Banca de QUALIFICAÇÃO: ELLYNES AMANCIO CORREIA NUNES
Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.DISCENTE : ELLYNES AMANCIO CORREIA NUNES
DATA : 02/10/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Videoconferência - Link para acesso: meet.google.com/dxs-wmzd-wtm
TÍTULO:
Purificação e caracterização bioquímica de moléculas bioativas de peçonhas ofídicas
PALAVRAS-CHAVES:
Moléculas bioativas. Peçonhas ofídicas. Bioprospecção
PÁGINAS: 69
RESUMO:
As toxinas animais possuem moléculas bioativas, com diversas atividades biológicas conhecidas que podem ser direcionadas ao tratamento de diversas doenças, como as toxinas isoladas de peçonhas ofídicas, que apresentam cerca de 90% de sua composição em peptídeos e proteínas. Estas, por sua vez, apresentam os mais diversos mecanismos bioquímicos, como é possível observar nos envenenamentos causados por serpentes do gênero Bothrops, pertencentes à família Viperidae, que demonstram atividades proteolítica, coagulante e hemorrágica. Essas atividades estão relacionadas à presença de proteínas como fosfolipase A2, metaloproteinases e serinoproteases, bem como lectinas, proteínas não enzimáticas, com afinidade por moléculas de carboidratos e com capacidade inata de aglutinar eritrócitos. Muitas destas proteínas apresentam propriedades farmacológicas já descritas. Dessa maneira, objetivou-se isolar e caracterizar moléculas bioativas das peçonhas de Bothrops moojeni e B. erythromelas. Para tal, na busca por moléculas bioativas das peçonhas ofídicas foram utilizadas as metodologias de Cromatografia de Exclusão Molecular e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em Fase Reversa, seguida de Ensaios de Hemaglutinação, ensaios enzimáticos e hemólitico. A Exclusão molecular aplicada a peçonha de B. moojeni gerou 6 frações, que foram recromatografadas em RP-HPLC. As frações oriundas da exclusão molecular foram submetidas a ensaios de hemaglutinação e apenas a fração 5 causou hemaglutinação em sangue do sistema ABO, posteriormente as amostras foram submetidas a ensaio de atividade fosofolipásica e apenas a fração 2 mostrou consumo do substrato indicando uma possível fosfolipase. O ensaio hemolítico mostrou que todas as frações ficaram abaixo de 20% de hemólise. Para a peçonha de B. erythromelas foi realizada cromatografia de fase reversa resultando em 3 frações monitoradas por gel de eletroforese SDS-PAGE. Após liofilização as amostras foram testadas no ensaio de hemaglutinação e somente a fração 3 foi capaz de aglutinar o sangue do sistema ABO. A fração foi recromatografada em fase reversa. Diante destes resultados novas frentes de caracterização bioquímica e biofísica serão realizadas para todas as frações com atividade, sendo o sequenciamento a próxima etapa para confirmação das frações proteicas.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Interno - 1544647 - MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA
Externo à Instituição - CAIO FERNANDO RAMALHO DE OLIVEIRA