Banca de QUALIFICAÇÃO: MICHELLE ROSSANA FERREIRA VAZ

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MICHELLE ROSSANA FERREIRA VAZ
DATA: 14/12/2011
HORA: 14:30
LOCAL: AUDITÓRIO DO PPGEQ
TÍTULO:

Estratégias de produção em reator dos antígenos recombinantes (648, 503) de Leishmania chagasi

PALAVRAS-CHAVES:

Proteína. Indução. Leishmaniose visceral.

PÁGINAS: 139
GRANDE ÁREA: Engenharias
ÁREA: Engenharia Química
RESUMO:

Desde o advento da tecnologia do DNA recombinate, a Escherichia coli é um dos hospedeiros mais utilizados para produção proteínas recombinantes tanto em escala de laboratório como em escala industrial. Apesar do avanço expressivo dos estudos da biologia molecular e da imunologia das infecções, não existe, atualmente, nenhuma droga profilática capaz de prevenir o calazar. Desta forma, existe uma grande necessidade de identificação de antígenos específicos para o desenvolvimento de vacinas e kits para diagnósticos contra a Leishmaniose visceral. Neste contexto, este trabalho objetivou avaliar o comportamento cinético e a capacidade de expressão dos antígenos recombinantes (648 e 503) de Leishmania chagasi. Um primeiro conjunto de ensaios foi realizado com o objetivo de se conhecer o comportamento cinético do crescimento dois clones recombinantes (648, 503) em duas diferentes composições de meios (2xTY, TB) suplementados por antibióticos, sem adição de IPTG.Um segundo conjunto de ensaios foram submetidos a um procedimento de indução por IPTG e posteriormente, por lactose a fim de verificar a influência da adição destes indutores na expressão dos antígenos recombinantes, em incubador rotativo, no sentido de se melhorar a expressão, bem como validar as novas condições de expressão em biorreator de bancada. Com base nos resultados obtidos, pode-se observar que a elevada complexidade do meio de cultivo favoreceu a cinética de crescimento dos clones recombinantes (648, 503), no entanto, ao se tratar dos ensaios submetidos ao procedimento de indução por IPTG, a elevada complexidade do meio de cultivo não favoreceu a expressão das proteínas recombinantes. Pode-se observar que a expressão dos antígenos 648 e 503 apresentam um comportamento associado ao crescimento e que em termos de localização, as proteínas 648 e 503, são armazenadas intracelularmente. A lactose é o indutor mais apropriado para síntese de proteína tendo em vista os fatores, custo, toxicidade e estabilidade. A elevada agitação pode aumentar o crescimento celular do clone 503, entretanto, pode não acarretar em altas concentrações da proteína de interesse. Por outro lado, foram obtidos resultados positivos para todos os clones recombinantes (648, 503) testados, confirmada através do perfil eletroforético

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 2378605 - CRISTIANE FERNANDES DE ASSIS
Externo ao Programa - 1714243 - DANIELLA REGINA ARANTES MARTINS
Interno - 1346198 - EVERALDO SILVINO DOS SANTOS
Presidente - 347401 - GORETE RIBEIRO DE MACEDO