AVALIAÇÃO DE ESTRATÉGIAS DE PRODUÇÃO EM CULTIVO DESCONTÍNUO DA PROTEÍNA QUIMERA MULTI-ANTIGÊNICA TgAGS/BsT de Toxoplasma gondii EM Escherichia coli
Toxoplasmose, Escherichia coli recombinante, cultivo descontínuo, proteína quimérica
A toxoplasmose, apesar dos avanços da ciência e tecnologia, ainda não possui uma vacina capaz de imunizar humanos e animais contra todos os tipos isolados de Toxoplasma gondii. O tratamento desta doença é realizado a partir da utilização de fármacos que possuem certa toxicidade e podem causar sérios efeitos colaterais justificando a necessidade do desenvolvimento de vacinas ou imunoterapêuticos como medidas preventivas. Devido à grande diversidade de antígenos apresentados pelo T. gondii uma vacina e kit de diagnóstico, contendo múltiplos antígenos, torna-se bastante promissor. Entre as bactérias utilizadas para produção de proteínas recombinantes a Escherichia coli é a mais utilizada por possuir suas características genéticas bem descritas. Nesse contexto, o presente trabalho tem como principal foco avaliar estratégias de cultivo descontínuo na produção da proteína quimérica multi-antigênica TgAGS/BsT de Toxoplasma gondii realizados em incubador rotativo. Para atingir o objetivo proposto serão realizados diversos ensaios para observar o comportamento cinético da cepa XL-1 Blue de E. coli em cinco diferentes composições de meio (2xTY, TB suplementado com glicose, TB suplementado com glicerol, LB e M9) sem adição de indutor em incubador rotativo. Além disso será avaliada a estabilidade do plasmídeo, a influência do meio nos parâmetros cinéticos de crescimento celular de E. coli. e de expressão da proteína quimera multi-antigênica TgAGS/BsT e formação de ácido acético.