Identificação de Polimorfismos em Genes Candidatos Associados à Resistência a Nematoides Gastrintestinais em Caprinos Mestiços
Biotecnologia, marcadores moleculares, nematoides, gastrintestinais, resistência
O presente trabalho teve como objetivo associar polimorfismos de genes candidatos à resistência a nematoides gastrintestinais em caprinos mestiços. Para isso, foram previamente selecionados 59 caprinos F2 (Anglo-Nubiano x ½ Saanen) com diferentes graus de resistências às endoparasitoses gastrintestinais através de marcadores fenotípicos. Esses animais foram monitorados por um período de 93 dias, sendo coletados sangue e fezes a cada 7 dias. O sangue coletado durante o período da caracterização fenotípica foi utilizado nesse estudo para extração de DNA. O DNA extraído foi submetido à leitura em espectrofotômetro para mensuração da sua concentração e avaliação do grau de pureza, e eletroforese em gel de agarose para verificar a sua integridade. Foram escolhidos cinco genes para serem investigados os polimorfismos desta população de caprinos F2, as interleucinas IL-2, IL-4, IL-5, IL-8 e IL-13. Os *primers* foram delineados para que flanqueassem a região de interesse, utilizando o programa do NCBI. O *primer *para o gene IL-2 foi padronizado e logo depois feita a reação de PCR com todas as amostras de DNA. Entretanto, os demais *primers*tiveram problemas ainda na padronização ou não amplificaram nenhum produto, como é o caso da IL-5, ou amplificaram varias vezes em várias posições, menos naquela desejada, como é o caso da IL-8. Na amplificação da IL-13, visualizou-se o fragmento esperado, porém outros fragmentos inespecíficos também foram constatados. Assim, novos *primers* foram delineados e estão sendo padronizados, pois suspeita-se que o desenho dos *primers* iniciais tendo o genoma bovino como referência possa ter ocasionado tais inespecificidades.