AVALIAÇÃO DE ESTRATÉGIAS DE INDUÇÃO, ROMPIMENTO E PURIFICAÇÃO DA PROTEÍNA QUIMERA MULTI-ANTIGÊNICA TgAGS/BsT de Toxoplasma gondii EXPRESSA EM E. coli BL21
E. coli BL21 Star; indução; proteína quimérica; toxoplasmose
O Toxoplasma gonddi é um parasita intracelular obrigatório mais eficiente existente sendo capaz de infectar quase todos os tipos de animais de sangue quente, incluindo humanos. Considera-se que cerca de 30% da população mundial está infectada pelo T. gondii e que, de acordo condições climáticas, que favorecem a sobrevivência ou não dos oocistos, e de fatores humanos e socioeconômicos essa porcentagem pode variar entre países. No Brasil, estudos soroepidemiológicos realizados em diferentes grupos populacionais têm demonstrado que a prevalência da infecção pode alcançar índices de até 80%.
De forma geral, a toxoplasmose não apresenta nenhum sintoma clínico em pacientes imunocompetentes, o que faz com que ela seja negligenciada em termos de tratamento e prevenção. Porém paciente imunossuprimidos (portadores de HIV, câncer, transplantados) e grávidas podem desenvolver sintomas graves, podendo chegar a óbito. Por ser negligenciada por órgão públicos não há a divulgação das formas de prevenção dessa doença, que ainda é através de medidas profiláticas como: evitar ingerir água e alimentos contaminados, além de manter condições socioambientais que evitem a proliferação do parasita.
Devido à grande diversidade de antígenos apresentados pelo Toxoplasma gondii estudos que busquem uma vacina e kit de diagnóstico contendo múltiplos antígenos tornam-se bastante promissores. Nesse contexto, estudo realizado por Moura (2018), demonstrou que a proteína quimérica TgAGS/BsT, uma proteína com massa molecular de aproximadamente 18,6 kDa, apresenta potencial como marcadores de diagnóstico ao ser reconhecida por anticorpos contidos no soro de pacientes positivos para Toxoplasmose, bem como, potencial para estudos futuros em murinos como vacinas, por ativar linfócitos e induzir produção de citocinas importantes para proteção do hospedeiro.
Nesse contexto, o presente estudo tem por finalidade avaliar como diferentes tipos de indução, concentração do indutor, tipo de rompimento e método de purificação influenciam na produção da proteína quimérica multiantigênica TgAGS/BsT, além de avaliar a estabilidade do plasmídeo pET-TgAGS e a expressão da proteína de interesse usando E. coli BL21 Star.