Banca de QUALIFICAÇÃO: KYVIA REGINA FERNANDES VARELA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : KYVIA REGINA FERNANDES VARELA
DATA : 09/10/2026
HORA: 09:00
LOCAL: VIDEOCONFERÊNCIA
TÍTULO:

DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE CANDIDATOS VACINAIS BASEADOS EM ANTÍGENOS RECOMBINANTES DE Trypanosoma cruzi

PALAVRAS-CHAVES:

Trypanosoma cruzi. Doença de Chagas. Vacinas. Proteínas recombinantes. Tc80.

PÁGINAS: 180
RESUMO:

A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, permanece como um importante problema de saúde pública e, apesar dos avanços no controle da transmissão e no manejo da infecção, ainda não dispõe de uma vacina aprovada. Nesse contexto, a identificação de antígenos imunogênicos e o estabelecimento de estratégias adequadas para sua produção são etapas importantes para o desenvolvimento de novos protótipos vacinais. Assim, este trabalho teve como objetivo desenvolver e caracterizar candidatos vacinais baseados em antígenos de T. cruzi, investigando a produção recombinante da cruzipaína (CZP), proteína de superfície de amastigotas 2 (ASP2), prolil oligopeptidase de 80 kDa (Tc80) e a região N-terminal da transsialidase (nTS), em sistema bacteriano e, posteriormente, avaliando a resposta humoral induzida pela Tc80 recombinante. Os plasmídeos contendo os genes de interesse foram caracterizados e empregados em ensaios de expressão em diferentes linhagens de Escherichia coli, sob distintas condições de indução. Entre os quatro antígenos avaliados, apenas a Tc80 apresentou expressão recombinante detectável, sendo observada majoritariamente na fração insolúvel. Variações na linhagem bacteriana, temperatura, tempo de indução e concentração de IPTG não possibilitaram a visualização da expressão de CZP, ASP2 e nTS. A Tc80 recombinante foi recuperada por eletroeluição a partir de gel de poliacrilamida e utilizada na imunização de camundongos para avaliação de sua imunogenicidade. A resposta humoral foi acompanhada por ELISA indireto e o perfil de reconhecimento antigênico dos anticorpos produzidos foi avaliado por Western blotting. A imunização induziu aumento da reatividade de IgG contra a Tc80 recombinante, acompanhado pelo reconhecimento de componentes presentes no extrato de T. cruzi, enquanto a reatividade frente ao extrato de E. coli permaneceu baixa. Por Western blotting, os anticorpos policlonais reconheceram a proteína recombinante e apresentaram reatividade frente a um componente do extrato parasitário com massa molecular compatível com a Tc80, sem reconhecimento evidente de proteínas do extrato bacteriano nas condições avaliadas. Em conjunto, os resultados evidenciam os desafios associados à expressão heteróloga de diferentes antígenos de T. cruzi e demonstram que, entre os candidatos avaliados, a Tc80 apresentou características que permitiram avançar da produção recombinante para sua caracterização imunológica. Mesmo recuperada a partir da fração insolúvel por eletroeluição, a preparação de Tc80 mostrou-se imunogênica e induziu anticorpos capazes de reconhecer o antígeno recombinante e componentes do parasito. Esses achados estabelecem uma base experimental para o aprimoramento da produção dos antígenos estudados e para sua posterior avaliação em estratégias vacinais, combinando proteínas recombinantes e imunização genética contra a doença de Chagas.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3652554 - FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
Interna - 1143827 - JULIANA FELIX DA SILVA
Externo ao Programa - 2213126 - VALTER FERREIRA DE ANDRADE NETO - null