Metagenômica de consórcios microbianos para biorremediação de resíduo de perfuração.
Resíduo de perfuração; consórcio microbiano; metagenoma; biodegradação; biossurfactantes.
Resíduo de perfuração de poços de petróleo caracteriza-se como um resíduo sem tratamento adequado, o qual vem sendo acumulado gerando um passivo ambiental de grandes proporções. Assim, conhecimentos da comunidade microbiana e suas funções no resíduo de perfuração pode ser útil no desenvolvimento de estratégias de biorremediação. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo identificar microrganismos do resíduo de perfuração de poços de petróleo por abordagem metagenômica e obter consórcios bacterianos e bactérias isoladas que tenham atividade de degradação de hidrocarbonetos e/ou produção de biossurfactantes, visando aplicação em estratégias de biorremediação. O DNA total foi extraído diretamente das amostras de resíduo de perfuração e consórcios (enriquecidos em diferentes meios) e sequenciados usando a plataforma Ion Torrent. Bactérias isoladas dos consórcios foram identificadas por meio do sequenciamento do rDNA 16S, pelo método Sanger. Análises taxonômicas revelaram mudanças a nível de filo e consequentemente gênero entre as amostras. Enquanto no resíduo de perfuração predominaram filo Proteobacteria e gênero Halomonas, nos consórcios maiores abundâncias foram observadas para o filo Firmicutes e gêneros Paenibacillus e Brevibacillus. Análise funcional utilizando banco de dados específico para a degradação de hidrocarbonetos e produção de biossurfactantes (BioSurfDB), revelou que a seleção não apenas manteve vias relacionadas a degradação de hidrocarbonetos e produção de biossurfactantes como favoreceu significativamente algumas. Crescimento na presença de petróleo, ensaio de degradação colorimétrico utilizando o indicador DCPIP e testes de emulsificação indicaram capacidade de degradação de hidrocarbonetos e produção de biossurfactantes pelos consórcios. Ao retorno ao resíduo ao qual foram obtidos, os consórcios selecionados em meio LB e YPD foram capazes de degradar 66 e 35% de n-alcanos, respectivamente. Assim, diferenças na composição dos microrganismos, provavelmente devido a etapa de enriquecimento em diferentes meios, refletiram diferentes capacidades metabólicas. Meio LB parece ter selecionado comunidade microbiana mais adequada à remoção de alcanos no resíduo de perfuração. Sequencias de rDNA 16S obtidas de cepas isoladas submetidas a análises filogenéticas por diferentes métodos sugerem que as sequencias alvo deste trabalho representam candidatos a novas cepas pertencentes aos clados Brevibacillus, Micrococcus e Bacillus. Metagenômica mostrou-se como uma ferramenta poderosa na análise das comunidades microbianas e escolha da estratégia de biorremediação. Bioaumentação autóctone pode ser uma alternativa eficiente na degradação hidrocarbonetos. Método de enriquecimento através de diferentes meios pode afetar a composição da comunidade microbiana e a degradação. Além disso, através deste método possivelmente novos microrganismos poderiam ser isolados.