in addition to having a greater ability to adhere to
    human buccal epithelial cells. The T. asahii isolates showed higher capacity for biofilm formation,
    cell surface hydrophobicity and hemolytic index. All evaluated isolates were able to produce
    hemolysins and DNAses, whereas melanin production on Niger Seed Agar was not detected.
    Phospholipase production was negative for all tested isolates, except for two strains of T. inkin,
    which showed a high Pz value (low enzyme production). Several isolates evaluated showed
    minimal inhibitory concentrations and high epidemiological cut-off values, with a tendency to
    multidrug resistance to azoles (ketoconazole, itraconazole and fluconazole) and amphotericin B.
    Although the present study included few isolates of T. asahii, it was observed that this species, in
    general, stands out in the expression of virulence factors and resistance to antifungal agents,
    reinforcing its importance in invasive trichosporonosis.
19
  • RITA YANKA PEREIRA DA SILVA
  • OBTENÇÃO DE MICROPARTÍCULAS POLÍMERICAS PARA VEICULAÇÃO DEα, β-AMIRINA, CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA E AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES BIOLÓGICAS IN VITRO
  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • JOSÉ OTÁVIO CARRÉRA SILVA JÚNIOR
  • Data: 21/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • Triterpenóides têm despertado interesse da comunidade científica nos últimos
    anos devido ao uso, pela medicina popular, de complexos naturais que contém
    estas substâncias em sua composição. Dentre elas, encontra-se a α, β-amirina,
    um triterpeno pentacíclico que consiste numa mistura isomérica de compostos
    com esqueleto ursano e oleonano. Algumas atividades farmacológicas têm sido
    reportadas, entretanto, sem alvo definido. Além disso, a baixa solubilidade em
    água desfavorece a absorção do composto. Neste trabalho, micropartículas
    poliméricas com HPMC foram desenvolvidas para veicular α, β-amirina e foi
    investigada a atividade biológica contra α-glicosidase, lipase pancreática, LXRβ
    e antioxidante. Além disso, foi feita a caracterização físico-química dos sistemas
    obtidos. Nela, o FTIR mostrou efetiva interação entre o princípio ativo e o
    polímero; no DR-X, observou-se que o ativo isolado apresenta alta cristalinidade,
    mas, ao ser incorporado nas micropartículas poliméricas, essa cristalinidade
    diminuiu; o MEV, assim como o DR-X, mostrou a α, β-amirina como uma
    estrutura altamente cristalina, com cristais de formato definido, longos e em
    forma de agulha. Ao ser inserido nas micropartículas, os cristais, apesar de ainda
    poderem ser visualizados, tiveram tamanho reduzido consideravelmente. Nos
    ensaios de atividade biológica, os sistemas não apresentaram atividade contra
    a lipase pancreática. Atividades hipolipemiante e hipoglicemiante já foram
    descritas para α, β-amirina, mas sem alvo biológico definido, por isso, os ensaios
    de atividade biológica procuraram testar alguns alvos na tentativa de definir se
    eram eles os responsáveis por essas atividades. Os resultados do ensaio contra
    a lipase e α-glicosidase não foram satisfatórios, entretanto, a atividade agonista
    do receptor nuclear LXRβ mostrou que o ativo produz atividade agonista sobre
    este receptor. Mais estudos em busca de elucidar os alvos pelo qual a α, β-
    amirina exerce seus feitos devem ser realizados e outros estudos aprofundando
    se no seu efeito sobre o receptor LXRβ.

  • Mostrar Abstract
  • Triterpenoids have aroused the interest of the scientific community in recent
    years due to the use, in popular medicine, of natural complexes that contain these
    substances in their composition. Among them, there is α, β-amyrin, a pentacyclic
    triterpene that consists of an isomeric mixture of compounds with ursane and
    oleonane backbone. Some pharmacological activities have been reported,
    however, without a defined target. In addition, the low solubility in water hinders
    the absorption of the compound. In this work, polymeric microparticles with
    HPMC were developed to carry α, β-amyrin and the biological activity against α-
    glucosidase, pancreatic lipase, LXRβ and antioxidant was investigated. In
    addition, the physical-chemical characterization of the obtained systems was
    carried out. In it, the FTIR showed effective interaction between the active
    principle and the polymer; in the DR-X, it was observed that the isolated active
    presents high crystallinity, but, when incorporated into polymeric microparticles,
    this crystallinity decreased; SEM, as well as DR-X, showed α, β-amyrin as a
    highly crystalline structure, with well-defined, long, needle-shaped crystals. When
    inserted into the microparticles, the crystals, although still visible, were
    considerably reduced in size. In biological activity assays, the systems did not
    show activity against pancreatic lipase. Hypolipidemic and hypoglycemic
    activities have already been described for α, β-amyrin, but without a defined
    biological target, therefore, biological activity assays sought to test some targets
    in an attempt to define whether they were responsible for these activities. The
    results of the test against lipase and α-glucosidase were not satisfactory,
    however, the agonist activity of the nuclear receptor LXRβ showed that the active
    product produces agonist activity on this receptor. More studies seeking to
    elucidate the targets through which α, β-amyrin exerts its effects must be carried
    out and other studies delving into its effect on the LXRβ receptor.
20
  • JANAINNA XAVIER FERNANDES
  • ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E ANTIBIOFILME DO PEPTÍDEO TsAP-2 E SUA ASSOCIAÇÃO COM ANTIMICROBIANOS CONTRA Staphylococcus aureus MULTIRRESISTENTES
  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CARINA CARVALHO DOS SANTOS
  • JULIANA FELIX DA SILVA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 27/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • Nas últimas décadas a saúde enfrenta um cenário de escassez na produção de novos antibióticos e a presença cada vez mais frequente de infecções causadas por bactérias multirresistentes. Nesse contexto a associação de antimicrobianos tem sido uma prática médica comum para promover a ampliação da atividade farmacológica, com maiores chances de eliminação de cepas resistentes. Considerando a necessidade do desenvolvimento de novos antibióticos, peptídeos antimicrobianos (PAMs) catiônicos de escorpião constituem-se moléculas promissoras como agentes antimicrobianos, que em associação com antibióticos podem potencializar seu efeito antibacteriano. A atuação dos PAMs em múltiplos alvos farmacológicos do micro-organismo, tendo o seu principal mecanismo de ação a formação de poros na membrana bacteriana, pode permitir o melhor efeito de agentes antimicrobianos convencionais. O TsAP-2 é um PAM catiônico presente no escorpião Tityus stigmurus, com atividades antimicrobiana, imunomoduladora e cicatrizante, com maior seletividade em cepas Gram-positivas. Neste estudo, foi investigado o potencial antimicrobiano e antibiofilme do TsAP-2 contra cepas de S. aureus multirresistente de isolado clínico in vitro e sua biocompatibilidade em células de mamíferos. Além disso, a atividade antimicrobiana in vivo do TsAP-2 utilizando larvas de Galleria mellonela e o efeito da combinação do peptídeo com antibióticos convencionais foram avaliados. O TsAP-2 apresentou atividade contra todas as cepas multirresistentes entre 21,6 μg/mL a 43,3 μg/mL. Na atividade antibiofilme, o TsAP-2 teve maior atividade sobre o biofilme precoce, com inibição de 98,97% da sua formação na concentração de 43,3 µg/mL, e fraca atividade sobre o biofilme tardio. TsAP-2 mostrou atividade hemolítica crescente e proporcional a sua concentração, com citotoxicidade em fibroblastos murinos a partir de 86,6 μg/mL (2x CIM), sem apresentar efeito tóxico em células epiteliais renais de primatas. In vivo, o peptídeo reduziu em 50% as bactérias resistentes circulantes na hemolinfa, promovendo um aumento na sobrevida das larvas, com baixa toxicidade. Quando combinado com antibióticos convencionais, o TsAP-2 apresentou efeitos aditivos e sinérgicos em 50% das associações, sobretudo com fármacos β-lactâmicos e com a cefoxitina. Portanto, TsAP-2 revela ser uma molécula promissora para ser utilizada como protótipo no desenvolvimento de novos fármacos anti-infecciosos.


  • Mostrar Abstract
  • Microbial infections are a serious public health problem with high morbimortality worldwide that, combined with the rapid emergence of microorganisms resistant to conventional antimicrobials, has boosting the search for new antibiotic agents in different natural sources. In this context, antimicrobial peptides without disulfide bridges are molecules with multiple biological activities, with high potential pharmacological. TsAP-2 is a peptide without disulfide bridges from Tityus stigmurus scorpion with antiproliferative, antifungal and antibacterial effect reported in the literature. In this study, we focused on evaluating the antibacterial activity, antibiofilm and the effect of the combination of TsAP-2 with conventional antibiotics in vitro, also investigating its antimicrobial action in the skin wound model infected by Staphylococcus aureus and microbial activity in Galleria mellonela larvae infected with multidrug-resistant S. aureus. TsAP-2 revealed a broad-spectrum antibacterial activity in vitro, with antimicrobial and antibiofilm action against standard and multidrug-resistant strains of S. aureus with greater effect on early biofilm. TsAP-2 also showed additive and synergistic effects in 50% of associations with conventional antibiotics, especially with β-lactam drugs and cefoxitin. In addition, TsAP-2 showed antibacterial and healing action in vivo, reducing the area and the necrosis of the surgical wound infected by S. aureus, and promoted an increase in neovascularization and epithelialization in the skin wound. TsAP-2 also reduced by 50% the resistant bacteria circulating in the hemolymph of G. mellonela larvae, promoting an increase in their survival, with absence of toxic signs on the uninfected insect. Taken together, this approach highlights the wide pharmacological potential of TsAP-2, making it an attractive molecule for prospecting for new drugs with applicability in anti-infective therapy.

21
  • ARTHUR RENAN DE ARAUJO OLIVEIRA
  • AVALIAÇÃO DE CÉLULAS ENDOTELIAIS CIRCULANTES COMO POSSÍVEIS
    MARCADORES DE DIAGNÓSTICO NA PRÉ-ECLÂMPSIA: UMA REVISÃO
    SISTEMÁTICA
  • Orientador : MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA PAULA FERREIRA COSTA
  • KARLA SIMONE COSTA DE SOUZA
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • Data: 28/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença multifatorial e multissistêmica, cuja
    fisiopatologia envolve lesão endotelial e aumento número de Células Endoteliais
    Circulantes (CECs). Tem como critérios de diagnóstico a hipertensão, que ocorre
    após 20 semanas de gestação, acompanhada de proteinúria e/ou disfunção de
    órgão-alvo. A PE está associada a diversas complicações tanto maternas quanto
    fetais, que podem culminar com o óbito. Assim, a identificação de biomarcadores
    com poder de diagnóstico pode levar a intervenções precoces, minimizando as
    complicações. Alguns estudos vêm avaliando a associação do número de CECs
    com o desenvolvimento da PE. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar se
    as CECs podem ser utilizadas no diagnóstico da PE. Para isto, foi elaborada uma
    revisão sistemática de acordo com as diretrizes PRISMA e registrada no
    PROSPERO (CRD42021226265). PubMed; Lilacs; Scopus; Embase; Web of
    Science; Science Direct; Cochrane Library e Gray-literature: CAPES e Google
    Scholar, foram as bases de dados utilizadas para a busca de artigos publicados
    até julho de 2022, sem restrição de idioma. A pergunta clínica foi elaborada de
    acordo com a estratégia PICOT, sendo elegíveis estudos observacionais
    (transversais, caso-controle e coorte), que avaliassem a contagem de CECs em
    sangue periférico de gestantes diagnosticadas com PE e normotensas, sendo o
    desfecho principal a diferença na contagem das CECs entre essas pacientes. As
    etapas de seleção por título e resumo, leitura de texto completo e extração de
    dados foram realizadas por dois pesquisadores de forma independente e um
    terceiro para decisão de conflitos. No total, 505 artigos foram recuperados pela
    estratégia de busca e 6 artigos preencheram os critérios de inclusão. A avaliação
    da qualidade metodológica dos estudos foi feita por meio da escala de
    Newcastle-Ottawa e todos apresentaram baixo risco de viés. Houve um aumento
    significativo no número de CECs no grupo PE em relação ao grupo controle na
    maioria dos estudos e apenas um deles não observou essa diferença. Foi
    demonstrada, ainda, uma correlação positiva da contagem de CECs com o
    aumento da pressão arterial. Assim, a contagem de CECs, tem grande potencial
    para ser utilizada como um novo biomarcador de diagnóstico da PE.

  • Mostrar Abstract
  • Preeclampsia (PE) is a multifactorial and multisystemic disease, whose
    pathophysiology involves endothelial injury, increased number of Circulating
    Endothelial Cells (CECs) and activation of coagulation. It has as diagnostic
    criteria hypertension, which occurs after 20 weeks of gestation, accompanied by
    proteinuria and/or target organ dysfunction. PE is associated with several
    complications both maternal and fetal, which may culminate in death. Thus, the
    identification of biomarkers with diagnostic power can lead to early interventions,
    minimizing complications. Some studies have evaluated the association of the
    number of CPBs with the development of PE. Thus, the aim of this study was to
    investigate whether these cells can be used in the diagnosis of PE. For this, a
    systematic review was prepared according to PRISMA guidelines and registered
    in PROSPERO (CRD42021226265). PubMed; Lilacs; Scopus; Embase; Web of
    Science; Science Direct; Cochrane Library and Gray-literature: CAPES and
    Google Scholar, were the databases used to search for articles published until
    July 2022, without language restriction. The clinical question was elaborated
    according to the PICOT strategy, being eligible observational studies (cross
    sectional, case-control and cohort), which evaluated the CPB count in peripheral
    blood of pregnant women diagnosed with PE and normotensive women, and the
    main outcome was the difference in CPB count between these patients. The
    selection by title and abstract, full-text reading, and data extraction steps were
    performed by two researchers independently and a third for conflict decision. In
    total, 505 articles were retrieved by the search strategy and 6 articles met the
    inclusion criteria. The methodological quality of the selected studies was
    assessed using the Newcastle-Ottawa scale, and all had a low risk of bias. There
    was a statistically significant increase in the CPB count in most studies when
    comparing the PE and control groups. Only one study showed that there was no
    significant difference. Furthermore, the studies also found a positive correlation
    between increased blood pressure and CPB counts. Thus, the SCC count, has
    great potential to be used as a new diagnostic biomarker for PE.
Teses
1
  • SAULO VICTOR E SILVA
  • PROPRIEDADES ANTIOXIDANTES DA COENZIMA Q10 E DO ZINCO EM INDIVÍDUOS COM SÍNDROME DE DOWN

  • Orientador : MARIA DAS GRACAS ALMEIDA THORNTON
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARIA DAS GRACAS ALMEIDA THORNTON
  • KARLA SIMONE COSTA DE SOUZA
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • JULIANA PADILHA RAMOS NEVES
  • GABRIEL ARAÚJO DA SILVA
  • Data: 12/05/2022

  • Mostrar Resumo
  • A Sídrome de Down (SD) é conhecida pela trissomia do cromossomo 21, carcterizadada
    pelas diversas alterações fsiológicas e metabólicas, dentre elas, a preseça de estresse
    oxidativo, por consequência do desequilíbrio entre a quantidade de espécies reativas de
    oxigênio (ERO’s) e enzimas antioxidantes. Compostos com propriedades antioxidantes
    como a coenzima Q10 (CoQ10) e o zinco (Zn) podem reduzir os desequilíbrios
    celulares ocasionados pelo aumento de ERO’s. Com isso, o presente estudo objetivou
    avaliar o potencial antioxidante da CoQ10 combinada com o Zn em indivíduos com SD.
    Inicialmente foi realizado um estudo in vitro que avaliou o potencial antioxidante da
    CoQ10, Zn e a combinação entre eles em um modelo de estresse oxidativo em células
    CHO-K1 induzidas por Arsênico (As). A determinação da viabilidade celular para cada
    tratamento foi feita pelos ensaios colorimétricos de cristal violeta, MTT e Alamar
    Blue®. A atividade antioxidante pelos ensaios de redução do radical DPPH, poder de
    redução férrico (FRAP), formação de hidroperóxido aquoso e determinação de ERO’s.
    Em paralelo, realizou-se um estudo clínico, duplo-cego e randomizado em crianças com
    SD de 2 a 9 anos para avaliar o efeito da suplementação de CoQ10 a 4 mg/kg/dia, Zn a
    11 mg/dia e CoQ10+Zn. Foram avaliados os parâmetros bioquímicos como: controle
    glicêmico, o perfil lipídico e função renal, consumo alimentar, parâmetros
    antropométricos, peroxidação lipídica, potencial antioxidante pela atividade enzimática
    da superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), e não-enzimática pela
    glutationa redutase (GSH), e o perfil sérico do Zn. No estudo in vitro os ensaios de
    viabilidade celular mostraram que tanto a CoQ10, quanto a sua combinação com Zn,
    apresentaram efeito citoprotetor independente das concentrações analisadas, ao
    contrário das células tratadas somente com Zn quando expostas a situações de estresse
    celular. A CoQ10 apresentou atividade antioxidante, independente da concentração
    utilizada, mas quando combinada com o Zn não apresentou nenhum aumento de sua
    atividade a nível celular, já o Zn em altas concentrações apresentou efeito pro-oxidante ocasionando dano celular. No estudo in vivo, os indivíduos apresentaram concentração Zn sérica abaixo da recomendação preconizada, com isso, a suplementação de Zn em combinação com a CoQ10 pôde agregar valor nutricional a atividade antioxidante da CoQ10 apresentando resultados satisfatórios a suplementação desses micronutrientes.
    Com isso, o estudo observou uma maior deficiência de Zn em crianças com SD e que a
    suplementação com CoQ10, quando combinada com o Zn, diferente do que foi
    observado do estudo in vitro, pode apresentar um aumento da atividade antioxidante,
    além de reduzir a peroxidação lipídica e garantir a preservação das enzimas antioxidantes.

  • Mostrar Abstract
  • Down Syndrome (DS) is known for the trisomy of chromosome 21, characterized by
    several physiological and metabolic alterations, among them the presence of oxidative
    stress as a result of the imbalance between the amount of reactive oxygen species (ROS)
    and antioxidant enzymes. Compounds with antioxidant properties such as coenzyme
    Q10 (CoQ10) and zinc (Zn) may reduce the cellular imbalances caused by the increase
    of ROS. Thus, the present study aimed to evaluate the antioxidant potential of CoQ10
    combined with Zn in individuals with DS. Initially, an in vitro study was performed to
    evaluate the antioxidant potential of CoQ10, Zn, and their combination in a model of
    oxidative stress in CHO-K1 cells induced by Arsenic (As). The determination of cell
    viability for each treatment was done by crystal violet, MTT and Alamar Blue®
    colorimetric assays. The antioxidant activity by DPPH radical reduction assays, ferric
    reducing power (FRAP), aqueous hydroperoxide formation and ROS determination. In
    parallel, a clinical, double-blind, randomized study was performed in children with DS
    aged 2 to 9 years to evaluate the effect of CoQ10 supplementation at 4 mg/kg/day, Zn at
    11 mg/day and CoQ10+Zn. Biochemical parameters such as glycemic control, lipid
    profile and renal function, food consumption, anthropometric parameters, lipid
    peroxidation, antioxidant potential by superoxide dismutase (SOD) and glutathione
    peroxidase (GPx) enzymatic activity, and non-enzymatic by glutathione reductase
    (GSH), and serum Zn profile were evaluated. In the in vitro study, cell viability assays
    showed that both CoQ10 and its combination with Zn showed cytoprotective effect
    independent of the concentrations analyzed, unlike cells treated only with Zn when
    exposed to cell stress situations. CoQ10 showed antioxidant activity, independent of the
    concentration used, but when combined with Zn it did not show any increase in its
    activity at the cellular level, while Zn in high concentrations showed a pro-oxidant
    effect causing cellular damage. In the in vivo study, the individuals presented serum Zn
    concentration below the recommended level, thus, Zn supplementation in combination
    with CoQ10 could add nutritional value to the antioxidant activity of CoQ10, presenting
    satisfactory results to the supplementation of these micronutrients. Thus, the study
    observed a greater deficiency of Zn in children with DS and that the supplementation
    with CoQ10, when combined with Zn, unlike what was observed in the in vitro study, can present an increase in antioxidant activity, besides reducing lipid peroxidation and
    ensuring the preservation of antioxidant enzymes.
2
  • CLÁUDIA CECÍLIO DAHER
  • DESENVOLVIMENTO E AVALIAÇÃO DE FORMULAÇÕES COSMÉTICAS ANTIOXIDANTE E FOTOPROTETORA A PARTIR DO RESÍDUO INDUSTRIAL DO SISAL (Agave sisalana Perrine)

  • Orientador : MARCIO FERRARI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCIO FERRARI
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • LOURENA MAFRA VERISSIMO
  • GABRIEL AZEVEDO DE BRITO DAMASCENO
  • PEDRO ALVES DA ROCHA FILHO
  • Data: 22/07/2022

  • Mostrar Resumo
  • O sisal é a principal fibra dura produzida no mundo. Na composição química do resíduo de Agave sisalana, são encontrados carboidratos, saponinas e compostos fenólicos. Os compostos fenólicos são utilizados na indústria cosmética com atividades fotoprotetora e antioxidante. Este trabalho teve como objetivo desenvolver uma formulação multifuncional com atividades antioxidante e fotoprotetora a partir do resíduo industrial de A. sisalana. Foi realizado uma extração por ultrasonicação do material vegetal sólido, variando as concentrações do agente extrator (etanol/água 50%, 80% e 100%). O extrato com melhor rendimento foi caracterizado quimicamente e avaliado quanto a atividade antioxidande in vitro. Foram preparadas dez formulações fotoprotetoras variando as concentrações dos emulsificantes e o tempo de cisalhamento. O extrato de A. sisalana a 1,0% foi incorporado às formulações mais estáveis e a estabilidade preliminar e acelerada dessas foi avaliada e investigada quanto a segurança. As formulações fotoprotetoras contendo ou não o extrato que se apresentaram estáveis após 90 dias, tiveram a determinação do Fator de Proteção Solar in vivo, Fator de Proteção UVA, comprimento de onda crítico, e proteção contra a luz visível e azul. A extração por ultrassom utilizando etanol/água 50%, como veículo extrator foi a que apresentou melhor rendimento. O extrato exibiu boa concentração de compostos fenólicos e apresentou atividade antioxidante in vitro nas diferentes etapas da cascata oxidativa. Emulsões sem e com o extrato de A. sisalana 1,0% se mantiveram estáveis durante 90 dias, apresentando comportamento reológico desejável para um cosmético de uso tópico. A emulsão contendo o extrato de A. sisalana apresentou-se segura após os estudos clínicos. Verificou-se que a adição do extrato a formulação fotoprotetora aumentou estatisticamente o FPS quando comparada a formulação sem o extrato com proteção contra radiação UVA, comprimento de onda crítico, absorção da luz visível e azul e contemplam as exigências da legislação atual para protetores solares. Diante dos resultados apresentados o resíduo sólido de A. sisalana pode ser utilizado como ingrediente de formulações cosméticas fotoprotetoras e antioxidantes.


  • Mostrar Abstract
  • Sisal is the main hard fiber produced in the world. In the chemical composition of Agave sisalana residue, carbohydrates, saponins and phenolic compounds are found. Phenolic compounds are used in the cosmetic industry with photoprotective and antioxidant activities. This work aimed to develop a multifunctional formulation with antioxidant and photoprotective activities from the industrial residue of A. sisalana. An ultrasonic extraction of solid plant material was performed, varying the concentrations of the extracting agent (ethanol/water 50%, 80% and 100%). The extract with the best yield was chemically characterized and evaluated for in vitro antioxidant activity. Ten photoprotective formulations were prepared varying the concentrations of the emulsifiers and the shear time. A. sisalana extract at 1.0% was incorporated into the most stable formulations and their preliminary and accelerated stability was evaluated and investigated for safety. The photoprotective formulations containing or not the extract that were stable after 90 days, had the determination of the Sun Protection Factor in vivo, UVA Protection Factor, critical wavelength, and protection against visible and blue light. Ultrasonic extraction using 50% ethanol/water as extractor vehicle showed the best yield. The extract exhibited a good concentration of phenolic compounds and presented in vitro antioxidant activity in the different stages of the oxidative cascade. Emulsions without and with 1.0% A. sisalana extract remained stable for 90 days, showing desirable rheological behavior for a topical cosmetic. The emulsion containing the extract of A. sisalana was shown to be safe after clinical studies. It was verified that the addition of the extract to the photoprotective formulation statistically increased the SPF when compared to the formulation without the extract with protection against UVA radiation, critical wavelength, absorption of visible and blue light and meeting the requirements of current legislation for sunscreens. In view of the results presented, the solid residue of A. sisalana can be used as an ingredient in photoprotective and antioxidant cosmetic formulations.

3
  • TAMYRES BERNADETE DANTAS QUEIROGA
  • AVALIAÇÃO DE NOVAS ABORDAGENS PARA CONTROLE E DIAGNÓSTICO DA LEISHMANIOSE VISCERAL NO BRASIL

  • Orientador : PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CARLOS RAMON DO NASCIMENTO BRITO
  • JOANNA GARDEL VALVERDE GALVÃO
  • LEOMIR AIRES SILVA DE LIMA
  • PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
  • VALTER FERREIRA DE ANDRADE NETO
  • VERUSKA CAVALCANTI BARROS
  • Data: 19/10/2022

  • Mostrar Resumo
  • A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica grave em crescente expansão geográfica no Brasil, frente a tratamentos que não eliminam o parasito, medidas profiláticas ineficazes e métodos diagnósticos com baixa acurácia. Pensando nesta problemática, este trabalho objetivou avaliar i) a atividade inseticida sistêmica de dose oral única do composto fluralaner contra Lutzomyia longipalpis, bem como ii) avaliar o infravermelho médio como alternativa para detecção de Leishmania infantum em amostras de soro de cães. Para isso, cães sem raça definida foram recrutados e randomizados em dois grupos, tratados com fluralaner (n = 4) e controle não tratado (n = 4), e submetidos ao repasto sanguíneo com fêmeas de Lu. longipalpis antes do tratamento, no dia 1 pós-tratamento e, então mensalmente até completar um ano. Além disso, a espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier e reflexão total atenuada (ATR-FTIR) combinada com análise multivariada foi empregada para distinguir amostras de cães infectados com L. infantum (n = 29), em diferentes formas clínicas, de animais saudáveis não infectados (n = 30). Após a análise dos dados, observou-se 100% de mortalidade de Lu. longipalpis por até cinco meses após o início do tratamento. O composto fluralaner apresentou eficácia inseticida de 100% até 5 meses pós-tratamento dos cães, 68% em seis meses, com redução para 1,4% um ano pós-tratamento. O ATR-FTIR foi eficiente em diferenciar amostras de cães infectados e não infectados com 100% de sensibilidade e especificidade, utilizando o algoritmo de projeções sucessivas com análise de discriminante linear (SPA-LDA), SPA com máquina de vetores de suporte (SPA-SVM) e algoritmo genético com LDA (GA-LDA). Esses bons resultados sugerem que o composto fluralaner pode ser usado como possível estratégia de controle para LV em áreas endêmicas, bem como a espectroscopia associada a análise multivariada demonstra seu potencial como ferramenta alternativa para o diagnóstico de LV em cães.


  • Mostrar Abstract
  • Visceral leishmaniasis is a serious and chronic disease with a geographic spread in

    Brazil due to the absence of a treatment that eliminates the parasite, ineffective control

    measures, and diagnostic methods with low accuracy. The study aimed to evaluate

    the systemic insecticidal activity of a single oral dose of fluralaner against Lutzomyia

    longipalpis, as well as evaluate the mid-infrared as an alternative for Leishmania

    infantum detection in canine serum samples. Mongrel dogs were recruited and

    randomized into two groups, fluralaner (n = 4) and control (n = 4), and female

    specimens of Lu. longipalpis were allowed to feed on all dogs before treatment, on day

    one post-treatment, and then monthly until 1-year post-treatment. In addition,

    attenuated total reflection Fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR)

    combined with multivariate analysis was employed to distinguish samples from dogs

    infected with L. infantum in different clinical forms (n = 29) from healthy animals (n =

    30). After data analysis, there was 100% mortality of Lu. longipalpis for up to five

    months after treatment initiation. The efficacy of fluralaner ranged from 100% on day

    1 to 68% at six months with a decrease to 1.4% at one-year post-treatment. ATR-FTIR

    was efficient in differentiating samples from infected and uninfected dogs with 100%

    sensitivity and specificity using the successive projections algorithm with linear

    discriminant analysis (SPA-LDA), SPA with support vector machine (SPA-SVM), and

    the genetic algorithm with LDA (GA-LDA). These satisfactory results suggest that

    fluralaner may be used as a control strategy for VL in endemic areas, as well as

    spectroscopy associated with multivariate analysis demonstrates its potential as an

    alternative tool for the VL diagnosis in dogs.

4
  • ELYS COSTA DE SOUSA
  • PROPOSIÇÃO DE PONTOS DE CORTE DE INDICES ANTROPOMÉTRICOS E DISTRIBUIÇÃO DE GORDURA CORPORAL PARA PREDIÇÃO DE RISCO CARDIOMETABÓLICO E SÍNDROME METABÓLICA

  • Orientador : TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MICHELLE VASCONCELOS DE OLIVEIRA BORGES
  • RADAMES MACIEL VITOR MEDEIROS
  • RAFAELA CATHERINE DA SILVA CUNHA DE MEDEIROS
  • ROBERTO FERNANDES DA COSTA
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • Data: 06/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • A morbimortalidade vem se tornando cada vez mais frequente causada principalmente pelas doenças crônicas não-transmissíveis. Ter uma ferramenta de triagem para auxiliar no diagnóstico da síndrome metabólica e risco cardiometabólico, que seja rápida, fácil aplicação e baixo custo, é uma necessidade para a realidade da saúde pública brasileira que não consegue proporcionar o acesso aos exames de rotina para toda a população. Assim, o objetivo do estudo foi propor pontos de corte para índices antropométricos a fim de identificar o risco cardiometabólico e síndrome metabólica, bem como comparar a sua capacidade preditiva. Trata-se um estudo descritivo com delineamento transversal. A amostra foi composta por 330 sujeitos, sendo 192 do sexo feminino e 138 do sexo masculino, estudantes universitários com idades entre 18 e 59 anos. Como critérios de inclusão, os participantes poderiam ou não apresentar algum critério válido para diagnóstico de síndrome metabólica, NCEP/ATP III. Foram excluídos do estudo gestantes, pessoas com deficiência física, pessoas com utilização de órteses, gesso ou em qualquer situação que interferisse nos resultados das medidas antropométricas de forma a não permitir o cálculo dos índices, assim como as pessoas com doenças crônicas ou metabólicas que afetassem o estado da composição corporal. Foram realizadas medidas de massa corporal, estatura e circunferência da cintura para calcular os índices antropométricos A body shape index, Body Roundess index, Circunferência da cintura e Razão cintura/ estatura (ABSI, BRI, CC, RCE). O percentual de gordura foi verificado por meio de DXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry), além de determinadas a partir da amostra sanguínea, as concentrações séricas de glicose de jejum, colesterol total, HDL-colesterol, LDLcolesterol e triglicerídeos. Também foi medida a pressão arterial. Como resultados, os pontos de corte dos índices antropométricos para o sexo feminino foram propostos: ABSI >0.073; BRI >1.81; CC >87.8 e RCE >0.52; além dos pontos de corte para a distribuição de gordura corporal: 49,5% para gordura total, para gordura ginoide 42,9% e para gordura androide 44,2%. Já para o sexo masculino foram propostos os seguintes resultados: ABSI >0.079; BRI >3.42; CC >90 e RCE >0.5 como pontos de corte de índices antropométricos; e 26,3% para gordura corporal total, para gordura ginoide 28,7% e gordura androide 34,5%. Com base na sensibilidade e especificidade dos dados, pudemos observar que a CC obteve resultados excelentes para ambos os sexos, podendo ser amplamente aplicada na população brasileira, além do BRI que obteve melhores resultados para o sexo feminino e o RCE para o sexo masculino, obtendo pontos de corte ótimos para triagem do risco cardiometabólico e da síndrome metabólica. Além disso, ficou evidenciado que o ABSI não possui um bom poder preditivo para os fatores de risco analisados. Quanto à adiposidade, a gordura androide apontou ser a melhor preditora de risco cardiometabólico e síndrome metabólica.


  • Mostrar Abstract
  • Morbimortality is becoming more and more frequent, mainly caused by non-transmissible chronic diseases. Having a screening tool to aid in the diagnosis of metabolic syndrome and cardiometabolic risk, which is quick, easy to use and low cost, is a necessity for the reality of Brazilian public health, which cannot provide access to routine exams for the entire population . Thus, the objective of the study was to propose cutoff points for anthropometric indices in order to identify cardiometabolic risk and metabolic syndrome, as well as to compare their predictive capacity.This is a descriptive study with a crosssectional design. The sample consisted of 330 subjects, 192 female and 138 male, university students aged between 18 and 59 years. As inclusion criteria, participants could or could not present any valid criteria for the diagnosis of metabolic syndrome, NCEP/ATP III. Pregnant women, people with physical disabilities, people using orthoses, casts or in any situation that interfered with the results of anthropometric measurements were excluded from the study in a way that would not allow the calculation of indices, as well as people with chronic or metabolic diseases that affect the state of body composition. Body mass, height and waist circumference measurements were taken to calculate the anthropometric indices A body shape index, Body Roundess index, Waist circumference and waist/height ratio (ABSI, BRI, CC, WHtR). The percentage of fat was verified by means of DXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry), in addition to determining from the blood sample, the serum concentrations of fasting glucose, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol and triglycerides. Blood pressure was also measured. As a result, the cutoff points for anthropometric indices for females were proposed: ABSI >0.073; BRI >1.81; CC >87.8 and WHtR >0.52; in addition to the cutoff points for body fat distribution: 49.5% for total fat, 42.9% for gynoid fat and 44.2% for android fat. For males, the following results were proposed: ABSI >0.079; BRI >3.42; WC >90 and WHtR >0.5 as cutoff points for anthropometric indices; and 26.3% for total body fat, for gynoid fat 28.7% and android fat 34.5%. Based on the sensitivity and specificity of the data, we were able to observe that CC obtained excellent results for both genders, and can be widely applied in the Brazilian population., in addition to the BRI, which obtained better results for females and the RCE for males, obtaining optimal cut-off points for screening for cardiometabolic risk and metabolic syndrome. In addition, it was evidenced that the ABSI does not have a good predictive power for the analyzed risk factors. As for adiposity, android fat was found to be the best predictor of cardiometabolic risk and metabolic syndrome.

5
  • STELLA MARIA ANDRADE GOMES BARRETO
  • POLISSACARÍDEOS DO RESÍDUO INDUSTRIAL DE Agave sisalana COMO BIOCOMPOSTOS EM FORMULAÇÕES COSMÉTICAS: avaliação do potencial antioxidante na prevenção do envelhecimento cutâneo
  • Orientador : MARCIO FERRARI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • GABRIEL AZEVEDO DE BRITO DAMASCENO
  • JOSEAN FECHINE TAVARES
  • MARCIO FERRARI
  • VERA LUCIA BORGES ISAAC
  • Data: 20/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • Agave sisalana (sisal) é uma planta extensamente cultivada na região nordeste
    com o intuito de se obter uma fibra dura. No entanto, grande quantidade de resíduo é
    gerada no processo para obtenção dessa. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi
    obter e caracterizar frações ricas em polissacarídeos, oriundas do resíduo
    agroindustrial de A. sisalana, avaliar o potencial antioxidante in vitro e in vivo e
    desenvolver uma nanoemulsão para veiculação das frações para aplicação como um
    produto para prevenção dos sinais do envelhecimento cutâneo. A partir do resíduo, foi
    obtida uma fração rica em polissacarídeos (FRE) e, a partir da FRE, outra fração foi
    obtida por meio de ultrafiltração por tamanho (FREP). A composição qualitativa das
    frações foi avaliada por meio de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e
    Cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). As frações
    foram avaliadas quanto à sua atividade antioxidante in vitro utilizando diferentes
    técnicas espectrofotométricas e em meio de cultura e, ainda, in vivo por meio da
    quantificação intracelular de espécies reativas de oxigênio (EROs), determinação da
    fração de sobrevivência ao estresse agudo e quantificação da expressão de genes
    gst-4::GFP, em modelos Caenorhabditis elegans. Um planejamento experimental
    fatorial (2³+3PC) foi delineado para se obter um sistema nanoemulsionado e sua
    estabilidade avaliada. As frações são constituídas majoritariamente por terpenóides e
    metabólitos O-glicosil, tendo como principais açucares β-Glcp, α- ManNH2p e α-
    GalNH2p. FRE apresentou maior capacidade de inibir diretamente os radicais DPPH
    e ABTS, enquanto FREP demonstrou melhor atividade quelante de metais (Cu2+ e
    Fe2+). FRE e FREP foram capazes de promover efeito protetor contra estresse
    oxidativo em células de linhagem 3T3. Em modelos C. elegans, FRE e FREP
    promoveram redução intracelular de EROs e aumentaram a fração de sobrevivência
    em até 21% e 26 %, respectivamente. A expressão de gst-4:GFP foi positiva para FRE
    enquanto que, para FREP, uma redução na expressão foi observada. A nanoemulsão
    constituida de 20% de fase oleosa, 5% de tensoativos e 75% de fase aquosa foi
    considerada estável por 90 dias, em diferentes temperaturas. A utilização do resíduo
    agroindustrial como uma nova matéria-prima cosmética antioxidante para cuidados da
    pele e prevenção dos sinais do envelhecimento cutâneo pode trazer benefícios
    ambientais e contribuir com o desenvolvimento socioeconômico da região.

  • Mostrar Abstract
  • Agave sisalana (sisal) is a plant extensively cultivated in the northeast region to obtain
    a hard fiber. However, a large amount of residue is generated in the process to obtain
    that fiber. In view of this, the aim of study was to obtain and characterize
    polysaccharides-rich fractions from A. sisalana agro-industrial residue, to evaluate the
    antioxidant potential in vitro and in vivo and to develop a nanoemulsion containg those
    fractions for application as a prevent product of skin aging sings. From the residue, a
    polysaccharides-rich fraction (FRE) was received, and, from the FRE, another fraction
    was received through ultrafiltration by size (FREP). The qualitative composition of the
    fractions was evaluated using Nuclear Magnetic Resonance (NMR) and liquid
    chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS). Fractions were evaluated for
    their antioxidant activity in vitro using different spectrophotometric techniques and in
    culture medium and, also in vivo by means of intracellular quantification of reactive
    oxygen species (ROS), oxidative stress survival and quantification of gst-4::GFP gene
    expression in Caenorhabditis elegans models. A factorial experimental design
    (2³+3PC) was designed to obtain a nanoemulsion system and its evaluations. The
    fractions consist mainly of terpenoids and O-glycosyl metabolites, with β-Glcp, α-
    ManNH2p and α-GalNH2p as the main sugars. FRE showed greater ability to
    scavenging DPPH and ABTS radicals, while FREP showed better metal chelating
    activity (Cu2+ and Fe2+). FRE and FREP were able to promote a protective effect
    against oxidative stress in 3T3 cells. In C. elegans, FRE and FREP promoted
    intracellular reduction of ROS and increased survival variation by up to 21% and 26%,
    respectively. The expression of gst-4:GFP was positive for FRE whereas, for FREP, a
    reduction in expression was observed. The nanoemulsion consisting of 20% oil phase,
    5% surfactants and 75% aqueous phase was considered stable for 90 days at different
    temperatures. The use of agro-industrial residue as a new antioxidant cosmetic raw
    material for skin care and prevention of signs of skin aging can bring environmental
    benefits and contribute to the socioeconomic development of the region.
2021
Dissertações
1
  • SOFIA SANTOS DA SILVA
  • DESENVOLVIMENTO RACIONAL DE COMPLEXO DE INCLUSÃO COM BZTEMPO E β-CICLODEXTRINA PARA TRATAMENTO DE DOENÇA DE CHAGAS

  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANO ANTUNES DE SOUZA ARAÚJO
  • ANTONIA CLAUDIA JACOME DA CAMARA
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • Data: 11/02/2021

  • Mostrar Resumo
  • Os radicais livres, produzidos para a manutenção da infecção pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi) no humano na fase crônica da Doença de Chagas, tem relação direta com o desenvolvimento de cardiomiopatias. Antioxidantes vem sendo usados como aliados no tratamento dessa condição. Os nitróxidos são radicais livres estáveis capazes de interagir com espécies reativas, reduzindo sua carga no organismo e, consequentemente, agindo na redução do estresse oxidativo corporal. O Tempol é o nitróxido mais estudado, e a partir da adição outros grupamentos, pode-se obter diversos compostos, como o Bztempo (BZT). Complexos de inclusão com a β-ciclodextrina (βCD) podem ser obtidos para a melhoria de características físico-químicas e a biodisponibilidade de diversos compostos. Tendo isso exposto, o seguinte estudo buscou obter racionalmente um complexo de inclusão contendo BZT e a βCD para o tratamento da infecção por T. cruzi. O planejamento dos complexos de inclusão foi feito a partir de metodologias in sílico, sendo elas Relação Quantitativa Estrutura-Propriedade (QSPR-2D) e Energia de Interação Linear (LIE). Os sistemas obtidos por mistura física (MF), malaxagem (MAL) e slurry (SL), caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Calorimetria Diferencial Esploratória (DSC) e Análise Termogravimétrica (TGA). A atividade in vitro foi feita pela inibição de resazurina em duas formas evolutivas da cepa Y de T. cruzi, epimastigota e tripomastigota, frente as amostras de BZT, βCD, MAL e SL. O modelo de predição obtido por QSPR-2D aliado ao LIE foi capaz indicar a viabilidade dos complexos de inclusão entre o BZT e βCD, demonstrando energias livres favoráveis para a interação. O FTIR indicou a formação de complexos de inclusão por MAL e SL, pois obtiveram espectros que diferem das bandas características dos compostos isolados. As fotomicrografias obtidas por MEV demonstraram a natureza cristalina do BZT e também foram indicativos da formação dos complexos por alterações na superfície dos sistemas, comparado aos compostos isolados. O DSC dos sistemas obtidos de MF e MAL apresentaram picos endotérmicos característicos dos compostos isolados. Por sua vez, o SL apresentou um perfil térmico diferente, com eventos próprios da mistura. A TGA demonstrou que os sistemas obtidos por MAL e SL incrementaram a proteção térmica do BZT isolado. No tocante da atividade in vitro, a βCD não interferiu na atividade para ambas as formas evolutivas e os complexos de inclusão testados, MAL e SL, incrementaram a atividade do BZT isolado. Para formas epimastigotas, MAL e SL não chegaram a obter os mesmos resultados do fármaco usado como controle positivo, o Benzonidazol (BZND). Para essa forma evolutiva, entre eles, o MAL obteve maior atividade em comparação ao SL até a concentração 50 μg/mL e a partir de 50 μg/mL, o SL obteve maior atividade. Para as formas tripomastigotas, o MAL obteve atividade semelhante ao BZND nas concentrações de 10 e 25 μg/mL. Em 50, 100 e 1 μg/mL, o MAL se sobressaiu em relação ao BZND, e ao outro método de obtenção testado, o SL. Os resultados demonstraram que os complexos de inclusão obtidos com BZT por MAL e SL podem ser aliados no tratamento da Doença de Chagas.


  • Mostrar Abstract
  • The free radicals produced to the maintenance of Trypanossoma cruzi’s (T. cruzi) infection in the human, under the chronic phase of Chagas Disease has a direct relation with the development of cardiomyopathies and antioxidants are being used as allies to the treatment of this condition. Nitroxides are stable free radicals that can interact with reactive species, reducing its load in the organism and, consequently, acting in the reduction of the corporal oxidative stress. Tempol is the most studied nitroxide and, through the addition of functional groups, other molecules can be obtained, such as Bztempo (BZT). The inclusion complexes with β-cyclodextrin (βCD) can be obtained to enhance the physicochemical properties and bioavailability of many compounds. Thus, the following study aims to rationally achieve an inclusion complex with BZT and βCD to the treatment of the infection by T. cruzi. The inclusion complexes were planned by two in silico methodologies, Quantitative Structure-Property Relationship (QSPR-2D) and Linear Interaction Energy (LIE). The systems were achieved by physical mixture (PM), kneading (KN) and slurry (SL) methods, and characterize by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), Scanning Electron Microscopy (SEM), Differential Scanning Calorimetry (DSC) and Thermogravimetric Analysis (TGA). The in vitro activity was made by resazurin’s inhibition in two T. cruzi’s evolutive forms (Y strain) facing the samples of BZT, βCD, KN and SL. The prediction model achieved by QSPR-2D method, allied to LIE, was capable to indicate the viability of the inclusion complexes between BZT and βCD, showing favorable free-energies to the interaction between the compounds. The FTIR results have indicated the inclusion complexes formation by KN and SL, due to the differences shown in their spectra related to the isolated compounds. The photomicrographs achieved by SEM presented indicatives of the inclusion complex formation due to the changes in the surface of the systems, comparing to the isolated samples. The DSC of the systems achieved by PM and KN methods has exhibited characteristic endothermic events of the isolated compounds. By other hand, the SL has shown a thermal profile that differs from the isolated compounds, with characteristic events of the mixture itself. The TGA has shown that KN and SL samples have enhanced the thermal protection of the BZT. Regarding the in vitro activity, the βCD has not interfered in the activity of the both evolutive forms and, the testes systems, KN and SL, had increased the activity of isolated BZT. To the epimastigote forms, KN and SL hasn’t reached close results to the positive control drug, Benzonidazole (BZND). To this evolutive form, KN complex had a better activity in comparison to SL until the concentration of 50 μg/mL, and after this concentration, the SL had a better activity. To the trypomastigotes, KN had a similar activity to BZND in the concentrations of 10 and 25 μg/mL. In 50, 100 and 1 μg/mL, the KN has stand out in relation to BZND, and to the other system achieved, SL. The results have shown that the inclusion complexes achieved with BZT by KN and SL can be allies in the treatment of Chagas Disease.

2
  • DANIELLE LIMA BEZERRA DE MENEZES
  • MICROPARTÍCULAS POLIMÉRICAS PARA VEICULAÇÃO DE UM DERIVADO TIOFENO E AVALIAÇÃO DA SUA POTENCIAL ATIVIDADE ANTIPROLIFERATIVA in vitro

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • FABIO ROCHA FORMIGA
  • HUGO ALEXANDRE DE OLIVEIRA ROCHA
  • Data: 25/02/2021

  • Mostrar Resumo
  • O 2-amino-4,5,6,7-tetrahidrobenzo[b]tiofeno-3-carbonitrila (6CN) é um derivado 2-aminotiofeno com atividade antiproliferativa contra linhagens celulares cancerígenas. No entanto, apresenta baixa solubilidade aquosa que limita sua utilização clínica. Este trabalho teve como objetivo avaliar a influência da microencapsulação no desenvolvimento de um novo sistema capaz de modular sua liberação e incrementar a atividade biológica. Para isto foram desenvolvidas microesferas de hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) carregadas com o 6CN por spray-drying com diferentes razões entre 6CN:HPMC. Estes sistemas foram caracterizados quanto ao teor, por técnicas de espectrofotometria na região do infravermelho, microscopia eletrônica de varredura e análise granulométrica, difração de raios-X (DRX), análise térmica por calorimetria exploratória diferencial (DSC), além de ensaios in vitro de cinética de liberação e viabilidade celular por alamarBlue em células de linhagem de rim embrionário humano (HEK-293) e carcinoma de cólon (CT-26). Os sistemas apresentaram um teor variante de 70-80% quando não consideradas as perdas totais durante o processo de obtenção. A caracterização por espectroscopia na região do infravermelho evidenciou interações entre matriz e ativo. A análise do tamanho de partícula mostrou a formação de partículas com tamanho médio entre 31-47 μm com uma morfologia de superfície esférica, bem definida e lisa. A análise por DRX e DSC evidenciaram que dentro do sistema o 6CN tende a permanecer em um estado mais amorfo. O ensaio de cinética de liberação em membrana de diálise mostrou que o 6CN tem 100% da sua liberação em até 10 horas tanto no pH 7,4 como pH 1,2. Os sistemas MP2 e MP3 promoveram uma liberação prolongada nos modelos mono e biexponencial, em ambos os pH em até 56 horas. O ensaio de citotoxicidade nas células de linhagem HEK-293 mostrou que nas concentrações entre 5-50 μg/mL o 6CN apresenta uma atividade protetora em até 48 horas. Nas células de CT-26, não foi observado um efeito citotóxico significativo. No entanto, nas células tratadas com MP3 nas concentrações de 25 e 50 μg/mL a viabilidade celular foi reduzida em 40 e 50%, respectivamente. Diante disso, os dados asseguram que foi desenvolvido um sistema obtido por spray-drying a partir de HPMC capaz de modificar a liberação do 6CN e interferir no crescimento celular de células CT-26 com potencial para aplicação em tratamentos de longa duração.


  • Mostrar Abstract
  • 2-amino-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]thiophene-3-carbonitrile (6CN) is a thiophene derivative with antiproliferative activity against cancer cell lines. However, presents low aqueous solubility which interferes its clinical use. This work aims to evaluate the influence of microencapsulation technique to developed a new system capable of modulate its release and improve the biological activity. 6CN-loaded hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) microspheres employing the spray-drying method were developed with different drug-polymer ratios. These systems were characterized for drug content (%), infrared, scanning electron microscopy (SEM), X-ray diffraction (XRD), granulometric and differential scanning calorimetry (DSC) analysis. Plus, release kinetics and cytotoxicity activity in vitro by alamarBlue assay in human kidney embryo cells (HEK-293) and colon carcinoma cells (CT-26). The systems showed a drug content (%) between 70-80%, although losses during the developing process. Infrared results evidenced interactions between the components of the formulation. The granulometric analysis showed microparticles with an average size between 31-47 μm and SEM analysis showed particles with a well-defined and smooth spherical surface morphology. XRD and DSC analysis confirmed the 6CN crystalline nature. In contrast, in the systems it showed an amorphous state. The kinetics study with the dialysis method showed that after 10 hours almost 100% of 6CN was released in both medium (pH 1.2 and pH 7.4). The systems MP2 and MP3 were capable of promote a controlled release for 56 hours fitted the mono and biexponential model. The results of alamarBlue assay showed that 6CN, at concentrations between 5-50 μg/mL, demonstrated a protective activity in up to 48 hours. In CT-26 cells, no significant cytotoxic effect was observed. However, cells treated with MP3 at concentrations of 25 and 50 μg/mL, cell viability was reduced by 40 and 50%, respectively. Therefore, the data ensures that a microparticulate system obtained by spray-drying from HPMC was developed, capable of modifying the release of 6CN and interfering in the cell growth of CT-26 cells with potential for application in long-term treatments.

3
  • MANUELA MIGUÉLIA BEZERRA DA SILVA
  • ESTUDO DA ASSOCIAÇÃO DA VITAMINA D COM A HEPATITE AUTOIMUNE

  • Orientador : MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOAO FELIPE BEZERRA
  • JUSSARA MELO DE CERQUEIRA MAIA
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • Data: 11/03/2021

  • Mostrar Resumo
  • A hepatite autoimune (HAI) é uma doença hepática grave que afeta crianças e adultos em todo o mundo. Ela se desenvolve em indivíduos geneticamente susceptíveis quando um gatilho ambiental leva a uma resposta autoimune direcionada a autoantígenos hepáticos, envolvendo as células imunes, citocinas, auto-anticorpos e o sistema complemento. Nos últimos anos a atividade imunomoduladora da vitamina D vem sendo estudada e neste sentido a associação desta vitamina com as doenças autoimunes vêm sendo investigada, visto que ela atua nas vias de regulação que previnem e melhoram a inflamação e a imunidade. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a associação da vitamina D com a hepatite autoimune, por meio da avaliação do estado nutricional de vitamina D e da expressão dos genes que codificam o seu receptor (VDR) e as citocinas IL-6 e IL-10 em crianças e adolescentes com HAI. Para este fim, 30 voluntários (16 pacientes com diagnóstico de HAI - Grupo Caso e 14, sem o diagnóstico da doença - Grupo Controle) foram incluídos no estudo. Foi realizada a coleta de sangue periférico por punção venosa para avaliação do estado metabólico geral (parâmetros bioquímicos), quantificação da 25(OH)D3 e quantificação da expressão do RNAm de VDR, IL6 e IL10. Observou-se que a maioria dos pacientes com HAI é do sexo feminino com idade média de 14 anos. No tocante aos parâmetros bioquímicos, foram encontrados aumentos nas atividades de AST (aspartato aminotransferase), ALT (alanina aminotransferase), GGT (gama glutamil transferase), FAL (fosfatase alcalina) e LDH (lactato desidrogenase), para os pacientes com HAI quando comparados aos controles. Já em relação à vitamina D, observou-se uma grande frequência de indivíduos com valores abaixo do recomendado nos pacientes com HAI (71%), enquanto que nenhum dos indivíduos do grupo controle apresentou valores abaixo do recomendado, além disso observou-se uma correlação entre a expressão de IL10 com a quantificação da 25(OH)D, sugerindo que quanto menor a concentração de vitamina D, menor será a expressão de IL10. Assim, pode-se concluir que os pacientes do grupo caso mostram um perfil característico de pacientes com HAI compensados e que há indícios de que a vitamina D pode estar associada ao desenvolvimento da doença.


  • Mostrar Abstract
  • Autoimmune hepatitis (HAI) is a serious liver disease that affects children and adults worldwide. It develops in genetically susceptible individuals when an environmental trigger leads to an autoimmune response directed at liver autoantigens, involving immune cells, cytokines, autoantibodies and the complement system. In recent years, the immunomodulatory activity of vitamin D has been studied and, in this sense, the association of this vitamin with autoimmune diseases has been investigated, since it acts in the regulatory pathways that prevent and improve inflammation and immunity. Thus, the present study aimed to assess the association of vitamin D with autoimmune hepatitis, by assessing the nutritional status of vitamin D and the expression of the genes encoding its receptor (VDR) and the cytokines IL-6 and IL -10 in children and adolescents with AIH. To this end, 30 volunteers (16 patients diagnosed with AIH - Case Group and 14 without the disease diagnosis - Control Group) were included in the study. Peripheral blood was collected by venipuncture to assess the general metabolic status (biochemical parameters), quantification of 25 (OH) vitamin D and quantification of VDR, IL6 and IL10 mRNA expression. It was observed that the majority of patients with AIH are female with an average age of 14 years. Regarding biochemical parameters, increases in AST (aspartate aminotransferase), ALT (alanine aminotransferase), GGT (gamma glutamyl transferase), FAL (alkaline phosphatase) and LDH (lactate dehydrogenase) activities were found for patients with HAI when compared controls. Regarding vitamin D, there was a high frequency of individuals with values below the recommended in patients with AIH (71%), while none of the individuals in the control group had values below the recommended, in addition, a correlation was observed between the expression of IL10 with the quantification of 25 (OH) D, suggesting that the lower the concentration of vitamin D, the lower the expression of IL10. Thus, it can be concluded that the patients in the case group show a characteristic profile of compensated HAI patients and that there is evidence that vitamin D may be associated with the development of the disease.

4
  • LORENA MARIA LIMA DE ARAÚJO
  • ESTUDO DE UTILIZAÇÃO DE INIBIDORES DE BOMBA DE PROTONS POR UTENTES DE FARMÁCIAS COMUNITÁRIAS

  • Orientador : ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • ERICA LIRA DA SILVA FREITAS
  • YONARA MONIQUE DA COSTA OLIVEIRA
  • Data: 12/04/2021

  • Mostrar Resumo
  • Os inibidores de bomba de prótons (IBP) estão entre os medicamentos mais prescritos no mundo. Contudo, informações sobre perfil de usuário e fatores associados à sua aquisição em farmácias comunitárias são escassos. O objetivo desse estudo foi caracterizar o padrão de uso de IBP e fatores associados à utilização inadequada e ao tempo prolongado de uso. Foi desenvolvido em um estudo transversal, prospectivo e observacional envolvendo entrevista a 410 pacientes que adquirirem IBP para uso próprio em farmácias comunitárias. E investigado o perfil sócio demográfico e clínico (doenças e outros medicamentos). Quanto aos IBP e sua utilização foi avaliado a indicação de uso, posologia adotada, tempo e conhecimento do paciente sobre o medicamento, e aspectos farmacoeconômicos. Empregamos estatística descritiva para caracterização da amostra e modelo de regressão logística multivariada para a determinação dos fatores associados ao uso de IBP. Resultados preliminares apontam para um uso adequado de IBP quanto a indicação e forma de uso (79%), contudo se observa um elevado uso prolongado destes medicamentos (30%) associados à ausência de conhecimento sobre os potenciais danos (57%). A seleção do IBP não considera o poder aquisitivo do paciente, bairros de menor IDH apresentam custo de tratamento com IBP equiparado às localidades economicamente mais desenvolvidas da cidade. Logo, os IBP se mostram adequados quanto a indicação e forma de uso, no entanto, se utiliza por períodos prolongados sem conhecimento dos riscos, como também é observada uma discrepância na prescrição entre poder aquisitivo do paciente e custo do tratamento.


  • Mostrar Abstract
  • Proton pump inhibitors (PPIs) are among the most prescribed drugs in the world. However, information on user profiles and factors associated with their purchase at community pharmacies is scarce. The aim of this study is to characterize the pattern of PPI use and factors associated with inappropriate use and prolonged use. A crosssectional, prospective and observational study involving interviews with 410 patients purchasing PPIs for their own use in community pharmacies is being conducted. The socio-demographic and clinical profile (diseases and other medications) is being investigated. Regarding PPIs and their use, the indication for use, dosage adopted, time and patient knowledge about the drug and pharmacoeconomic aspects are being evaluated. We are using descriptive statistics for sample characterization and multivariate logistic regression model to determine factors associated with PPI use. Preliminary results point to an adequate use of PPI regarding indication and form of use (79%), however there is a high prevalence of prolonged use of these drugs (30%) associated with lack of knowledge about adverse reactions (57%). The selection of the PPI does not consider the purchasing power of the patient, with lower HDI neighborhoods presenting the cost of PPI treatment similar to the most economically developed locations in the city. Therefore, PPI use is adequate as to indication and form of use, however, it is used for prolonged periods without knowledge of the risks and existing PDIs, as well as a discrepancy in the prescription between patient's purchasing power and cost of treatment.

5
  • RAFAEL CAETANO LISBOA CASTRO DE ANDRADE
  • PRODUÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE QUITOOLIGOSSACARÍDEOS, AVALIAÇÃO DA SUA TOXICIDADE AGUDA E AÇÃO CICATRIZANTE

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MARIA GIOVANA BINDER PAGNONCELLI
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 11/05/2021

  • Mostrar Resumo
  • A integridade da pele é essencial para a vida humana. Quando ocorre uma ruptura nessa barreira física, o intuito do mecanismo de reparo é induzir uma resposta rápida e eficiente para evitar complicações como a formação de queloides ou evolução para uma ferida crônica. Nesse cenário, a demanda pela busca de biomoléculas, com características antioxidantes, antimicrobiana, anti-inflamatória e imunoestimulante, como os quitooligossacaídeos (QOS), que possam auxiliar no processo de cicatrização, tem aumentado recentemente de maneira acelerada. Diante disso, esse estudo apresenta como objetivo produzir QOS, em dois tempos de hidrólise (1 e 5 minutos) por quitosanases derivadas de Bacillus toyonensis, realizar sua caracterização estrutural, avaliar sua biocompatibilidade, em modelos de toxicidade aguda in vivo e citotoxidade, e sua ação cicatrizante nos modelos de migração celular (“scratch”) in vitro e no de reparo de feridas in vivo. O processo de degradação enzimática da quitosana produziu oligossacarídeos com grau de desacetilação de cerca de 80%, com predominância de hexâmeros indicada através da técnica de cromatografia de permeação em gel (CPG) e comprovada na análise de espectrometria de massas. O ensaio de toxicidade aguda confirmou a não toxicidade dessas substâncias e a viabilidade celular indica a biocompatibilidade dessas oligossacarídeos sobre fibroblastos murinos. A capacidade dos QOS em estimular a migração de fibroblastos in vitro foi observada em todas as concentrações testadas (100; 250; 500 µg/mL), com uma redução de até 100% no tamanho da ranhura após 12 horas da adição da concentração de 500 µg/mL de QOS produzidos com 5 minutos de hidrólise. O efeito cicatrizante in vivo desses oligossacarídeos foi confirmado no modelo da ferida induzida por corte cirúrgico, onde essas moléculas apresentaram redução significativa para os grupos testados com QOS1 30 mg/kg (89,25% ± 2,2), QOS1 300 mg/kg (82% ± 10,6), QOS5 30 mg/kg (89,25% ± 1,7) e QOS5 300 mg/kg (93% ± 0,8) quando comparados ao grupo salina (61,25% ± 8,1) no sétimo dia de experimento. Apesar de não possuir mecanismo de ação conhecido, a presença de hexâmeros pode estar relacionada com os efeitos biológicos dos QOS. Dessa forma, os resultados obtidos indicam o potencial uso como cicatrizante dos QOS para o âmbito farmacêutico


  • Mostrar Abstract
  • The skin integrity is essential for human life. When a rupture occurs in this physical barrier, the purpose of the repair mechanism is to induce a quick and efficient response to avoid complications such as keloid formation or progression to a chronic wound. In this scenario, the demand for the search for biomolecules, with antioxidant, antimicrobial, anti-inflammatory and immunostimulating characteristics, such as chitooligosaccharides (COSs), which can assist in the healing process, must be accelerated. Therefore, this study aims to produce COS, in two times of hydrolysis (1 and 5 minutes) by chitosanases derived from Bacillus toyonensis, to carry out structural characterization, to evaluate biocompatibility in acute toxicity models in vivo and cytotoxicity, and healing action in cell migration models (“scratch”) in vitro and in vivo wound repair. The chitosan enzymatic degradation process produced oligosaccharides with a deacetylation degree about 80%, with a hexamers predominance attributed through the gel permeation technique chromatography (GPC) and proven in the analysis mass spectrometry. The acute toxicity test confirms the nontoxicity of these substances and cell viability indicates the oligosaccharides biocompatibility on murine fibroblasts. The QOS ability to stimulate fibroblast migration in vitro was observed in all tested tools (100; 250; 500 µg/mL), with a reduction up to 100% in the groove size 12 hours after adding a concentration of 500 µg/mL COS obtained with 5 minutes hydrolysis. The oligosaccharides in vivo healing effect was confirmed in the surgical wound-induced model, where these molecules reduced for the groups tested with COS1 30 mg/kg (89.25% ± 2.2), COS1 300 mg/kg (82% ± 10.6), COS5 30 mg/kg (89.25% ± 1.7) and COS5 300 mg/kg (93% ± 0.8) when compared to saline group (61.25% ± 8.1) without the seventh day of the experiment. Despite having no known mechanism of action, the hexamers presence may be related to the biological effects of COS. Thus, the selected results indicate the COS potential use as a healing for the pharmaceutical field.

6
  • LANNYA CLARA SANTOS TAVARES PESSOA
  • DESENVOLVIMENTO E AVALIAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS LIPÍDICAS SÓLIDAS CONTENDO PAPAÍNA EM MODELOS IN VITRO DE LEISHMANIOSE CUTÂNEA

  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • RAQUEL DE MELO BARBOSA
  • Data: 30/07/2021

  • Mostrar Resumo
  • A Leishmaniose cutânea é a forma mais comum de leishmaniose. Atualmente, os tratamentos disponíveis para esta doença são tóxicos, longos e de elevado custo. Diante disso, a busca de novas moléculas com potencial antileishmania é enfatizada. Neste cenário, a papaína é uma enzima proteolítica com propriedades medicinais, como anti-inflamatória, cicatrizante e antiparasitária. No entanto, a aplicação da papaína apresenta limitações quanto à sua baixa estabilidade e alta sensibilidade. Sendo assim, o desenvolvimento de metodologias para a imobilização de enzimas surge como uma estratégia. Em especial, a nanotecnologia, apresenta vantagens relacionadas a incorporação e transporte de fármacos e biomoléculas, além de melhorar a estabilidade, capacidade de atravessar barreiras biológicas e seguir até o local alvo de ação. O objetivo do presente estudo consiste em obter nanopartículas lipídicas sólidas (NLSs) a base de triglicerídeo 1,3-distearil-2-oleil glicerol (TG1) e monitorar as propriedades físico-químicas para liberação modificada de papaína. As nanopartículas lipídicas sólidas foram produzidas pelo método de emulsificação com evaporação de solvente e a incorporação da papaína pelo método de adsorção (NLSPAP). A caracterização físico-química das nanopartículas, demonstrou que as NLSs possuíam diâmetro menor que 300 nm, com distribuição de tamanho de partícula uniforme e potencial zeta de -13,2 ± 0,26 mV. As NLSPAP apresentaram tamanho da partícula maior e um o potencial zeta menos negativo (-2,08 ± 0,22), corroborando com os dados de espectroscopia de infravermelho (FTIR-ATR). As formulações mostraram, para morfologia, forma esférica e superfície lisa, observado pelas técnicas de microscopia de força atômica (MFA), microscopia eletrônica de varredura (MEV). As formulações NLSTG1 e NLSPAP foram biocompatíveis em ensaio com células NIH3T3 e Vero E6. Na avaliação da atividade contra as formas promastigotas de Leishmania amazonensis, a utilização do sistema nanoparticulado aumentaram a atividade antileishmania da papaína em 20%. Assim, o presente trabalho aborda de forma sistemática, o desenvolvimento de um nanocarreador com capacidade inovadora para incorporar a papaína e aumentar a eficácia de sua possível aplicação na atividade antileishmania.


  • Mostrar Abstract
  • Cutaneous Leishmaniasis is the most common form of leishmaniasis. Nowadays, the treatments available for this disease are toxic, long and expensive. Therefore, the search for new molecules with antileishmania potential is emphasized. In this scenario, papain is a proteolytic enzyme with medicinal properties, such as anti-inflammatory, healing and anti-parasitic. However, it is a protein that has limitations in terms of its application, such as low stability and high sensitivity. Hence, the development of methodologies for immobilizing enzymes appears as a powerful strategy. In special, nanotechnology presented advantages due to the incorporating and transport of drugs and biomolecules, in addition to improving stability, ability to cross biological barriers and proceed to the targeted action site. The aim of the present study is to obtain solid lipid nanoparticles (SLNs) based on 1,3-distearyl-2-oleyl glycerol (TG1) triglyceride and to monitor the physicochemical properties for modified papain release. The solid lipid nanoparticles were produced by the emulsification method with solvent evaporation and the incorporation of papain by the adsorption method (SLNPAP). The physical-chemical characterization of the nanoparticles, demonstrated that the NLSs had a diameter smaller than 300 nm, with uniform particle size distribution and zeta potential of -13.2 ± 0.26 mV. SLNPAPs presented larger particle size and a less negative zeta potential (-2.08 ± 0.22), corroborating with the infrared spectroscopy (FTIR-ATR) data. The formulations showed, for morphology, spherical shape and smooth surface, observed by the techniques of atomic force microscopy (MFA), scanning electron microscopy (SEM). NLSTG1 and NLSPAP formulations were biocompatible in assay with NIH3T3 and Vero E6 cells. The SLNTG1 and SLNPAP formulations were biocompatible and increased the papain antileishmania activity by 20%. Therefore, the present study, systematically addresses the nanocarrier development with innovative capacity to incorporate papain and increase the effectiveness of its possible application in antileshmania activity.

7
  • RITA NYKÁSSIA PINHEIRO SANTOS
  • VITAMINA D E PRÉ-ECLÂMPSIA: 25-HIDROXI-VITAMINA D SÉRICA DIMINUÍDA NA PRÉ-ECLÂMPSIA PRECOCE E INVERSAMENTE CORRELACIONADA COM A RELAÇÃO ALBUMINA-CREATININA

  • Orientador : MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • KARINE CAVALCANTI MAURICIO DE SENA EVANGELISTA
  • RICARDO NEY OLIVEIRA COBUCCI
  • Data: 30/07/2021

  • Mostrar Resumo
  • A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença específica da gestação caracterizada por hipertensão e lesão em órgão-alvo após 20 semanas de gestação. As complicações da PE podem comprometer diretamente a vida da mãe e do feto/neonato. Assim, o entendimento do desenvolvimento da doença pode levar a uma intervenção mais precoce e um manejo mais adequado, diminuindo o risco à saúde materna e fetal/neonatal. Neste sentido, há evidências da associação entre a deficiência de vitamina D e falha nos processos de imunomodulação que estariam diretamente relacionados ao desenvolvimento e a evolução da PE. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a concentração de 25-hidroxivitamina D (25(OH)D) e sua correlação com parâmetros bioquímicos gerais em gestantes com PE. Foram incluídas 45 gestantes, sendo 25 com diagnóstico de PE com sinais de gravidade (Grupo PE) e 20 normotensas (Grupo normotensas). Após assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido foram coletadas uma amostra de sangue em jejum, para a avaliação do perfil bioquímico geral e quantificação da 25(OH)D, e uma amostra da primeira urina da manhã para a determinação da relação albumina:creatinina urinária (RAC). Para a avaliação da vitamina D o grupo PE foi subdividido de acordo com o momento do desenvolvimento da PE, em grupo PE precoce (pacientes que desenvolveram PE antes da 34ª semana de gestação) e grupo PE tardia (pacientes que desenvolveram PE a partir da 34ª semana de gestação); e de acordo com a presença (grupo PE + HR) ou não (grupo PE) de hipertensão resistente associada. Em relação ao perfil bioquímico geral das pacientes observou-se valores aumentados de ureia (p<0,001), creatinina (p<0,001), RAC (p<0,001), ácido úrico (p<0,001), AST (p=0,016), LDH (p=0,002), fósforo (p=0,046) e magnésio (p<0,001), assim como valores diminuídos de albumina (p<0,001), proteína total (p<0,001) e cálcio (p<0,001), no grupo PE quando comparado às normotensas. No tocante à quantificação da 25(OH)D, foram observados valores estatisticamente menores no grupo PE precoce quando comparado ao grupo PE tardia (p = 0,045), não sendo observadas diferenças estatísticas entre os demais grupos estudados. Foi notada, ainda, uma correlação negativa entre os valores da 25(OH)D e da RAC (r=-0,765, p<0,001). Assim, conclui-se que há indícios de que a deficiência de vitamina D pode estar associada à PE precoce e que quanto menor a concentração de 25(OH)D maior será a gravidade da PE.


  • Mostrar Abstract
  • Preeclampsia (PE) is a pregnancy-specific disease. It is characterized by hypertension and target-organ injury after 20 weeks of pregnancy. PE’s complications are associated with significant maternal and perinatal mortality and morbidity. Thus, understanding the development of the disease may lead to an early intervention and a more appropriated management of PE, reducing the risks to maternal and fetal/neonatal health. In this regard, there are evidence of the association of vitamin D deficiency, as well, of immunomodulatory process failure may be directly associated to PE development and evolution. Thus, the objective of the present study was to evaluate 25-hidroxivitamin D (25(OH)D) concentration and its correlation with general biochemical parameters in pregnant women with PE. Forty-five pregnant women were included: 25 with severe PE diagnosis (PE group) and 20 normotensives (normotensive group). After signing written informed consent, a fasting blood sample, to evaluate general metabolic biochemical parameters and 25(OH)D; and a first morning urine sample, to determine urinary albumin-to-creatinine (ACR), were collected. Regarding vitamin D evaluation, PE group was divided according to the moment of PE development in early PE group (patients who developed PE before 34th week of pregnancy) and late PE group (patients who developed PE from 34th of pregnancy); and according to the presence (PE + RH group) or not (PE group) of resistant hypertension. Regarding general metabolic status analyses, urea (p<0.001), creatinine (p<0.001), ACR (p<0.001), uric acid (p<0.001), AST (p=0.016), LDH (p=0.002), phosphorous (p=0.046) and magnesium (p<0.001) increased values, as well as, albumin (p<0.001), total protein (p<0.001) and calcium (p<0.001), diminished values, were observed in PE group when compared to the normotensives pregnant. Concerning 25(OH)D quantification, statistically lower values were observed in early PE group when compared to late PE group (p=0.045). No differences were found between the other groups. A negative correlation between 25(OH)D and ACR was also noticed (r=-0.765, p<0.001). In conclusion, there are also evidences that vitamin D may be associated to early PE, as well, as that the lower the 25(OH)D concentration more severe will be the PE.

8
  • MARIANA FARIAS ALVES DA SILVA
  • EFEITO DA CO-ENCAPSULAÇÃO DO TERPENO FITOL NOS PARÂMETROS FÍSICO-QUÍMICOS DE NANOPARTÍCULAS DE ÁCIDO POLI LÁTICO CARREGADAS COM METOTREXATO

  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • JOÃO AUGUSTO OSHIRO JUNIOR
  • Data: 27/08/2021

  • Mostrar Resumo
  • O câncer é a segunda principal causa de morte no mundo, superada apenas por doenças cardiovasculares. A falta de especificidade dos fármacos no tecido neoplásico torna o seu tratamento repleto de efeitos adversos. O fitol é um metabólito bioativo secundário da clorofila que expressa uma atividade anticancerígena promissora. O metotrexato é um quimioterápico comumente usado no tratamento de tumores malignos. As nanopartículas vem sendo estudadas para a veiculação de fármacos visando aumentar seu direcionamento, possibilitando uma liberação sítio-específica, bem como superar as limitações de barreiras biológicas. O objetivo do estudo consiste no desenvolvimento e monitoramento de nanopartículas co-encapsuladas, contendo e fitol e metotrexato, funcionalizadas com polietelineimina, para potencial aumento da atividade antiproliferativa nas células cancerígenas. A metodologia de obtenção utilizada foi nanoprecipitação com evaporação de solvente. Os parâmetros de composição e método foram avaliados por medições de diâmetro de partículas, índice de polidispersão (PdI), potencial zeta, pH, espectroscopia de absorção de infravermelhos (FTIR-ATR), eficiência de encapsulamento e indicadores de desempenho, que incluem estudos de liberação, viabilidade celular in vitro e estabilidade. As nanopartículas conjugadas apresentaram tamanho médio em torno de 200 nm (PdI <0,2). A eficiência de encapsulamento foi superiror a 90% nas nanoparticulas funcionalizadas co-nanoencapsuladas. O fitol foi capaz de possibilitar uma liberação mais lenta e controlada na nanopartículas conjugadas. As amostras apresentaram-se viáveis e com morfologia esférica. O estudo promove o desenvolvimento de uma plataforma promissora para co-encapsulação de fármacos em nanopartículas para futuros testes de atividade biológica in vitro e in vivo.


  • Mostrar Abstract
  • Cancer is the second leading cause of death in the world, surpassed only by cardiovascular disease. The lack of specificities of the drugs in the neoplastic tissue, makes the traditional cancer therapy subject to severe undesirable effects. Phytol is a secondary bioactive metabolite of chlorophyll and expresses a promising anticancer activity. Methotrexate is a chemotherapeutics commonly used in the treatment of malignant tumors. Nanoparticles have been studied for drug delivery in order to improve the targeting, enabling site-specific release, as well as overcoming limitations of biological barriers. This study mains the development and monitoring of co-encapsulated nanoparticles loaded phytol and methotrexate and functionalized with polyethelineimine for potential increase in antiproliferative activity in cancer cells. The obtaining methodology used was nanoprecipitation with solvent evaporation. The composition and method parameters were evaluated by measurements of particle diameter, polydispersion index (PdI), zeta potential, pH, infrared absorption spectroscopy (FTIR-ATR), entrapment efficiency and performance indicators, including in vitro released, cell viability and stability studies. The conjugated nanoparticles presented average size around 200 nm (PdI <0.2) and the encapsulation efficiency was over 90% in the co-nanoencapsulated functionalized nanoparticles. Phytol was able to enable a slower and more controlled release in the conjugated nanoparticles. The samples were viable and with spherical morphology. The study promotes the development of a promising platform for co-encapsulated nanoparticles, for future tests of biological activity in vitro and in vivo.

9
  • KATIUSSE ALVES DOS SANTOS
  • miRNAs EXOSSÔMICOS CIRCULANTES COMO BIOMARCADORES DE DIAGNÓSTICO E PROGNÓSTICO DE CÂNCER COLORRETAL: REVISÃO DA LITERATURA

  • Orientador : VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JANAINA CRISTIANA DE OLIVEIRA CRISPIM FREITAS
  • RAUL HERNANDES BORTOLIN
  • VIVIAN NOGUEIRA SILBIGER
  • Data: 17/09/2021

  • Mostrar Resumo
  • O câncer colorretal (CCR) é o tumor maligno mais comum do trato gastrointestinal. É uma doença multifatorial que envolve fatores ambientais, genéticos e de estilo de vida. Devido à ausência de biomarcadores específicos e sensíveis, os pacientes com CCR geralmente são diagnosticados em um estágio avançado e, consequentemente, sofrem de uma baixa taxa de sobrevida global em 5 anos. Vários estudos demonstraram que pequenos RNAs não codificantes, como os microRNAs (miRNAs) obtidos de exossomos, são biomarcadores potenciais em vários tipos de câncer, incluindo o CCR, e que podem ser detectados de forma estável tanto no soro quanto no plasma. Desta forma, o presente estudo busca apresentar uma visão geral do papel dos miRNAs exossômicos circulantes com potencial para atuar como biomarcadores para o diagnóstico e prognóstico do CCR a partir de evidências disponíveis na literatura. Neste intuito, desenvolveu-se uma revisão da literatura consultada na base eletrônica de dados publicados entre 2015 a 2019. Foram identificados 28 artigos que descreveram os miRNAs exossômicos circulantes como potenciais biomarcadores de diagnóstico, prognóstico e alvos terapêuticos do CCR. Um total de 59 miRNAs exossômicos diferencialmente expressos foram sugeridos como bons candidatos para uso como biomarcadores do CCR. Desta forma, a presente revisão almeja que o uso de biomarcadores circulantes, em conjunto com os métodos de triagem atuais, possam fornecer um caminho para uma futura utilização na prática clínica em pacientes com CCR e, consequentemente, contribuir para diminuição da mortalidade decorrente da dificuldade da detecção precoce, assim como na melhoria da qualidade de vida dos pacientes.


  • Mostrar Abstract
  • Colorectal cancer (CRC) is the most common malignant tumor of the gastrointestinal tract. It is a multifactorial disease that involves environmental, genetic and lifestyle factors. Due to the absence of specific and sensitive biomarkers, patients with CRC are usually diagnosed at an advanced stage and consequently suffer from a low 5-year overall survival rate. Several studies have shown that small non-coding RNAs, such as microRNAs (miRNAs) obtained from exosomes, are potential biomarkers in several types of cancer, including CRC, and that they can be detected in a stable form in both serum and plasma. Thus, the present study seeks to present an overview of the role of exosomal circulating miRNAs with the potential to act as biomarkers for the diagnosis and prognosis of CRC based on evidence available in the literature. For this purpose, a review of the literature consulted in the electronic database published between 2015 and 2019 was developed. 28 articles were identified that described circulating exosomal miRNAs as potential biomarkers of diagnosis, prognosis and therapeutic targets of CRC. A total of 59 differentially expressed exosomal miRNAs have been suggested as good candidates for use as biomarkers of CRC. Thus, the present review aims for the use of circulating biomarkers along with current screening methods to provide a path for future use in clinical practice in patients with CRC, and consequently, contribute to the reduction of mortality due to the difficulty of early detection, as well as improving the quality of life of patients.

10
  • CAMILA SOARES DE FRANÇA
  • NITRÓXIDOS COM POTENCIAL ANTIOXIDANTE: CARACTERIZAÇÃO, DESENVOLVIMENTO DE MÉTODO INDICATIVO DE ESTABILIDADE E DEGRADAÇÃO FORÇADA

  • Orientador : CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
  • TICIANO GOMES DO NASCIMENTO
  • Data: 22/09/2021

  • Mostrar Resumo
  • Nitróxidos são uma classe de substâncias com potencial promissor na indústria cosmética em virtude de suas ações antioxidantes que permitem o uso no tratamento do envelhecimento cutâneo a partir da inibição da ação dos radicais livres e, consequentemente, diminuição dos efeitos de envelhecimento da pele. Neste trabalho, três exemplares dessa classe: TEMPOL, BZTEMPOL e TSTEMPOL foram caracterizados a partir de diferentes técnicas analíticas, tais como: espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), espectroscopia de ressonância paramagnética (EPR), difração de raios-X (DRX), calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TG), espectrometria de massas (LC-MS) e cromatografia líquida de ultra eficiência (UHPLC), além disso, um método indicativo de estabilidade por cromatografia líquida de ultra eficiência (UHPLC) foi desenvolvida e utilizado para estudos de degradação forçada dos compostos em questão. Com os resultados das técnicas de DRX, FTIR, EPR e LC-MS foi possível identificar a natureza cristalina dessas moléculas, confirmar a presença dos grupos funcionais e a natureza radicalar esperados para estrutura desses compostos, além garantir a identidade molecular e pureza das amostras estudadas. Já as técnicas termoanalíticas possibilitam conhecer o comportamento térmico desses três nitróxidos e para isso foram utilizadas quatro razões de aquecimento (5, 10, 15 e 20 °C.min-1), sob atmosfera de nitrogênio. O TEMPOL, BZTEMPOL e TSTEMPOL apresentaram ponto de fusão em 72,2, 121 e 108,4 ºC, respectivamente sendo o TEMPOL o nitróxido mais estável termicamente (152°C). Com as curvas termogravimétricas também foi possível realizar o estudo cinético do tipo dinâmico através do método de Ozawa e como resultado o BZTEMPOL apresentou de maior energia de ativação. Quanto ao método analítico, foi desenvolvido adequadamente com base em um planejamento fatorial do tipo Box-Behnken para quantificação de forma individualizada dessas moléculas e posteriormente foi aplicado no estudo de degradação forçada, evidenciando sua eficiência. Dessa forma, esse estudo fornece subsídios úteis para o desenvolvimento de possíveis formulações cosméticas com essas substâncias de maneira segura, eficaz e com qualidade.


  • Mostrar Abstract
  • Nitroxides are a class of substances with promising potential in the cosmetic industry due to their antioxidant actions that allow their use in the treatment of skin aging by inhibiting the action of free radicals and, consequently, reducing the effects of aging on the skin. In this work, three examples of this class: TEMPOL, BZTEMPOL, and TSTEMPOL were characterized using different analytical techniques, such as Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), paramagnetic resonance spectroscopy (EPR), X-ray diffraction ( XRD), Differential Scanning Calorimetry (DSC), Thermogravimetry (TG), Mass Spectrometry (LC-MS) and Ultra Performance Liquid Chromatography (UHPLC), in addition to an indicative method of stability by ultra-performance liquid chromatography (UHPLC) was developed and used for forced degradation studies of the compounds in question. With the results of the DRX, FTIR, EPR, and LC-MS techniques, it was possible to identify the crystalline nature of these molecules, confirm the presence of functional groups and the radical nature expected for the structure of these compounds, in addition to guaranteeing the molecular identity and purity of the samples studied. The thermoanalytical techniques, on the other hand, make it possible to know the thermal behavior of these three nitroxides and for this four heating ratios (5, 10, 15, and 20 °C.min-1) were used, under nitrogen atmosphere. TEMPOL, BZTEMPOL, and TSTEMPOL had a melting point of 72.2, 121, and 108.4 ºC, respectively, with TEMPOL being the most thermally stable nitroxide (152°C). With the thermogravimetric curves, it was also possible to carry out the kinetic study of the dynamic type through the Ozawa method and as a result, BZTEMPOL presented higher activation energy. As for the analytical method, it was properly developed based on a Box-Behnken factorial design for individual quantification of these molecules and was later applied in the study of forced degradation, showing its efficiency. Thus, this study provides useful support for the development of possible cosmetic formulations with these substances in a safe, effective, and quality manner.

11
  • LUIZ FERNANDO RODRIGUES DE SOUZA
  • ESTUDO DOS METABÓLITOS BIOATIVOS DE INTERESSE FARMACÊUTICO EM Selaginella convoluta (ARN.) SPRING

  • Orientador : RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • EDUARDO LUIZ VOIGT
  • RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • TAFFAREL MELO TORRES
  • Data: 24/09/2021

  • Mostrar Resumo
  • A licófita Selaginella convoluta é uma espécie nativa do bioma Caatinga e está inserida no grupo das plantas da ressureição. No gênero Selaginella é relatada uma ampla diversidade de moléculas quimicamente singulares, em especial as que compõem as classes de biflavonoides e selaginelinas, sendo estas últimas exclusivas do gênero. O presente projeto objetiva estudar a ocorrência de metabólitos secundários de interesse farmacêutico em S. convoluta, norteando-se em dados prévios de proteoma obtidos de partes aéreas e raízes em situação de dessecação e irrigação, sendo um dos principais interesses, o estudo da biossíntese de metabólitos secundários de interesse farmacêutico. A análise instrumental do proteoma foi realizada em um sistema UPLC DionexUltimate 3000 com re-fragmentação dos íons mais intensos em espectrômetro de massas com detector de armadilha linear em quadrupolo (LTQ), sendo o tratamento dos dados realizado pelo software PatternLab for Proteomics. Os resultados de proteoma enfatizam a preparação da espécie para tolerar a dessecação por meio de mecanismos coordenados de proteção e sinalização inter-órgãos. Destacam-se as partes aéreas enquanto o principal órgão na biossíntese de metabólitos secundários, contudo é perceptível o envolvimento e comunicação da planta como um todo na mobilização de enzimas presentes em vias de biossíntese. Neste sentido, àquelas ligadas a biossíntese de fenilpropanoides sugerem a construção de metabólitos das classes de cumarinas e ligninas, sendo também elencanda a enzima polifenol oxidase, importante reguladora da via de fenilpropanoides, como atuante na síntese de produtos naturais em S. convoluta. As abordagens apresentadas contribuem para a inserção de métodos inovadores no estudo de moléculas oriundas de espécies da Caatinga, bem como permitem a resolução de questões de fronteira no estudo de espécies vegetais com enfoque na biossíntese de moléculas de potencial bioativo, o que promove este bioma exclusivamente brasileiro no cenário de alto impacto biotecnológico do Brasil.


  • Mostrar Abstract
  • Selaginella convoluta is a lycophyte native from Caatinga biome that belongs to the group of resurrection plants. Selaginella genus is known to posess a wide diversity of chemically unique molecules, especially those that make up the classes of biflavonoids and selaginellins, the latter being exclusive to their species. The present project aims to study the occurrence of secondary metabolites of pharmaceutical interest in S. convoluta, based on previous proteome data obtained from shoots and roots in desiccation and hydrated situations, with special interest in the study of the biosynthesis of secondary metabolites of pharmaceutical interest. The instrumental analysis of the proteome was performed in a UPLC DionexUltimate 3000 system with re-fragmentation of the most intense ions in a linear trap quadrupole mass spectrometer (LTQ), and the treatment of the data was carried out by the PatternLab for Proteomics software. The proteome results emphasize the preparation of the species to tolerate desiccation through coordinated mechanisms of protection and inter-organ signaling. Shoots stand out as the main organ in the biosynthesis of secondary metabolites, however it is noticeable the involvement and communication of the plant as a whole in the mobilization of enzymes present in biosynthetic pathways. In this sense, those linked to phenylpropanoid biosynthesis suggest the construction of coumarins and lignins, also showing the enzyme polyphenol oxidase, an important regulator of the phenylpropanoid pathway, as active in the synthesis of natural products in S. convoluta. The presented approaches contribute to the insertion of innovative methods in the study of molecules from Caatinga species, as well as allows the resolution of frontier issues in the study of plant species with a focus on bioactive potential molecule biosynthesis, wich promotes this exclusive biome in the highly biotechnological impact in Brazil

12
  • ELAINE CRISTINE SOUZA DA SILVA
  • ESTUDO FITOQUÍMICO E AVALIAÇÃO DO EFEITO GASTROPROTETOR E ANTI-INFLAMATÓRIO DA CACTÁCEA Nopalea cochenillifera

  • Orientador : SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DALINE FERNANDES DE SOUZA ARAUJO
  • JOVELINA SAMARA FERREIRA ALVES
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • Data: 22/11/2021

  • Mostrar Resumo
  • Nopalea cochenillifera, da família das Cactáceas, é conhecida popularmente como palma “doce” ou “miúda” e é amplamente cultivada na região Nordeste do Brasil. Esta pesquisa teve como objetivo caracterizar o perfil cromatográfico e avaliar o efeito gastroprotetor e anti-inflamatório do extrato hidroetanólico da Nopalea cochenillifera. Para isso, a cactácea foi coletada, cortada e seca em estufa, triturada, macerada com etanol e água, obtendo-se o extrato hidroetanólico, que foi liofilizado. O estudo fitoquímico do extrato hidroetanólico foi realizado por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e Cromatografia em Líquida de Alta Eficiência Acoplada à Espectrômetro de Massas (HPLC-ESI-IT). O teor de fenóis e flavonoides totais foi avaliado por espectrofotometria no ultravioleta. A avaliação por CCD indicou a presença de compostos fenólicos, incluindo os flavonoides. A análise por HPLC-ESI-IT identificou a presença de seis compostos, com predomínio do ácido cafeico hexosídeo. O teor de fenóis e flavonoides totais no extrato foi de 67,85% e 46,16%, respectivamente. No estudo farmacológico para avaliação da atividade anti-inflamatória, foram utilizados camundongos Swiss divididos aleatoriamente em grupos (n=.5) carragenina (tratado com salina), dexametasona (1 mg/g), extrato (200 mg/kg; 400 mg/kg ou 600 mg/kg). A atividade da enzima mieloperoxidase (MPO) foi avaliada como marcador da infiltração de neutrófilos. Para a avaliação da atividade gastroprotetora foram utilizados Rattus norvegicus (Wistar), distribuídos aleatoriamente em grupos (n=7) controle lesões gástricas, grupo saudável (salina), extrato de N. cochenillifera (50, 100 e 200 mg/kg) e ranitidina (50 mg/kg), administrados por gavagem. Os resultados mostram que o extrato apresenta uma atividade antiedematogênica, a dose de 600 mg/kg mostrou o percentual de inibição do edema de 58,00% ± 6,02 (P< 0,01). A atividade anti-inflamatória do extrato pôde ser confirmada pela redução siginificativa da enzima mieloperoxidase (MPO) (P< 0,01). Nos modelos induzidos pelo etanol e indometacina, o extrato mostrou que preveniu a formação das lesões gástricas, na dose de 100 mg/kg, modelo do etanol (P<0,001); e nas doses de 100 mg/kg (P< 0,05) e 200 mg/kg (P< 0,01), no modelo da indometacina. A avaliação macroscópica dos estômagos mostrou redução no índice de ulceração, acompanhado da redução da atividade da mieloperoxidade (MPO), e malondialdeído (MDA), preservação do GSH, redução dos níveis gástricos das citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-1β), e elevação da IL-10. As análises histopatológicas revelaram que o extrato preveniu as alterações morfológicas induzidas por etanol e pela indometacina, preservando a integridade tecidual gátrica, e ainda reduziu o infiltrado inflamatório, o que foi confirmado pela redução da MPO. Nas análises imunohistoquímica o extrato diminuiu a expressão da enzina COX-2 e aumentou a expressão da SOD na dosagem de 200 mg/kg quando induzido por indometacina e etanol. O pré-tratamento com extrato da N. cochenillifera não alterou o pH, o volume nem a acidez total do suco gástrico, porém preservou a secreção de muco podendo exercer um efeito citoprotetor. Os resultados do presente trabalho trazem evidências pré-clínicas que o extrato de Nopalea cochenillifera possui atividades gastroprotetoras e anti-inflamatórias, que podem estar relacionadas á riqueza de compostos fenólicos, especialmente flavonoides.


  • Mostrar Abstract
  • Nopalea cochenillifera, from the Cactaceae family, is popularly known as “sweet” or “small” palm and is widely cultivated in the Northeast region of Brazil. This research aimed to characterize the chromatographic profile and evaluate the gastroprotective effect of the hydroethanolic extract of Nopalea cochenillifera. For this, the cactus was collected, cut and dried in an oven, crushed, macerated with ethanol and water, obtaining the hydroethanolic extract, which was lyophilized. The phytochemical study of the hydroethanolic extract was carried out by Thin Layer Chromatography (TLC) and High Performance Liquid Chromatography Coupled to a Mass Spectrometer (HPLC-ESI-IT). The evaluation by CCD indicated the presence of phenolic compounds, including flavonoids. Analysis by HPLC-ESI-IT identified the presence of six compounds, with a predominance of hexoside caffeic acid. In the pharmacological study, to evaluate the gastroprotective activity, Rattus norvegicus (Wistar) were used, randomly distributed in groups (n=7) control gastric lesions, healthy group (saline), extract of N. cochenillifera (50, 100 and 200 mg/kg ) and ranitidine (50 mg/kg). In the models induced by ethanol and indomethacin, the extract showed that it prevented the formation of gastric lesions, at a dose of 100 mg/kg, ethanol model (P<0.001); and at doses of 100 mg/kg (P<0.05) and 200 mg/kg (P<0.01), in the indomethacin model. The macroscopic evaluation of the stomachs showed a reduction in the ulceration index, accompanied by a reduction in the activity of myeloperoxidation (MPO), and malondialdehyde (MDA), preservation of GSH, reduction in gastric levels of pro-inflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β ), and elevation of IL-10. Histopathological analyzes revealed that the extract prevented the morphological changes induced by ethanol and indomethacin, preserving the gastric tissue integrity, and also reduced the inflammatory infiltrate. In immunohistochemical analysis, the extract decreased the expression of the COX-2 enzyme and increased the expression of SOD at a dosage of 200 mg/kg when induced by indomethacin and ethanol. Pre-treatment with N. cochenillifera extract did not change the pH, volume or total acidity of the gastric juice, but preserved the secretion of mucus, which could exert a cytoprotective effect. The results of the present work provide preclinical evidence that the extract of N. cochenillifera has gastroprotective activity, which may be related to the richness of phenolic compounds, especially flavonoids.

Teses
1
  • SARA IASMIN VIEIRA CUNHA LIMA
  • PREVISÃO DE OCORRÊNCIA DE REAÇÃO ADVERSA A MEDICAMENTO EM PACIENTES HOSPITALIZADOS

  • Orientador : ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • DIVALDO PEREIRA DE LYRA JÚNIOR
  • FRANCISCA SUELI MONTE MOREIRA
  • MARCIO GALVÃO GUIMARÃES DE OLIVEIRA
  • ZENEWTON ANDRÉ DA SILVA GAMA
  • Data: 05/02/2021

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: As RAM têm uma incidência significativa entre pacientes hospitalizados. Um passo importante para reduzir a incidência das reações adversas seria a identificação daqueles pacientes que estão em risco aumentado de desenvolver uma RAM a partir de fatores de risco individuais. Objetivo: Desenvolver uma ferramenta para prever reações adversas a medicamento em pacientes hospitalizados. Metodologia: Estudo observacional, analítico, de casos-controles na proporção 1:2, de todos os pacientes admitidos durante o período junho de 2016 a dezembro de 2017 no Hospital Universitário Onofre Lopes, Brasil. Para a identificação das variáveis dos pacientes associadas com a ocorrência de RAM foi realizada inicialmente, com a totalidade da população do estudo, a análise univariada de cada variável do paciente por regressão logística condicional. Para a análise multivariada foram incluídas as variáveis que em análise univariada apresentaram associação significativa com a ocorrência de RAM a um nível de significância <0,10. Foi utilizado o programa estatístico Stata 12. Resultados: A proporção de pacientes em que ocorreu uma ou mais RAM foi de 4,43% (IC95% 4,00-4,90%). As reações adversas mais comuns foram a hipoglicemia (26,4%) e a hipotensão (15,2%). A análise univariada identificou 27 variáveis que se mostraram associadas com a ocorrência de RAM. Doze variáveis se mantiveram estatisticamente relacionadas com a ocorrência de RAM, dentre elas o sexo feminino (OR ajustado (ORA) 1,61, IC 95% 1,18-2,21), história prévia de RAM (ORA 1,97 IC 95% 1,34-2,90), diabetes sem (ORA 1,63 IC 95% 1,13-2,34) e com lesão de órgão alvo (ORA 6,49, IC 95% 3,56-11,83) e prescrição de medicamento administrado por via intravenosa (ORA 1,60, IC 95% 1,14-2,24). Conclusão: A prevalência de RAM foi observada em 3,97% dos pacientes, com destaque para reações dose dependentes de hipoglicemia e hipotensão. Foram identificados doze fatores independentes de risco de desenvolvimento de RAM, destacando-se a diabetes com lesão em órgão alvo como o fator de maior impacto. A partir desses fatores, o instrumento de avaliação de risco para desenvolvimento de RAM foi elaborado e validado.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: RAMs have a significant incidence among hospitalized patients. An important step in reducing the incidence of adverse reactions would be to identify those patients who are at increased risk of developing an RAM from individual risk factors. Objective: Develop a tool to predict adverse drug reactions in hospitalized patients. Methodology: Observational, analytical, case-control study in a 1: 2 ratio of all patients admitted during the period from June 2016 to December 2017 at Hospital Universitário Onofre Lopes, Brazil. For the identification of the variables of the patients associated with the occurrence of RAM, the univariate analysis of each patient variable by conditional logistic regression was performed initially with the entire study population. For the multivariate analysis were included the variables that in univariate analysis showed a significant association with the occurrence of RAM at a level of significance <0.10. The statistical program Stata 12 was used. Results: The proportion of patients with one or more RAMs was 4.43% (95% CI 4.00 to 4.90%). The most common adverse reactions were hypoglycaemia (26.4%) and hypotension (15.2%). Univariate analysis identified 27 variables that were associated with the occurrence of RAM. Twelve variables were statistically related to the occurrence of RAM, such as female (adjusted OR, 1.61, 95% CI, 1.18-2.21), previous history of RAM (ORA 1.97 CI 95 (ORA 1.63 95% CI 1.13- 2.34) and with target organ damage (ORA 6.49, 95% CI, 3.56-11.83) and intravenous drug prescription (ORA 1.60, 95% CI, 1.14-2.24). Conclusion: The prevalence of RAM was observed in 3.97% of the patients, with emphasis on dose-dependent hypoglycemia and hypotension reactions. Twelve independent risk factors for RAM development were identified, with diabetes with target organ damage being the most impacting factor. Based on these factors, the risk assessment tool for the development of RAM was developed and validated.

2
  • MENILLA MARIA ALVES DE MELO
  • AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE QUELANTE, ANTIOXIDANTE, ANTICOAGULANTE, IMUNOMODULADORA E CICATRIZANTE DO PEPTÍDEO ANIÔNICO (TanP) DA PEÇONHA DO ESCORPIÃO Tityus stigmurus.

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • DANIEL DE LIMA PONTES
  • ENEAS DE CARVALHO
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • NORBERTO DE KASSIO VIEIRA MONTEIRO
  • Data: 30/06/2021

  • Mostrar Resumo
  • Peptídeos aniônicos, ou ácidos, de escorpiões correspondem a classe de peptídeos sem ligações dissulfeto, ricos em resíduos de ácido aspártico e/ou glutâmico em sua sequência primária. TanP é um peptídeo aniônico, linear, com 50 resíduos de aminoácidos e carga líquida -20, identificado na peçonha do escorpião Tityus stigmurus através de uma análise transcriptômica e com posterior confirmação por espectrometria de massas. Um estudo anterior indicou que TanP possui potencial quelante para o íon Cu2+, além de potencial imunomodulador. A aplicação terapêutica de moléculas quelantes está relacionada a casos de intoxicações agudas ou crônicas por metais, doenças neurodegenerativas, doenças hematológicas, cicatrização de feridas cutâneas, doenças cardiovasculares e câncer. Neste estudo foi realizada a avaliação da atividade quelante de TanP com relação a novos metais de importância biológica (Fe2+, Ca2+, Zn2+), através da espectroscopia UV-visível, métodos computacionais e espectroscopia de fluorescência, bem como ampliado a investigação do potencial biológico do peptídeo, como molécula antioxidante, hemostática, imunomoduladora e cicatrizante de feridas, através de ensaios in vitro. TanP (25 μM) foi capaz de formar complexos estáveis com Fe2+ numa proporção de 1:5 (TanP:Fe2+). As geometrias obtidas para os complexos Zn2+ e Fe2+ apresentaram formas tetraédricas e octaédricas, respectivamente. Resultados teóricos sugerem que TanP pode funcionar como um sensor para identificar e quantificar íons Fe2+. A intensidade de fluorescência de TanP (1,12 μM) diminuiu significativamente após adição de Fe2+, obtendo-se que a maior relação 1:7,4 (TanP:Fe2+) levou à menor intensidade de fluorescência. TanP apresentou o máximo de 3% de atividade hemolítica quando avaliado na maior concentração (50 μM). TanP exibiu capacidade de sequestro dos radicais DPPH acima de 70% em todas as concentrações testadas (1 a 25 μM), 89,7% de atividade quelante de ferro em 25 μM e 96% de atividade de sequestro do radical hidroxila em 73,6 μM. TanP apresentou também atividade anticoagulante significativa nas concentrações de 12,5 μM e 25 μM para os ensaios de TP e TTPa. Nenhum efeito fibrinogenolítico foi observado. TanP (12,5 e 25 μM) induziu liberação de TNF-α por macrófagos murinos, na ausência de LPS, sendo esse aumento dose-dependente. A migração de células 3T3 foi estimulada por TanP (2 μM, 12,5 μM e 50 μM) em ensaio de cicatrização in vitro. Dessa forma, sugere-se que a avaliação do potencial quelante associado a ação antioxidante, anticoagulante, imunomodulador e cicatrizante de TanP poderá fornecer subsídios para maiores estudos que viabilizem o desenvolvimento de uma molécula protótipo para aplicação terapêutica e biotecnológica.


  • Mostrar Abstract
  • Anionic peptides, or acids, of scorpions correspond to the class of peptides without disulfide bonds, rich in aspartic and / or glutamic acid residues in their primary sequence. TanP is a linear anionic peptide, with 50 amino acid residues and net charge -20, which is present in the venom gland of the scorpion Tityus stigmurus, identified by a transcriptomic approach and after confirmed by mass spectroscopy. A previous study indicated that TanP has a chelating potential for Cu2+ ion, in addition to an immunomodular potential. The therapeutic application of chelating molecules is related to cases of acute or chronic intoxication by metals, neurodegenerative diseases, hematological diseases, healing of skin wounds, cardiovascular diseases and cancer. This work evaluated TanP chelating activity in relation to new metals of biological importance (Fe2+, Ca2+ and Zn2+), by UV-visible spectroscopy, computational methods, and fluorescence, as well as expanding the investigation of the biological potential of the peptide, as an antioxidant, hemostatic, immunomodulatory and wound healing molecule, by in vitro assay. TanP (25 μM) was able to form stable complexes with Fe2+ in a ratio of 1: 5 (TanP: Fe2+). The obtained geometries for Zn2+ and Fe2+ complexes present tetrahedral and octahedral shapes, respectively. Theoretical results suggest that TanP can work as a sensor to identify and quantify Fe2+ ions. The fluorescence intensity of TanP (1.12 μM) decreased significantly after the addition of Fe2+, obtaining that the highest ratio 1: 7.4 (TanP: Fe2+) led to the lowest fluorescence intensity. TanP showed a maximum of 3% of hemolytic activity when evaluated at the highest concentration (50 μM). TanP exhibited DPPH radical scavenging above 70% at all concentrations tested (1 to 25 μM), 89.7% iron chelating activity at 25 μM, 96% hydroxyl radical scavenging activity at 73.6 μM. TanP showed significant anticoagulant activity at concentrations of 12.5 μM and 25 μM for the TP and TTPa assays. No fibrinogenolytic effect was observed. TanP (12.5 and 25 μM) induced release of TNF-α by murine macrophages, in the absence of LPS, this increase being dose-dependent. The migration of 3T3 cells was stimulated by TanP (2 μM, 12.5 μM and 50 μM) in an in vitro healing assay. Thus, it is suggesting that the assessment of the chelating potential associated with the antioxidant, anticoagulant, immunomodulatory and healing effects of TanP supports further studies that enable the development of a prototype molecule for therapeutic and biotechnological applications.

2020
Dissertações
1
  • LETÍCIA GONDIM LAMBERT MOREIRA
  • ALCALOIDES TROPÂNICOS DE Erythroxylum pungens O. E. Shulz (ERYTHROXYLACEAE): DO CONTEXTO EDAFOCLIMÁTICO DA CAATINGA À INVESTIGAÇÃO COMPORTAMENTAL EM Zebrafish (Danio rerio Hamilton)

  • Orientador : RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JEAN PAULO DE ANDRADE
  • FABIANO PERES MENEZES
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • Data: 28/02/2020

  • Mostrar Resumo
  • A biodiversidade brasileira oferece enorme riqueza de flora, oportunidade singular para a atividade de bioprospecção. Dentre as moléculas bioativas, encontradas na maioria dos organismos vegetais, os alcaloides representam uma ampla variedade de estruturas químicas. Dentre os biomas brasileiros, a Caatinga, vegetação predominante da região Nordeste, oferece patrimônio biológico que não pode ser encontrado em nenhum outro local do planeta. É neste ambiente xérico que se encontra a Erythroxylum pungens O.E Shulz, espécie arbórea-arbustiva com grande potencialidade em alcaloides bioativos pouco explorados. O objetivo deste trabalho é a bioprospecção de alcaloides tropânicos de Erythroxylum pungens O. E. Shulz, coletadas em ambiente natural, a avaliação do efeito do estresse hídrico em plantas jovens e avaliação do potencial bioativo in vivo em organismo modelo Danio rerio (Zebrafish), bem como, análise in silico do alcaloide majoritário. No Capítulo 1, realizou-se o experimento de estresse hídrico por meio da suspensão de rega em espécimes de E. pungens até 20 dias. Concluímos que E. Pungens consegue armazenar altos índices de prolina, aminoácido osmoregulador e protetor, como resposta à tolerância a seca. Também, a partir de análises por CG-MS, foi possível observar que a produção diferenciada de alcaloides tropânicos está relacionada mais com a fase de desenvolvimento do que com a condição de estresse hídrico em que a planta foi submetida. No capítulo 2 foi possível identificar, por meio de análises espectroscópicas realizadas por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-EM), que foram identificados 13 alcaloides tropânicos neste estudo, sendo três destes inéditos para a espécie e classe de alcaloide. O alcaloide majoritário do caule foi isolado e realizada a atividade biológica com ele. Realizou-se o ensaio de toxicidade, para as larvas, a dose letal foi de 4,73 mg/L enquanto não houve toxicidade em experimento com até 30 mg/L com peixes adultos. No ensaio comportamental de campo aberto com zebrafish adultos para avaliar a atividade bioativa do alcaloide tropânico majoritário dos caules, o 3α-(2-metilbutiriloxi)tropan-6,7-diol mostrou ação psicoestimulatória a 30 mg/L. No teste in silico, os alvos envolvidos nas vias antidepressivas foram identificados atracando com o alcaloide. 3α-(2-metilbutiriloxi)tropan-6,7-diol parece estar envolvido em alterações comportamentais do zebrafish e merece investigação futura como uma possível nova molécula no tratamento de sintomas depressivos, ou possível efeito alucinógeno.


  • Mostrar Abstract
  • Brazilian biodiversity offers an enormous wealth of flora, a unique opportunity for bioprospecting activity. Among the bioactive molecules found in most plant organisms, alkaloids represent a wide variety of chemical structures. Among the Brazilian biomes, the Caatinga, predominant vegetation in the Northeast region, offers biological heritage that cannot be found anywhere else on the planet. It is in this xeric environment that Erythroxylum pungens O.E Shulz is found, a tree-shrub species with great potential in little explored bioactive alkaloids. The objective of this work is the bioprospecting of tropane alkaloids of Erythroxylum pungens OE Shulz, collected in a natural environment, the evaluation of the effect of water stress on metabolism under young plants and the evaluation of the bioactive potential in vivo in a Danio rerio (Zebrafish) model organism, as well as, in silico analysis of the major alkaloid. In Chapter 1, the water stress experiment was carried out by suspending irrigation in specimens of E. Pungens in up to 20 days. We conclude that E. Pungens is able to store high levels of proline, osmoregulatory and protective amino acid, in response to drought tolerance. Also, from analysis by CG-MS, it was possible to observe that the production of tropane alkaloids is more related to the development phase than to the water stress condition in which the plant was subjected. In chapter 2 was identified by means of GC-MS spectroscopy analysis were 13 tropane alkaloids identified in this study, with three of these species and to unpublished alkaloid class. Regarding toxicity, several teratogenic effects were observed at 5mg/L and the lethal dose for zebrafish embryo was established at 4.73 mg/L. No mortality was observed in adults, but a behavioral screen showed psychostimulatory action at 30 mg/L. In silico, targets involved in the antidepressant pathways were identified by docking with the alkaloid. Overall, E. pungens is a source of unique tropane alkaloids, as the 3α-(2-methylbutyryloxy)tropan-6,7-diol, which seems to be involved in zebrafish behavioral changes and deserve future investigation as a possible new molecule in the treatment of depressive-like symptom or hallucinogens effects.

2
  • WENDELL MEDEIROS DE AZEVEDO
  • CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA E BIOATIVA DO ÓLEO E DA MANTEIGA DE CACAY (Caryodendron orinocense Karst.) E AVALIAÇÃO DO EFEITO INDUTOR NA PRODUÇÃO DE LIPASE

  • Orientador : FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • EVERALDO SILVINO DOS SANTOS
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • NATHALIA KELLY DE ARAUJO
  • Data: 28/02/2020

  • Mostrar Resumo
  • O cacay (Caryodendron orinocense Karst.) e uma arvore tipica da Amazonia que apresenta uma composicao nutricional rica em acidos graxos poli-insaturados e compostos antioxidantes. No entanto, suas propriedades bioativas e seu potencial indutor lipidico sao pouco estudados. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades fisico-quimicas e bioativas do oleo e da manteiga de cacay e oleo de coco, como tambem o potencial indutor para a producao de lipase por Aspergillus terreus NRRL . 255 utilizando fermentacao em estado solido (FES). Inicialmente, realizou-se a determinacao do perfil dos acidos graxos e a caracterizacao fisico-quimica das amostras, alem da determinacao da capacidade antioxidante e atividade antibacteriana in vitro. Alem disso, residuos agroindustriais foram caracterizados visando o emprego como suportes solidos nao inertes para a FES. O potencial indutor lipidico para a producao de lipase fungica tambem foi avaliado e o processo de producao de lipase foi otimizado por delineamento experimental. Por fim, as lipases produzidas foram caracterizadas frente a influencia do pH, temperatura, ions metalicos e surfactantes. No que diz respeito ao perfil lipidico e as caracteristicas fisico-quimicas, o oleo de cacay apresentou uma elevada concentracao de acidos graxos poli-insaturados (58,32%) e alto numero de insaturacoes (116,35 cg I2.g-1). Em contrapartida, a manteiga de cacay e o oleo de coco apresentaram uma maior estabilidade contra a peroxidacao lipidica (7,77 e 5,99 meq.kg-1) e elevado percentual de acidos graxos saturados (69,09% e 78,4%), respectivamente. A fracao hidrofilica do oleo de cacay obteve destaque na quantificacao de compostos fenolicos totais (326,27 mg EAG.kg-1) e na capacidade antioxidante in vitro (156,57 ƒÊmol TE.g-1), segundo o ensaio de sequestro do radical DPPH. Alem disso, o oleo de cacay demonstrou atividade antibacteriana contra as bacterias gram-positivas Bacillus cereus (44,99%), Enterococcus faecalis (27,76%) e Staphylococcus aureus (11,81%). No que se refere a producao de lipase, o presente estudo encontrou no farelo de trigo boas caracteristicas como suporte solido nao inerte, como o alto indice de absorcao de agua (3,65 g H2O.g-1) e, como melhor indutor lipidico, a manteiga de cacay, com atividade lipolitica de 308,14 U.g-1. Apos otimizacao da producao de lipase por delineamento fatorial fracionario 25-1, os efeitos dos fatores temperatura e tempo foram considerados estatisticamente significativos e avaliados por delineamento composto central rotacional 22, sendo possivel encontrar o valor critico de 27,36‹C para a temperatura e atividade maxima de 2.867,18 U.g-1. Quanto a caracterizacao da lipase, uma atividade relativa maxima foi observada no pH 7,0 e na temperatura de 35oC e um efeito inibitorio foi encontrado para os ions Ca2+, Mn2+, Zn2+, Fe2+ e Cu2+. Um incremento de sua atividade foi percebido com a reducao da concentracao de dodecil sulfato de sodio (SDS) e aumento de Triton X-100. Por fim, o oleo de cacay apresentou uma rica composicao de acidos graxos poli-insaturados e propriedades bioativas que podem justificar sua exploracao industrial. Por outro lado, a manteiga de cacay mostrou ser um excelente indutor da atividade lipolitica, indicando potencial biotecnologico para a producao de lipases industriais.


  • Mostrar Abstract
  • The cacay (Caryodendron orinocense Karst.) is a typical Amazonian tree that presents a nutritional composition rich in polyunsaturated fatty acids and antioxidant compounds. However, its bioactive properties and lipid inducing potential are poorly studied. Thus, the present work aims to evaluate the fatty acids profile, physicochemical, and bioactive properties of cacay oil and butter and coconut oil as the potential inducer to lipase production from Aspergillus terreus NRRL - 255 by solid state fermentation (SSF). Initially, the fatty acids profile by gas chromatography and physicochemical characterization were performed, as well as the determination of antioxidant capacity and antibacterial activity in vitro. In addition, agro-industrial wastes were characterized for use as non-inert solid supports by SSF. The potential of the lipid inducer for fungal lipase production was also evaluated, and the lipase production process was optimized by experimental design. Finally, the lipases produced were characterized by the influence of pH, temperature, metal ions, and surfactants. Regarding the fatty acids profile and physicochemical characterization, cacay oil presents a high content of polyunsaturated fatty acids (58.32%) and a high unsaturation (116.35 cg I2.g-1) . In contrast, cacay butter and coconut oil have greater stability against lipid peroxidation (7.77 and 5.99 meq.kg-1) and a high saturated fatty acid (69.09% and 78.4%), respectively. The hydrophilic fraction of cacay oil was highlighted in the quantification of total phenolic compounds (326.27 mg GAE.kg-1) and antioxidant capacity in vitro (156.57 ƒÊM TE.g-1), by DPPH radical scavenging assay. The cacay oil showed antibacterial activity against gram-positive bacteria Bacillus cereus (44.99%), Enterococcus faecalis (27.76%), and Staphylococcus aureus (11.81%). Regarding lipase production, the present study found favorable results for wheat bran as a non-inert solid support, such as the high water absorption index (3.65 g H2O.g-1) and, as the best lipid inducer, cacay butter, with a lipolytic activity of 308.14 U.g-1. After optimization of lipase production by a fractional factorial design 25-1, the effects of temperature and time factors were considered statistically significant and evaluated by a central rotational composite design 22, being possible to find the critical value of 27.36 ‹C for temperature and maximum activity of 2,867.18 U.g-1. Regarding the characterization of the lipase, a maximum relative activity was observed at pH 7.0 and temperature of 35 oC and an inhibitory effect was found for Ca2+, Mn2+, Zn2+, Fe2+, and Cu2+ ions. An increase of lipase activity was found with the reduction of sodium dodecyl sulfate (SDS) concentration and increase of Triton X-100. Finally, cacay oil presented bioactive properties which might justify its industrial exploitation. On the other hand, the use of cacay butter as a lipid inducer showed a high lipolytic activity, indicating a potential biotechnology to produce industrial lipases.

3
  • DAISY SOTERO CHACON
  •  AVALIAÇÃO DO TRANSCRIPTOMA, PROTEOMA E PERFIL METABÓLICO NA INVESTIGAÇÃO DA BIOSSÍNTESE DE ALCALOIDES DE Erythrina velutina Willd.

  • Orientador : RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • MAYSA FURLAN
  • RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • Data: 20/03/2020

  • Mostrar Resumo
  • As plantas pertencentes ao gênero Erythrina são fontes de alcaloides tetracíclicos do tipo benzilisoquinolínicos, podem ser encontradas no nordeste brasileiro, no bioma da Caatinga e utilizadas na medicina popular principalmente como depressor do sistema nervoso central (sedativo, calmante). Um dos fatores limitantes que muitos produtos naturais apresentam como medicamentos é seu baixo rendimento e difícil obtenção em quantidades suficientes para abastecer a indústria farmacêutica. Dessa forma, de acordo com estudos de fronteira na área é importante compreender aspectos da biossíntese de alcaloides através de ferramentas moleculares. Este trabalho tem como objetivo contribuir com o estudo na área de biossíntese no que se refere aos alcaloides presentes nas folhas e sementes da espécie Erythrina velutina Willd através das tecnologias ômicas (transcriptoma, proteoma e perfil metabólico) de forma a compreender a dinâmica de produção dessas moléculas com potencial bioativo. Portanto, para a investigação do transcriptoma realizamos o sequenciamento de novo pela primeira vez em uma espécie do gênero e em uma planta nativa do bioma Caatinga. A análise do proteoma e do perfil metabólico direcionado foram realizados com uma estratégia de Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massas [LC-MS/MS] aliado à ferramenta do Molecular Networking para os metabólitos secundários. Como resultado, foram identificados 17 transcritos e 4 proteínas candidatos a compor a via biossintética dos alcaloides isoquinolínicos em sementes e folhas desta espécie. Além disso, 29 alcaloides foram anotados pertencendo às três classes de alcaloides da reportadas para o gênero: dienoide, alcenoide e lactona, sendo 12 alcaloides comum a folhas e sementes, 8 encontrados exclusivamente em semente e 9 exclusivos em folhas. Esses dados contribuem com o conhecimento cientifico no delineamento de estratégias de intervenção biotecnológica para estudos futuros, a fim de melhorar a produção dessas moléculas bioativas na planta, além da valorização de uma planta da Caatinga do RN como fonte de alcaloides com potencial interesse farmacêutico.


  • Mostrar Abstract
  • Plants belonging to the genus Erythrina are sources of tetracyclic benzylisoquinoline alkaloids (BIAs). These plants, commonly found in the Northeast of Brazil, in the Caatinga biome, are used in folk medicine mainly as central nervous system depressant (sedative, soothing). One of the limiting factors that impair many natural products to reach the market as a drugs is known to be the low yield and difficult to obtain in sufficient quantities to supply the pharmaceutical industry. Thus, in accordance with frontier studies in the area, it is important to understand aspects of alkaloid biosynthesis using data from transcriptome, proteome and metabolite profile analysis. In this study the focus is on Erythrina velutina, seeds and leaves, therefore, the de novo sequencing was performed for the first time in a species of the genus and in a native plant of the Caatinga biome. The proteome and targeted metabolic profile analyze were performed with an LC/MS/MS strategy and the Molecular Networking tool in a complementary way regarding secondary metabolites analysis. As a result, several genes candidates were suggested in compose the biosynthetic pathway of alkaloids in E. velutina (seeds and leaves). In addition, 29 alkaloids were annotated in both plant and leaf organs. It is hoped that these unpublished data may indicate strategic targets for biotechnological intervention for future studies in order to improve the production of these bioactive molecules in the plant, such as crop improvement or microbial pathway reconstruction. In addition, other expected impact is the valorization of a plant from Caatinga do RN as source of alkaloids with bioactive potential.

4
  • ESTELA MARIANA GUIMARÃES LOURENÇO
  • PLANEJAMENTO ASSISTIDO POR COMPUTADOR E SÍNTESE DE POTENCIAIS INIBIDORES SELETIVOS DE PDE4 BASEADOS EM PRODUTOS NATURAIS

  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DÊNIS PIRES DE LIMA
  • EDSON DOS ANJOS DOS SANTOS
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • RAQUEL BRANDT GIORDANI
  • Data: 26/03/2020

  • Mostrar Resumo
  • O desenvolvimento da síntese orgânica representa um grande avanço no descobrimento de novos fármacos, sendo considerada uma etapa importante na química medicinal. Apesar disso, o processo de obtenção e otimização de fármacos é considerado desafiador. O alto custo e tempo laboratorial deste processo são oriundos, especialmente, da priorização da síntese de novos compostos sem uma atividade farmacológica previamente estabelecida. O uso do planejamento racional de fármacos assistido por computador a partir de protótipos é considerado uma ferramenta importante, capaz de guiar a síntese de novas moléculas. Aliado a isso, a prospecção de produtos naturais possui um amplo histórico no descobrimento de fármacos e ainda se apresenta como uma fonte de protótipos inéditos. Recentemente, foi isolado um flavonoide glicosilado com notória seletividade para a isoforma PDE4B em comparação à PDE4A. Esse alvo pode ser destacado como uma alternativa promissora na busca pelo tratamento de doenças como deficiência obstrutiva pulmonar crônica e asma. Contudo, a estrutura desse flavonoide apresenta desafios estruturais que o impedem de ser considerado um potencial fármaco. O presente estudo tem como objetivo o desenho e síntese de novos potenciais inibidores seletivos da enzima PDE4 utilizando como protótipo o flavonoide descoberto. Para tanto, foi construída uma biblioteca de inibidores seletivos de fosfodiesterase 4B e utilizada para a elaboração de um modelo de QSAR 4D bem como de uma relação estrutura-atividade. Estudos de dinâmica molecular e cálculos de energia livre de ligação foram também realizados com o objetivo de construir hipóteses relacionadas ao modo de interação do protótipo no sítio ativo de ambas as isoformas. Os resultados demonstraram a importância de grupamentos polares capazes de interagir com os resíduos de aminoácido dos sítios M e S. Interações intermoleculares hidrofóbicas com a fenilalanina presente no sítio Q foram apontadas como essenciais, justificando a necessidade da presença de um anel aromático ou heterocíclo na estrutura dos inibidores. Os valores calculados de energia livre de ligação e o estudo de flexibilidade proteica permitiram a determinação de dois possíveis modos de interação do flavonoide em PDE4A e PDE4B e corroboraram com a seletividade observada in vitro. Com essas informações, foram propostos análogos capazes de serem obtidos via uma rota sintética acessível e versátil. Os compostos propostos já foram obtidos a partir de diferentes metodologias e que obedecem aos princípios de química verde. Esse estudo pode contribuir para a obtenção dos compostos alvos planejados e possíveis protótipos de fármacos para o tratamento da deficiência obstrutiva pulmonar crônica e asma.


  • Mostrar Abstract
  • The development of organic synthesis represents an important advance in the discovery of new drugs, being considered an important step in medicinal chemistry. However, the preparation and optimization of drugs is considered a challenge task. The expenditure and time consuming involved in this process are result, particularly, of the prioritization of the synthesis of new compounds without a previously established pharmacological activity. The use of computer aided-drug design using prototypes is considered an important tool, capable to generate guide the synthesis of new molecules. In addition, the prospection of natural products has a long history in drug discovery and is still a source of unprecedented prototypes. Recently, a glycosylated flavonoid with remarkable selectivity for PDE4B isoform in comparison with PDE4A was isolated. This target can be highlighted as a promising alternative for the treatment of diseases as asthma and chronical obstructive pulmonary disease. Nonetheless, the structure of the flavonoid has some structural challenges that prevent it from being considered a potential drug. The present study aims to design and synthesize new potential selective inhibitors of PDE4 enzyme using the newly isolated flavonoid as a prototype. Therefore, a library of selective phosphodiesterase 4B inhibitors was constructed and utilized for the elaboration of a 4D QSAR model and a structure-activity relationship. Molecular dynamics studies and binding free energy calculations were also made to construct hypothesis related to the binding mode of the prototype in the active site of both isoforms. The results demonstrated the importance of polar groups capable to interact with the amino acid residues of M and S pockets. Hydrophobic intermolecular interactions with the phenylalanine present in the Q pocket have been identified as essential, justifying the need of the presence of an aromatic ring or heterocycle in the molecular structure of the inhibitors. The calculated values of binding free energy and the study of protein flexibility allowed the determination of two potential binding modes of the flavonoid in the PDE4A and PDE4B and corroborated with the selectivity observed in vitro. With these informations, analogues that can be obtained by an accessible and versatile synthetic route have been proposed. The compounds have already been obtained from different methodologies that follow the principles of green chemistry. This study may contribute to the obtention of the target compounds and potential new drug prototypes for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease and asthma.

5
  • ALINE MARIA VASCONCELOS QUEIROZ
  • CARACTERIZAÇÃO DA PROPRIEDADE IMUNOESTIMULATÓRIA DE Virus-like particles DE Triatoma virus E ANTÍGENOS RECOMBINANTES QUIMÉRICOS DE Trypanosoma cruzi

  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • PAOLA FIORANI CELEDON
  • DIEGO MARCELO GUÉRIN AGUILAR
  • MANOELA TORRES DO RÊGO
  • Data: 31/03/2020

  • Mostrar Resumo
  • A infecção causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi acomete os seres humanos ocasionando a doença de Chagas. Atualmente, as principais medidas disponíveis para essa doença são tratamento e controle vetorial. O desenvolvimento de vacinas acontece, principalmente, pelo o uso de antígenos do agente etiológico. As partículas semelhantes a vírus (do inglês virus-like particles ou VLPs) são estruturas análogas a cápsides virais compostas essencialmente por proteínas estruturais, não possuem material genético viral e são amplamente utilizadas em protocolos de vacinação por causa de suas propriedades imunoestimulatórias. Nesse contexto, o objetivo do atual trabalho foi caracterizar a capacidade imunoestimulatória de partículas semelhantes a virus de Triatoma virus (VLPs-TrV), na presença e ausência do adjuvante hidróxido de alumínio, utilizando o modelo murino de imunização, paralelamente observar o comportamento imunogênico das VLPs com quatro antígenos recombinantes quiméricos de T. cruzi denominados mix-IBMP. Para isso, camundongos BALB/c (Mus musculus) com 8 semanas de idade foram utilizados e amostras de soros foram colhidas em diferentes momentos. O perfil de anticorpos IgG total, IgG1, IgG2a, IgG2b e IgG3 foram determinados por ELISA. Os dados obtidos demonstram a capacidade de VLPs-TrV sem a presença de alumínio induzir preferencialmente os anticorpos do tipo IgG2b e IgG3, além disso, os animais imunizados com VLPs-TrV tiveram o mesmo perfil de IgG total que os imunizados com VLPs-TrV associado ao hidróxido de alumínio. Além disso, mix-IBMP tem melhor perfil de IgG total e subclasses IgG1 e IgG3 quando associado a VLPs-TrV, mesmo com a possível competição antigênica entre VLP e antígenos IBMP. Em conclusão, esses resultados contribuem para a potencialização de VLPs-TrV como adjuvante em formulações vacinais em modelo murino, apesar dos mecanismos na indução da resposta polarizada para Th1 precisarem ser mais claramente entendidos.


  • Mostrar Abstract
  • The infection caused by the protozoan Trypanosoma cruzi affects humans and is called Chagas disease. Currently, the main measures available to reduce the incidence of this disease are treatment and vector control. The development of vaccines is mainly due to the use of antigens of the etiologic agent. Virus-like particles (VLPs) are structures in the form of capsids and composed essentially of viral structural proteins. VLPs do not present viral genetic material and have been extensively used in vaccination protocols due to their immunostimulatory properties. Recently, we have developed a system for the production of recombinant VLP from Triatoma virus (TrV). Thus, the objective of this study was to characterize the immunostimulatory capacity of virus-like particles from Triatoma virus (VLPs-TrV), analyzed in the presence or absence of the aluminium hydroxide vaccine adjuvant, using the model of immunization in mice; in parallel, the immunogenic behavior of VLPs was observed with four T. cruzi chimeric recombinant antigens called mix-IBMP. BALB/c mice (Mus musculus) at 8 weeks of age were used in this study. Subsequently, serum samples from animals immunized with VLPs-TrV were obtained at different times after immunizations. Antibodies titles IgG, IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 were determined by ELISA. The data obtained in this study demonstrate the ability of VLPs-TrV only to preferentially induce anti-VLPs IgG2b and IgG3 antibodies in murine model of immunization. Furthermore, VLPs-TrV had the same antibody profile (total IgG) as those immunized with VLPs-TrV mixed with aluminium hydroxide. In addition, mix-IBMP has a better profile of total IgG and subclasses IgG1 and IgG3 when associated with VLPs-TrV, even with the possible antigenic competition between VLP and IBMP antigens. In conclusion, these results contribute to the potentiation of VLPs-TrV as an adjuvant in vaccine formulations in a murine model, although the mechanisms for inducing a Th1 polarized humoral immune response need to be more clearly understood.

6
  • VALÉRIA COSTA DA SILVA
  • AVALIAÇÃO DE TOXICIDADE E DA ATIVIDADE ANTI-INFLAMATÓRIA INTESTINAL DO EXTRATO AQUOSO DAS FOLHAS DE Ipomoea asarifolia (Desc.) Roem. & Schult.



  • Orientador : GERLANE COELHO BERNARDO GUERRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GERLANE COELHO BERNARDO GUERRA
  • AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
  • EDILSON DANTAS DA SILVA JUNIOR
  • RITA DE CÁSSIA RAMOS DO EGYPTO QUEIROGA
  • Data: 06/04/2020

  • Mostrar Resumo
  • Ipomoea asarifolia (Desc.) Roem. & Schult., popularmente conhecida como “salsa ou salsa brava”, pertence à família Convolvulaceae. A análise fitoquímica do extrato aquoso das folhas de I. asarifolia identificou a presença de compostos bioativos como o ácido clorogênico, ácido cafeíco e rutina, os quais apresentam atividade anti-inflamatória. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito preventivo do extrato aquoso das folhas de I. asarifolia (IA) em modelo de colite aguda induzida pelo DNBS, bem como, avaliação de efeitos tóxicos do extrato, por meio dos ensaios de toxicidade aguda e subcrônica para validação de segurança. Nos ensaios de toxicidade aguda e subcrônica foram realizadas administrações em dose única (2000 mg/kg) e doses seriadas por 28 dias (50, 100 e 200 mg/kg) de IA, respectivamente; no ensaio de colite, ratas pré-tratadas com extrato IA (25, 50 e 100 mg/kg) ou sulfassalazina 250 mg/kg (SSZ) receberam instilação intracolônica de DNBS em etanol a 50% (v/v) para avaliação do efeito preventivo de IA na inflamação intestinal. Os ensaios de toxicidade hematológica, hepática, renal e de alterações do SNC não revelaram efeitos tóxicos in vivo. Enquanto que no modelo de colite, IA apresentou efeito protetor frente à inflamação intestinal induzida por DNBS, com melhora no índice de atividade da doença, no dano macroscópico intestinal, e na relação peso/comprimento colônico. O pré-tratamento com o extrato promoveu downregulation de importantes moléculas envolvidas em vias de sinalização na inflamação intestinal como, JNK1, NF-κB-p65 e STAT3, enquanto que SOCS1 teve upregulation. Consequentemente, IA promoveu downregulation (IL-17 e iNOS) e redução no níveis (IL-1β e TNF-α), marcadores pró-inflamatórios. Por outro lado, aumentou significativamente IL-10, uma importante citocina anti-inflamatória. O efeito anti-inflamatório de IA também foi confirmado pela redução da atividade da mieloperoxidase colônica, marcador da infiltração de neutrófilos. Em asssociação a estes resultados, houve uma melhora significativa do estresse oxidativo com redução do MDA e aumento da glutationa. Adicionalmente, o efeito de IA foi confirmado na avaliação histológica, demonstrando preservação da citoarquitetura colônica com células caliciformes preservadas, que corrobora com os dados referente à upregulation para MUC2, envolvida na integridade da barreira intestinal. Diante dos resultados apresentados, concluímos que o extrato de I. asarifolia apresenta baixa toxicidade e atividade protetora contra a inflamação intestinal e revelando potencial para possível aplicação adjuvante no controle da DII humana.


  • Mostrar Abstract
  • Ipomoea asarifolia (Desc.) Roem. & Schult., Popularly known as "salsa or salsa brave", belongs to the family Convolvulaceae. Phytochemical analysis of the aqueous extract of I. asarifolia leaves identified the presence of bioactive compounds such as chlorogenic acid, caffeic acid and rutin, which have anti-inflammatory activity. Thus, the objective of this work was to evaluate the preventive effect of the aqueous extract of the leaves of I. asarifolia (IA) in a model of acute colitis induced by DNBS, as well as, evaluation of toxic effects of the extract, through the tests of acute toxicity and subchronic for security validation. In acute and subchronic toxicity tests, single dose (2000 mg/kg) and serial doses were performed for 28 days (50, 100 and 200 mg/kg) of IA, respectively; in the colitis assay, rats pretreated with IA extract (25, 50 and 100 mg/kg) or sulfasalazine 250 mg / kg (SSZ) received intracolonic instillation of DNBS in 50% (v/v) ethanol to evaluate the effect preventive measure of IA in intestinal inflammation. The hematological, hepatic, renal and CNS changes tests did not reveal toxic effects in vivo. Whereas in the colitis model, IA showed a protective effect against intestinal inflammation induced by DNBS, with improvement in the disease activity index, in macroscopic intestinal damage, and in the colonic weight/length ratio. The pretreatment with the extract promoted downregulation of important molecules involved in signaling pathways in intestinal inflammation such as, JNK1, NF-κB-p65 and STAT3, while SOCS1 had upregulation. Consequently, IA promoted downregulation (IL-17 and iNOS) and reduced levels (IL-1β and TNF-α), pro-inflammatory markers. On the other hand, it significantly increased IL-10, an important anti-inflammatory cytokine. The anti-inflammatory effect of IA was also confirmed by the reduction in the activity of colonic myeloperoxidase, a marker of neutrophil infiltration. In association with these results, there was a significant improvement in oxidative stress with reduced MDA and increased glutathione. Additionally, the IA effect was confirmed in the histological evaluation, demonstrating preservation of the colonic cytoarchitecture with preserved goblet cells, which corroborates with the data referring to upregulation for MUC2, involved in the integrity of the intestinal barrier. In view of the results presented, we conclude that the extract of I. asarifolia has low toxicity and protective activity against intestinal inflammation and reveals the potential for possible adjuvant application in the control of human IBD.

7
  • ADDISON RIBEIRO DE ALMEIDA
  • DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE UMA FORMULAÇÃO LARVICIDA CONTENDO DERIVADO DO ÁCIDO CINÂMICO PARA O COMBATE AO Aedes aegypti

  • Orientador : CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • LORENA CARNEIRO ALBERNAZ
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • Data: 13/04/2020

  • Mostrar Resumo
  • A principal estratégia de controle das doenças transmitidas pelo mosquito Aedes aegypti é a eliminação do vetor, principalmente em sua fase larval. Apesar da eficácia dos larvicidas e inseticidas comerciais, esses produtos apresentam toxicidade ambiental sendo o uso de produtos naturais uma alternativa para essa problemática. O objetivo desse estudo foi desenvolver e caracterizar formulações contendo cinamato de pentila e avaliar sua atividade larvicida para o Aedes aegypti. O cinamato de pentila foi obtido por semissíntese através da esterificação do ácido cinâmico. Este composto foi caracterizado e sua pureza determinada por RMN 1H e CLUE-EM/EM. Foram realizados ensaios de atividade do cinamato de pentila em larvas L3 e em mosquitos adultos de A. aegypti, obtendo-se uma atividade larvicida com DL50 de 19,9 μg.mL-1, e contra mosquitos adultos na dose de 200 μg por frasco teste, 80,8 ± 3,8 % de mortalidade em 2 h. Foram produzidas nanoemulsões com as lecitinas PHOSAL® 50+ (PHO), LIPOID® S 20 (L20) e LIPOID® S 75-3 (L75) por agitação mecânica e ultra turrax. As nanoemulsões foram submetidas à secagem por atomização para a obtenção de micropartículas sólidas caracterizadas por FTIR, MEV, DSC e TG. As nanoemulsões obtidas por agitação com turrax tiveram menores tamanhos de gotícula, sendo a de PHO: 81,0 ± 1,8 nm; L20: 120,4 ± 4,9 nm e L75 com 150,9 nm. As nanoemulsões de PHO se mostraram as mais estáveis durante 30 dias de observação, também foram as que apresentaram maior teor de cinamato de pentila com 66,0 ± 0,5%. As imagens obtidas por MEV evidenciaram que as micropartículas formadas pelas diferentes lecitinas tiveram aspecto semelhante entre elas. Nos espectros de FTIR foram observados sinais de estiramento característicos do cinamato de pentila e dos excipientes e pelas técnicas de DSC e TG foi possível ver um aumento da estabilidade do composto incorporado nas micropartículas sólidas. O estudo preliminar de toxicidade em zebrafish demonstrou evidências de toxicidade do cinamato de pentila em baixas concentrações, entretanto futuros estudos poderão ser realizados para a influência do solvente neste tipo de modelo. As nanoemulsões e micropartículas produzidas se mostraram adequadas para viabilizar o uso em água desse éster com potencial uso como larvicida e adulticida, abrindo perspectivas para estudos com outros compostos.


  • Mostrar Abstract
  • The main strategy for controlling diseases transmitted by the Aedes aegypti mosquito is the elimination of the vector, mainly in its larval stage. Despite the proven effectiveness of commercial larvicides and insecticides, these products have environmental toxicity. The literature shows the use of natural products as an alternative to this problem. The aim of this study was to develop and characterize formulations containing pentyl cinnamate and to evaluate its larvicidal activity for Aedes aegypti. The pentyl cinnamate was obtained by semisynthesis through the esterification of cinnamic acid. This compound was characterized and its purity determined by NMR 1H e 13C, GC-MS and UHPLC-MS/MS. Pentyl cinnamate activity tests were performed on L3 larvae and on adult mosquitoes of A. aegypti, obtaining a larvicidal activity with LD50 of 19.9 μg.mL-1, and against adult mosquitoes at 200 μg per bottle test, 80.8 ± 3.8% mortality in 2 h. Nanoemulsions were produced with PHOSAL® 50+ (PHO), LIPOID® S 20 (L20) and LIPOID® S 75-3 (L75) lecithins by homogenization with mechanical agitation and ultra turrax. The nanoemulsions were subjected to spray drying to obtain solid microparticles characterized by FTIR, SEM and thermal analysis by DSC and TG. The nanoemulsions obtained by agitation with turrax had smaller droplet sizes, being that of PHO: 81.0 ± 1.8 nm; L20: 120.4 ± 4.9 nm and L75 with 150.9 nm. The PHO nanoemulsions proved to be the most stable during 30 days of observation, they were also the ones that showed higher content of pentyl cinnamate whith 66.0 ± 0.5%. The images obtained by SEM showed that the microparticles formed by the different lecithins had a similar aspect between them. In the FTIR spectra, stretching signals characteristic of the pentyl cinnamate and excipients were observed and by DSC and TG techniques it was possible to see an increase in the stability of the compound incorporated in solid microparticles. The preliminary study of toxicity in zebrafish showed evidence of toxicity of pentyl cinnamate in low concentrations, however future studies may be carried out for the influence of the solvent in this type of model. The nanoemulsions and microparticles produced proved to be suitable for making the use of this ester in water with potential use as a larvicide and adulticide feasible, opening perspectives for studies with other compounds.

8
  • WALESKA RAYANE DANTAS DE MEDEIROS LIMA
  • PRODUÇÃO, CONCENTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO PARCIAL DE ENZIMAS LIPOLÍTICAS DE Aspergillus niger EM FERMENTAÇÃO EM ESTADO SÓLIDO

  • Orientador : FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
  • EVERALDO SILVINO DOS SANTOS
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • SÉRGIO DANTAS DE OLIVEIRA JÚNIOR
  • Data: 02/06/2020

  • Mostrar Resumo
  • As lipases são enzimas com diversas aplicações nas áreas alimentícia, farmacêutica e cosmética em virtude da sua versatilidade. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a produção de lipases de Aspergillus niger IOC 4003 por fermentação em estado sólido utilizando substratos de baixo custo e realizar purificação parcial das lipases obtidas. O cultivo de A. niger foi inicialmente conduzido utilizando análise multivariada. Para seleção das variáveis de maior efeito, foi realizado planejamento experimental Plackett-Burman (PPB) com 15 ensaios e 11 fatores (proporção torta de algodão/farelo de trigo, concentração de óleo de vísceras de tilápia, tempo de cultivo, pH, concentração de inóculo, umidade, glicose, ureia, extrato de levedura, KH2PO4 e MgSO4). Em seguida, realizou-se um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) 23 com as três variáveis mais significativas do PPB: tempo de cultivo, proporção torta de algodão/farelo de trigo e umidade. A variável resposta (atividade lipolítica) foi mensurada nos extratos enzimáticos por espectrofotometria utilizando p-nitrofenil-palmitato. Os resultados mostraram que as combinações de substrato com menor porcentagem de torta de algodão e maior porcentagem de farelo de trigo, bem como as condições extremas de tempo de cultivo e umidade contribuíram para o incremento da atividade enzimática. A maior atividade lipolítica (0,091 U/g) foi obtida com 30% de torta de algodão, 50% de umidade e 240 horas de cultivo. Essa condição foi reproduzida com suplementação dos indutores azeite, tween 80 e triton X-100. No entanto, não houve diferença estatística entre os cultivos com e sem suplementação. O extrato enzimático bruto foi submetido à precipitação com acetona e etanol. Os melhores perfis foram verificados com as frações acetona 40% (29,04% de rendimento e fator de purificação 4,04) e etanol 20% (42,47% de rendimento e fator de purificação 5,03). As frações acetona 40% e etanol 20% revelaram predominância de uma banda com massa molecular de 115 kDa, sugestiva da presença de lipases. A estabilidade da fração acetona 40% contendo lipases pré-purificadas foi avaliada nos pHs 3 a 10 e nas temperaturas de 30 a 60°C durante 6 horas. A menor estabilidade ocorreu no pH 3 mantendo atividade lipolítica residual de 74,62%. Quanto à temperatura, a perda de atividade mais importante foi de 15,10%, que ocorreu apenas com 60°C. Portanto, a partir do cultivo de A. niger em fermentação em estado sólido foi possível obter lipases pré-purificadas com boa estabilidade a temperaturas e pHs, que podem ser de grande interesse em diversos processos industriais.


  • Mostrar Abstract
  • The lipases are enzymes with various applications in the food, pharmaceutical and cosmetic areas because of their versatility. The goals of the present study were to evaluate the production of Aspergillus niger IOC 4003 lipases by solid state fermentation using low cost substrates and to perform partial purification of the obtained lipases. The cultivation of A. niger was initially conducted using multivariate analysis. To select the variables with the greatest effect, Plackett-Burman (PB) experimental design was performed with 15 tests and 11 factors (cottonseed cake/wheat bran ratio, tilapia viscera oil concentration, cultivation time, pH, concentration of inoculum, moisture, glucose, urea, yeast extract, KH2PO4 and MgSO4). After a 23 Central Rotational Composite Design was carried out with the three most significant PB variables: cultivation time, cottonseed cake/wheat bran ratio and moisture. The response variable (lipolytic activity) was measured in the enzymatic extracts by spectrophotometry using p-nitrophenyl-palmitate. The results showed that the substrate combinations with the lowest percentage of cotton cake and the highest percentage of wheat bran and the extreme conditions of cultivation time and moisture contributed to the increase in enzymatic activity. The highest lipolytic activity (0.091 U/g) was obtained with 30% cotton cake, 50% moisture and 240 hours of cultivation. This condition was reproduced with supplementation of the inducers olive oil, tween 80 and triton X-100. However, there was no statistical difference with and without supplementation. The crude enzymatic extract was submitted to precipitation with acetone and ethanol. The best profiles were verified with the 40% acetone fraction (29.04% yield and purification factor 4.04) and the 20% ethanol fraction (42.47% yield and purification factor 5.03). The fractions 40% acetone and 20% ethanol showed predominance of a band with a molecular mass of 115 kDa, suggestive of the presence of lipases. The stability of the fraction containing pre-purified lipases was evaluated at pH 3 to 10 and at temperatures from 30 to 60 °C for 6 hours. The lowest stability occurred at pH 3 maintaining a residual lipolytic activity of 74.62%. The most important loss of activity was 15.10%, which occurred only at 60 °C. Therefore, from the cultivation of A. niger in solid state fermentation it was possible to obtain pre-purified lipases with good stability at temperatures and pHs, which can be of great interest in several industrial processes.

9
  • PAULO HENRIQUE DE SANTANA MIRANDA
  • DESIDROQUINATO DESIDRATASE II COMO ALVO PARA O PLANEJAMENTO RACIONAL DE FÁRMACOS CONTRA O Mycobacterium tuberculosis e Helicobacter pylori

  • Orientador : EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALESSANDRO KAPPEL JORDAO
  • EUZEBIO GUIMARAES BARBOSA
  • KASSIO MICHELL GOMES DE LIMA
  • MARCUS TULLIUS SCOTTI
  • Data: 22/06/2020

  • Mostrar Resumo
  • Infecções ocasionadas por microrganismos patogênicos como Mycobacterium tuberculosis e Helicobacter pylori tem demonstrado índices alarmantes em relação a sua incidência e prevalência no Brasil afora. Portanto, há uma necessidade urgente de planejar novos fármacos, seguros e eficientes com o intuito de hostilizar essas infecções. O planejamento de fármacos baseado na estrutura do receptor é uma tecnologia que pode ser empregada neste processo, bastando apenas o conhecimento de um alvo de interesse para doença e ligantes com afinidades variáveis. A desidroquinato desidratase II (DHQase II) é uma enzima que faz parte da rota biossintética dessas bactérias, denominada como a via chiquimato. Essa via é considerada de suma importância para o crescimento desses microrganismos patogênicos. Diante disso, a DHQase II tornou-se um alvo atrativo para o planejamento racional de novos inibidores. O objetivo geral desse trabalho foi o planejamento racional de novos compostos ativos que possam inibir esta enzima. A utilização das técnicas de regressões lineares para desenvolver modelos preditivos de QSAR (2D, 3D, 4D e híbrido) com ótimos parâmetros estatísticos, possibilitou na elaboração de moléculas inéditas sem a real necessidade de execução de teste de atividade biológica in vitro ou in vivo. Os descritores dos respectivos modelos lineares atrelados as análises dos Activity Cliffs, corroboraram na elucidação das interações intermoleculares dos inibidores com o sítio receptor da DHQase II das duas bactérias. Os dados obtidos servem como guia para o planejamento racional de novos antibióticos potentes e altamente seletivos para atuar na inibição enzimática da DHQase II.


  • Mostrar Abstract
  • Infections caused by pathogenic microorganisms such as Mycobacterium tuberculosis and Helicobacter pylori have shown alarming rates regarding its incidence and prevalence in Brazil. Therefore, there is an urgent need to design new, safe and efficient drugs to hostile these infections. Drug structure-based drug planning is a technology that can be employed in this process, with only the knowledge of a target of interest for disease and ligands with varying affinities. Dehydroquinate dehydratase II (DHQase II) is an enzyme that is part of the biosynthetic pathway of these bacteria, called the shikimate pathway. This pathway is considered of paramount importance for the growth of these pathogenic microorganisms. Given this, DHQase II has become an attractive target for rational planning of new inhibitors. The general objective of this work was the rational design of new active compounds that may inhibit this enzyme. The use of linear regression techniques to develop predictive QSAR models (2D, 3D, 4D and Hybrid) with excellent statistical parameters, made possible the elaboration of unpublished molecules without the real need to perform biological activity test in vitro or in vivo. The descriptors of the respective linear models linked to the Activity Cliffs analysis corroborated the elucidation of the intermolecular interactions of the inhibitors with the DHQase II receptor site of the two bacteria. The data obtained serve as a guide for the rational planning of new potent and highly selective antibiotics to act in the enzymatic inhibition of DHQase II.

10
  • ELAYNE BARROS FERREIRA
  • OBTENÇÃO DE SISTEMAS BINÁRIOS COM UM DERIVADO 2-AMINOTIOFENO PARA AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIPROLIFERATIVA E DA TOXICIDADE

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • ADRIANA AUGUSTO DE REZENDE
  • BOLIVAR PONCIANO GOULART DE LIMA DAMASCENO
  • Data: 23/06/2020

  • Mostrar Resumo
  • O 2-amino-4,5,6,7-tetrahidrobenzo[b]tiofeno-3-carbonitrila (6CN), um derivado 2-
    aminotiofeno, possui potencial aplicabilidade farmacológica. Entretanto, o 6CN
    apresenta problemas nas suas características físico-químicas, o que dificulta sua
    aplicação farmacológica. Com isso, o objetivo deste trabalho foi desenvolver sistemas
    binários entre o 6CN e a β-ciclodextrina (βCD) a fim de melhorar as propriedades
    desde protótipo. Foram realizados estudos teóricos computacionais de modelagem
    molecular e diagrama de solubilidade de fases. Em seguida, foram desenvolvidos os
    sistemas binários entre o 6CN e a βCD pelos métodos de mistura física (MF),
    malaxagem (MAL) e rotaevaporação (ROTA). A caracterização físico-química dos
    sistemas foi realizada através de espectroscopia de infravermelho por transformada
    Fourier (FTIR), calorimetria exploratória diferencial (DSC), análise termogravimétrica
    (TG), difração de raio-X (DRX) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Ensaios
    in vitro de MTT investigaram o efeito antiproliferativo dos sistemas binários e, por fim,
    avaliou-se a toxicidade in vivo para o sistema com melhor resultado. A caracterização
    físico-química aponta para a formação dos sistemas binários com a βCD. Os estudos
    de solubilidade de fase indicaram que a βCD forma sistemas estáveis na
    estequiometria de 1:1 com 6CN, corroborando com os dados da modelagem
    molecular. Os sistemas binários 6CN-βCD em concentrações de 10 a 50 mM, no
    ensaio MTT, demostraram efeitos antiproliferativos de 20-80% após 48 horas de
    exposição a linhagens celulares cancerígenas 786-0 e HepG2, potencializando o
    efeito citostático do 6CN, aumentando a sua atividade antiproliferativa. Já os testes
    de toxicidade in vivo foram conduzidos com o ROTA, em que esse sistema binário
    reduziu a toxicidade do 6CN, uma vez que não houve mortalidade para os animais
    tratados com o sistema, corroborando com os achados bioquímicos, hematológicos e
    histopatológicos. Portanto, sistemas binários com ciclodextrinas surgem como
    alternativa para superar as limitações físico-químicas do 6CN, podendo vir a ser
    utilizados em uma futura formulação terapêutica segura e eficaz.


  • Mostrar Abstract
  • 2-amino-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]thiophene-3-carbonitrile (6CN), a new 2-
    aminothiophene derivative, has wide spectrum of pharmacological properties.
    However, the poor aqueous solubility of 6CN impairs its clinical use. This work aimed
    to develop 6CN-β-cyclodextrin binary systems with the purpose of increasing 6CN
    solubility in water and therefore, to improve its pharmacological activity. Computational
    theoretical studies of molecular modeling and phase solubility diagram were
    performed. The 6CN-βCD binary systems were prepared by physical mixing (PM),
    kneading (KND) and rotary evaporation (ROTA). The physical and chemical
    characterization of binary systems was performed by Fourier transform infrared
    spectroscopy (FTIR), differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetric
    analysis (TG), x-ray diffraction (DRX) and scanning electron microscopy (SEM). In vitro
    MTT assays investigated the antiproliferative effect of the binary systems and, finally,
    the in vivo toxicity was evaluated for the system with the best results. The
    characterization results show evident changes in the physicochemical properties of
    6CN after the formation of the binary systems with βCD. In addition, 6CN was
    associated with βCD in aqueous solution and the solid state, which was confirmed by
    molecular modeling and the afore mentioned characterization techniques. Phase
    solubility studies indicated that βCD forms stable 1:1 complexes with 6CN. The 6CN-
    βCD binary systems at concentrations of 10 to 50 mM, in the MTT assay, demonstrated
    antiproliferative effects of 20-80% after 48 hours of exposure to carcinogenic cell lines
    786-0 and HepG2, enhancing the cytostatic effect of the 6CN, increasing the
    Antiproliferative activity. In vivo toxicity tests were conducted with the ROTA, in which
    this binary system reduced the toxicity of the 6CN, since there was no mortality for the
    animals treated with the system, corroborating the biochemical, hematological and
    Histopathological. Therefore, binary systems with cyclodextrins emerge as an
    alternative to overcome the physicochemical limitations of the 6CN, which may be used
    in a future safe and effective therapeutic formulation.

11
  • FABIOLA LEITE GOUVEIA
  • AVALIAÇÃO DO EFEITO DA SUPLEMENTAÇÃO COM COENZIMA-Q10 SOBRE A RESISTÊNCIA INSULÍNICA EM MULHERES OBESAS PORTADORAS DA SÍNDROME DOS OVÁRIOS POLICÍSTICOS

  • Orientador : TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MELINA BEZERRA LOUREIRO
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • Data: 20/07/2020

  • Mostrar Resumo
  • A Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) é uma endocrinopatia de causa
    multifatorial, origem indefinida e que acomete uma considerável parcela da população
    feminina em idade reprodutiva. Devido ao seu perfil metabólico característico, podem
    apresentar dislipidemia, obesidade, síndrome metabólica (SM) e resistência à insulina (RI),
    estes fatores podem contribuir para o desenvolvimento de estresse oxidativo (EO). Esse EO
    gerado pelo excesso de espécies reativas de oxigênio favorece o desenvolvimento de
    complicações, como a aterosclerose, doenças inflamatórias, cardíacas, entre outras.
    Considerando este fato, a coenzima Q10 é uma benzoquinona que desempenha um papel
    importante na eliminação de radicais livres e na inibição da oxidação lipídica e protéica.
    Diante disso, o presente estudo objetivou avaliar o efeito da suplementação com a coenzima
    Q10 sobre a resistência insulínica em mulheres obesas com SOP. A população do estudo foi
    composta por 60 mulheres obesas, com idades entre 20 e 40 anos com e sem o diagnóstico de
    SOP. Para análise comparativa, as pacientes foram divididas em dois grupos: Caso (obesas
    com SOP - n = 30); Controle (obesas sem SOP – n = 30), e submetidas à suplementação com
    a coenzima Q10 100mg/dia via oral por 08 semanas. A obesidade foi caracterizada pelo índice
    de massa corporal (IMC), considerando o ponto de corte ≥ 30,0 kg/m². Em seguimento, as
    mulheres foram avaliadas quanto aos parâmetros clínicos, bioquímicos e hormonais. A análise
    estatística dos dados foi realizada com o pacote estatístico SPSS© 22. A RI esteve presente
    em 76,7% do grupo caso e 80% do grupo controle. A análise comparativa entre o grupo SOP
    pré e pós-intervenção, demonstrou diferenças significativas em relação à massa (91,1 vs. 89,9
    kg p=0,008), glicose 120 minutos (138 vs. 122,5 mg/dL p=0,004), insulina (16,2 vs. 10,7
    μUI/mL p=0,000), HOMA-IR (3,67 vs. 2,31 p=0,000) e QUICKI (0,31 vs. 0,30 p=0,000).
    Além disso, foram observadas alterações significativas no perfil hormonal, tais como
    hormônio folículo estimulante (5,4 vs. 6,0 UI/mL p=0,004), hormônio luteinizante (6,3 vs. 4,5
    UI/mL p=0,000), testosterona (32,1 vs. 22,0 ng/dL p=0,000) e progesterona (0,20 vs. 0,35
    ng/dL p=0,000). Em relação ao grupo controle (pós-suplemetação), foi possível observar
    resultados significativos frente aos parâmetros bioquímicos e hormonais. Deste modo, a
    intervenção com a coenzima Q10 pode promover efeitos benéficos em relação às principais
    alterações metabólicas e hormonais que estão presentes na SOP e obesidade.


  • Mostrar Abstract
  • Polycystic Ovarian Syndrome (PCOS) is an endocrinopathy of multifactorial cause, undefined
    origin and affecting a considerable portion of the female population of reproductive age. Due
    to its characteristic metabolic profile, it can present dyslipidemia, obesity, metabolic
    syndrome (MS) and insulin resistance (IR), these factors can contribute to the development of
    oxidative stress (OES). This OES generated by excess reactive oxygen species favors the
    development of complications such as atherosclerosis, inflammatory and cardiac diseases,
    among others. Considering this fact, coenzyme Q10 is a benzoquinone that plays an important
    role in the elimination of free radicals and inhibition of lipid and protein oxidation. Therefore,
    this study aimed to evaluate the effect of coenzyme Q10 supplementation on insulin resistance
    in obese women with PCOS. The study population was composed of 60 obese women aged
    20 to 40 years with and without the diagnosis of PCOS. For comparative analysis, the patients
    were divided into two groups: Case (obese with PCOS - n = 30); Control (obese without SOP
    - n = 30), and submitted to supplementation with coenzyme Q10 100mg/day orally for 8
    weeks. Obesity was characterized by body mass index (BMI), the cut point being ≥ 30.0
    kg/m². In follow-up, women were evaluated regarding clinical, biochemical and hormonal
    parameters. Statistical analysis of the data was performed with the statistical package SPSS©
    22. IR was present in 76.7% of the case group and 80% of the control group. The comparative
    analysis between the PCOS pre and post intervention group showed significant differences in
    relation to mass (91.1 vs. 89.9 kg p=0.008), glucose 120 minutes (138 vs. 122.5 mg/dL
    p=0.004), insulin (16.2 vs. 10.7 μUI/mL p=0.000), HOMA-IR (3.67 vs. 2.31 p=0.000) and
    QUICKI (0.31 vs. 0.30 p=0.000). In addition, significant changes were observed in the
    hormone profile, such as follicle stimulating hormone (5.4 vs. 6.0 IU/mL p=0.004),
    luteinizing hormone (6.3 vs. 4.5 IU/mL p=0.000), testosterone (32.1 vs. 22.0 ng/dL p=0.000)
    and progesterone (0.20 vs. 0.35 ng/dL p=0.000). In relation to the control group (post
    suplementation), it was possible to observe significant results in relation to biochemical and
    hormonal parameters. Thus, intervention with coenzyme Q10 may promote beneficial effects
    in relation to the main metabolic and hormonal changes that are present in PCOS and obesity.

12
  • PEDRO IVO PALACIO LEITE
  • EXTRAÇÃO VERDE DE COMPOSTOS BIOATIVOS DA CASCA E DA POLPA DO BURITI (Mauritia flexuosa L.): AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIOXIDANTE E ANTIBACTERIANA

  • Orientador : FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA LÚCIA FIGUEIREDO PORTO
  • EVERALDO SILVINO DOS SANTOS
  • FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
  • MARCIO FERRARI
  • Data: 21/07/2020

  • Mostrar Resumo
  • O Buriti (Mauritia flexuosa L.) é um fruto que fornece grandes quantidades de componentes bioativos como carotenoides e vitamina A. Assim, esta espécie representa uma matéria-prima de grande potencial, devido à presença de compostos com atividades bioativas. Neste sentido, o objetivo do presente estudo foi extrair os compostos bioativos da casca e da polpa do buriti utilizando solventes verdes para avaliação da atividade antioxidante e antibacterina. Foram realizadas extrações da casca e da polpa do buriti, utilizando solventes eutéticos profundos (DES), etanol e solvente supramolecular (SUPRAS). Além disso, o rendimento da extração de carotenoides com etanol foi avaliado pela técnica convencional e assistida por ultrassom. A concentração de carotenoides totais nos extratos foi avaliada por espectrofotometria, e a de compostos fenólicos totais e betacaroteno foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O desempenho da extração SUPRAS foi comparado com os resultados de extração com etanol utilizando a casca e polpa do buriti como matrizes. A extração de betacaroteno com SUPRAS apresentou rendimento de 5,82 ± 0,05 mg/g para casca e 26,7 ± 0,02 mg/g para a polpa. Para extração dos compostos fenólicos totais, os rendimentos foram de 32,1 ± 1,2 μg EAG/g para casca e 24,53 ± 4,9 μg EAG/g para a polpa. Todos os extratos apresentaram atividade antioxidante, com destaque para os obtidos com SUPRAS, que apresentaram EC50 (concentração em que 50% dos radicais foram eliminados) para o sequestro do radical ABTS de 3,00 μg/mL para a casca e 0,84 μg/mL para a polpa. Estes extratos inibiram o crescimento de Staphylococcus aureus (ATCC 29213) e Enterococcus faecalis (ATCC 4028). Além disso, quando associados aos antibióticos norfloxacino e gentamicina, os extratos apresentaram ação sinérgica contra cepas multiressistentes de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. Assim, a extração dos compostos bioativos do buriti utilizando um solvente seguro, biocompatível, biodegradável e ambientalmente amigável como o SUPRAS, representa um enorme potencial para desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos, cosméticos e alimentos funcionais.


  • Mostrar Abstract
  • Buriti (Mauritia flexuosa L.) is a fruit that provides large quantities of bioactive components such as carotenoids and vitamin A. Thus, this species represents a raw material of great potential, due to the presence of bioactive compounds. In this sense, the objective of the present study was to extract the bioactive compounds from the peel and pulp of the buriti using green solvents to evaluate the antioxidant and antibacterial activities. Initially, extraction of the buriti peel and pulp was performed using deep euthectic solvents (DES), ethanol and supramolecular solvent (SUPRAS). In addition, the yield of carotenoid extraction with ethanol was evaluated by the conventional and ultrasound-assisted technique. The concentration of total carotenoids in the extracts was evaluated by spectrophotometry, and the concentration of total phenolic compounds and beta-carotene was determined by high-efficiency liquid chromatography (HPLC). The performance of SUPRAS extraction was compared with the results of ethanol extraction using the peel and buriti pulp as matrices. Beta-carotene extraction with SUPRAS yielded 5.82 ± 0.05 mg/g for peel and 26.7 ± 0.02 mg/g for pulp. For total phenolic compounds, yields were 32.1 ± 1.2 μg GAE/g for peel and 24.53 ± 4.9 μg GAE/g for pulp. All extracts presented excellent antioxidant activity, with emphasis on the extracts obtained with SUPRAS, which presented EC50 (concentration required to obtain a 50% antioxidant effect) for the sequestration of the ABTS radical of 3.00 μg/mL for the peel and 0.84 μg/mL for the pulp. These extract inhibiting bacterial growth of Staphylococcus aureus (ATCC 29213) and Enterococcus faecalis (ATCC 4028). Moreover, when associated with norfloxacin and gentamicin antibiotics, the extracts showed synergistic action against multiresistant strains of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. Thus, the extraction of bioactive compounds from buriti using a safe, biocompatible, biodegradable and environmentally friendly solvent such as SUPRAS represents an enormous potential for the development of new pharmaceutical, cosmetic and functional food products.

13
  • NAYARA SOUSA DA SILVA
  • AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTIMICROBIANO E ANTIPARASITÁRIO DE OLIGOSSACARÍDEOS DE QUITOSANA

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARIA GIOVANA BINDER PAGNONCELLI
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • ROBERTO NICOLETE
  • Data: 31/07/2020

  • Mostrar Resumo
  • O aumento de surtos de doenças infeciosas, a progressão mundial da resistência microbiana e o elevado impacto de doenças tropicais negligenciadas reforça a busca por novas moléculas com potencial antimicrobiano. A quitosana é um copolímero formado de D-glicosamina e N-acetil-glicosamina, obtida pela desacetilação parcial da quitina. A hidrólise da quitosana gera os quitooligossacarídeos (QOS) e monossacarídeos. Os QOS apresentam maior vantagem em relação à quitosana devido a maior solubilidade e menor viscosidade. Aliado a esses parâmetros, pesquisas demonstram o vasto potencial biológico dos QOS com propriedades antimicrobiana, anti-inflamatória, antioxidante e antitumoral. Apesar do conhecimento dos efeitos biológicos dos QOS, a atividade antiparasitária dessas moléculas é pouco estudada. Dessa forma, os objetivos deste estudo foram obter QOS, a partir da hidrólise enzimática da quitosana por quitosanases provenientes de Bacillus toyonensis, caracterizar os oligômeros e avaliar seus efeitos citotóxicos, antimicrobiano e antiparasitário in vitro. A mistura de QOS produzidos por hidrólise enzimática nos tempos de 5 e 10 min de reação foram caracterizados por RMN 1H e ¹³C, uni e bidimensional, e espectrometria de massas. Ambos os oligômeros avaliados não demonstraram citotoxicidade sobre células cancerígenas e não cancerígenas até 2 mg/mL. Os QOS revelaram efeito antimicrobiano semelhante a quitosana frente a bactérias e leveduras. No ensaio antiparasitário, os QOS apresentaram inibição parasitária tempo-dependente sobre os parasitos Trypanosoma cruzi e Leishmania amazonensis. A possibilidade de obtenção de uma molécula de elevado interesse biotecnológico a partir de resíduos da carcinicultura, resultando na diminuição do impacto ecológico, releva a importância do estudo e utilização dos quitooligossacarídeos para obtenção de novos agentes farmacológicos.


  • Mostrar Abstract
  • The increase in outbreaks of infectious diseases, the worldwide progression of microbial resistance and the high impact of neglected tropical diseases reinforces the search for new molecules with antimicrobial potential. Chitosan is a copolymer formed of D-glucosamine and N-acetyl-glucosamine, obtained by partial deacetylation of chitin. The chitosan hydrolysis generates chitosoligosaccharides (COS) and monosaccharides. COS have a greater advantage over chitosan due to greater solubility and lower viscosity. Allied to these parameters, research demonstrates the vast biological potential of COS with antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant and anti-tumor properties. Despite the knowledge of the biological effects of COS, the antiparasitic activity of these molecules is poorly studied. Thus, the objectives of this study were to obtain COS from the enzymatic hydrolysis of chitosan by chitosanases from Bacillus toyonensis, to characterize the oligomers and to evaluate their cytotoxic, antimicrobial and antiparasitic effects in vitro. The mixture of COS produced by enzymatic hydrolysis in the 5- and 10-min reaction times were characterized by ¹H and ¹³C NMR, uni and bidimensional, and mass spectrometry. Both oligomers evaluated did not demonstrate cytotoxicity on cancer cells and non-cancer cells up to 2 mg / mL. The COS revealed an antimicrobial effect similar to chitosan against bacteria and yeasts. In the antiparasitic assay, the COS showed time-dependent parasitic inhibition on the Trypanosoma cruzi and Leishmania amazonensis parasites. The possibility of obtaining a molecule of high biotechnological interest from shrimp residues, resulting in a decrease in ecological impact, highlights the importance of the study and use of chitooligosaccharides to obtain new pharmacological agents.

14
  • ALESSANDRA SUELEN JARDIM DA SILVA
  • ESTUDOS DO DIAGNÓSTICO, CLASSIFICAÇÃO E AVALIAÇÃO PROGNÓSTICA DAS LEUCEMIAS LINFOIDE AGUDA NO RIO GRANDE DO NORTE PELA TECNOLOGIA DE IMUNOFENOTIPAGEM POR CITOMETRIA DE FLUXO

  • Orientador : GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GERALDO BARROSO CAVALCANTI JUNIOR
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • GUSTAVO HENRIQUE DE MEDEIROS OLIVEIRA
  • Data: 31/08/2020

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma doença maligna do sistema linfo-hematopoetico caracterizada pelo acúmulo de precursores linfóides neoplásicos (linfoblastos) de origem B ou T na medula óssea e/ou sangue periférico. O diagnóstico e classificação dessas leucemias ocorre pela classificação morfológica franco-americana-britânica (L1, L2 ou L3) associada a características do perfil imunológico de malignidades de células T ou B, com base no perfil de expressão de anticorpos monoclonais (AcMo) dirigidos contra os antígenos de diferenciação celular por citometria de fluxo (CF). Vários estudos têm demonstrado que os imunofenótipos de células blásticas de casos de leucemia linfoblástica aguda nem sempre exibem características de diferenciação linfóide normais, mas exibem imunofenótipos aberrantes. Assim, blastos alguns casos de leucemia linfoblástica aguda de linhagem B podem apresentar antígenos T ou mieloides. Também blastos de casos de determinantes de células T de leucemia linfoblástica aguda podem possuir células B ou mieloides. Objetivos: Determinar o perfil imunofenotípico pela CF em 88 pacientes com LLA (linhagem B ou T) diagnosticados no Laboratório de Citometria de Fluxo do Hemocentro Dalton Cunha - HEMONORTE, do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Métodos: Todas as amostras de sangue periférico e / ou medula óssea foram submetidas a imunofenotipagem de FC usando um painel de MoAb específico para o diagnóstico de leucemia aguda (AL) diretamente conjugada a fl uorocromos como fl uoresceína isotiocianato (FITC), ficoeritrina (PE), peridinina-clorofila proteína (PerCP) e aloficocianina (APC). Resultados: A faixa etária dos pacientes variou de 1 mês a 84 anos, com média de 20,3 anos, sendo 62,5% dos pacientes do sexo masculino. A cepa observada com mais frequência foi a B e o subtipo mais evidênte foi a LLA Pré-B comum. Dentre os marcadores celulares avaliados, os mais expressos na linhagem B foram CD19, CD10, HLADR e cCD79a e os antígenos mais frequentemente expressos na linhagem T foram CD3 citoplasmático (cCD3) e membrana (mCD3), CD7, CD5 e CD2. Uma pequena porcentagem (6,8%) eram células T duplamente positivas. Conclusão: Conclui-se que os indivíduos com LLA neste estudo apresentam características demográficas, clínicas e imunofenotípicas semelhantes às observadas em outros estudos, demonstrando que a imunofenotipagem para FC é uma metodologia essencial no diagnóstico do seguimento dessas leucemias.


  • Mostrar Abstract
  • Acute Leukemia (AL) defines a huge and heterogeneous group of malignant clonal
    diseases. They affect hematopoietic precursors quantitatively and qualitatively and it
    needs clinical and laboratory criteria for diagnosis and classification. AL may have
    myeloid or lymphoid origin and specifically for Acute Lymphoid Leukemia (ALL) it may
    be subclassified in B or T lineage. In this study, 88 individuals with ALL treated at the
    Hemocentro Dalton Cunha (HEMONORTE) were listed, from Rio Grande do Norte.
    The patients were submitted to laboratory and immunophenotypic analyzes aiming for
    outline the immunophenotypic profile of ALL in the state of Rio Grande do Norte, Brazil.
    The 88 case found were between 1 month and 84 years old with a mean of 20.3 years
    and 62.5% of the patients were male. The lineage most frequently observed was the
    B lineage and the most evident subtype was Common Pre-B ALL. The most frequently
    expressed antigens in the B subtype were CD19, CD10, HLADR and cCD79a, and the
    most frequently expressed antigens in the T strain were CD7, CD5 and CD2. It was
    concluded that individuals with ALL in Rio Grande do Norte have similar demographic,
    clinical and immunophenotypic characteristics, as others studied around the world and
    that flow cytometry immunophenotyping (FCI) is an essential way to diagnose AL of
    lymphoid origin.

15
  • FRANCISCO LEANDRO MEDEIROS DE LUCENA JALES
  •  INVESTIGAÇÃO FITOQUÍMICA E AVALIAÇÃO DO POTENCIAL EFEITO ANTIVIRAL E DA TOXICIDADE ORAL AGUDA DE Scoparia dulcis L. (VASSOURINHA)

  • Orientador : SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOSELIO MARIA GALVAO DE ARAUJO
  • JULIA MORAIS FERNANDES
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • Data: 18/09/2020

  • Mostrar Resumo
  • A espécie Scoparia dulcis L. (Plantaginaceae), comumente conhecida como vassourinha, é utilizada popularmente como cicatrizante, anti-inflamatório e no tratamento de doenças gastrointestinais. Os principais metabólitos secundários descritos para a espécie são os terpenos como ácidos scopadulcico A e B, scopadiol, scopadulciol, scopadulinico, ácidos scoparico A – C, mas também tem relatos da presença de flavonoides. O presente estudo teve como objetivo investigar o perfil fitoquímico e avaliar o potencial antiviral e a toxicidade do extrato das folhas de S. dulcis. Foram preparados extratos hidroetanólicos com amostras coletadas na zona urbana do município Natal e amostras coletadas na zona rural do município de Serra Caiada-RN, com variação do método de extração e teor alcoólico: maceração 35%, e 70% e turbólise 35% e 70%. Os extratos foram analisados por Cromatografia em Camada Delgada e por Cromatografia Líquida acoplada a espectrômetro de massas e foi avaliado o teor de flavonoides e fenois totais em cada extrato. Os extratos obtidos com amostras da zona urbana foram avaliados quanto a citotoxicidade pelo teste de viabilidade celular em células VERO pelo teste de MTT e atividade antiviral dos extratos frente ao vírus herpes tipo I- HSV-1 nos ensaios: de atividade virucida, pós-infecção, concomitante e pré-tratamento. A toxicidade oral aguda do extrato obtido por maceração 70% de amostras coletadas da zona rural de Serra Caiada foi avaliada em modelo in vivo, por administração oral de 2000 mg/kg. Por meio das análises cromatográficas foram identificadas ao total 31 substâncias nos extratos de S. dulcis, sendo a maioria flavonoides como O-glicosídeos derivados do núcleo quercetina, além de terpenoides como álcool benzílico, metil éster do ácido benzoico, metil éster do ácido palmítico, metil éster do ácido oleico, metil éster do ácido fitol, metil éster do ácido esteárico, n-tetracosano e mais cinco composto não identificáveis. Quanto ao teor de fenois e flavonoides totais os extratos que apresentaram o maior teor foram: turbolise 70% 104,18±0,05 para fenois e 64,06±0,05 para flavonoides e maceração 70% zona rural com 98,04±0,03 e 56,75±0,06. No ensaio do MTT, foi observada uma viabilidade celular acima de 80% para todos extratos até a concentração de 250 μg/mL, com exceção do extrato obtido por turbólise 35 % que apresentou viabilidade celular inferior à 50%. Nos modelos antivirais estudados, o extrato obtido por turbólise 70 % mostrou-se o mais eficiente quando comparado aos demais extratos, visto que, promoveu uma inibição significativa do vírus HSV-1 nos modelos avaliados. Em relação a avaliação da toxicidade aguda in vivo do extrato obtido por maceração 70% (amostra rural), não foi observado nenhuma alteração nos parâmetros bioquímicos, comportamentais ou hematológicos que fossem sugestivos de suposta toxicidade gerada pelo extrato. Por fim, a espécie apresentou um potencial efeito antiviral e não apresentou sinais de toxicidade in vitro e em modelo agudo in vivo.


  • Mostrar Abstract
  • Scoparia dulcis L. species (Plantaginaceae), commonly known as broom, is popularly used as, anti-inflammatory and in the treatment of gastrointestinal diseases. The presence of several secondary metabolites were until described including terpenes as scopadulcic acids A and B, scopadiol, scopadulciol, scopadulinic, scoparic acids A - C and some flavonoids. Thus, the present study aimed to evaluate the phytochemical profile and the antiviral potential of S. dulcis leaf extract, as well as their toxicity. Hidroethanolic extracts were prepared with samples collected in the urban area of Natal and in the rural area of Serra Caiada-RN, using two different methods and ethanol proportions: maceration 35% and 70%, turbolysis 35% and 70%. Then, phytochemical profile was analyzed by Thin Layer Chromatography and by Liquid Chromatography coupled to a mass spectrometer and the content of flavonoids total phenols were evaluated. The cell viability test in VERO cells was carried out with the extracts produced from the urban area by the MTT test. Then, the antiviral activity of the extracts against herpes virus type I-HSV-1 was evaluated by the tests: virucidal activity, post-infection, concomitant and pre-treatment. Acute oral toxicity was evaluated using only the maceration extract 70 % obtained from the rural area of Serra Caiada in in vivo model, by oral administration of 2000 mg/kg. Through chromatography analysis coupled to a mass spectrometer, 31 substances were identified in S. dulcis leaf extracts, the majority of which were flavonoids as O-glycosides derived from the quercetin nucleus, added to terpenoids such as benzyl alcohol, benzoic acid methyl ester, palmitic acid methyl ester, oleic acid methyl ester, phytol acid methyl ester, stearic acid methyl ester, n-tetracosane and five other unidentifiable compounds. Regarding the content of total phenols and flavonoids, the extracts that presented the highest content were: turbolysis 70% 104.18 ± 0.05 for phenols and 64.06 ± 0.05 for flavonoids and maceration 70% rural area with 98.04 ± 0.03 and 56.75 ± 0.06. Cell viability above 80% was observed for all extracts up to a concentration of 250 μg/ml, except to extract obtained by turbolysis 35% which presented cell viability below 50%. Regarding the antiviral results, extract obtained by turbolysis 70% proved to be the most efficient when compared to the other extracts, promoting a significant inhibition of the HSV-1 virus. In the non-clinical study of acute oral toxicity in vivo of maceration extract 70 % (rural area) no changes were observed in the biochemical, behavioral or hematological parameters, suggesting that the extract is safe in acute administration. Scoparia dulcis showed a potential antiviral effect and safety in vitro and in vivo acute model of toxicity.

16
  • LUANA CARVALHO DE OLIVEIRA
  • OBTENÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE COMPLEXOS DE INCLUSÃO ENTRE A MISTURA BINÁRIA DE triterpenos α, β-amirenona COM CICLODEXTRINAS NATURAIS PARA EXPLORAÇÃO E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE INIBITÓRIA DA ENZIMA LIPASE IN VITRO

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • ADRIANO ANTUNES DE SOUZA ARAÚJO
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • Data: 26/10/2020

  • Mostrar Resumo
  • A α, β-amirenona (ABAME), um derivado triterpênico, assim como outros derivados dessa classe, possui muitas atividades biológicas e, por sua vez, potencial aplicabilidade farmacológica. Entretanto, a ABAME apresenta problemas nas suas características físico-químicas, como baixa solubilidade aquosa, o que dificulta sua administração por via oral e, consequentemente, sua biodisponibilidade, limitando sua utilização farmacológica. Na área farmacêutica, as ciclodextrinas (CD) são utilizadas como uma estratégia para aumentar a solubilidade, estabilidade e biodisponibilidade de fármacos. O desenvolvimento de complexos de inclusão (CI) com ciclodextrinas torna possível superar as limitações impostas pela ABAME, possibilitando assim um aumento na solubilidade e proteção deste protótipo, uma melhora do perfil de dissolução e um aumento da biodisponibilidade, permitindo a exploração das atividades farmacológicas. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver complexos de inclusão deste triterpeno com CD e melhorar as atividades biológicas. Os complexos obtidos foram sistematicamente caracterizados através de estudos de modelagem molecular, análises por FTIR, DRX, DSC, TG e MEV. Em seguida foram realizados testes in vitro para enzima lipase. A caracterização físico-química aliada com os estudos de modelagem molecular indicou a formação de CI com CD sendo capaz de induzir alterações nas propriedades físico-químicas da ABAME. Além do CI apresentarem resultados superiores a 90% quando comparados ao padrão de referência (inibição de 77%) em testes para enzima lipase, demonstrando superioridade nos efeitos inibitórios. Comprovando que os CI com ABAME são capazes de potencializar os efeitos inibitórios da ABAME em enzimas do pâncreas de suínos. Concluindo que, este estudo desenvolveu um novo insumo farmacêutico com potencial melhora nas características físico-químicas e na atividade inibitória lipo-enzimática, demonstrando ser um composto promissor à uma futura formulação.


  • Mostrar Abstract
  • Α, β-amirenone (ABAME), a triterpene derivative, as well as other derivatives of this class, has many biological activities and, in turn, potential pharmacological applicability. However, ABAME has problems with its physical-chemical characteristics, such as low aqueous solubility, which makes it difficult to be administered orally and, consequently, its bioavailability, limiting its pharmacological use. In the pharmaceutical area, cyclodextrins (CD) are used as a strategy to increase the solubility, stability and bioavailability of drugs. The development of inclusion complexes (CI) with cyclodextrins makes it possible to overcome the limitations imposed by ABAME, thus enabling an increase in the solubility and protection of this prototype, an improvement in the dissolution profile and an increase in bioavailability, allowing the exploration of pharmacological activities. In this context, the present work aimed to develop complexes for the inclusion of this triterpene with CD and to improve biological activities. The complexes obtained were systematically characterized through molecular modeling studies, analysis by FTIR, DRX, DSC, TG and SEM. Then, in vitro tests for lipase enzyme were performed. The physico-chemical characterization combined with molecular modeling studies indicated the formation of CI with CD being able to induce changes in the physical-chemical properties of ABAME. In addition to the CI, they present results above 90% when compared to the reference standard (77% inhibition) in tests for enzyme lipase, showing superiority in inhibitory effects. Proving that the ABAME ICs are capable of potentiating the inhibitory effects of ABAME in swine pancreas enzymes. In conclusion, this study developed a new pharmaceutical ingredient with potential improvement in the physical-chemical characteristics and in the enzymatic lipo inhibitory activity, demonstrating to be a promising compound for a future formulation.

17
  • SAMARA VITÓRIA FERREIRA DE ARAÚJO
  • DESENVOLVIMENTO DE NANOEMULSÕES CONTENDO EXTRATO HIDROETANÓLICO DAS FOLHAS DE Kalanchoe laciniata (L.) DC. E AVALIAÇÃO IN VITRO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE

  • Orientador : MARCIO FERRARI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GABRIEL AZEVEDO DE BRITO DAMASCENO
  • JULIA MORAIS FERNANDES
  • MARCIO FERRARI
  • Data: 29/10/2020

  • Mostrar Resumo
  • A Kalanchoe laciniata (L.) DC. (Crassulaceae), conhecida popularmente como saião
    e coirama branca, é uma planta de pequeno porte, de fácil cultivo e apresenta em sua
    constituição química metabólitos ativos utilizados em produtos para prevenir os sinais
    do envelhecimento cutâneo. Em cosméticos, a veiculação de ativos de origem vegetal
    em sistemas nanoemulsionados tem recebido grande destaque devido ao menor
    tamanho de gotícula, sensorial e aspecto físico mais agradáveis. Diante disso, este
    trabalho teve como objetivo desenvolver nanoemulsões cosméticas, com atividade
    antioxidante para prevenção do envelhecimento cutâneo, aditivadas com o extrato
    hidroetanólico das folhas de Kalanchoe laciniata. Para tanto, foi realizada uma
    turboextração hidroetanólica (etanol 50%, v/v) na proporção planta (folhas in natura):
    solvente de 1:1 (p/v). O extrato obtido foi caracterizado quantitativamente quanto à
    concentração de fenólicos e flavonoides totais. O potencial antioxidante in vitro foi
    avaliado por meio de diferentes metodologias antioxidantes: sequestro de radicais 2,2-
    difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), sequestro de radicais 2,2′-Azino-bis (3-
    ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS˖+), capacidade antioxidante total, poder
    redutor, sequestro de radicais superóxido, quelação de íons metálicos (Cu2+ e Fe2+) e
    sequestro de radicais hidroxila. Nanoemulsões foram obtidas a partir de um
    planejamento experimental (2³+3PC) por métodos de baixa e alta energia de
    emulsificação, caracterizadas quanto ao tamanho de gotícula, polidispersividade e
    potencial zeta e avaliados quanto a sua estabilidade preliminar e acelerada em
    diferentes condições de armazenamento. O extrato apresentou compostos fenólicos,
    flavonoides e atividade antioxidante. Uma nanoemulsão cosmética estável por 90 dias
    foi obtida, contendo 20,0% de emoliente, 5,0% de tensoativos, 1,0% de conservante,
    0,5% do extrato hidroetanólico de Kalanchoe laciniata e 73,5% de água destilada.
    Após 90 dias em diferentes condições de temperatura as nanoemulsões produzidas
    pelo processo de alta energia foram consideradas estáveis. Dessa forma, os
    resultados indicam o potencial antioxidante do extrato hidroetanólico de Kalanchoe
    laciniata como uma matéria-prima cosmética para prevenção dos sinais do
    envelhecimento cutâneo, além de demonstrar a viabilidade de um produto cosmético
    inovador nanoemulsionado.


  • Mostrar Abstract
  • Kalanchoe laciniata (L.) DC. species (Crassulaceae), popularly known as saião and
    white coirama, is a small plant that is an easy cultivated plant that has in its chemical
    constitution active metabolites used in products to prevent the signs of skin aging. In
    cosmetics, the addition of plant active ingredients in nanoemulsified systems has
    received great prominence, due to the smaller droplet size, sensory and more pleasant
    physical aspect. Given this fact, this work aimed to develop cosmetic nanoemulsions
    with antioxidant activity to prevent skin aging, using hydroethanolic extract of
    Kalanchoe laciniata leaves. For this, a hydroethanolic turboextraction with 50% ethanol
    (v/v) was carried out using fresh leaves in a 1: 1 ratio (plant:solvent) (w/v). The extract
    obtained was quantitatively characterized in relation to the concentration of phenolics
    and total flavonoids. The antioxidant potential in vitro was evaluated using different
    antioxidant methodologies: 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) radical scavenging, 2,2′-
    Azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS˖+) radical scavenging, total
    antioxidant capacity, reducing power, superoxide radicals scavenging, Cu2+ and Fe2+
    chelation and hydroxyl radicals scavening. Nanoemulsions were obtained form an
    experimental design (2³ + 3PC) by low and high energy emulsification methods,
    characterized by droplet size, polydispersity and zeta potential and then evaluated for
    their preliminary and accelerated stability under different storage conditions. The
    extract showed the presence of phenolic compounds, flavonoids and antioxidant
    activity. A cosmetic nanoemulsion stable for 90 days was obtained, containing 20% of
    emollient, 5.0% of surfactants, 1% of preservative, 0.5% of the Kalanchoe laciniata
    hydroethanolic extract, and 73.59% distilled water. After 90 days in different
    temperature conditions the nanoemulsions produced by the high energy process were
    considered stable. Thus, the results indicate the antioxidante potential of the
    Kalanchoe laciniata hydroethanolic extract as a cosmetic raw material for preventing
    the signs of skin aging, as well as demonstrating the viability of an innovative
    nanoemulsified cosmetic product.

18
  • JOICE CASTELO BRANCO SANTOS
  • AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIPARASITÁRIA DE COMPOSTOS SINTÉTICOS À BASE DE BISFOSFONATOS EM Leishmania amazonensis

  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALINE RIMOLDI RIBEIRO
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • Data: 30/10/2020

  • Mostrar Resumo
  • A leishmaniose é uma das principais doenças tropicais negligenciadas causada por várias espécies de parasito do gênero Leishmania responsável por pelo menos doze milhões de casos de infecções em todo o mundo. Apesar de sua importância em termos de saúde pública, o tratamento dos pacientes é limitado e apresenta principalmente baixos níveis de eficácia e segurança. Os bisfosfonatos são compostos que inibem a enzima farnesil difosfato sintase (FPPS) que atua nos estágios iniciais da síntese do ergosterol que mantém a integridade da bicamada lipídica do parasito causador da doença. Nesse sentindo, o objetivo central deste projeto é avaliar a atividade antiparasitária de compostos sintéticos à base de bisfosfonatos em Leishmania amazonensis. Vinte quatro compostos cobrindo uma faixa de concentração de 100µM a 1µM foram avaliados contra promastigotas de L. amazonensis pelo período de 24 horas através do ensaio colorimétrico de resazurina, e os que obtiveram inibição superior a 50% da concentração inicial foram selecionados para determinação de valores de IC50. Além disso, foi avaliado o docking molecular frente a enzima FPPS de L. major e os possíveis mecanismos da atividade antiparasitária desses compostos. A triagem parasitária apresentou significativa redução na maior concentração nos compostos 1656 e 1662, com valores de inibição de 100 % (IC50 = 58,39 µM) e 88% (IC50 = 52,86 µM), respectivamente. No docking molecular os compostos 1656 e 1662 interagiram com a enzima FPPS através da ligação com pontes de hidrogênio. E no ensaio de dupla fixação por Anexina V-FITC e PI, o composto 1662 apresentou apoptose nas concentrações de 100 µM (3,84%) e 50 µM (1,75%) e necrose em 100 µM (17,7%) e 50 µM (12,4%). Apenas o composto 1656 apresentou necrose com os valores de 2,70 e 2,73%, na mesma sequência de concentração. Estes resultados denotam que compostos sintéticos à base de bisfosfonatos mostraram ser potenciais candidatos à quimioterapia da leishmaniose. Uma vez que as principais medidas de controle dessa doença são através de programas de tratamento terapêutico, este projeto encoraja novos estudos a identificar composto(s) ativo(s) para o controle da leishmaniose.


  • Mostrar Abstract
  • Leishmaniasis is one of the main neglected tropical diseases caused by several species of parasite of the genus Leishmania responsible for at least twelve million cases of infections worldwide. Despite its importance in terms of public health, treatment of patients is limited and has mainly low levels of efficacy and safety. Bisphosphonates are compounds that inhibit the enzyme farnesyl diphosphate synthase (FPPS) that acts in the initial stages of ergosterol synthesis that maintains the integrity of the lipid bilayer of the disease-causing parasite. In this sense, the main objective of this project is to evaluate the antiparasitic activity of synthetic compounds based on bisphosphonates in Leishmania amazonensis. Twenty four compounds covering a concentration range of 100µM to 1µM were evaluated against L. amazonensis promastigotes for a period of 24 hours through the colorimetric assay of resazurin, and those that obtained inhibition greater than 50% of the initial concentration were selected to determine values IC50. In addition, molecular docking was evaluated against the L. major FPPS enzyme and the possible mechanisms of the antiparasitic activity of these compounds. Parasitic screening showed a significant reduction in the highest concentration in compounds 1656 and 1662, with inhibition values of 100% (IC50 = 58.39 µM) and 88% (IC50 = 52.86 µM), respectively. In molecular docking, compounds 1656 and 1662 interacted with the FPPS enzyme by bonding with hydrogen bonds. And in the double fixation assay by Annexin V-FITC and IP, compound 1662 showed apoptosis at concentrations of 100 µM (3.84%) and 50 µM (1.75%) and necrosis at 100 µM (17.7%) and 50 µM (12.4%). Only compound 1656 showed necrosis with values of 2.70 and 2.73%, in the same concentration sequence. These results show that synthetic compounds based on bisphosphonates have been shown to be potential candidates for leishmaniasis chemotherapy. Since the main measures to control this disease are through therapeutic treatment programs, this project encourages further studies to identify active compound (s) for the control of leishmaniasis.

Teses
1
  • VALDJANE SALDANHA
  • PROBLEMAS RELACIONADOS A MEDICAMENTO
    EM PACIENTES ADMITIDOS EM HOSPITAL GERAL DE ENSINO: INCIDÊNCIA, CARACTERIZAÇÃO E FATORES DE RISCO

  • Orientador : ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PABLO DE MOURA SANTOS
  • ALDAIR DE SOUSA PAIVA
  • ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • LUCIA DE ARAUJO COSTA BEISL NOBLAT
  • ZENEWTON ANDRÉ DA SILVA GAMA
  • Data: 10/03/2020

  • Mostrar Resumo
  • Introdução: Problema Relacionado a Medicamento (PRM) interferem nos resultados terapêuticos ideais do paciente e podem estar associados a maior morbidade, mortalidade e gastos com saúde. Objetivo: Descrever a incidência de PRM, caracterizar quanto ao tipo e causa, avaliar a aceitabilidade das intervenções farmacêuticas, identificar fatores de risco nas primeiras 48 horas de admissão, desenvolver e validar um sistema de estratificação de risco de PRM. Método: Estudo coorte prospectivo realizado em um hospital geral de ensino, durante 2 anos, usando PCNE 6.2 para classificação de PRM detectados pela revisão de 100% das prescrições médicas. Para a identificação de fatores, a regressão logística reversa foi usada para determinar o conjunto de preditores independentes nas primeiras 48 horas após a admissão no conjunto de treinamento composto por 2/3 da população do estudo. O modelo foi validado na amostra restante. Resultados: A coorte de pacientes foi constituída por 9.303 pacientes, em um total de 12.286 episódios de hospitalização, com idade média de 52,6 ± 17,7 anos e 50,9% do sexo feminino. Foram identificados 3.373 DRP em 1.903 episódios hospitalares, uma incidência cumulativa de 15,5%. "Ineficácia do tratamento" (11,5%) e "Custo do tratamento" (5,90%) foram os PRM mais comuns e "Processo de uso de drogas" (18,4%) e "Duração do tratamento" (31,0%) as principais causas de PRM. Os medicamentos mais frequentemente envolvidos nos PRMs foram anti-infecciosos (36,0%), principalmente cefalosporinas (20,2%), anti-úlcera (38,6%), analgésicos/antipiréticos (61,2%), propulsivos (51,2%), opióides (38,5%) e antieméticos (57,4%). Das 1.939 intervenções farmacêuticas por comunicado escrito, pelo menos 21,4% não foram aprovadas pela equipe médica. A população do estudo para determinação dos fatores de risco foi composta por 1686 pacientes com idade entre 52,0 e 18,3 anos, 51,4% do sexo feminino, tempo médio de permanência de 3,24 dias e 4,5% de mortalidade hospitalar com incidência cumulativa de PRM potencial de 14,5%. A internação para cirurgia eletiva e o principal diagnóstico de doença do sistema circulatório estiveram associados à redução do risco PRM (OR 0,41 e 0,57, respectivamente, p <0,05). Frequência cardíaca ≥ 80 bpm (OR 1,41, p = 0,05), prescrição de sete ou mais medicamentos no dia 2 (OR 1,63, p = 0,05), prescrição no dia 1 de medicamentos do Código Anatômico Terapêutico Químico (ATC) classe A (trato alimentar e metabolismo, OR 2,24, p = 0,003), prescrição no dia 2 de dois ou mais medicamentos ATC classe A (OR = 3,52, p <0,001) e no dia 1 dos medicamentos ATC classe J (anti-infecciosos para uso sistêmico, OR 1,97, p = 0,001). No conjunto validação, a estatística-c do modelo preditivo foi 0,65, a sensibilidade foi 56,1% e a especificidade foi 65,2%. Conclusão: Os PRMs detectados pela revisão de 100% das prescrições médicas pelos farmacêuticos hospitalares ocorreram em proporção significativa dos episódios hospitalares, sendo mais frequentes os relacionados à efetividade e custos do tratamento. As cefalosporinas, penicilinas, antidispépticos, analgésicos, antipiréticos, opióides e antieméticos medicamentos foram os mais envolvidos em PRM. As intervenções farmacêuticas por comunicação escrita tiveram baixa aceitabilidade pela equipe médica. Foram identificados sete fatores de risco independentes de PRM potencial em pacientes hospitalizados que apresentaram desempenho preditivo justo para utilização na prática clínica.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: Drug-related Problem (DRP) interferes with the patient's ideal therapeutic results and may be associated with greater morbidity, mortality and health costs. Objective: The aim of study is describe incidence of DRP, their types and causes; in addition assess the acceptability of pharmaceutical interventions, identify risk factors in the first 48 hours of admission, develop and validate a DRP risk stratification system. Method: Prospective cohort study carried out in a general university hospital for 2 years, using PCNE 6.2 for classification of DRP detected by review of 100% of medical orders. For the identification of risk factors, logistic regression model was used to determine set of independent predictors in the first 48 hours after admission to the training set comprising 2/3 of the study population. The model was validated in the remaining sample. Results: The patient cohort consisted of 9,303 patients corresponding to 12,286 hospitalization episodes, with a mean age of 52.6 ± 17.7 years and 50.9% of female sex. 3,373 DRP were identified in 1,903 hospital episodes, a cumulative incidence of 15.5%. "Treatment ineffectiveness" (11.5%) and "Treatment cost" (5.90%) were the most common DRP, in addition "Drug use process" (18.4%) and "Treatment duration" (31. 0%) were the main causes of DRPs. The drugs most frequently involved in DRPs were anti-infectious (36.0%) like cephalosporins (20.2%), anti-ulcer (38.6%), analgesics / antipyretics (61.2%), propulsive (51.2%), opioids (38.5%) and antiemetics (57.4%). Of the 1,939 pharmaceutical interventions, at least 21.4% were not approved by the medical team. The study population for determining risk factors was composed of 1686 patients aged between 52.0 and 18.3 years, 51.4% female, mean length of stay of 3.24 days and 4.5% of hospital mortality with a cumulative incidence of potential DRP of 14.5%. Hospitalization for elective surgery and diagnosis of circulatory system disease were associated with reduced risk of DRP (OR 0.41 and 0.57, respectively, p <0.05). On the other hand, heart rate ≥ 80 bpm (OR 1.41, p = 0.05), prescription of seven or more medications on day 2 (OR 1.63, p = 0.05), prescription on day 1 of medications in the Therapeutic Anatomical Code Chemical (ATC) class A (alimentary tract and metabolism, OR 2.24, p = 0.003), prescription on day 2 of two or more ATC class A drugs (OR = 3.52, p <0.001) and on day 1 of class J ATC drugs (anti-infectives for systemic use, OR 1.97, p = 0.001) was associated to increase of DRP occurrence. In the validation set, the c-statistic of the predictive model was 0.65, the sensitivity was 56.1% and the specificity was 65.2%. Conclusion: The DRPs detected by the review of 100% of medical orders by hospital pharmacists occurred in a significant proportion of episodes, highlighting those related to effectiveness and costs of treatment. Cephalosporins, penicillins, antidispeptics, analgesics, antipyretics, opioids and antiemetics medications were the most involved in DRPs. Pharmaceutical interventions by written communication had low acceptability by the medical team. Seven independent risk factors for potential PRD were identified in hospitalized patients who had a fair predictive performance for use in clinical practice.

2
  • LUANDA BÁRBARA FERREIRA CANÁRIO DE SOUZA
  • EFEITO DO EXTRATO DE Eugenia uniflora SOBRE FATORES DE VIRULÊNCIA E CARACTERIZAÇÃO DA AÇÃO ANTIFÚNGICA EM ISOLADOS DE Candida spp. ORIUNDOS DA CAVIDADE ORAL DE RECEPTORES DE TRANSPLANTE RENAL

  • Orientador : GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA CAROLINA BARBOSA PADOVAN
  • ELIZABETH CRISTINA GOMES DOS SANTOS
  • GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • Data: 10/06/2020

  • Mostrar Resumo
  • A candidíase oral é uma importante manifestação clínica em rececptores de transplante renal. Candida spp. possuem fatores de virulência que contribuem para o processo infeccioso, incluindo a capacidade de aderir a células epiteliais e de formar de biofilme em superfícies bióticas e abióticas. Devido ao limitado arsenal de antifúngicos disponíveis no mercado, as reações adversas e o surgimento de espécies resistentes, torna-se necessário encontrar novos antifúngicos que atuem em alvos alternativos, ou de forma sinérgica aos atuais antifúngicos e que possuam menor toxicidade. Nesse contexto, os produtos naturais têm ganhado importância. O extrato obtido a partir das folhas de Eugenia uniflora [acetona: água (7:3, v/v)] tem demonstrado atividade antifúngica contra Candida spp.. Portanto, este estudo objetivou avaliar o efeito do extrato de E. uniflora sobre fatores de virulência in vitro e caracterizar a ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal. O extrato de E. uniflora foi caracterizado por cromatografia líquida de alta eficiência. Cepas de Candida spp. pertencentes a um banco de microrganimos foram reativadas e utilizadas nas análises. A determinação da concentração inibitória mínima do extrato foi realizada pelo método de microdiluição em caldo. Ensaios de toxicidade frente a eritrócitos e células epiteliais bucais humanas (CEBH) foram realizados a partir da determinação do índice de hemólise e da contagem de 150 CEBH em microscópio óptico, respectivamente. Para os ensaios de virulência in vitro, as leveduras foram cultivadas na presença e ausência de 1000 μg/mL do extrato. A adesão foi quantificada usando o número de células de Candida aderidas a 150 CEBH determinadas por microscópio óptico. A formação de biofilme foi avaliada usando duas metodologias: XTT (2,3-bis (2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil) -2H-tetrazólio-5-carboxanilida) e o ensaio do cristal violeta, sendo analisado posteriormente por microscopia eletrônica de varredura. A hidrofobicidade da superfície celular (HSC) foi quantificada com o teste de adesão microbiana a hidrocarbonetos. Realizaou-se análise in silico para predição de atividade antifúngica dos compostos majortitarios determinados no extrato. Determinou-se a CIM quando na presença de ergosterol exógeno, bem como em ambiente osmoprotegido por sorbitol (0,8 M). A ação do extrato na parede celular foi avaliada a partir do crescimento das células tratadas com extratdo de E.uniflora em ASD acrescido de calcofluor, vermelho congo e dodecil sulfato de sódio (SDS). Avaliou-se a perda de integridade da membrana utilizando-se a marcação com o iodeto de propídio (IP). A ação combinada do extrato de E. uniflora com o Fluconazol, a Micafungina e o Ácido gálico foi determinada pelo método checkerboard e por fim foi determinada a curva de morte de Candida spp. tratadas com o extrato de E. uniflora e em combinação em função do tempo. O extrato de E. uniflora foi capaz de inibir em 50% o crescimento das células de Candida spp. e possui dois compostos majoritários: miricitrina e ácido gálico. Mostrou-se não citotóxico aos eritrócitos e CEBH. Reduziu a adesão as CEBH e HSC para as espécies de Candida albicans e Candida não-Candida albicans. Também observou-se uma capacidade reduzida estatisticamente significativa para formar biofilmes usando os dois métodos de quantificação. Análise in silico demonstrou que não há alvos moleculares que correlacionem a miricitrina à ação antifúngica do extrato de E. uniflora, já o ácido gálico demonstrou ligação a enzima CPY51 presente na célula fúngica. O extrato aumentou discretamente as CIM quando realizado o ensaio de ligação ao ergosterol, descartando a ligação direta do extrato com essa molécula. No ensaio na presença do sorbitol, os valores de CIM para o extrato foram aumentados, sugerindo-se que um dos possíveis mecanismos de ação seja atuar na parede celular fúngica. O tratamento das células de Candida com o extrato conferiu resistência frente aos perturbadores de parede celular. Houve perda de integridade da membrana celular fúngica quando células tratadas com o extrato foram coradas com IP. O extrato de E. uniflora apresentou ação sinérgica aditiva quando combinado com o Fluconazol e a Micafungina. A combinação com o ácido gálico apresentou um efeito indeterminado (sem interação). A curva de morte das células tratadas com o extrato demonstrou uma diminuição na contagem do número de UFC em 48 horas e a combinação do extrato de E. uniflora com o fluconazol resultou em uma queda significativa na contagem de UFC. O extrato de E. uniflora pode de alguma forma estar perturbando a membrana celular, tendo visto a perda de integridade da membrana verificada no ensaio com marcação com IP. Entretanto, aparentemente esse processo não se dá através da ligação direta ao ergosterol, ou somente pela inibição da enzima CYP51 (14 α-demetilase), ação atribuída ao ácido gálico nas análises in silico. O extrato interage em nível de parede celular fúngica, haja visto o aumento da CIM no ensaio com o sorbitol e a discreta diminuição de crescimento para algumas cepas no ensaio com os perturbadores de parede celular. O extrato de E. uniflora mostrou-se promissor como uma plausível alternativa de terapia combinada com o fluconazol para o tratamento de candidíase oral. Mais análises devem ser realizadas para confirmação das evidências apresentadas pelos ensaios realizados quanto ao mecanismo de ação do extrato de E. uniflora.


  • Mostrar Abstract
  • Oral candidiasis is an important clinical manifestation in kidney transplant recipients. Candida spp. it has virulence factors that contribute to the infectious process, including the ability to adhere to epithelial cells and form biofilm on biotic and abiotic surfaces. Considering the limited arsenal of antifungals available on the market, such as adverse and resistant species surgeries, it becomes necessary to find new antifungals that reach alternative targets, or synergistically to antifungals and that have less toxicity. In this context, natural products have gained importance. The extract activated from the leaves of Eugenia uniflora [acetone: water (7: 3, v/v)] has demonstrated antifungal activity against Candida spp.. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of E. uniflora extract on virulence factors in vitro and to characterize the antifungal action in Candida spp. from the oral cavity of kidney transplant recipients. The E. uniflora extract was characterized by high performance liquid chromatography. Strains of Candida spp. belonging to a microorganism bank were reactivated and used in the analysis. The determination of the minimum inhibitory concentration of the extract was carried out by the broth microdilution method. Toxicity tests against erythrocytes and human epithelial bucal cells (HEBC) were carried out by determining the hemolysis index and counting 150 HEBC in an optical microscope, respectively. For in vitro virulence assays, yeasts were grown in the presence and absence of 1000 μg/mL of the extract. Adherence was quantified using the number of Candida cells adhered to 150 CEBH determined by an optical microscope. The biofilm formation was evaluated using two methodologies: XTT (2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl) -2H-tetrazolium-5-carboxanilide) and the violet crystal assay, being analyzed later by scanning electron microscopy. The cell surface hydrophobicity (CSH) was quantified with the microbial adhesion test to hydrocarbons. In silico analysis was performed to predict antifungal activity of the major compounds determined in the extract. MIC was determined when in the presence of exogenous ergosterol, as well as in an osmoprotected environment by sorbitol (0.8 M). The action of the extract on the cell wall was evaluated from the growth of the cells treated with E. uniflora extract in ASD plus calcofluor, Congo red and sodium dodecyl sulfate (SDS). The loss of membrane integrity was assessed using propidium iodide (PI) staining. The combined action of E. uniflora extract with Fluconazole, Micafungin and Gallic acid was determined by the checkerboard method and finally, the time-kill curve of Candida spp. treated with E. uniflora extract and in combination with others antifungals drugs. E. uniflora extract was able to inhibit the growth of Candida spp cells by 50% and it has two marjoritary compounds: myricitrin and gallic acid. It was shown to be non-cytotoxic to erythrocytes and HEBC. Reduced adherence to HEBC and HSC for all Candida species was shown. There was also a statistically significant reduced ability to form biofilms using both methods of quantification. In silico analysis demonstrated that there are no molecular targets that correlate myricitrin to the antifungal action of E. uniflora extract, while gallic acid demonstrated a link to the CPY51 enzyme present in the fungal cell. The extract slightly increased MIC when the ergosterol binding assay was performed, discarding the direct binding of the extract with this molecule. In the assay in the presence of sorbitol, the MIC values for the extract were increased, suggesting that one of the possible mechanisms of action is to act on the fungal cell wall. The treatment of Candida cells with the extract conferred resistance to cell wall disturbers. There was a loss of fungal cell membrane integrity when cells treated with the extract were stained with PI. E. uniflora extract showed an additive synergistic action when combined with Fluconazole and Micafungin. The combination with gallic acid had an indeterminate effect (without interaction). The time-kill curve of the cells treated with the extract demonstrated a decrease in the number of CFU count in 48 hours and the combination of E. uniflora extract with fluconazole resulted in a significant drop in the CFU count. The E. uniflora extract may in some way be disturbing the cell membrane, having seen the loss of membrane integrity seen in the PI labeled assay. However, this process apparently does not occur through direct binding to ergosterol or only by inhibiting the enzyme CYP51 (14 α-demethylase), an action attributed to gallic acid in in silico analyzes. The extract interacts at the fungal cell wall level, having seen the increase in MIC in the sorbitol assay and the slight decrease in growth for some strains in the assay with cell wall disturbers. E. uniflora extract has shown promise as a great alternative therapy combined with fluconazole for the treatment of oral candidiasis. Further analysis should be carried out to confirm the evidence presented by the tests carried out regarding the mechanism of action of E. uniflora extract.

3
  • THALITA SÉVIA SOARES DE ALMEIDA MAGALHÃES
  • COMPLEXOS DE INCLUSÃO DO ÓLEO DE Euterpe oleracea Mart. EM (β-) E (HPβ-) CICLODEXTRINAS E AÇÃO ANTIOXIDANTE, ANTI-INFLAMATÓRIA E MODULATÓRIA ANTIBACTERIANA

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • BOLIVAR PONCIANO GOULART DE LIMA DAMASCENO
  • FABIO ROCHA FORMIGA
  • JOSÉ LAMARTINE SOARES SOBRINHO
  • TULIO FLAVIO ACCIOLY DE LIMA E MOURA
  • Data: 19/06/2020

  • Mostrar Resumo
  • O óleo de Euterpe oleraceae Mart. (OEO), conhecido como óleo de açaí, é comumente utilizado pela indústria de alimentos e cosméticos. À sua composição, por ácidos graxos e metabólitos fenólicos e fitoesteróides, é atribuída importantes atividades biológica, como antioxidante, antimicrobiano, ainti-inflamatório e antiproliferativo. Entretanto, o seu emprego pela indústria farmacêutica é limitada por características físico-químicas, como baixa solubilidade e instabilidade física. Complexos de inclusão têm sido utilizados para incrementar solubilidade, estabilidade e atividades biológicas de óleos vegetais. Portanto, objetivou-se no presente trabalho a obtenção e caracterização físico-química de complexos de inclusão com óleo em β-ciclodextrina (OEO-β-CD) e hidroxipropil-β-ciclodextrina (OEO-HPβ-CD) e testá-los quanto sua atividade antimicrobiana, antioxidante e anti-inflamatória. Procedeu-se a caracterização química do OEO por Cromatografia gasosa acoplada ao detector de ionização por chama (CG-FID). Determinou-se a energia de interação entre o ácido oleico e ciclodextrinas pela dinâmica molecular. Os complexos foram desenvolvidos pelos métodos de malaxagem (MX) e slurry (SL) e caracterizados por Espectroscópica de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Difratograma de Raio-X (DR-X), Análise Termogravimétrica (TG) e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC). Avaliou-se a atividade antibacteriana expressa em Concentração Inibitória Mínima (CIM) e modulatória de drogas com concentração subinibitória (MIC/8) contra Staphylococcus aureus (ATCC 25932), Enterococcus faecales (ATCC 29212), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Escherichia coli (ATCC 25922), atividade antioxidante (in vitro) e anti-inflamatória pelos métodos de edema de pata e bolsa de ar, em camundongo Swiss. A CG-FID apresentou o ácido oleico (47,58%), como o principal constituinte do óleo. Complexos de inclusão com β-CD e HP-β-CD demonstraram eficiência de encapsulação, com uma melhor energia de interação entre ácido oleico e β-CD (-41,28 ± 0,57 kJ/mol). FTIR mostrou deslocamentos nos números de onda e uma variação na intensidade de pico característica da ciclodextrina e OEO. As caracterizações morfológicas e cristalinas, em MEV e DR-X, exibiram-se variações na forma, aparência e perfil amorfo dos complexos em comparação com ciclodextrinas isoladamente. Análises de TG e DSC mostraram variações de temperatura nas perdas de massa e variações de entalpia entre OEO, ciclodextrinas e complexos de inclusão, confirmando a formação de complexos de inclusão. Valores de CIM revelaram maior atividade antibacteriana dos complexos em comparação o óleo isolado. A resposta modulatória de OEO e OEO-β-CD preparada por MX, bem como de OEO-β-CD e OEO-HP-β-CD preparados por SL mostraram um efeito sinérgico à ampicilina contra E. coli, embora manteve a atividade biológica de outros antibióticos testados. A ação antioxidante demonstrou-se potencializar atividade quelante de Fe2+, quando usado OEO-βCD (SL), enquanto a atividade de sequestro de radical OHdemonstrou efeito sinergismo entre a ciclodextrina e óleo com uso do OEO-HP-β-CD (MX). A atividade edematogênica e índices de mieloperoxidade, em modelo de edema de pata, e índices de leucócitos, mieloperoxidade, glutationa dissulfeto, em modelo de bolsa de ar, foram diminuídas, enquanto interleucina-10 foi aumentada neste mesmo modelo, sugerindo que OEO-β-CD potencializou o efeito anti-inflamatório exibido pelo OEO. As respostas farmacológicas exibidas pelos complexos são amplamente relevantes, uma vez que subsidia estudos para o desenvolvimento de novas formulações farmacêuticas.


  • Mostrar Abstract
  • The Euterpe oleraceae Mart. oil (EOO), known as açaí oil, is commonly used by the food and cosmetics industry. Its composition, of fatty acids, polyphenolics and phytosteroid metabolites, is attributed important biological activities, such as: antioxidant, antimicrobial, anti-inflammatory and antiproliferative. However, its use by the pharmaceutical industry is limited by unwanted physicochemical characteristics. Inclusion complexes have been used to increase solubility, stability and biological activities of vegetable oils. Therefore, the objective of the present work was to obtain a physicochemical characterization of inclusion complexes with oil in β-cyclodextrin (EOO-β-CD) and hydroxypropyl-β-cyclodextrin (EOO-HP-β-CD) and test them regarding the increase of antimicrobial, antioxidant and anti-inflammatory activity. Chemical characterization of the EOO was carried out by gas chromatography coupled to a flame ionization detector (CG-FID). The interaction energy between oleic acid and cyclodextrins was determined by molecular dynamics. The complexes were developed by the methods of kneading (KND) and slurry (SL) and characterized by Infrared Spectroscopy with Fourier Transform (FTIR), Scanning Electron Microscopy (SEM), X-Ray Diffractogram (DR-X), Thermogravimetric Analysis (TG) and Differential Scanning Calorimetry (DSC). The antibacterial activity was expressed in Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and modulatory drugs with sub-inhibitory concentration (MIC/8) against Staphylococcus aureus (ATCC 25932), Enterococcus faecales (ATCC 29212), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Escherichia coli (ATCC 25922), antioxidant (in vitro) and anti-inflammatory activity by the methods of paw edema and air sac in Swiss mouse. CG-FID presented oleic acid (47.58%) as the main constituent of the oil. Inclusion complexes with β-CD and HP-βCD demonstrated encapsulation efficiency, with a better interaction energy between oleic acid and β-CD (-41.28 ± 0.57 kJ/mol). FTIR showed shifts in wave numbers and a variation in the peak intensity characteristic of cyclodextrin and EOO. The morphological and crystalline characterizations, in SEM and DR-X, showed variations in the shape, appearance and amorphous profile of the complexes in comparison with cyclodextrins alone. TG and DSC analysis showed variations in temperature in mass losses and variations in enthalpy between EOO, cyclodextrins and inclusion complexes, confirming the formation of inclusion complexes. MIC values showed greater antibacterial activity of the complexes compared to the isolated oil. The modulatory response of EOO and EOO-β-CD prepared by KND, as well as of EOO-β-CD and EOO-HP-β-CD prepared by SL showed a synergistic effect to ampicillin against E. coli, although it maintained biological activity of other tested antibiotics. The antioxidant action has been shown to enhance Fe2+ chelating activity when EOO-β-CD (SL) is used, while the OHradical scavenging activity of EOO-HP-β-CD (MX) has shown a synergistic effect between the cyclodextrin and the oil. The edematogenic activity and myeloperoxity indexes, in the paw edema model; and leukocyte index, myeloperoxity, glutathione disulfide, in the air bag model, were decreased, while interleukin-10 was increased in this same model, suggesting that EOO-β-CD enhanced the anti-inflammatory effect exhibited by EOO. The pharmacological responses displayed by the complexes are highly relevant, since it supports studies for the development of new pharmaceutical formulations.

4
  • EDNALDO GOMES DO NASCIMENTO
  • DESENVOLVIMENTO E AVALIAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA E MECÂNICA DE MEMBRANAS DE QUITOSANA CONTENDO SISTEMAS MULTICOMPONENTES DE TRIANCINOLONA ACETONIDA

  • Orientador : ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ÁLVARO FEDERICO JIMENEZ KAIRUZ
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MARCELA RAQUEL LONGHI
  • RAQUEL DE MELO BARBOSA
  • RICARDO NEVES MARRETO
  • Data: 30/07/2020

  • Mostrar Resumo
  • A triancinolona acetonida é um corticosteroide utilizado no tratamento de ulcerações tópicas. Apesar de seu uso na terapia tópica, apresenta problemas de solubilidade dificultando sua utilização em formas farmacêuticas de uso oral e tópica. Os agentes solubilizantes, como as ciclodextrinas e trietanolamina apresentam capacidade de promover uma melhor solubilidade deste fármaco, enquanto que a membrana de quitosana permite incorporar ativos e modificar sua liberação, modulando seu perfil biofarmacêutico. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver membranas de quitosana capazes de incorporar sistemas multicomponentes com liberação sustentada da triancinolona acetonida, com o intuito de promover o possível tratamento de estomatites aftosas recorrentes menores. As membranas de quitosana foram preparadas pelo método de evaporação do solvente (casting), na qual a incorporação da triancinolona acetonida foi realizada através da dispersão prévia deste fármaco em soluções de hidroxipropil beta-ciclodextrina ou beta-ciclodextrina (sistemas binários) contendo ou não a trietanolamina (sistema ternário). As membranas foram caracterizadas por microscopia de força atômica (AFM), microscopia eletrônica de varredura (MEV-FEG), espectroscopia de absorção na região do infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), percentual de intumescimento, medidas do pH da superfície, difração de raios X (DRX), ensaio de tração e análise térmica (DSC e ATG/DTG). Todos os sistemas propostos desenvolvidos apresentaram características físico-químicas parecidas. O ensaio de performance de liberação in vitro da triancinolona acetonida foi realizado em células do tipo Franz, obtendo uma quantidade liberada que variou de 56 a 273 μg/mL após o período de 24h. A quantificação liberada da triancinolona foi feita pela cromatografia liquida de ultra eficiência (UPLC). Dos modelos matemáticos cinéticos utilizados, o Bhaskar e Difusão parabólica representaram melhor o comportamento de liberação dos sistemas estudados. Dentre os sistemas desenvolvidos e avaliados, a incorporação da triancinolona acetonida nas membranas de quitosana na forma de sistema ternário apresentou-se mais promissor como sistema de liberação sustentada.


  • Mostrar Abstract
  • Triamcinolone is a corticosteroid used to treat topical ulcerations. Despite its use in topical therapy, it presents problems of solubility making it difficult to use in oral and topical dosage forms. Solubilizing agents, such as cyclodextrins and triethanolamine can promote better solubility of this drug, while the chitosan membrane allows incorporating assets and modifying their release, modulating their biopharmaceutical profile. The aim of the present work was to develop chitosan membranes capable of incorporating multicomponent systems with sustained release of triamcinolone acetonide, to promote the possible treatment of minor recurrent aphthous stomatitis. The chitosan membranes were developed using the solvent evaporation method (casting), in which the incorporation of triamcinolone acetonide was carried out through the previous dispersion of this drug in hydroxypropyl beta-cyclodextrin or beta-cyclodextrin solutions (binary systems) containing or not triethanolamine (ternary system). The membranes were characterized by atomic force microscopy (AFM), scanning electron microscopy (SEM-FEG), absorption spectroscopy in the infrared region with Fourier transform (FTIR), percentage of swelling, surface pH measurements, X-ray diffraction (DRX), tensile test and thermal analysis (DSC and ATG / DTG). All the proposed systems developed had similar physical-chemical characteristics. The in vitro release performance test for triamcinolone acetonide was carried out on cells of the Franz type, obtaining a quantity released that varied from 56 to 273 μg / mL after the 24h period. The quantification released for triamcinolone was done by ultra-performance liquid chromatography (UPLC). Of the kinetic mathematical models used, Bhaskar and parabolic diffusion best represented the release behavior of the studied systems. Among the systems developed and evaluated, incorporating triamcinolone in the chitosan membranes in the form of a ternary system was more promising as a sustained release system.

5
  • BARBARA CABRAL
  • AVALIAÇÃO DA COMPOSIÇÃO QUÍMICA E DO PERFIL TOXICOLÓGICO E FARMACOLÓGICO DOS EXTRATOS OBTIDOS DO RESÍDUO INDUSTRIAL DOS FRUTOS DE Passiflora edulis f. flavicarpa O. Deg.

  • Orientador : SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • EDILSON DANTAS DA SILVA JUNIOR
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • LEOPOLDO CLEMENTE BARATTO
  • FOUED SALMEN ESPINDOLA
  • Data: 28/08/2020

  • Mostrar Resumo
  • A hipertensão e a Diabetes Mellitus são doenças em ascensão no mundo e podem causar várias complicações cardiovasculares. Diversos fármacos apresentam eficácia no tratamento dessas doenças, entretanto, muitos apresentam efeitos adversos e limitações de eficácia. O pericarpo do fruto de P. edulis f. flavicarpa O. Degener (maracujá amarelo), considerado um resíduo da indústria alimentícia é rico em compostos bioativos. Assim, devido à necessidade da busca por novos tratamentos para a hipertensão e diabetes, e com o intuito de estimular o desenvolvimento de fitoterápicos com espécies nativas do Brasil, o estudo teve como objetivo avaliar a composição fitoquímica, o perfil de toxicidade e o potencial efeito farmacológico de extratos do pericarpo em modelo não clínico de hipertensão e de diabetes. Para atingir os objetivos, a metodologia do estudo foi dividida nas seguintes partes: i: estudo fitoquímico, avaliação da atividade antioxidante in vitro e a avaliação da toxicidade oral aguda ii: avaliação não clínica da atividade antihipertensiva em modelo ex vivo de artérias isoladas e em modelo crônico de ratos espontaneamente hipertensos; iii avaliação não clínica aguda e crônica da atividade antidiabética em modelos de diabetes tipo 1, induzido por streptozotocina. Para o desenvolvimento do estudo foram produzidos dois extratos, um aquoso, preparado por decocção (AFA) e um hidroetanólico (AFM), obtido por maceração, a partir da farinha do pericarpo (pericarpo seco e triturado) de P. edulis. Os metabólitos secundários dos extratos foram identificados por CCD, CLUE-UV/DAD e CLAE-ESI-MSn, sendo os flavonoides C-glicosilados os metabólitos secundários mais encontrados em AFA e AFM. Dentre os flavonoides identificados, foi possível quantificar o teor de vicenina-2, orientina, isoorientina, vitexina e isovitexina por CLAE-QqQ-MS/MS. O polissacarídeo pectina foi encontrado apenas no extrato AFA, através de cromatografia de exclusão estérica de alto desempenho e RMN, o seu teor foi de 34,3%. De acordo com os resultados obtidos da avaliação da toxicidade oral aguda, os extratos AFA e AFM foram classificados na categoria 5 pelo GSH (Globally Harmonised Classification System for Chemical Substances and Mixtures) com DL50 >2000mg/kg, visto que, não apresentaram sinais de toxicidade aguda. O ensaio de avaliação antioxidante in vitro mostrou que os extratos tem boa atividade antioxidante pelos ensaios de CAT, poder redutor e DPPH. Na avaliação do efeito antihipertensivo foi verificado em modelo ex vivo de artéria isolada que o extrato AFM apresentou o melhor perfil de vasorelaxamento, quando comparado com AFA, esse efeito pode ser devido à abertura dos canais de potássio. Além disso, o extrato AFM nas doses 200 e 400 mg/Kg mostrou efeito hipotensivo significativo após 28 dias de tratamento e melhorou a função vascular em artéria mesentérica. Isso foi verificado pela diminuição da hipercontratilidade vascular e aumento do efeito vasorelaxante em resposta ao nitroprussiato de sódio e a Acetilcolina. Houve também uma diminuição na disfunção endotelial que pode ser atribuída ao aumento da biodisponibilidade do óxido nítrico. Assim, nossa hipótese é que todos esses efeitos foram capazes de contribuir para a redução da resistência vascular periférica, causando um efeito hipotensivo significativo. Estes resultados são inéditos para o pericarpo de P. edulis. Além disso, houve uma diminuição nos níveis plasmáticos de MDA no coração e um aumento da glutationa, sugerindo uma diminuição no estresse oxidativo, bem como um aumento no plasma de citocinas anti-inflamatórias como a IL-10. Na avaliação aguda da atividade antidiabética, observou-se que os extratos AFA e AFM nas doses de 400 e 600 mg/Kg de forma adjuvante a insulina conseguiram reduzir de forma significativa a glicemia, quando comparado aos ratos diabéticos que receberam apenas a insulina, sendo esse efeito mais significativo com tratamento com AFA. No estudo crônico de 60 dias esse efeito foi confirmado sendo observado uma redução significativa da glicemia com o tratamento dos extratos AFA e AFM na dose de 400 mg/Kg. Foi verificado ainda uma diminuição do MDA no fígado e uma dimunição de MPO no coração e rim, sugerindo que os extratos podem agir diminuindo o extresse oxidativo e a inflamação ocasionada na diabetes. A fibrose renal também foi diminuída com o tratamento crônico. Portanto, os estudos toxicológicos e farmacológicos apontaram que o extrato AFA e AFM, obtido de um resíduo industrial mostrou-se seguro e tem potencial para a obtenção de novos fitoterápicos com ação na hipertensão e na diabetes tipo 1.


  • Mostrar Abstract
  • Hypertension and Diabetes Mellitus are diseases on the rise in the world and can cause several cardiovascular complications. Several drugs have efficacy in the treatment of these diseases, however, many have adverse effects and limitations of efficacy. The peel of the fruit of P. edulis f. flavicarpa O. Degener (yellow passion fruit), considered a waste from the food industry, is rich in bioactive compounds. Thus, due to the need to search for new treatments for hypertension and diabetes, and in order to stimulate the development of herbal medicines with species native to Brazil, the study aimed to evaluate the phytochemical composition, the toxicity profile and the pharmacological potential of P. edulis peel extracts in non-clinical models of hypertension and diabetes. Methodology was divided into the following parts: i: phytochemical study, assessment of antioxidant activity in vitro and acute oral toxicity ii: non-clinical assessment of antihypertensive activity in an ex vivo model of isolated arteries and in chronic model of spontaneously hypertensive rats; iii acute and chronic non-clinical evaluation of antidiabetic activity in models of type 1 diabetes, induced by streptozotocin. Two extracts were produced (aqueous, prepared by decoction-AFA and hydroethanolic -AFM, obtained by maceration) from the peel flour (dry and crushed peel) of P. edulis. Phytochemical analysis was performerd by CCD, UHPLC/UV-DAD and HPLC-ESI-MSn. In both extracts C-glycosylated flavonoids were identified. Among the identified flavonoids, it was possible to quantify the content of vicenin-2, orientin, isoorientin, vitexin and isovitexin by HPLC-QqQ-MS/MS. The polysaccharide pectin was found only in the AFA extract, through high performance steric exclusion chromatography and NMR, its content was 34.3%. According to the results obtained in acute oral toxicity, extracts were classified in category 5 by GSH (Globally Harmonized Classification System for Chemical Substances and Mixtures) with LD50> 2000mg/kg, since they did not show signs of acute toxicity. The in vitro antioxidant assay showed that the extracts have good antioxidant activity observed by TAC, reducing power and DPPH tests. In the evaluation of the antihypertensive effect, it was verified in an ex vivo model of isolated artery that the AFM extract had the best relaxation profile, when compared to AFA. It effect may be due to the opening of the potassium channels. In addition, the AFM extract at doses 200 and 400 mg/kg, orally, showed a significant hypotensive effect after 28 days of treatment and improved vascular function in the mesenteric artery. This was verified by a decrease in vascular hypercontractility and an increase in the vasorelaxant effect in response to sodium nitroprusside and acetylcholine. There was also a decrease in endothelial dysfunction that can be attributed to the increased bioavailability of nitric oxide. Thus, our hypothesis is that all these effects were able to contribute to the reduction of peripheral vascular resistance, causing a significant hypotensive effect. These results are unprecedented for the pericarp of P. edulis. In addition, there was a decrease in plasma MDA levels in the heart and an increase in glutathione, suggesting a decrease in oxidative stress, as well as an increase in plasma of anti-inflammatory cytokines such as IL-10. In the acute in vivo antidiabetic model, it was observed that the extracts at doses of 400 and 600 mg/kg associated with insulin were able to significantly reduce blood glucose, when compared to diabetic rats that received only insulin, being this effect more significant with AFA treatment. In the chronic antidiabetic model, the treatment with the extracts during 60 days caused a significant reduction in glycemia observed at a dose of 400 mg/kg. In addition, extracts decreased MDA in the liver and MPO in the heart and kidney, suggesting that the extracts may act by reducing oxidative stress and inflammation caused in diabetes. Renal fibrosis was also reduced with chronic treatment. Taken together, toxicological and pharmacological studies proved the safe and the potential effect of P.edulis peel fruit extracts in development new phytoterapics.

6
  • MARIANA BORGES LOPES
  • REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO DE Pla2g2a ATRAVÉS DO USO DE MIMÉTICOS DE rno-miR-214-3p NA CARDIOMIOPATIA DIABÉTICA

  • Orientador : ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALICE CRISTINA RODRIGUES
  • ALVARO DANILO CERDA MAUREIRA
  • ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 29/09/2020

  • Mostrar Resumo
  • A hiperglicemia sistêmica causada pelo diabetes leva a um processo inflamatório e disfunções cardiovasculares inclundo a a cardiomiopatia diabética (CMD). O presente estudo objetivou buscar através de análises in silico, RNAms e miRNAs diferentemente expressos na CMD e, in vitro e in vivo, validar o papel do rno-miR-214-3p através da regulação da fosfolipase A2 do grupo IIA (Pla2g2a) no processo inflamatório decorrente da hiperglicemia. Bancos de dados de microarray do Gene Expression Omnibus (GSE4745 e GSE44179) e ferramentas como Ingenuity Pathway Analysis e TargetScan 7.1 foram usados para predizer interações miRNA-RNAm relacionadas à CMD. Com isso, foi avaliada a expressão de rno-miR-214-3p, Pla2g2a e Il6 no ventrículo esquerdo (VE) ratos Wistar com diabetes induzido por estreptozotocina (40 mg/kg, i.v.) e cultura de células H9c2 em condições normoglicêmicas (NG, 5,5 mmol/L de glicose), hiperglicêmicas (25 mmol/L de glicose) e transfectadas com rno-miR-214-3p mimético em meio hiperglicêmico para validar os resultados in silico. RNA total e proteínas foram extraídos das amostras e a expressão avaliada por RT-qPCR e Western Blotting. Fibrose foi caracterizada pelo aumento da deposição de colágeno no espaço intersticial no miocárdio de ratos diabéticos (p = 0,023). A hiperglicemia reduziu a expressão do rno-miR-214-3p (p = 0,043 e p = 0,020) e aumentou de Pla2g2a (p = 0,016 e p = 0,043) e Il6 (p = 0,016 and p = 0,011) no VE dos ratos e nas células H9c2, respectivamente. A expressão das proteínas sPLA2-IIA (p = 0,011) e IL-6 (p = 0,011) também estava aumentada no VE dos ratos diabéticos. Expressão de Pla2g2a e sPLA2-IIA tiveram correlação positiva com a hiperglicemia e expressão de Il6 (p < 0,05). A transfecção de células H9c2 com mimético aumentou a expressão de rno-miR-214-3p e reduziu a expressão de Pla2g2a e Il6 em meio hiperglicêmico (mimético a 50 nM/24 h). O presente estudo confirmou nossos resultados in silico, hiperglicemia leva à redução da expressão de rno-miR-214-3p e aumento de seu gene alvo Pla2g2a. O aumento na expressão de rno-miR-214-3p reduziu a expressão de Pla2g2a e Il6, indicando que miR-214/Pla2g2a/Il6 podem ser uma via de inflamação associada ao desenvolvimento de CMD.


  • Mostrar Abstract
  • Systemic hyperglycemia caused by diabetes leads to an inflammatory process and cardiovascular dysfunctions including diabetic cardiomyopathy (DCM). The present study aimed to search through in silico analyzes, mRNAs and miRNAs differently expressed in DCM and, in vitro and in vivo, to validate the role of rno-miR-214-3p through the regulation of phospholipase A2 of group IIA (Pla2g2a) in inflammatory process resulting from hyperglycemia. Thus, the expression of rno-miR-214-3p, Pla2g2a and Il6, was avaliated in Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes (40 mg / kg, iv) left ventricle (LV) and in H9c2 cell culture under normoglycemic conditions (NG , 5.5 mmol / L glucose), hyperglycemic (25 mmol / L glucose) and transfected with rno-miR-214-3p mimetic in hyperglycemic medium to validate the in silico data. Total RNA and proteins were extracted from the samples and gene expression was evaluated by RT-qPCR and Western Blotting. Fibrosis was characterized by increased collagen deposition in interstitial space in the myocardium of diabetic rats (p=0.023). Hyperglycemic conditions resulted in downregulation of rno-miR-214-3p (p=0.043 and p=0.020) and upregulation of Pla2g2a (p=0.016 and p=0.043) and Il6 (p=0.016 and p=0.011) in rat LV and H9c2 cells, respectively. Protein expression of sPLA2-IIA (p=0.011) and IL-6 (p=0.011) was also increased in LV of diabetic rats. mRNA and protein expression of Pla2g2a correlated positively with glycaemia and Il6 expression (p<0.05). Transfection of H9c2 cells with mimic increased rno-miR-214-3p and reduced Pla2g2a and Il6 expression under HG concentrations (50 nM for 24 h). The present study confirmed our in silico results in which, hyperglycemia leads to a reduction in the expression of rno-miR-214-3p and an increase in its target gene Pla2g2a. The increase in rno-miR-214-3p expression reduced the expression of Pla2g2a and Il6, indicating that miR-214 / Pla2g2a / Il6 may be a pathway of inflammation associated with the development of DCM.

7
  • FERNANDA ÍLARY COSTA DUARTE
  • DESENVOLVIMENTO DE COMPLEXOS DE INCLUSÃO MULTICOMPONENTES COM ÁCIDO FERÚLICO E OBTENÇÃO DE MEMBRANA SINTÉTICA OTIMIZADA PARA AVALIAÇÃO DO PERFIL DE LIBERAÇÃO DE FORMULAÇÕES SEMISSÓLIDAS

  • Orientador : ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANDRÉ LUIS MENEZES CARVALHO
  • ADLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
  • ATTILIO CONVERTI
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • RICARDO NEVES MARRETO
  • Data: 30/10/2020

  • Mostrar Resumo
  • O ácido ferúlico (AF) é um constituinte fitoquímico pertencente ao grupo dos polifenois encontrado principalmente no farelo de arroz e de milho, com destaque para sua atividade fotoprotetora e antioxidante. Assim, o AF vêm sendo amplamente estudado para aplicação em formulações fotoprotetoras e antienvelhecimento cutâneo. No desenvolvimento de formulações tópicas os ensaios de liberação cutânea in vitro apresentam-se como um ensaio rápido, de baixo custo e que possibilitam resultados preliminares. O uso do AF é limitado pela instabilidade da molécula frente à luz e/ou oxidação. Diante disto, sua estabilidade pode ser melhorada através da complexação com ciclodextrinas, dispersão em polímeros ou inclusão em ciclodextrinas seguido da associação de um polímero formando um sistema multicomponente. Assim, objetivou-se a obtenção de um modelo de membrana que seja semelhante à composição da pele humana para ensaios de liberação cutânea in vitro e desenvolvimento de sistemas multicomponentes com ciclodextrinas e polímeros hidrofílicos utilizando ácido ferúlico. A membrana foi obtida pela impregnação de uma solução lipídica em membrana sintética e caracterizadas por Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Microscopia de Força Atômica (MFA) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Formulações gel e gel-creme contendo AF 0,5% (p/p) foram avaliadas quanto à estabilidade e liberação in vitro na membrana otimizada através da célula de difusão de Franz. No desenvolvimento dos complexos multicomponentes procedeu-se estudos de dinâmica molecular e solubilidade em fase aquosa. Após seleção da ciclodextrina e polímero para compor os sistemas, os mesmos foram obtidos pelos métodos de malaxagem e rotaevaporação, caracterizados por DSC e TG (termogravimetria), difração de raios-X (DR-X) e espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). Além disto, foram avaliados quanto à estabilidade oxidativa e atividade antioxidante. As técnicas utilizadas para a caracterização da membrana obtida, permitiram demonstrar a ocorrência de impregnação da solução lipídica. As formulações foram estáveis quando armazenadas a 4 ºC ± 2 °C. Os resultados da liberação in vitro utilizando a membrana otimizada sugerem que esta pode ser aplicada como uma membrana acessível e simples na liberação in vitro de substâncias ativas. Com relação ao desenvolvimento dos sistemas multicomponentes, através das técnicas de caracterização foi possível compreender as interações entre o AF, ciclodextrinas e polímeros. As técnicas de obtenção dos sistemas mostraram-se adequadas, com alto de teor de incorporação do ativo. Destacando-se o método de obtenção por malaxagem, que apresentou rendimento consideravelmente maior quando comparado ao método por rotaevaporação. As ciclodextrinas e os polímeros selecionados possuíram potencial para serem empregados em sistemas multicomponentes. Uma vez que aumentaram a estabilidade do AF frente a altas temperaturas, como também auxiliaram na transição do estado cristalino para amorfo do fármaco, devido à inserção do ativo dentro da cavidade e interação com o polímero. Para a estabilidade oxidativa verificou-se, que os componentes do sistema conferiram significativa estabilidade para o AF. Na atividade antioxidante, em geral, os complexos multicomponentes potencializaram a atividade do AF. Os resultados sugerem a formação de sistemas multicomponentes estáveis, viabilizando otimização do ativo. Fornecendo subsídios para incorporação destes sistemas em formulações semissólidas.


  • Mostrar Abstract
  • Ferulic acid (FA) is a phytochemical constituent pat of the polyphenols group which are found mainly in rice and corn meal, with emphasis on its photoprotective and antioxidant activity. Thus, FA has been widely studied for application in photoprotective and anti-aging skin formulations. In the development of topical formulations, in vitro skin release assays present themselves as a fast, low-cost assay that enable preliminary results. The use of FA is limited by the instability of the molecule in the face of light and/or oxidation. In view of this, its stability can be improved through complexation with cyclodextrins, dispersion in polymers or inclusion in cyclodextrins followed by the association of a polymer forming a multicomponent system. Thus, the objective was to obtain a membrane model that is similar to the composition of human skin for in vitro skin release assays and development of multicomponent systems with cyclodextrins and hydrophilic polymers using ferulic acid. The membrane was obtained by impregnation of a lipid solution in synthetic membrane and characterized by Differential Exploratory Calorimetry (DSC), Atomic Force Microscopy (AFM) and Scanning Electron Microscopy (SEM). Gel and cream-gel formulations containing AF 0.5% (w/w) were evaluated for stability and in vitro release through the optimized membrane in franz diffusion cell. In the development of multicomponent complexes, studies of molecular dynamics and solubility in aqueous phase were carried out. After selection of cyclodextrin and polymer to make up the systems, they were obtained by the methods of kneading and evaporation rotary, characterized DSC and TG (thermogravimetry), X-ray diffraction (DR-X) and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). In addition, they were evaluated for oxidative stability and antioxidant activity. The techniques used to characterize the obtained membrane allowed to demonstrate the occurrence of impregnation of the lipid solution. The formulations were stable when stored at 4 ºC ± 2 °C. The results of in vitro release using the optimized membrane suggest that it can be applied as an accessible and simple membrane in the in vitro release of active substances. Regarding the development of multicomponent systems, through characterization techniques it was possible to understand the interactions between FA, cyclodextrins and polymers. The techniques of obtaining the multicomponent systems were adequate, with high incorporation content of the asset. The method of obtaining by kneading was highlighted, which presented considerably higher yield when compared to the method by evaporation rotary. The cyclodextrins and polymers selected had the potential to be used in multicomponent systems. Since they increased the stability of FA against high temperatures, they also assisted in the transition from crystalline to amorphous state of the drug, due to the insertion of the active inside the cavity and interaction with the polymer. For oxidative stability, it was verified that the components of the system conferred significant stability for FA. In antioxidant activity, in general, multicomponent complexes enhanced FA activity. The results suggest the formation of stable multicomponent systems, enabling optimization to the asset. Providing subsidies for the incorporation of these systems in cosmetic formulations.

2019
Dissertações
1
  • JOSÉ VENÂNCIO CHAVES JÚNIOR
  • DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA E AVALIAÇÃO DA SOLUBILIDADE AQUOSA DE COCRISTAIS DE ÁCIDO FERÚLICO

  • Orientador : CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
  • FÁBIO SANTOS DE SOUZA
  • RODRIGO MOLINA MARTINS
  • Data: 18/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Os cocristais são estruturas cristalinas geradas a partir da união de duas ou mais substâncias em uma mesma fase cristalina, os quais demonstram o potencial de melhorar parâmetros tecnológicos e físico-químicos ligados a fármacos, por exemplo a solubilidade aquosa que representa um fator limitante na absorção dos fármacos administrados por via oral. O ácido ferúlico (AFE) é uma molécula muito estudada pelo seu potencial antioxidante, em que se destacam seus resultados antitumorais, no entanto a baixa solubilidade aquosa dessa molécula aparece como um obstáculo para o seu estudo clínico. O objetivo desse trabalho é desenvolver e caracterizar físico-quimicamente cocristais de AFE visando a melhoria de sua solubilidade aquosa. Os cocristais foram preparados pela técnica de secagem por pressão reduzida, utilizando etanol como solvente, e caracterizados por diferentes técnicas analíticas: calorimetria exploratória diferencial (DSC), difração de raios-X do pó (DRXP), espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), termogravimetria (TG), ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN-¹H) e microscopia eletrônica de varredura ambiental (MEV), bem como foi desenvolvido um planejamento experimental e avaliada a dissolução in vitro. O cocristal de AFE e nicotinamida (CC) apresentou a melhor solubilidade aquosa (70% maior que o AFE isolado). Dois métodos para quantificação de AFE e nicotinamida (NIC) por cromatografia líquida de alta e ultra eficiência, CLAE e CLUE, foram desenvolvidos e validados. O processo de obtenção do CC apresentou bom rendimento (98,3 ± 1,3%) e reprodutibilidade. As técnicas analíticas forneceram fortes indícios de formação do cocristal entre o AFE e a NIC. O planejamento experimental mostrou a formação de CC na proporção molar 1:1, dentre as condições utilizadas. O CC apresentou melhor eficiência de dissolução que o AFE isolado nos meios de pH 4,5 e 6,8. Sabendo da necessidade do aumento da biodisponibilidade do AFE, o CC desenvolvido surge como uma alternativa tecnológica para um produto farmacêutico de maior eficiência para o AFE.


  • Mostrar Abstract
  • The cocrystals are crystalline structures generated from the union of two or more substances in the same crystalline phase, which demonstrate the potential to improve technological and physicochemical parameters related to the pharmaceutical area, for example aqueous solubility, which is a limiting factor on absorption of the drugs administered orally. The ferulic acid (FEA) is a molecule very studied for its antioxidant potential, in which its antitumor results are highlighted, however the low aqueous solubility of this molecule appears as an obstacle to its clinical study. The objective of this work is to develop and characterize physicochemically cocrystals of FEA aiming to improve its aqueous solubility. The cocrystals were prepared by the drying technique under reduced pressure, using ethanol as solvent, and characterized by different analytical techniques: differential scanning calorimetry (DSC), X-ray powder diffraction (XRPD), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), thermogravimetry (TG), nuclear magnetic resonance of hydrogen (NMR-¹H) and scanning electron microscopy (SEM), as well as an experimental planning was developed and the in vitro evaluated. The FEA and nicotinamide cocrystal (CC) presented the best aqueous solubility (70% greater than the isolated FEA). Two methods for quantification of AFE and nicotinamide (NIC) by high performance liquid chromatography, HPLC and UHPLC, were developed and validated. The process of obtaining CC showed good yield (98.3 ± 1.3%) and reproducibility. Analytical techniques provided strong evidence of cocrystal formation between the FEA and the NIC. The experimental design showed the formation of CC in the 1: 1 molar ratio, among the conditions used. The CC showed better dissolution efficiency than the FEA alone in the media of pH 4.5 and 6.8. Considering the need for increasing the bioavailability of the FEA, the developed CC appears as a technological alternative for a more efficient pharmaceutical product for the FEA.

2
  • BRUNNA SOARES RODRIGUES COSTA
  • AVALIAÇÃO DA ESTABILIDADE DE FORMULAÇÕES LÍQUIDAS ORAIS DE SULFADIAZINA OBTIDAS A PARTIR DE COMPRIMIDOS

  • Orientador : ANA PAULA BARRETO GOMES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA PAULA BARRETO GOMES
  • EDUARDO PEREIRA DE AZEVEDO
  • FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
  • LOURENA MAFRA VERISSIMO
  • Data: 20/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • A sulfadiazina (SDZ) é um dos fármacos utilizados para o tratamento pós-natal da toxoplasmose congênita, entretanto a única formulação oral comercialmente disponível é em comprimido (500 mg). Uma das estratégias para solucionar esse problema é através da transformação de formas farmacêuticas. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo preparar e avaliar a estabilidade física, química e microbiológica de suspensões extemporâneas de SDZ (100 mg/mL) usando comprimidos (FURP-Sulfadiazina). Os veículos de suspensão utilizados foram: A – xarope simples 85% e metilcelulose 1% (p/v); e B – sorbitol 70%. A estabilidade foi avaliada durante os dias 0, 7, 14 e 30 sob armazenamento em temperaturas controladas de 5 ºC ± 3 ºC e 22,5 ºC ± 2,5 ºC. As características físicas analisadas foram as características organolépticas, o pH, o tamanho de partícula e a viscosidade. A concentração de SDZ foi determinada através de método desenvolvido e validado utilizando a cromatografia líquida de ultra eficiência (CLUE). Os atributos microbiológicos de formas farmacêuticas não estéreis também foram avaliados, adicionando ácido p-aminobenzóico aos meios de cultura a fim de neutralizar a atividade antimicrobiana da SDZ. O pH e a viscosidade apresentaram diferenças significativas nos dias de estudo. A distribuição do tamanho de partícula foi constante até 14 dias de estudo para ambas as formulações. Todavia, apenas a suspensão de SDZ A apresentou resultados confiáveis dentro dos limites farmacopeicos, provavelmente influenciadas pela solubilidade do ativo em diferentes pH, sedimentação de partículas e redução da viscosidade. Ademais, durante o estudo não foi observado contaminação microbiana. Com base nos resultados, pode-se concluir que a suspensão de SDZ A em temperatura ambiente é estável durante 14 dias, sendo uma alternativa viável para o tratamento pediátrico da toxoplasmose congênita.


  • Mostrar Abstract
  • Sulfadiazine (SDZ) is one of the drugs used for the postnatal treatment of congenital toxoplasmosis, however the only commercially available oral formulation is the tablet (500 mg). One of the strategies to solve this problem is through the transformation of pharmaceutical forms. Thus, the present work aimed to prepare and evaluate the physical, chemical and microbiological stability of extemporaneous suspensions of SDZ (100 mg / mL) using tablets (FURP-Sulfadiazine). The suspension vehicles used were: A - 85% simple syrup and 1% (w/v) methylcellulose; and B - sorbitol 70%. Stability was evaluated during days 0, 7, 14 and 30 under storage at controlled temperatures of 5 °C ± 3 °C and 22.5 °C ± 2.5 °C. The physical characteristics analyzed were the organoleptic characteristics, the pH, the particle size and the viscosity. The concentration of SDZ was determined by a method developed and validated using ultra-high performance liquid chromatography (CLUE). Microbiological attributes of non-sterile pharmaceutical forms were also evaluated by adding p-aminobenzoic acid to the culture media in order to neutralize the antimicrobial activity of SDZ. pH and viscosity showed significant differences on study days. The particle size distribution was constant up to 14 days of study for both formulations. However, only the SDZ A suspension presented reliable results within the pharmacopoeial limits, probably influenced by the solubility of the active substance at different pH, particle sedimentation and viscosity reduction. In addition, during the study no microbial contamination was observed. Based on the results, it can be concluded that SDZ A suspension at room temperature is stable for 14 days and is a viable alternative for the pediatric treatment of congenital toxoplasmosis.

3
  • BRUNO AMORIM DO CARMO
  • CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL E POTENCIAL ANTIMICROBIANO, ANTIPARASITÁRIO E ANTIPROLIFERATIVO DE NOVOS PEPTÍDEOS ANÁLOGOS DA STIGMURINA

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DAVI SERRADELLA VIEIRA
  • JOSELIO MARIA GALVAO DE ARAUJO
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • RAFAEL MATOS XIMENES
  • Data: 25/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • A peçonha de escorpiões constitui-se de uma rica fonte de componentes biologicamente ativos com elevado potencial para aplicação terapêutica e biotecnológica, podendo ainda ser utilizados como protótipo para obtenção de novos fármacos. O objetivo deste estudo é caracterizar a conformação estrutural, avaliar as atividades antimicrobiana, antiparasitária e determinar um possível mecanismo de ação subjacente, utilizando a dinâmica molecular de dois novos peptídeos análogos do peptídeo escorpiônico Stigmurina, denominados StigA25 e StigA31. A substituição de aminoácidos na sequencia nativa por resíduos de lisina resultou no aumento da carga superficial e hidrofobicidade dos peptídeos análogos, com o aumento teórico na conformação helicoidal. Na análise por dicroísmo circular, os peptídeos análogos apresentaram a capacidade de modificar a conformação estrutural dependendo do meio em que se encontram, apresentando estabilidade térmica a uma ampla variação de pH e temperatura, com resultados semelhantes para o peptídeo nativo. StigA25 e StigA31 demonstram amplo espectro de ação antimicrobiana e antiparasitária T. cruzi in vitro com efeito superior ao peptídeo nativo e a antibióticos de referência, com reduzido efeito hemolítico nas concentrações que apresentam atividade biológica e potencial atividade antiproliferativa em células HeLa. Portanto, este estudo demonstra o potencial terapêutico desses peptídeos análogos da Stigmurina e o efeito promissor da engenharia de peptídeos para o potencial desenvolvimento de novos agentes terapêuticos.


  • Mostrar Abstract
  • Scorpion venom constitutes a rich source of biologically active compounds with high potential for therapeutic and biotechnological applications, which can be used as prototypes for the design of new drugs. The aim of this study was to characterize the structural conformation, to evaluate the antimicrobial activity and to give an insight about the possible action mechanism underlying it, using the molecular dynamics of two new analog peptides of the scorpion peptide Stigmurin, named StigA25 and StigA31. The amino acid substitutions in the native sequence for lysine residues resulted in peptides with higher positive net charge and hydrophobicity, with an increase in the theoretical helical content. StigA25 and StigA31 showed the capacity to modify their structural conformation according to the environment, and were stable to pH and temperature variation, results similar to the native peptide. Both analog peptides demonstrated broad-spectrum antimicrobial activity in vitro, showing an effect superior to that of the native peptide, being non-hemolytic at the biologically active concentrations and potential antiproliferative activity in HeLa cells. Therefore, this work demonstrates the therapeutic potential of analog peptides of Stigmurin and the promising effect of peptide engineering for the potential development of new therapeutic agents.

4
  • FRANCISCO DE ASSIS BEZERRA NETO
  • AVALIAÇÃO DO EFEITO DE UMA FRAÇÃO ENRIQUECIDA EM SAPONINAS OBTIDA DE Ziziphus joazeiro EM ISOLADOS DE Candida spp. ORIUNDOS DE PACIENTES COM CANDIDEMIA COM ÊNFASE NA EXPRESSÃO DOS FATORES DE VIRULÊNCIA

  • Orientador : GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • EVELINE PIPOLO MILAN
  • GUILHERME MARANHAO CHAVES
  • REGINALDO GONÇALVES DE LIMA NETO
  • Data: 26/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Além de seu conhecido potencial de virulência in vitro, isolados de Candida spp. têm chamado atenção pelo número crescente de relatos de resistência a medicamentos antifúngicos, constituindo um sério problema para o tratamento de infecções causadas por esses micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a susceptibilidade antifúngica de isolados de Candida spp. oriundos de pacientes com infecção de corrente sanguínea frente a antifúngicos sintéticos, bem como a uma fração enriquecida em saponinas obtida do extrato de Ziziphus joazeiro, assim como a interferência na expressão dos fatores de virulência. Foram analisados 70 isolados de Candida oriundos de hemoculturas. Realizou-se a técnica de microdiluição em caldo a fim de se observar a susceptibilidade dos isolados frente aos antifúngicos sintéticos Anfotericina B, Caspofungina, Fluconazol e Itraconazol. Posteriormente, 50 isolados foram selecionados e a avaliação da atividade antifúngica da fração foi realizada. Um total de 27 isolados foram selecionados para a realização dos ensaios de expressão dos fatores de virulência na ausência e na presença da fração. Nenhum dos isolados apresentou resistência a anfotericina B e a caspofungina. Quatro isolados de C. albicans e 1 isolado de C. glabrata foram resistentes ao fluconazol, enquanto que 3 isolados de C. albicans, 1 de C. tropicalis e 2 do complexo C. parapsilosis apresentaram susceptibilidade dose-dependente a este medicamento. Quatro isolados de C. albicans e 1 isolado de C. tropicalis apresentaram uma susceptibilidade dose-dependente ao itraconazol. Os isolados identificados como C. albicans e C. glabrata foram susceptíveis frente a fração com CIMs na faixa de 5000 – 10000 μg/mL. As cepas tratadas com a fração apresentaram uma redução de cerca de 26% na capacidade de adesão às células do epitélio bucal, diminuição na capacidade de formação do biofilme, diminuição na capacidade de filamentação (em meios líquidos e sólidos) e diminuição da produção de fosfolipases e hemolisinas. A fração enriquecida em saponinas obtida a partir do extrato de Z. joazeiro apresenta significativa atividade antifúngica, sendo capaz de interferir na expressão de fatores de virulência deste grupo de leveduras. Novos estudos devem ser conduzidos para que o mecanismo de ação envolvido seja elucidado.


  • Mostrar Abstract
  • Bloodstream infections represent an important public health problem, with attributed mortality of 40-60%. In addition to their known in vitro virulence potential, Candida spp. have been drawing attention to the growing number of reports of resistance to antifungal drugs, representing a serious problem for the treatment of infections caused by these microorganisms. This study aimed to evaluate the antifungal susceptibility of Candida spp. from patients with Candida bloodstream infection against synthetic antifungal compounds, as well as an enriched fraction obtained from the extract of Ziziphus joazeiro. We also investigated the interference of this natural product on the expression of Candida spp. virulence factors. Material and methods: Seventy Candida spp. isolates from blood cultures were analyzed. The microdilution broth technique was performed to investigate the susceptibility of the isolates against synthetic antifungals. Subsequently, 50 isolates were selected and the evaluation of the antifungal activity of the fraction was performed. A total of 27 isolates were selected for virulence factor expression assays in the absence and presence of the fraction. None of the isolates presented resistance to amphotericin B and caspofungin. Four isolates of C. albicans and 1 isolate of C. glabrata were resistant to fluconazole, whereas 3 isolates of C. albicans, 1 of C. tropicalis and 2 of C. parapsilosis complex showed dose-dependent susceptibility to this drug. Four isolates of C. albicans and 1 of C. tropicalis showed a dose-dependent susceptibility to itraconazole. The isolates identified as C. albicans and C. glabrata were susceptible to the fraction with MFCs ranging from 5000-10000 μg/mL. The strains treated with the fraction showed a reduction of about 26% in the capacity of adhesion buccal epithelial cells, a lower production of phospholipase, haemolisyns and a decrease in filamentation capacity. The enriched fraction of Z. joazeiro presents significant antifungal activity, being able to interfere with the expression of virulence factors in vitro of this group of yeasts. Further studies should be performed in order to evaluate the mechanisms of action involved.

5
  • SHAYANNE MOURA FERNANDES DE ARAÚJO
  • AVALIAÇÃO DOS NÍVEIS SÉRICOS DE VITAMINA DE FATORES ASSOCIADOS À SÍNDROME DOS OVÁRIOS POLICÍSTICOS

  • Orientador : TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • MARCIA MARILIA GOMES DANTAS LOPES
  • AMALIA CINTHIA MENESES DO REGO
  • Data: 26/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • A Síndrome dos ovários policísticos (SOP) é considerada a endocrinopatia mais comum na fase reprodutiva da mulher, com prevalência de até 26%, além de ser a maior causa de infertilidade entre as mulheres. Em geral, a SOP é a causa mais comum de anovulação e evidências sugerem que a deficiência da vitamina D tem sido associados à fertilidade, adipogênese, resistência insulínica, diabetes e obesidade que podem ser fatores primários no desenvolvimento da SOP. Com isso objetivou-se avaliar a os níveis séricos de vitamina D em mulheres com síndrome dos ovários policísticos (SOP) e seus fatores associados. A população do estudo foi composta por 100 mulheres com SOP, com idades entre 18 e 40 anos. Para as variáveis clínicas foi realizado um teste correlação de Pearson, para se avaliar as relações possíveis dos valores séricos da vitamina D com as demais variantes do estudo. Os testes foram considerados estatisticamente significativos em p<0,05. A média de idade das participantes do estudo foi de (26.74 ± 5.52) e IMC de (30.07 ± 5.37 kg/ m2). A maioria das mulheres apresentaram obesidade e sobrepeso (47%) e (39%). Em relação ao escore de Ferriman-Gallwey modificado, a média foi de (11.95 ± 5,96), apresentando uma média de escore alto para hirsutismo e (55%) apresentaram infertilidade. Em relação à hipovitaminose, a frequência foi de 57% (insuficiência 49% e deficiência 8%). Na análise estática, apresentou correlação com os níveis séricos da vitamina D a fertilidade (r=0.209; p= 0.03*), a gordura ginóide (r=-0.225; p= 0.04*) e a uréia (r=-0.206; p= 0.04). Valores adequados de vitamina D pode melhorar a disfunção ovulatória e, assim, a fertilidade em mulheres com a síndrome. Isso pode ser explicado pela constatação de que o VDR foi encontrado em vários tecidos do sistema reprodutor feminino, como ovários, placenta e endométrio, além disso, 1,25 (OH) D leva diretamente a produção de estrogênio e progesterona nos ovários. Os níveis de vitamina D variam com a massa corporal em SOP, muitos estudos relataram associações inversas entre gordura corporal com os níveis séricos de 25OHD. Acredita-se que a alta prevalência de hipovitaminose D em mulheres com SOP está relacionada à obesidade, como a vitamina D é lipossolúvel e na obesidade, uma proporção maior é sequestrada no tecido adiposo, diminuindo assim a biodisponibilidade. Diante dos resultados, pode-se observar que o perfil sócio-demográfico das voluntárias manteve-se similar se compararmos com estudos anteriores da SOP, a maioria das mulheres apresentaram obesidade, principalmente androide, mais da metade das mulheres apresentaram infertilidade e mesmo com o clima ensolarado do nordeste, apresentaram média de hipovitaminose D, o que pode ser um fator de risco para SOP, uma vez que ela faz parte da homeostase da glicose e no modulamento da resposta do receptor de insulina. Observamos uma correlação estatística do status da vitamina D com a fertilidade, gordura ginoide e uréia, em que há espaço para a suplementação de vitamina D para ajudar na melhora nos parâmetros ovulatórios.


  • Mostrar Abstract
  • Polycystic ovarian syndrome (PCOS) is considered the most common endocrinopathy in the reproductive phase of women, with a prevalence of up to 26%, as well as being the major cause of infertility among women. In general, PCOS is the most common cause of anovulation and evidence suggests that vitamin D deficiency has been associated with fertility, adipogenesis, insulin resistance, diabetes and obesity which may be primary factors in the development of PCOS. The aim of this study was to evaluate serum vitamin D levels in women with polycystic ovary syndrome (PCOS) and its associated factors. The study population consisted of 100 women with PCOS, aged between 18 and 40 years. For the clinical variables, a Pearson correlation test was performed to evaluate the possible relationships of serum vitamin D values with the other study variants. The tests were considered statistically significant at p <0.05. The mean age of the study participants was (26.74 ± 5.52) and BMI (30.07 ± 5.37 kg / m2). Most of the women were obese and overweight (47%) and (39%). In relation to the modified Ferriman-Gallwey score, the mean was (11.95 ± 5.96), presenting a mean of high score for hirsutism and (55%) presented infertility. In relation to hypovitaminosis, the frequency was 57% (failure 49% and deficiency 8%). In the static analysis, the fertility (r=0.209, p=0.03*), gynoid fat (r= -0.225, p=0.04*) and urea (r=-0.206, p=0.04*). Adequate values of vitamin D may improve ovulatory dysfunction and thus fertility in women with the syndrome. This can be explained by the finding that VDR was found in several tissues of the female reproductive system, such as ovaries, placenta and endometrium, and 1,25 (OH) D directly leads to the production of estrogen and progesterone in the ovaries. Vitamin D levels vary with body mass in PCOS, many studies have reported inverse associations between body fat and serum levels of 25OHD. It is believed that the high prevalence of hypovitaminosis D in women with PCOS is related to obesity, as vitamin D is fat-soluble and in obesity, a higher proportion is sequestered in adipose tissue, thus decreasing bioavailability. Considering the results, it can be observed that the socio-demographic profile of the volunteers remained similar when compared to previous studies of PCOS, the majority of the women presented obesity, mainly android, more than half of the women presented infertility and even with the climate in the northeast, had a mean of hypovitaminosis D, which may be a risk factor for PCOS, since it is part of glucose homeostasis and in modulating the insulin receptor response. We observed a statistical correlation of vitamin D status with fertility, gynoid fat and urea, where there is room for vitamin D supplementation to help improve ovulatory parameters.

6
  • JONH ANDERSON BORGES DOS SANTOS
  • OBTENÇÃO, CARACTERIZAÇÃO E AVALIAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA DE COCRISTAIS DE ÁCIDO CINÂMICO

  • Orientador : CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • CICERO FLAVIO SOARES ARAGAO
  • FÁBIO SANTOS DE SOUZA
  • JOSEAN FECHINE TAVARES
  • Data: 28/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Umas das etapas limitantes para o Insumo Farmacêutico Ativo (IFA) administrado por via oral ser absorvido e agir farmacologicamente, é sua prévia solubilização nos meios aquosos. Muitos candidatos a IFAs possuem baixa solubilidade aquosa, e alternativamente propor modificações físicas ou químicas nestas substâncias, são necessárias. O ácido cinâmico (AC) é um candidato a IFA que possui estudos comprovando diversas atividades farmacológicas importantes, como antimicrobiana, e antitumoral, apresentando baixa toxicidade. O uso da cocristalização é uma das principais estratégias aplicadas para melhorar a solubilidade aquosa do IFA. O objetivo foi a obtenção dos cocristais de AC e realização da sua caracterização e avaliação físico-química. As misturas físicas (MFs) foram preparadas manualmente por mistura dos pós e os cocristais (CCs) foram obtidos por evaporação de solvente com quantidades estequiométricas de IFA e coformador em razão molar 1:1. A caracterização foi realizada com uso de técnicas como Difração de Raios-X (DRX) do pó, Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Espectroscopia Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Para avaliação físico-química dos possíveis CCs, um método analítico foi desenvolvido e otimizado por Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência (CLUE) e validado de acordo com resolução vigente. A avaliação físico-química dos cocristais foi realizado por teste de solubilidade de saturação em água, e a determinação da solubilidade foi expressa por medidas de concentração. Os resultados de caracterização por avaliação de DRX do pó mostraram que a interação do AC com 8 coformadores não evidenciaram mudanças no padrão de difração das amostras sólidas obtidas após rotaevaporação. Porém, a interação do AC com outros 3 coformadores, CAF, NIC e TIA nas amostras de CCs obtidos, mostraram por DRX do pó mudanças no padrão de difração caracterizados pelo aparecimento de novos picos não identificados no padrão de difração dos insumos farmacêuticos isolados. Pelas curvas DSC, foi observado que a fusão das amostras de CCs ocorreram em temperaturas inferiores comparado aos insumos farmacêuticos isolados. Os espectros FTIR evidenciaram deslocamentos das principais vibrações para menores frequências, relacionados as possíveis ligações de hidrogênio formadas. Fotomicrografias MEV mostraram uma breve mudança no hábito cristalino dos CCs. O método analítico por CLUE foi desenvolvido por modo gradiente com fase móvel ácido trifluoroacético (TFA) a 0,1% em água ultrapura e metanol, nas condições cromatográficas otimizadas. O método mostrou-se seletivo, linear, preciso, exato e robusto. Após teste de solubilidade, a solubilidade de saturação em meio aquoso para o AC isolado foi de 0,55 mg.mL-1, e nos CCs com CAF, NIC e TIA foram de 0,9, 0,86 e 0,64 mg.mL-1, considerando-se assim um aumento significativo de 63%, 56% e 16% respectivamente, na solubilidade aquosa do IFA. Resultados demonstraram a importância do uso das técnicas de caracterização do estado sólido na identificação dos cocristais, no entanto, ainda mostram-se ser necessários a introdução de técnicas mais confirmatórias, como a DRX do monocristal. O aumento na solubilidade aquosa do AC correlaciona-se diretamente com as modificações proporcionadas pelos cocristais, o que pode favorecer a produção de um produto farmacêutico tecnologicamente mais favorável.


  • Mostrar Abstract
  • One of the limiting steps for the Active Pharmaceutical Ingredient (API) to be absorbed oral and to act pharmacologically is its previous solubilization in the aqueous media. Many candidates for IFAs have low aqueous solubility, and alternatively propose physical or chemical modifications in these substances, are necessary. Cinnamic acid (AC) is an IFA candidate that has studies demonstrating several important pharmacological activities, such as antimicrobial, and antitumor, with low toxicity. The use of cocrystallization is one of the main strategies applied to improve the aqueous solubility of the IFA. The objective was to obtain the cocrystals of CA and to carry out its characterization and physical-chemical evaluation. Physical mixtures (MFs) were prepared manually by mixing the powders and the cocrystals (CCs) were obtained by evaporation of solvent with stoichiometric amounts of IFA and copolymer in molar ratio 1: 1. The characterization was performed using techniques such as X-ray Diffraction (XRD), Differential Scanning Calorimetry (DSC), Infrared Spectroscopy with Fourier Transform (FTIR) and Scanning Electron Microscopy (SEM). For physical-chemical evaluation of the possible CCs, an analytical method was developed and optimized by Ultra High Pressure Liquid Chromatography (UHPLC) and validated according to the current resolution. The physicochemical evaluation of the cocristais was performed by water saturation solubility test, and the solubility determination was expressed by concentration measurements. The results of characterization by XRD evaluation of the powder showed that the interaction of the AC with 8 coformers did not show changes in the diffraction pattern of the solid samples obtained after rotaevaporation. However, the interaction of CA with other 3 coformers, CAF, NIC and TIA in the samples of CCs obtained showed by powder XRD changes in the diffraction pattern characterized by the appearance of new unidentified peaks in the diffraction pattern of the isolated pharmaceutical ingredients. From the DSC curves, it was observed that the fusion of the CCs samples occurred at lower temperatures compared to the isolated pharmaceutical ingredients. The FTIR spectra showed shifts of the main vibrations to lower frequencies, related to the possible hydrogen bonds formed. SEM photomicrographs showed a brief change in the crystalline habit of CCs. The analytical method by UHPLC was developed by gradient mode with mobile phase 0.1% trifluoroacetic acid (TFA) in ultrapure water and methanol under optimized chromatographic conditions. The method was selective, linear, precise, accurate and robust. After solubility test, the saturation solubility in aqueous medium for the isolated CA was 0.55 mg.mL-1, and in the CCs with CAF, NIC and TIA were 0.9, 0.86 and 0.64 mg.mL-1, thus considering a significant increase of 63%, 56% and 16%, respectively, in the aqueous solubility of the IFA. Results demonstrated the importance of the use of solid state characterization techniques in the identification of cocrystals, however, it is still necessary to introduce more confirmatory techniques, such a single crystal XRD. The increase in the aqueous solubility of CA correlates directly with the modifications provided by the cocrystals, which may favor the production of a technologically more favorable pharmaceutical product.

7
  • MARILIA GABRIELLA DE OLIVEIRA PINHEIRO
  • ANÁLISE IN SILICO PARA PREDIÇÃO DA INTERAÇÃO RNAm-miRNAs RELACIONADOS AO TRANSTORNO BIPOLAR

  • Orientador : ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANDRE DUCATI LUCHESSI
  • EMERSON ARCOVERDE NUNES
  • RAUL HERNANDES BORTOLIN
  • Data: 28/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • O transtorno bipolar (TB) é uma doença psiquiátrica conhecida por suas altas taxas de morbidade influenciadas por um diagnóstico clínico tardio e impreciso. Neste contexto, biomoléculas como miRNAs e RNAm têm sido estudados para elucidar a patogênese de muitas doenças, levando ao desenvolvimento de técnicas para obter um diagnóstico precoce ou garantir um tratamento individualizado. Este estudo utilizou análise integrativa in silico de dados de expressão de miRNAs e RNAm diferencialmente regulados em amostras de sangue total de pacientes com TB, com o objetivo de elucidar possíveis interações destas biomoleculas no TB. Portanto, interações de miRNA-RNAm em TB foram investigadas através de ferramentas de bioinformática usando dados de microarray e revisão bibliográfica. Foram identificados perfis de expressão de 81 RNAm diferencialmente expressos em pacientes com TB quando comparados a controles de dois conjuntos de dados disponíveis (GSE46416 e GSE23848) e miRNAs (n = 15) diferencialmente expressos em pacientes com TB. Estes dados foram utilizados no programa de análise Ingenuity Pathways Analysis 6 (IPA). Concluída a análise in silico foi feita a casuística clínica, composta por dois grupos: um de pacientes com TB (n=30) e outro de voluntários controles (n=30). Houve a análise dos dados gerais e clínicos dos voluntários da pesquisa, além da análise dos prontuários dos pacientes com TB. Os resultados in silico mostraram 34 predições de interação entre miRNA-RNAm, quando foram realizadas análises de miRNA-RNAm diretamente envolvidas no TB, 9 miRNAs e 28 RNAm foram interconectados, em destaque a ligação encontrada para o TB foram mi140-3p com o gene COX6C, e destes com o COX7b. Os três estão relacionados com a mitocôndria, organela que em estudos sugerem que pode ser prejudicada no TB. Quanto a etapa clínica não foram encontradas diferenças significativas nos dados gerais e clínicos dos pacientes com TB quando comparados com controles. Em conclusão, esses resultados direcionam os futuros estudos para alguns miRNAs e RNAm que podem estar envolvidos direta ou indiretamente na fisiopatologia do TB e poderiam ser potenciais biomarcadores circulantes para serem usados na detecção precoce do TB.


  • Mostrar Abstract
  • Bipolar disorder (BD) is a psychiatric illness known for its high morbidity rates influenced by a delayed and inaccurate clinical diagnosis. Biomarkers as miRNAs and mRNAs target has been studied to elucidate pathogenesis of many diseases leading to a development of technics to obtain early diagnosis or guarantee an individualized treatment. This study used in silico integrative analysis of mRNAs and miRNAs differentially expressed in whole blood samples of BD patients aiming to elucidate potential mRNA-miRNA interactions in BD. Therefore, miRNA-mRNA interactions in BD were investigated through bioinformatics tools using microarray data and bibliographic review. Expressions profiles of mRNAs (n=81) differentially expressed in BD patients when compared to controls (GSE46416 and GSE23848) and miRNAs (n=15) differentially expressed in BD patients study, described by Maffioletti et al. (2016). These data were used in the analysis program Ingenuity Pathways Analysis 6 software (IPA). The in silico Analysis completed, a clinical stage was performed, consisting of two groups: patients with TB (n = 30) and another of control volunteers (n = 30). There was an analysis of the general and clinical data of the volunteers of the research, besides the analysis of the medical records of patients with TB.
    Results showed 34 miRNAs-mRNAs predictions of interactions, when were performed miRNAs-mRNAs analysis directly involved in BD, 9 miRNAs and 28 mRNAs were interconnected, highlighted the connection between BD, mi140-3p and COX6C, and of these with COX7b. All three are related to mitochondria, organelle shown in studies that is impaired in TB. The clinical stage, no significant differences were found in the general and clinical data of BD patients when compared to controls.
    In conclusion, these results direct us to some miRNAs and mRNAs that could be involved direct or indirectly in BD physiopathology and could be potential circulating biomarkers to be used in early detection of BD.

8
  • RÚSIA DAYANNY AIRES NONATO
  • AVALIAÇÃO DOS TRANSTORNOS PSÍQUICOS ASSOCIADOS À INFERTILIDADE EM MULHERES COM SÍNDROME DOS OVÁRIOS POLICÍSTICOS

  • Orientador : TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANA AUGUSTO DE REZENDE
  • MELINA BEZERRA LOUREIRO
  • TELMA MARIA ARAUJO MOURA LEMOS
  • Data: 28/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • A Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) é uma endocrinopatia ginecológica que acomete em torno de 20% das mulheres em idade fértil. Além das complicações reprodutivas, esta síndrome encontra-se associada às alterações metabólicas e transtornos psicológicos, como redução da qualidade de vida e aumento de fatores de risco para ansiedade e depressão, que podem desestruturar a saúde e o bem estar ao longo do tempo. A infertilidade pode ocasionar impactos negativos que envolvem o sofrimento emocional, físico, psicológico e social. Como a síndrome é considerada uma das principais causas de infertilidade feminina, o presente estudo objetivou avaliar os transtornos psíquicos associados à infertilidade em mulheres com SOP. As 100 mulheres foram analisadas quanto aos aspectos clínicos, bioquímicos e psicológicos. As participantes foram submetidas à coleta de material biológico e ao preenchimento dos questionários de avaliação clínica e sociodemográfica, BDI, WHOQOL-BREF e SCL-90- R. A análise das informações coletadas foi realizada mediante processo sistematizado em base estatística de dados pelo programa Stata versão 11. As mulheres inférteis (n=55) e férteis (45) apresentaram diferenças estatisticamente significativas na média de idade (27,7±5,1 vs 24,9±5,7; p= 0,01), IMC (31,7±5,2 Kg/m2 vs 29,01±5,1 Kg/m2), no percentual de gordura androide (49,1±8,3 vs 44,2±9,7; p=0,01) e pressão arterial sistólica (123,81±14,1 mmHg vs 118,45±12,9; p=0,05). Além disso, a infertilidade foi observada em 55% (n=55) das participantes e 66% (n=66) das mulheres apresentaram pontuações médias que indicam a presença de sintomas depressivos. Os valores médios dos escores referentes ao WHOQOL-BREF foram: 56,9±17,4 (Físico), 57,3±18,8 (Psicológico), 58,5±23,3 (Social), 50,7±16 (Ambiental) e qualidade de vida geral 54,8±15. Quanto à avaliação do sofrimento emocional pelo instrumento SCL-90- R, nenhuma das participantes ultrapassou o valor normativo. No modelo de análise por regressão logística, a infertilidade não apresentou associação aos sintomas de depressão, redução da qualidade de vida e sofrimento emocional. Os resultados demonstram que mulheres com SOP apresentam sintomatologia complexa que podem estar relacionadas ao desenvolvimento de sintomas depressivos, redução da qualidade de vida, bem como sofrimento emocional, independetemente da presença de infertilidade.


  • Mostrar Abstract
  • Polycystic Ovarian Syndrome (PCOS) is a gynecological endocrinopathy that affects about 20% of women of childbearing age. In addition to reproductive complications, this syndrome is associated with metabolic alterations and psychological disorders, such as reduced quality of life and increased risk factors for anxiety and depression, which can de-structure health and well-being over time. Infertility can cause negative impacts that involve emotional, physical, psychological and social suffering. As the syndrome is considered one of the main causes of female infertility, the present study aimed to evaluate the psychic disorders associated with infertility in women with PCOS. The 100 women were analyzed for clinical, biochemical and psychological aspects. The participants were submitted to the collection of biological material and to the questionnaire for clinical and sociodemographic evaluation, BDI, WHOQOL-BREF and SCL-90-R. The analysis of the information collected was performed using a statistical system based on Stata (n = 55) and fertile (45) presented statistically significant differences in mean age (27.7 ± 5.1 vs 24.9 ± 5.7, p = 0.01), BMI ( 31.7 ± 5.2 kg / m2 vs 29.01 ± 5.1 kg / m2), in the percentage of android fat (49.1 ± 8.3 vs. 44.2 ± 9.7, p = 0.01 ) and systolic blood pressure (123.81 ± 14.1 mmHg vs 118.45 ± 12.9, p = 0.05). In addition, infertility was observed in 55% (n = 55) of the participants and 66% (n = 66) of the women presented mean scores that indicate the presence of depressive symptoms. The mean values of the WHOQOL-BREF scores were: 56.9 ± 17.4 (Physical), 57.3 ± 18.8 (Psychological), 58.5 ± 23.3 (Social), 50.7 ± 16 (Environmental) and overall quality of life 54.8 ± 15. As for the evaluation of emotional distress by the SCL-90-R instrument, none of the participants exceeded the normative value. In the logistic regression model, infertility was not associated with symptoms of depression, reduced quality of life and emotional distress. The results show that women with PCOS present complex symptoms that may be related to the development of depressive symptoms, reduced quality of life, as well as emotional distress, regardless of the presence of infertility.

9
  • WÓGENES NUNES DE OLIVEIRA
  • AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTINEOPLÁSICA IN VITRO DO ÓLEO DE RÃ-TOURO (Rana catesbeiana Shaw) FRENTE AO CÂNCER DE PELE


  • Orientador : ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ERYVALDO SOCRATES TABOSA DO EGITO
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Nereide Stela Santos Magalhães
  • Data: 28/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • O óleo de rã-touro (OR) é um óleo animal obtido a partir do reaproveitamento biotecnológico do tecido adiposo do anfíbio Rana catesbeiana Shaw e que apresenta biocompatibilidade frente às células saudáveis (3T3) e toxicidade em células de melanoma murino (B16F10). Baseado nisso e na atual necessidade de novas alternativas de tratamento contra o melanoma, esse trabalho teve como objetivo avaliar a potencial atividade citotóxica in vitro do OR in natura frente à linhagem celular de melanoma humano A2058. Assim, foram realizados os ensaios de atividade mitocondrial (MTT), ciclo celular e morte celular para avaliar o atividade citotóxica do OR, enquanto que o potencial apoptótico foi investigado por meio da avaliação de alterações na morfologia celular, pelo potencial de membrana mitocondrial e avaliação da indução de estresse oxidativo. Os resultados obtidos demonstram que o OR (100 μg/mL) após 72 horas foi capaz de reduzir a viabilidade celular em 40 ± 9 % no ensaio de MTT. Adicionalmente, no ensaio de morte celular foi verificado que a citotoxicidade do OR está relacionada à indução de apoptose sem interferências no ciclo celular. Além disso, foi verificado que o processo apoptótico pode ter sido estimulado pela capacidade que o OR apresentou em induzir o estresse oxidativo, visto que foi capaz de aumentar em 51 ± 13 % os níveis intracelulares de espécies reativas de oxigênio, gerando, desta forma, uma redução do potencial da membrana mitocondrial (35 ± 5 %). Finalmente, os resultados obtidos nos permitiram elucidar, pela primeira vez, uma das vias de citotoxicidade do OR, a qual está relacionada a indução de estresse oxidativo intracelular associado a danos mitocondriais, resultando, assim, na indução da apoptose. Assim, estes resultados evidenciam potencial citotóxico do OR e permitem sugerir que este óleo pode vir a ser utilizado como matéria-prima bioativa no desenvolvimento de novas alternativas de tratamento contra o câncer de pele.


  • Mostrar Abstract
  • Bullfrog oil, an animal oil extracted from the adipose tissue of Rana catesbeiana Shaw, showed promising cytotoxic activity against melanoma cells and, therefore, potential to become a pharmaceutical active compound. However, there is a lack of information regarding the pathways involved its pharmacological activity. Thus, the aim of this study was to investigate and elucidate the cytotoxic effect of this oil against human melanoma cells (A2058). The cytotoxic potential was evaluated by the MTT assay, the cell cycle analysis and the cell death assay. In addition, the apoptotic potential was investigated by (i) the DNA fragmentation using propidium iodide (PI) staining analysis, (ii) the evaluation of mitochondrial membrane potential and (iii) the determination of intracellular reactive oxygen species (ROS) level. The results showed that the bullfrog oil was able to promote a time-dependent cytotoxic effect, decreasing cell viability in 38 % after 72 hours of treatment without affecting the cell cycle. Additionally, the bullfrog oil induced the apoptosis in A2058 cells, increasing up to 50 ± 13 % the intracellular ROS level, maintaining the DNA integrity and promoting an approximate decrease of 35 ± 5 % in the mitochondrial membrane potential. It can be concluded that the in vitro cytotoxic effect of the bullfrog oil in human melanoma cells is mediated by oxidative stress that induces mitochondrial dysfunction, triggering the apoptosis. These unprecedented results highlight the pharmacological potential of bullfrog oil and provide important information to support studies on the development of new pharmaceutical products for complementary and alternative treatments for melanoma.

10
  • RENATO DANTAS DE MEDEIROS
  • Commiphora leptophloeos (MART.) J.B. GILLETT (BURSERACEAE): ESTUDO FITOQUÍMICO, TOXICIDADE E AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTI-INFLAMATÓRIO E ANTIMICROBIANO

  • Orientador : SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JULIANA FELIX DA SILVA
  • LEANDRO DE SANTIS FERREIRA
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • Data: 28/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • A especie Commiphora leptophloeos(Burseraceae)e uma planta nativa do Brasil, pertence ao bioma caatinga e e conEHcida popularmente como gimburana-de-espinhoh e gimburana-de-cambaoh. Os estudos etnobotanicos citam o uso da especie no tratamento de inflamacoes e infeccoes. Dentro deste contexto, o presente estudo objetivou avaliar a toxidade, a atividade anti-inflamatoria e antimicrobiana em ensaios nao clinicos in vitro e in vivo dos extratos das folhas e das cascas do caule, e isolar, identificar e quantificar os marcadores quimicos. No estudo fitoquimico, o extrato hidroetanolico foi preparado por maceracao e as fracoes foram obtidas por particicao liquido-liquido (fracao diclorometano, acetato de etila-AcOEt e n-butanol-BuOH). O isolamento, a elucidacao estrutural e a caracterizacao das substancias nos extratos foram realizadas por CPC,CL-EM, FIA-ESI-IT-MS/MSe RMN de1H e a quantificacao dos marcadores nos extratos por CLAE-DAD-ELSD. A toxicidade dos extratos foi avaliadain vitro pelo ensaio de MTT e citometria de fluxo e in vivo pelo teste de toxicidade aguda, via oral. A atividade anti-inflamatoria in vitro foi avaliada pelo ensaio de oxido nitrico induzido por LPS e in vivo nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e de bolsa de ar induzida por zimosam. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela determinacao da Concentracao Inibitoria Minima (CIM) e triagem virtual dos compostos isolados foi realizada por estudos in silico. Do extrato das folhas, foram isolados 2 flavonoides por CPC e caracterizadas 16 substancias por espectrometria de massas como acidos fenolicos, flavonoides glicosilados derivados de quercetina, luteolina e apigenina e taninos condensados derivados de catequina. Das cascas do caule foram isolados 2 taninos por CPC e caracterizadas 8 substancias como acidos fenolicos e procianidinas. O extrato das folhas a 200 ƒÊg/mL e o extrato das cascas do caule nas concentracoes de 1, 10, 100 e 200 ƒÊg/mL demonstraram efeito anti-inflamatorio in vitro no ensaio de oxido nitrico induzido por LPS. No modelo de edema de pata induzido por carragenina, o extrato das folhas e das cascas do caule nas doses de 100, 200 e 400 mg/kg, via oral, reduziu significativamente (p<0,001) o edema seguido da reducao damieloperoxidase (MPO) e no modelo de bolsa de ar induzido por zimosam, nas mesmas doses testadas, reduziramsignificativamente (p<0,001) a migracao celular, a concentracao de proteinas totais, a mieloperoxidase (MPO), os niveis de malondialdeido (MDA) e da citocina pro-inflamatoria TNF-ƒ¿ e aumentou a producaoda citocina anti-inflamatoria IL-10.Na avaliacao da atividade antimicrobiana, o extrato das cascas do caule e as fracoes AcOET e BuOH demostraram efeito fungistatico e bactericida. O estudo in silicoindicou possiveis ligantes da procianidina dimerica do tipo B e isovitexina relacionados a atividade anti-inflamatoria e antimicrobiana. Os resultados obtidos sao ineditos para a especie, justificam seu uso na medicina popular e revelam que os extratos das folhas e das cascas do caule apresentam um potencial terapeutico para o desenvolvimento de fitoterapicos com propriedades anti-inflamatorias e antimicrobianas.


  • Mostrar Abstract
  • A espécie Commiphora leptophloeos(Burseraceae)é uma planta nativa do Brasil, pertence ao bioma caatinga e é conEHcida popularmente como “imburana-de-espinho” e “imburana-de-cambão”. Os estudos etnobotânicos citam o uso da espécie no tratamento de inflamações e infecções. Dentro deste contexto, o presente estudo objetivou avaliar a toxidade, a atividade anti-inflamatória e antimicrobiana em ensaios não clínicos in vitro e in vivo dos extratos das folhas e das cascas do caule, e isolar, identificar e quantificar os marcadores químicos. No estudo fitoquímico, o extrato hidroetanólico foi preparado por maceração e as frações foram obtidas por particição líquido-líquido (fração diclorometano, acetato de etila-AcOEt e n-butanol-BuOH). O isolamento, a elucidação estrutural e a caracterização das substâncias nos extratos foram realizadas por CPC,CL-EM, FIA-ESI-IT-MS/MSe RMN de1H e a quantificação dos marcadores nos extratos por CLAE-DAD-ELSD. A toxicidade dos extratos foi avaliadain vitro pelo ensaio de MTT e citometria de fluxo e in vivo pelo teste de toxicidade aguda, via oral. A atividade anti-inflamatória in vitro foi avaliada pelo ensaio de óxido nítrico induzido por LPS e in vivo nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e de bolsa de ar induzida por zimosam. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e triagem virtual dos compostos isolados foi realizada por estudos in sílico. Do extrato das folhas, foram isolados 2 flavonoides por CPC e caracterizadas 16 substâncias por espectrometria de massas como ácidos fenólicos, flavonoides glicosilados derivados de quercetina, luteolina e apigenina e taninos condensados derivados de catequina. Das cascas do caule foram isolados 2 taninos por CPC e caracterizadas 8 substâncias como ácidos fenólicos e procianidinas. O extrato das folhas a 200 μg/mL e o extrato das cascas do caule nas concentrações de 1, 10, 100 e 200 μg/mL demonstraram efeito anti-inflamatório in vitro no ensaio de óxido nítrico induzido por LPS. No modelo de edema de pata induzido por carragenina, o extrato das folhas e das cascas do caule nas doses de 100, 200 e 400 mg/kg, via oral, reduziu significativamente (p<0,001) o edema seguido da redução damieloperoxidase (MPO) e no modelo de bolsa de ar induzido por zimosam, nas mesmas doses testadas, reduziramsignificativamente (p<0,001) a migração celular, a concentração de proteínas totais, a mieloperoxidase (MPO), os níveis de malondialdeído (MDA) e da citocina pró-inflamatória TNF-α e aumentou a produçãoda citocina anti-inflamatória IL-10.Na avaliação da atividade antimicrobiana, o extrato das cascas do caule e as frações AcOET e BuOH demostraram efeito fungistático e bactericida. O estudo in sílicoindicou possíveis ligantes da procianidina dimérica do tipo B e isovitexina relacionados à atividade anti-inflamatória e antimicrobiana. Os resultados obtidos são inéditos para a espécie, justificam seu uso na medicina popular e revelam que os extratos das folhas e das cascas do caule apresentam um potencial terapêutico para o desenvolvimento de fitoterápicos com propriedades anti-inflamatórias e antimicrobianas.

11
  • ANNA CLARA DE ARAÚJO CARDOSO
  • PLASMÍDEOS FORMULADOS COM NANOPARTICULAS CATIÔNICAS: ANÁLISE DA ESTABILIDADE FÍSICO QUÍMICA E BIOLÓGICA

  • Orientador : MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCELO DE SOUSA DA SILVA
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • ARIANE FERREIRA LACERDA
  • ELIZABETH CRISTINA GOMES DOS SANTOS
  • Data: 28/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Os plasmídeos (pDNAs) têm se destacado quanto a sua aplicação em biotecnologia, principalmente em vacinas de DNA e terapia gênica. pDNAs são moléculas de DNA dupla fita extracromossomal, que apresentam forma circular e exibem diferentes isoformas. A agência Food and Drug Administration recomenda que durante a utilização de pDNAs em protocolos de imunização, os mesmos devem estar pelo menos 80% na sua isoforma superenrolada, pois estudos conferem que a isoforma superenrolada tem um maior acesso ao interior das células. A isoforma superenrolada pode ser alterada por fatores químicos, físicos e biológicos. Tendo em vista a importância da estabilidade estrutural de pDNAs na sua função biológica, esse estudo objetiva avaliar a estabilidade de pDNAs utilizados em biotecnologia, e testar uma nanoformulação com nanopartículas funcionalizadas com polietilenoimina (PEI) com pDNAs associado, afim de promover um aumento na estabilidade e biodisponibilidade de pDNAs. Foi avaliado o efeito da temperatura de incubação, tamanho do plasmídeo e concentração de nucleases sob a conservação da isoforma superenrolada por meio do desenvolvimento de um protocolo de cinética de degradação. Também foi avaliado a estabilidade de pDNAs formulados com nanopartículas funcionalizadas com PEI frente a variáveis de tempo, concentração de nucleases e comparando com pDNAs formulados com nanopartículas não funcionalizadas. Nas temperaturas de 37°C e 42°C houve a maior degradação dos plasmídeos, bem como nas maiores concentrações de soro, apresentando isoformas superenrolada somente na diluição 1:64. O plasmídeo de menor tamanho, 3,0 kb, apresentou menor degradação em todos os testes. A preparação de nanopartículas funcionalizadas com PEI associado ao pDNA se mostrou uma alternativa promissora para proteger contra degradação enzimática, apresentando eficiência de associação com o plasmídeo de 100%. Porem requer mais estudos in vitro e in vivo para verificar fatores de segurança e taxa de transferência gênica.


  • Mostrar Abstract
  • The plasmids (pDNAs) have been standing out regarding to its application at biotechnology, mostly in DNA vaccination and genic therapy. pDNAs are DNA molecules with extra chromosomal double bands, presenting circular shape and have different isoforms. The Food and Drug Administration recommends that during pDNAs utilization on immunization protocols, they must be at least 80% on its super-curled isoform, once the studies assign that super-curled isoforms have a larger access to the interior of cells. Super curled isoform may be altered by chemical, physical and biological factors. Owing to its importance at pDNAs structure stability at biological function, this study aims to evaluate the pDNAs stability used at biotechnology, ands tests a nanoformulation with polyethyleneimine (PEI) associated to pDNAs, in order to promote a stability and bioavailability increasing of pDNAs. We evaluate the temperature effect at incubation, plasmid size and nucleases concentrations under super-curled isoform conservation. Also, it was evaluated pDNAs stability using functionalized nanoparticles with PEI through time variables, nucleases concentration and comparing to non functionalized nanoparticles formulated pDNAs. On 37°C and 42°C temperatures, there was higher degradation on plasmids, as well as higher serum concentration, presenting super-curly isoforms only at 1:64 dilution. The smaller sized plasmid presented lower degradation in all the tests. The preparation of functionalized nanoparticles with PEI associated to pDNA showed to be a promising alternative of protection against enzymatic degradation, with 100% efficiency of plasmid association. However, it requires more in vitro and in vivo studies to verify security factors and genic transference rate.

12
  • JÚLIA GABRIELA RAMOS PASSOS
  • AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTI-INFLAMATÓRIA, CICATRIZANTE E ANTIOFÍDICA DE UM GEL CONTENDO O EXTRATO HIDROETANÓLICO DAS FOLHAS DE Jatropha mollissima (Pohl) Baill.

  • Orientador : MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GERLANE COELHO BERNARDO GUERRA
  • JULIANA FELIX DA SILVA
  • KARLA PATRÍCIA DE OLIVEIRA LUNA
  • MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
  • Data: 29/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Acidentes provocados por serpentes são considerados um grande problema de saúde pública em várias regiões do mundo. O gênero Bothrops é responsável pela grande maioria dos acidentes ofídicos no Brasil. Sabe-se que atualmente o principal tratamento específico disponível para a picada dessas serpentes é o soro antibotrópico, porém o mesmo apresenta algumas limitações, tais como: não combater os efeitos locais de forma eficaz, difícil acesso em algumas regiões, além do alto custo. Plantas do gênero Jatropha (Euphorbiaceae) são frequentemente indicadas pela medicina tradicional, em algumas regiões do Brasil, para reverter os danos induzidos por picadas de serpentes e também com função anti-inflamatória. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho é avaliar o potencial anti-inflamatório, cicatrizante e antiofídico contra a peçonha da serpente Bothrops jararaca do extrato hidroetanólico das folhas de Jatropha mollissima (Pohl) Baill. incorporado em uma formulação desenvolvida para aplicação por via tópica. Foram realizados ensaios para avaliar a atividade anti-inflamatória tópica desta formulação nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e edema de orelha induzido por aplicação única (inflamação aguda) ou aplicações múltiplas (inflamação crônica) de óleo de cróton. Também foram realizados testes para avaliar a atividade cicatrizante da formulação, enquanto o teste de irritação cutânea foi conduzido para analisar a segurança durante o uso tópico das formulações desenvolvidas. Foi possível observar que o gel apresenta ação anti-inflamatória nos modelos de inflamação aguda induzida por carragenina, visto através da diminuição da espessura da pata, além de inibir os modelos de inflamação aguda e crônica induzidas por óleo de cróton, vistos através da diminuição da espessura da orelha, além da diminuição de parâmetros inflamatórios e oxidativos. Também foi revelado que o gel apresenta atividade cicatrizante, uma vez que o mesmo diminuiu de forma significativa o tamanho da ferida em relação ao grupo placebo. O gel não provocou irritação cutânea nos camundongos, mostrando-se seguro para uso tópico. A eficácia do gel contendo o extrato hidroetanólico das folhas de J. mollissima sozinho e em associação com o soro comercial antibotrópio-crotálico polivalente quanto ao seu potencial antiofídico frente os efeitos locais do envenenamento por B. jararaca foi avaliada no modelos de edema de pata, hemorragia muscular e dermonecrose induzidos por esta peçonha. Como resultado, foi visto que as atividades edematogênica e hemorrágica induzidas pela peçonha foram inibidas tanto pelo gel, como pela sua associação com o soro antiofídico, uma vez que estes tratamentos reduziram o edema, além de diminuírem de maneira significativa a concentração de hemoglobina no músculo inoculado com peçonha, tendo consequentemente um potencial anti-hemorrágico significativo. Nesse estudo foi exibido também que o soro antiofídico sozinho não foi capaz de inibir a dermonecrose induzida no dorso dos animais, diferentemente do gel JmF 5%, que inibiu o tamanho do halo dermonecrótico de forma significativa. Em conclusão, os resultados demonstram que o gel contendo o extrato hidroetanólico das folhas de J. mollissima apresenta potencial atividade anti-inflamatória, cicatrizante e antiofídica, atuando sobre os efeitos locais da picada, sugerindo que esta formulação de uso tópico possui um importante potencial antiofídico como alternativa complementar ao tratamento dos efeitos locais induzidos pelo envenenamento botrópico, além de atuar como potencial cicatrizante e anti-inflamatório tópico.


  • Mostrar Abstract
  • Accidents caused by snakes are considered a major public health problem in several regions of the world. Bothrops are responsible for the vast majority of ophidic accidents in Brazil. It is known that, currently, the only specific treatment available for the bite of these snakes is the bothropic antivenom, but it has some limitations, such as not combat local effects effectively, difficult access in some regions, and high cost. Plants of the genus Jatropha (Euphorbiaceae) are often indicated by traditional medicine, in some regions of Brazil, to reverse the damage caused by snake bites and also with anti-inflammatory function. In this view, the objective of this work was to evaluate the anti-inflammatory, healing and antiophidic potential against the venom of the snake Bothrops jararaca of the hydroethanolic extract of the leaves of Jatropha mollissima (Pohl) Baill. incorporated into a formulation developed for topical application. Tests were performed to evaluate the topical anti-inflammatory activity of this species in carrageenan-induced paw edema and ear edema induced by single application (acute inflammation) or multiple applications (chronic inflammation) of chroton oil. Tests were also performed to evaluate the healing activity of the formulation, while the skin irritation test was conducted to analyze safety during topical use of the formulations developed. It was possible to observe that the gel had anti-inflammatory action in acute inflammation models induced by carrageenan, and in acute and chronic inflammation models by chroton oil. chroton oil. It was also observed that the gel has cicatrizant activity, since it significantly decreased the size of the wound in relation to the placebo group. The gel did not cause skin irritation in mice, proving to be safe for topical use. The efficacy of the gel containing the hydroethanolic extract of the leaves of J. mollissima alone and in association with the commercial polyvalent antibothropic-crotalic commercial antivenom in relation to its antiophidic potential against the local effects of B. jararaca envenoming were evaluated in the paw edema and muscle hemorrhagic models and it was seen that the venom-induced edematogenic and hemorrhagic activities were inhibited, both by the gel alone and by the association with the antiophidic antivenom, since these treatments reduced edema (the gel treatment containing the extract in association with the antiophidic antivenom had an inhibition of approximately 90% after four hours of the envenoming), in addition to significantly reducing the concentration of hemoglobin in the evaluated tissues, consequently having a significant anti-hemorrhagic potential. In conclusion, the results show that the gel containing the hydroethanolic extract of the leaves of J. mollissima shows potential anti-inflammatory, healing and antiophidic activity, acting on the local effects of the bite, suggesting that this formulation of topical use has an important antiophidic potential as a complementary alternative to the treatment of local effects caused by bothropic envenoming, besides acting as healing potential and topical anti-inflammatory for the treatment of various skin diseases.

13
  • RAQUEL RIBEIRO BARBOSA
  • AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTI-HELMÍNTICODO EXTRATO DAS FOLHAS DA Calotropis procera EM NEMATÓIDES GASTRINTESTINAIS DE OVINOS PARA O DESENVOLVIMENTO DE FITOTERÁPICO DE USO VETERINÁRIO

  • Orientador : SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LILIAN GIOTTO ZAROS DE MEDEIROS
  • MAIRA CONCEIÇÃO JERONIMO DE SOUZA LIMA
  • SILVANA MARIA ZUCOLOTTO LANGASSNER
  • Data: 29/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Os nematóides gastrintestinais são uma das principais preocupações de produtores no que diz respeito a sanidade de pequenos de ruminantes. A ocorrência da resistência anti-helmíntica, em função do uso indiscriminado, tem favorecido investigações sobre o uso de tratamentos alternativos. A C. procera pertence à família Apocynaceae, popularmente conhecida como “bombardeira”, “flor de seda”, “algodoeiro de seda” e “rosa cera”, nativa da África e Índia, a espécie, apresenta boa adaptabilidade às condições semiáridas do Nordeste brasileiro. Relatos dessa planta por produtores rurais indicam o uso na alimentação animal e no alívio de distúrbios gastrintestinais. Dessa forma, este estudo objetivou avaliar o potencial antihelmíntico do extrato hidroetanólico das folhas daC. procerapor meio de ensaios in vitro e in vivo em nematóides gastrintestinais de ovinos naturalmente infectados. O experimento foi divido nas seguintes etapas: I. Preparo do extrato e estudo fitoquímico;II. Avaliação da atividade anti-helmíntica in vitro;III.Avaliação da Citotoxicidade eToxicidade oral aguda e IV. Ensaio Clínico.Como resultados, o extrato que apresentou melhor perfil fitoquímico e rendimento foi o extrato em etanol 70% preparado na proporção 1g/20ml (planta/solvente),por meio da triagemfitoquímica foi observada a presença demetabólitos secundários pertencentes aos grupos dos flavonoides,saponinas, alcaloides e fenois.Ainda, a análise por Cromatografia em Camada Delgada,sugeriu a presença de rutina, canferol, vitexina.Na análise por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência Aclopada a Espectofotômetro de Massas Ion – Trapfoi possível identificar21 compostos fenólicos. Em relação ao estudo in vitro para avaliação da atividade anti-helmíntica, oextrato deC. procera apresentou um percentual de inibição da eclodibilidadede ovos superior a 90% naconcentraçãode 24mg/mle de 100 % nas concentrações superiores a 36 mg/ml após 48 h de incubação. No teste do desenvolvimento larval,mais de 90% das larvas permaneceram em estágio rabditóide em concentrações superiores a 6 mg/ml doextrato deC. procera. A avaliação da citotoxicidade pelo ensaio de MTT(brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil tetrazolium]) mostrou que as concentrações de 1 a 1.000 μg/ml do extratonão apresentaram citotoxicidade quando comparadas ao controle negativo. Oteste de toxicidade oral aguda em ratos, não apresentou mortalidade nas dosesde 1.000 mg/Kg e 2.000 mg/Kg, via oral, assim como, não foram observadasalterações significativas nos parâmetros hematológicos e bioquímicos nos grupos tratados. Os resultados apresentados no ensaio clínico com ovinosdemonstraram uma redução significativa (76%)pós-tratamento,no 14º dia na contagem de ovos por grama de fezes, quando administrada a dose oral única de 500 mg/Kg. Não foram observadas alterações hematológicas e bioquímicas que evidenciem toxicidade hepática e renal nos animais tratados com o extrato de C. procera.Pode-se concluir que esse estudo forneceu evidências da atividade anti-helmínticado extrato das folhas da C. procera em nematóides gastrintestinais de ovinos naturalmente infectados.Embora o extrato da C. procera possa não ter um efeito anti-helmíntico altamente eficaz (>90%), o efeito redutor observado nesse estudo pode ser de grande valor em programas de controle integrado de parasitos.


  • Mostrar Abstract
  • Gastrintestinal nematodes are one of the main concerns of producers regarding the sanity of small ruminants. The occurrence of anthelmintic resistance, due to the indiscriminate use, has favored investigations on the use of alternative treatments. The C. procera belonging to the family Apocynaceae is popularly known as "bombardeira", "silk flower" and "silk cotton". Native to Africa and India, the species shows good adaptability to the semi-arid conditions of the Brazilian Northeast, reports of this plant by rural producers indicate the use in farm animal feed and the relief of gastrointestinal disorders.Thus, this study aimed to evaluate the anthelmintic potential of the hydroethanolic extract of C. procera leaves by means of in vitro and in vivo assays on gastrintestinal nematodes of naturally infected sheep. The experiment was divided in stages: I. Phytochemical screening; II. Evaluation of antihelmintic activity in vitro; III. Evaluation of toxicity and IV. Clinical Trial. As a result, phytochemical screening showed the presence of secondary metabolites belonging to the flavonoids, saponins, alkaloids and phenols. Thin Layer Chromatography analysis suggested the presence of rutin, canferol and vitexin. Analysis by HPLC-ITMS / MS, identified the presence of 21 phenolic compounds. The extract of C. procera leaves had a percentage of egg hatchability greater than 90% at 24 mg/ml and 100% at concentrations higher than 36 mg/ml after 48 h of incubation. In the larval development test, more than 90% in stage rabbtoid larva at concentrations greater than 6 mg/ml of the C. procera leaves extract. The MTT assay showed that concentrations of 1 to 1.000 μg/ml of the extract showed no cytotoxicity when compared to the negative control. The acute oral toxicity test in rats showed no mortality at doses of 1.000 mg/Kg and 2.000 mg/Kg orally, as well as no significant changes in hematological and biochemical parameters in the treated groups. The results presented in the clinical trial with sheep showed a significant reduction (76%) on the 14th day in the egg count per gram of faeces after treatment when the single oral dose of 500 mg/Kg was administered. No hematological and biochemical alterations have been observed that show hepatic and renal toxicity in the animals treated with the C. procera extract. It can be concluded that this study provided evidence of the anthelmintic activity of C. procera leaf extract in gastrintestinal nematodes of naturally infected sheep.Although C. procera extract may not have a highly effective anthelmintic effect (> 90%), the reducing effect observed in this study may be of great value in integrated parasite control programs.

14
  • MAGNA MARCELA FERREIRA DE OLIVEIRA
  • QUANTIFICAÇÃO DAS PROTEÍNAS WT1, NEFRINA E PODOCINA
    NAS VESÍCULAS EXTRACELULARES URINÁRIAS
    DE GESTANTES COM PRÉ-ECLÂMPSIA GRAVE

  • Orientador : MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANA AUGUSTO DE REZENDE
  • MARCELA ABBOTT GALVAO URURAHY
  • RICARDO NEY OLIVEIRA COBUCCI
  • Data: 29/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença específica da gravidez caracterizada por hipertensão e proteinúria após 20 semanas de gestação, cujas complicações da PE podem comprometer diretamente a vida da mãe e do feto. Assim, a pesquisa de um marcador para predição pode levar a uma intervenção mais precoce nos casos de PE. Uma vez que a associação dos podócitos (células renais) e de proteínas marcadores de podócitos (fator tumoral de Willms 1 – WT1, nefrina e podocina) com a PE vêm sendo descrita na literatura, torna-se importante avaliar essas proteínas, em vesículas extracelulares eliminadas na urina (VEus), nesse grupo de pacientes. Assim, foram pesquisadas as proteínas WT-1, nefrina e podocina em VEus de gestantes com PE em busca de potenciais marcadores de pré-eclâmpsia utilizando-se uma amostra coletada de forma não invasiva. Vinte gestantes, sendo 10 com diagnóstico de pré-eclâmpsia grave (hipertensão e proteinúria após 20 semanas de gestação) e 10 normotensas, foram incluídas no estudo. As proteínas foram quantificadas por Western-blot, após o isolamento das VEus por ultracentrifugação. Foi observado um aumento significativo da nefrina (p = 0,008) no grupo das pacientes com pré-eclâmpsia quando comparadas com o grupo das gestantes normotensas. Os resultados sugerem que a nefrina presente em vesículas extracelulares urinárias, pode ser um potencial marcador para a predição da pré-eclâmpsia.


  • Mostrar Abstract
  • Preeclampsia (PE) is a pregnancy-specific disease characterized by hypertension and proteinuria after 20 weeks of gestation, whose complications of PE can directly affect the life of the mother and fetus. Thus, searching for a marker for prediction can lead to earlier intervention in cases of PE. Since the association of podocytes (renal cells) and podocyte marker proteins (Willms tumor factor 1 - WT1, nephrine and podocin) with PE has been described in the literature, it is important to evaluate these proteins in vesicles in the urine (VEus) in this group of patients. Thus, WT-1, nephrine and podocin proteins were investigated in VEus of pregnant women in search of potential markers of preeclampsia using a non-invasively collected sample. Twenty pregnant women, 10 of whom had a diagnosis of preeclampsia (hypertension and proteinuria after 20 weeks gestation) and 10 normotensive women, were included in the study. The proteins were quantified by Western blot after the isolation of the VEs by ultracentrifugation. Significant increase in nephrine (p = 0.008) and was observed in the group patients with preeclampsia when compared to healthy pregnant women. The results suggest that nephrine present in urinary extracellular vesicles, may be a potential marker for the prediction of preeclampsia.

15
  • MARTA DANIELLE DE ALMEIDA PIMENTA CUNHA
  • MODELO FARMACOCINÉTICO POPULACIONAL PARA A AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE AO SULFATO DE MAGNÉSIO EM GESTANTES COM PRÉ ECLÂMPSIA

  • Orientador : ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIO MANUEL GOUVEIA DE OLIVEIRA
  • MIGUEL ADELINO DA SILVA FILHO
  • SERGIO RICARDO FERNANDES DE ARAUJO
  • Data: 29/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • OBJETIVOS: desenvolver um modelo farmacocinético populacional considerando características individuais visando a adequação posológica e menor ocorrência de toxicidade em gestantes com PE. METODOLOGIA: Coorte prospectiva em pacientes com pré-eclâmpsia em uso de sulfato de magnésio entre junho de 2016 a fevereiro de 2018. As gestantes (n=111) receberam 4 g de sulfato de magnésio intravenoso e infusão posterior de a 1 g/h por 24 horas. O magnésio foi dosado em amostras de sangue obtidas antes da administração, após 2, 6, 12 e 18 horas da dose inicial e 4 horas após o término da infusão. Reações adversas ao sulfato de magnésio foram investigadas diariamente. Os parâmetros farmacocinéticos populacionais foram estimados usando o software Monolix ® 2018 Suite (Lixoft ®, Antony, França) e um modelo incluindo covariáveis demográficas, clínicas e laboratoriais foi desenvolvido. RESULTADOS: A farmacocinética do sulfato de magnésio pode ser caracterizada como monocompartimental. Pacientes com menor peso corporal e creatinina sérica elevada se encontram mais susceptíveis a toxicidade do magnésio. O modelo obtido considera alterações na taxa de infusão como de potencial efeito protetor. CONCLUSÃO: a modelagem farmacocinética populacional estabeleceu uma relação entre volume de distribuição, taxa de depuração renal e ocorrência de reações adversas ao sulfato de magnésio em gestantes.


  • Mostrar Abstract
  • OBJECTIVES: To develop a population pharmacokinetic model considering individual patient characteristics aimed at an improved dose definition for the prevention of toxicity in pregnant women with pre-eclampsia (PE). METHODOLOGY: Prospective cohort of patients with preeclampsia administered magnesium sulfate. The patients (n = 111) received 4 g of magnesium sulphate intravenously followed by the hourly infusion of 1 g during 24 hours. Serum magnesium levels were measured in blood samples obtained before administration and 2, 6, 12 and 18 hours after the initial dose and 4 h after the end of the administration. Adverse reactions to magnesium sulphate were investigated through active search. Population pharmacokinetic parameters were estimated using the Monolix software® 2018 Suite (Lixoft®, Antony, France). Demographic, clinical and laboratory variables were tested for significance. RESULTS: A 1-compartment model was adopted. Patients with a lower body weight and higher serum creatinine are more susceptible to magnesium toxicity. CONCLUSION: The population pharmacokinetics model proposes the adoption of individualized dosing schemes of magnesium sulfate based on creatinine and body weight in order to prevent toxicity manifestations.

16
  • GABRIEL BEZERRA MOTTA CÂMARA
  • NANO-HÍBRIDOS TERMORESPONSIVOS CONTENDO POLOXAMINAS E
    LAPONITA COMO CARREADORES DE BETA-LAPACHONA: PLATAFORMA PARA
    TERAPIA ANTICÂNCER

  • Orientador : FERNANDA NERVO RAFFIN
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FERNANDA NERVO RAFFIN
  • ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
  • LEONARDO FERNANDES FRACETO
  • RAQUEL DE MELO BARBOSA
  • Data: 29/03/2019

  • Mostrar Resumo
  • Os Tetronics® são copolímeros que formam micelas e têm a capacidade de transitar
    de forma reversível entre as fases sol-gel de acordo com a sua concentração, pH e
    temperatura, podendo ser utilizados em sistemas de liberação controlada para
    fármacos de baixa solubilidade aquosa. Foram testados os Tetronics® T904, T90R4 e
    T1304 para incorporação da β-lapachona (BLPC) escolhida, por suas diversas
    atividades biológicas caracterizadas, sobretudo, anticancerígenas e anti-inflamatórias
    e que apresentar uma solubilidade aquosa muito baixa (0,038 mg.ml-1), que limita sua
    biodisponibilidade e administração sistêmica. Para auxiliar na estabilidade fisicoquimica
    das micelas, como modificador reológico foi adicionada a hectorita sintética
    Laponita RD® (LAP), que forma hidrogéis. As amostras foram preparadas variando de
    1 a 20% as concentrações dos polímeros e de 0 a 3% as de Laponita. Os parâmetros
    analisados foram: Aumento da solubilidade da BLPC, comportamento reológico dos
    sistemas, tamanho das partículas por espalhamento dinâmico de luz, caracterização
    por análises térmicas (TG e DSC), Espectrometria de Infravermelho, perfil de liberação
    e citotoxicidade in vitro em fibroblastos murinos e células de adenocarcinoma humano.
    Os sistemas híbridos aumentaram em mais de 50 vezes a solubilidade da BLPC em
    relação a água, formaram compostos estáveis termicamente e a BLPC apresenta
    sinais de encapsulação nas micelas criadas, promoveram uma liberação controlada
    da BLPC por 140 horas e foram mais eficientes na morte de células cancerígenas em
    ensaios in vitro que o fármaco livre.


  • Mostrar Abstract
  • Tetronics® are copolymers that form micelles and have the ability to reversibly
    transition between the sol-gel phases according to their concentration, pH and
    temperature, and can be used in controlled release systems for drugs of low aqueous
    solubility. Tetronics® T904, T90R4 and T1304 were tested for β-lapachone
    incorporation (BLPC), which was selected for its various biological activities,
    characterized in particular as anticancer and anti-inflammatory and which presented
    very low aqueous solubility (0.038 mg.ml -1 ), which limits its bioavailability and
    systemic administration. To aid in the physical-chemical stability of the micelles, as a
    rheological modifier was added to synthetic hectorite Laponite RD® (LAP), which forms
    hydrogels. The samples were prepared by varying from 1 to 20% the polymer
    concentrations and from 0 to 3% the Laponite ones. The parameters analyzed were:
    Increased BLPC solubility, rheological behavior of the systems, particle size by
    dynamic light scattering, characterization by thermal analysis (TG and DSC), Infrared
    Spectrometry, release profile and in vitro cytotoxicity in murine fibroblasts and human
    adenocarcinoma cells. Hybrid systems increased the solubility of BLPC more than 50
    times with respect to water, formed thermally stable compounds and BLPC showed
    signs of encapsulation in the micelles created, promoted a controlled release of BLPC
    for 140 hours and were more efficient in killing cancer cells in in vitro assays than the
    free drug.