Banca de DEFESA: THAWANN MALFATTI BORGES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : THAWANN MALFATTI BORGES
DATA : 27/03/2020
HORA: 14:00
LOCAL: INSTITUTO DO CEREBRO
TÍTULO:

O papel da atividade do núcleo coclear dorsal na percepção de tinnitus em camundongos

PALAVRAS-CHAVES:

zumbido, núcleo coclear, Neurônios, camundongos

PÁGINAS: 127
RESUMO:

O zumbido induzido pelo ruído é um som fantasma, percebido sem uma fonte física, causado pela exposição excessiva ao ruído alto. O núcleo coclear dorsal (DCN), uma região conhecida por integrar vias somatossensoriais e auditivas, foi identificada como uma estrutura chave potencial na geração da percepção sonora fantasma. Aqui, nós primeiramente visamos a camada de saída do DCN usando vetores virais contendo o promotor da Proteína Kinase dependente de cálcio/calmodulina tipo II alfa (CaMKIIa) para expressar proteínas optogénicas e investigar como excitar (Channelrhodopsin-2, ChR2) ou inibir (enhanced Archaerhodopsin 3.0, eArch3.0) essas células do DCN afetam a resposta a sons nessa área. Descobrimos que a estimulação optogenética das células do DCN que expressam CaMKIIa-ChR2 ou CaMKIIa-eArch3.0 pode distorcer as respostas das unidades no DCN ao som. Em seguida, nós quimogeneticamente inibimos a atividade desse mesmo subgrupo de neurônios no DCN usando o Gi-coupled human M4 Designer Receptors Exclusively Activated by Designer Drugs (hM4Di DREADDs) para investigar seu papel na percepção do zumbido. Os camundongos foram expostos a ruído alto (90dBSPL, 1h, seguido de 2h de silêncio) para induzir o zumbido. Potenciais evocados auditivos de tronco encefálico (ABRs) e o teste de inibição de reflexo de sobressalto a partir de gap (GPIAS) foram registrados dois dias antes e duas semanas após a exposição ao ruído para confirmar a percepção do zumbido (diminuição significativa na resposta do GPIAS) sem perda auditiva. A atividade dos neurônios expressando CaMKIIa-hM4Di no DCN foi diminuída ao expressar e ativar farmacologicamente os hM4Di DREADDs. A percepção do zumbido foi avaliada quando os hM4Di DREADDs inibitórios foram ativados pela administração sistêmica de n-óxido de clozapina (CNO, 0,5mg/kg). Encontramos que CNO diminui respostas indicativas de zumbido (p = 0,038, n = 11 camundongos), em comparação com o grupo controle, o qual não mostrou melhoria das respostas do GPIAS (vírus controle; CaMKIIa-YFP + CNO, p = 0,696, n = 7 camundongos). Registros de atividade extracelular de unidades confirmaram que CNO diminui a frequência de disparo de unidades no DCN, altera a melhor frequência e banda de resposta ao som. Em seguida, neurônios CaMKIIa-hM4Di-mCherry+ do DCN foram quimogeneticamente inibidos durante a exposição ao ruído (n = 6 experimental e 6 controles), mas isso não impediu a indução do zumbido, nem a administração de CNO 2 semanas depois melhorou a detecção de gap, indicando que a percepção do zumbido não foi diminuída. Nossos resultados sugerem que células CaMKIIa-hM4Di-mCherry positivas no DCN não são cruciais para a indução do zumbido, mas desempenham um papel significativo na manutenção da percepção do zumbido em camundongos.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1976236 - EMELIE KATARINA SVAHN LEAO
Externo à Instituição - MARINE RAQUEL DINIZ DA ROSA - UFPB
Externo à Instituição - NIVALDO ANTONIO PORTELA DE VASCONCELOS - UFPE
Interno - 1824636 - RICHARDSON NAVES LEAO
Interno - 1698305 - RODRIGO NEVES ROMCY PEREIRA
Interno - 1842426 - SERGIO TULIO NEUENSCHWANDER MACIEL