Banca de DEFESA: STHEPHANIE NASSIF PINHEIRO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : STHEPHANIE NASSIF PINHEIRO
DATA : 05/10/2018
HORA: 10:00
LOCAL: IMD - SALA B436
TÍTULO:

CARACTERIZAÇÃO DO GENE 18S rRNA EM PROTOZOÁRIOS DO TAXA APICOMPLEXA: UMA ABORDAGEM APLICADA AO DESENHO DE MARCADORES MOLECULARES

 

PALAVRAS-CHAVES:

Semi-nested-PCR.Toxoplasma. Plasmodium. Malaria. Protozoários. Diagnóstico molecular.

PÁGINAS: 79
RESUMO:

O filo Apicomplexa compreende protozoários de vários filo ao nível de gênero causadores de parasitoses mundialmente distribuídas como malária, toxoplasmose ou distúrbios intestinais oportunistas. Ainda nos dias de hoje, os principais protozoários de importância médica geralmente são identificados por microscopia óptica, o que dificulta a classificação precisa e o diagnóstico dos pacientes, principalmente nos casos em que a parasitemia é baixa. Nesse contexto o presente trabalho teve como objetivo desenvolver um método molecular alternativo, que possibilite a identificação de ampla variedade de protozoários do filo Apicomplexa. Dessa forma, foi desenvolvido um sistema de primers para utilização em uma reação de PCR (Polymerase Chain Reaction) em duas etapas (semi-nested PCR). O alvo investigado para o desenho de primers foi a região 18S rDNA, por ser um alvo amplamente utilizado para screening e identificação de espécies em estudos de biodiversidade. A partir da análise e caracterização estrutural do ácido nucleico ribossomal in silico, foram desenhados conjuntos de primers que se anelam em regiões conservadas e flanqueiam regiões variáveis no gene. A eficiência de cada conjunto de primers foi avaliada por PCR in silico. Foi selecionado um conjunto de primers que, quando usado de forma aninhada, pode gerar ~166 amplicons com sequências distintas, que podem ser usados para discriminar gêneros e espécies de Apicomplexa por diferença no tamanho em gel de agarose e por sequenciamento. O método proposto foi validado in vitro e sua eficiência na identificação de algumas espécies de protozoários de interesse médico foi confirmada. Após etapas adicionais de validação, esse método poderá ser utilizado para triagem inicial em casos de suspeita de parasitoses e também para determinação de diferentes espécies de parasitas.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CLAUDIO BRUNO SILVA DE OLIVEIRA - F.M.Nassau
Presidente - 1880243 - DANIEL CARLOS FERREIRA LANZA
Interno - 1453487 - KATIA CASTANHO SCORTECCI