Avaliação da eficiência dos métodos sorológicos e da técnica de Nested-PCR utilizando o iniciador GRA7 na detecção do Toxoplasma gondii no líquido amniótico de gestantes
Toxoplasmose, gestação, transmissão fetal, diagnóstico.
A toxoplasmose tem como agente etiológico o protozoário Toxoplasma gondii e geralmente causa infecção assintomática em indivíduos imunocompetentes. Entretanto, na transmissão congênita pode gerar quadros graves e morte, representando um sério problema de saúde pública. Em pacientes grávidas reativas para IgM anti-T. gondii recomenda-se diagnóstico molecular do líquido amniótico utilizando a metodologia de PCR qualitativa com o iniciador B1. Porém, seu diagnóstico utilizando esta metodologia pode ser ineficiente principalmente na detecção de cepas híbridas encontradas na América Latina. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência dos métodos sorológicos e da técnica de Nested-PCR utilizando o iniciador GRA7 na detecção do Toxoplasma gondii na transmissão congênita. O estudo foi realizado em 71 gestantes, atendidas no Centro de Saúde Anita Garibaldi (CSAG), Macaíba-RN no período de 2011 a 2015, com idades gestacionais variáveis e faixa etária entre 15-49 anos, submetidas a procedimentos de rotina durante o exame pré-natal tratando-se, portanto, de um estudo de delineamento observacional transversal de acurácia. Foram coletadas amostras de sangue periférico e líquido amniótico. Inicialmente foi realizado o diagnósticosorológico para toxoplasmose com o auxílio das técnicas de ELISA e Imunofluorescência indireta (IFI) para a detecção de IgG e IgM anti-T. gondii. Posteriormente, as gestantes apresentaram testes sorológicos reativos para IgM foram selecionadas para a realização da técnica de Nested-PCR utilizando os iniciadores RE e GRA7. A sororeatividade detectada pela presença de IgG e IgM anti-. T gondii pelas técnicas de ELISA e IFI foram, respectivamente, 91,55% e 14,08%, 76,06% e 5,63%. A positividade total para IgM utilizando as técnicas de ELISA e IFI foi de 15,49% (11/71). Entretanto, a análise da positividade com a utilização da Nested-PCR foi de 0% (0/11) e 54,5% (6/11) utilizando os iniciadores RE e GRA7 respectivamente. Os resultados indicam que o iniciador GRA7 proposto é mais eficiente na detecção do T. gondii no líquido amniótico que o iniciador RE, quando utilizada a técnica de Nested-PCR.