Banca de DEFESA: ELLYNES AMANCIO CORREIA NUNES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ELLYNES AMANCIO CORREIA NUNES
DATA : 15/10/2024
HORA: 15:00
LOCAL: Videoconferência - Link para acesso: https://meet.google.com/krm-hkji-tes
TÍTULO:

PURIFICACAO, CARACTERIZACAO E ATIVIDADE BACTERIOSTATICA DE UMA LECTINA MANGANES-DEPENDENTE DA PECONHA DE Bothrops moojeni

PALAVRAS-CHAVES:

 

Atividade biológica. Peçonhas ofídicas. Bioprospecção.

PÁGINAS: 97
RESUMO:

Moléculas bioativas isoladas de animais peçonhentos constituem uma variedade de componentes com atividades biológicas que podem ser direcionadas ao tratamento de diferentes doenças. As peçonhas ofídicas são constituídas em cerca de 90% por proteínas e peptídeos. Essas toxinas desempenham diferentes mecanismos bioquímicos e por isso são responsáveis pela resposta clínica observada em acidentes ofídicos. O conhecimento das proteínas ofídicas permite o estudo de atividades heterólogas relacionadas a essas toxinas, como atividade antibacteriana e antitumoral. Nesse contexto, objetivou-se realizar uma revisão bibliográfica acerca do grupo proteico das lectinas isoladas de peçonhas ofídicas e isolar, caracterizar e conhecer atividades biológicas de uma lectina da peçonha da serpente Bothrops moojeni. Portanto, realizou-se uma revisão bibliográfica sobre as lectinas isoladas e caracterizadas de peçonhas ofídicas e suas principais características e classificação com ênfase na última década, onde foi possível verificar que até o momento as lectinas de serpentes estão caracterizadas como lectinas do tipo C e proteínas semelhantes a lectinas do tipo C, com atividades heterólogas já descrita para o tratamento de doenças neoplásicas, de ordem hematológica, bem como atividades antibacterianas. Além disso, a identificação de uma proteína com atividade de lectina foi realizada utilizando Cromatografia de Exclusão Molecular (CEM) e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em Fase Reversa (CLAE-FR). Os procedimentos seguintes incluíram a análise por Gel de Poliacrilamida (SDS-PAGE), bem como ensaios de hemaglutinação, inibição da atividade hemaglutinante, e avaliação da dependência de íons, pH e temperatura. Adicionalmente, foram realizadas avaliações da atividade hemolítica, antibacterianas contra as linhagens bacterianas Acinetobacter baumannii e Staphylococcus aureus, e atividade antibiofilme. A exclusão molecular gerou um perfil cromatográfico com 6 picos que foram analisados por eletroforese em gel de poliacrilamida e submetidos a ensaios de hemaglutinação. A atividade hemaglutinante foi observada nas frações 5 e 6, com o melhor resultado para a fração 5, que recebeu o nome de BmoojL. Foi confirmado também que BmoojL se mostrou manganês dependente. Além disto, BmoojL foi inibida na presença dos carboidratos glicose, frutose, manose, fucose e N-acetilgalactosamina, e se revelou ativa em temperaturas de até 80 ºC, e em faixas de pH de 5 a 9. O ensaio hemolítico mostrou que a molécula não promoveu hemaglutinação nas concentrações testadas (31,25 – 500 µg. mL-1), com porcentagem de hemólise abaixo de 10% . Os ensaios antibacterianos mostraram que apesar de não ter atingido a concentração inibitória mínima, BmoojL reduziu o crescimento bacteriano de A. baumannii a partir da concentração de 64 µg.mL-1. O ensaio antibiofilme mostrou que para S. aureus, BmoojL foi efetivo, reduzindo consideravelmente o crescimento do biofilme em todas as concentrações testadas (16 - 512 µg.mL-1) em cerca de 50%. Foi mostrado ainda que o íon de forma isolada e associado a outra proteína não desempenhou atividade significativa, como observado com BmoojL. Além disso, foi constatado que BmoojL reduziu o crescimento bacteriano, indicando que a molécula atua de forma bacteriostática. Dessa forma, o estudo permitiu isolar uma molécula com atividade lectínica manganês dependente com potencial para exercer atividade antibacteriana e antibiofilme, contribuindo para a pesquisa de moléculas bioativas derivadas de serpentes peçonhentas. Embora a literatura preconize alguns estudos envolvendo tais moléculas e suas atividade heterólogas, quando comparado a outros grupos moleculares, o estudo envolvendo as lectinas provenientes de animais peçonhentos é uma área ainda pouco explorada, e esses achados mostram o que ainda há para se conhecer acerca destas moléculas e direcionar e propor novas atividades que venham somar as pesquisas biotecnológicas envolvendo esses grupos animais.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - ***.121.724-** - LUDOVICO MIGLIOLO - UCDB
Interna - 1549705 - ADRIANA FERREIRA UCHOA
Interno - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Externa à Instituição - JULIANA PAVAN ZULIANI - UNIR
Externo à Instituição - OCTÁVIO LUIZ FRANCO - UCDB