Banca de QUALIFICAÇÃO: STEPHANIE CAROLINE BIVAR MATIAS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : STEPHANIE CAROLINE BIVAR MATIAS
DATA : 14/09/2026
HORA: 14:30
LOCAL: Via Google Meet
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DE ESTRATÉGIAS DE INDUÇÃO, ROMPIMENTO E PURIFICAÇÃO DA PROTEÍNA QUIMÉRICA MULTI-ANTIGÊNICA TgAGS/BsT de Toxoplasma gondii EXPRESSA EM E. coli BL21

PALAVRAS-CHAVES:

Toxoplasma gondii; indução; proteína quimérica; estabilidade do plasmídeo.

PÁGINAS: 79
RESUMO:

O Toxoplasma gondii é um parasita intracelular obrigatório mais eficiente existente sendo capaz de infectar quase todos os tipos de animais de sangue quente, incluindo humanos. Considera-se que cerca de 30% da população mundial está infectada pelo T. gondii e que, de acordo condições climáticas, que favorecem a sobrevivência ou não dos oocistos, e de fatores humanos e socioeconômicos essa porcentagem pode variar entre países. No Brasil, estudos soroepidemiológicos realizados em diferentes grupos populacionais têm demonstrado que a prevalência da infecção pode alcançar índices de até 80%.

O presente estudo avaliou as condições de indução (tipo e concentração do indutor) para a expressão da proteína quimérica multiantigênica TgAGS/BsT, derivada de T. gondii, em Escherichia coli BL21 Star durante o cultivo submerso em batelada. Com massa molecular de aproximadamente 18,6 kDa, a proteína quimérica TgAGS/BsT apresenta potencial para uso em kits de diagnóstico e como candidata a vacina contra a toxoplasmose. Os cultivos em batelada foram realizados a 37°C e induzidos pela adição de diferentes concentrações de isopropil-β-D-1-tiogalactopiranosídeo (IPTG) (0,1; 1,0 e 2,0 mM) e lactose (1,0; 10,0 e 20,0 g/L) em diferentes meios de cultura (2xTY e Terrific Broth). Os parâmetros utilizados para analisar os cultivos foram: crescimento celular, formação de ácido acético, variação de pH, estabilidade do plasmídeo e expressão proteica (avaliada por SDS-PAGE, juntamente com técnicas espectrofotométricas e cromatográficas). Concentrações mais elevadas de IPTG (acima de 1,0 mM) e lactose (acima de 10,0 g/L) levaram ao acúmulo de ácido acético e à redução da estabilidade do plasmídeo, indicando estresse metabólico. O perfil de pH variou conforme o meio: o 2xTY apresentou recuperação parcial após 4 horas, enquanto o TB exibiu uma diminuição contínua. A estabilidade do plasmídeo manteve-se elevada em baixas concentrações de indutor, apresentando uma leve redução nas concentrações mais altas. Os resultados demonstram que a concentração e o tipo de indutor exercem forte influência no equilíbrio entre crescimento celular, metabolismo e eficiência da expressão de proteína heteróloga. A indução com concentração moderada de IPTG (1,0 mM) proporcionou o melhor desempenho geral, garantindo expressão consistente e manutenção estável do plasmídeo, ao passo que a indução com lactose foi menos eficaz.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - ***.656.434-** - CARLOS EDUARDO DE ARAÚJO PADILHA - UFRN
Interno - 1346198 - EVERALDO SILVINO DOS SANTOS
Interna - 3214434 - NATHALIA SARAIVA RIOS
Externo ao Programa - 3652554 - FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR - UFRN