Banca de QUALIFICAÇÃO: LUKAS IOHAN DA CRUZ CARVALHO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LUKAS IOHAN DA CRUZ CARVALHO
DATA : 29/09/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Google Meet, https://meet.google.com/bgb-nhev-jbe
TÍTULO:

Caracterização Molecular de Neurônios Humanos Induzidos com Bioinformática

PALAVRAS-CHAVES:

HiNPCs; ASCL1; SMAD; scRNA-Seq

PÁGINAS: 56
RESUMO:

Vários protocolos foram desenvolvidos nos últimos anos para gerar células neuronais a partir de células-tronco pluripotentes induzidas humanas (hiNPCs), revolucionando a pesquisa em neurociência e aprimorando nossa compreensão da patogênese de doenças humanas. Esses protocolos abrangem abordagens como a inibição de SMAD ou a conversão forçada de hiNPCs em neurônios induzidos humanos (hINs) por meio da expressão de fatores de transcrição cruciais (TFs) associados à diferenciação neuronal. Neste estudo, realizamos uma análise comparativa de um novo método de geração de hINs, que combina a inibição de SMAD com a superexpressão de ASCL1, um TF bem conhecido implicado na indução neuronal, juntamente com duas estratégias de diferenciação: diferenciação induzida por NEUROG2 e diferenciação espontânea de hiNPCs. Após um período de diferenciação de 4-6 semanas, as células desses protocolos distintos foram isoladas, submetidas a sequenciamento e posteriormente analisadas usando ferramentas analíticas de célula única. Nossas descobertas a partir da expressão diferencial e da Análise de Enriquecimento de Conjunto de Genes (GSEA) revelaram que os hINs induzidos por ASCL1, abrangendo subtipos glutamatérgicos e GABAérgicos, exibiram uma significativa superexpressão de genes associados à maturação sináptica e ao desenvolvimento neuronal, distinguindo-os de hiNPCs_4w, hiNPCs_6w e hINs induzidos por NEUROG2. Além disso, a análise de identidade regional revelou uma identidade cortical predominante entre as células glutamatérgicas, em contraste com as diversas identidades regionais observadas entre os neurônios GABAérgicos. Adicionalmente, a análise de regulons identificou fatores de transcrição candidatos que podem elucidar o mecanismo por trás das propriedades aprimoradas de maturação do novo protocolo ASCL1. Uma exploração mais aprofundada dos alvos downstream desses regulons e das redes regulatórias associadas apresenta uma perspectiva intrigante para investigações futuras sobre essa abordagem inovadora de diferenciação de hINs.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1674643 - MARCOS ROMUALDO COSTA
Externo ao Programa - 2183828 - TARCISO ANDRE FERREIRA VELHO - UFRN