Banca de DEFESA: DEBORAH AFONSO CORNELIO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: DEBORAH AFONSO CORNELIO
DATA: 13/04/2012
HORA: 14:00
LOCAL: sala de reuniões do Centro de Biociências
TÍTULO:

Análise da estabilidade genética de células tronco mesenquimais humanas.

PALAVRAS-CHAVES:

Células-tronco mesenquimais humanas; cordão umbilical; titânio; análise citogenética; análise do micronúcleo/citoma.

PÁGINAS: 150
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Genética
RESUMO:

Células tronco mesenquimais humanas (CTMH) são células multipotentes utilizadas em várias pesquisas de terapia celular regenerativa, pois apresentam a capacidade de se diferenciar em múltiplas e diferentes linhagens, têm grande capacidade de expansão in vitro, excelentes propriedades imunossupressoras e são capazes de secretar moléculas bioativas que exercem efeitos tróficos.  O cordão umbilical é uma fonte de CTMH cuja extração não necessita de um procedimento invasivo, além de não envolver controvérsias éticas, políticas e religiosas. Um dos problemas que pode ocorrer em linhagens de CTMH de diferentes fontes é a possibilidade de ocorrência de alterações cromossômicas e instabilidade genômica, que podem aparecer durante a expansão in vitro. Além disso, as CTMH de um dos cordões apresentaram uma alteração cromossômica constitucional: inversão paracêntrica no braço curto do cromossomo 3, cariótipo: 46,XY,inv(3)(p13p25~26). Em 3p25-26, estão localizados vários genes de grande importância biológica, como genes envolvidos com o reparo de DNA e outros responsáveis pelo desenvolvimento de tumores. O titânio é um dos materiais mais utilizado para fabricação de implantes ortopédicos e dentários, e é considerado um excelente biomaterial, entretanto as partículas derivadas de próteses acumulam-se nos tecidos periprostéticos e na medula óssea local, disseminam-se para linfonodos, fígado e baço. As implicações biológicas a longo prazo da disseminação sistêmica de partículas de metais e seus efeitos cito- e genotóxicos não estão bem caracterizados. Considerando-se que possíveis alterações  em genes em 3p25~26 poderia predispor as CTMH com inv(3) à transformação espontânea in vitro, ainda mais no cultivo na presença de titânio, neste trabalho investigamos a estabilidade genética de CTMH isoladas da veia do cordão umbilical durante a expansão in vitro, após o congelamento, e verificamos as características das CTMH com cariótipo alterado comparadas com CTMH com cariótipo normal em diferentes condições de cultivo in vitro, na presença e na ausência de titânio, antes e após a senescência. A análise da estabilidade genômica das CTMH foi realizada através da análise do cariótipo e da análise do citoma / micronúcleo das CTMH. Ficou estabelecido que as CTMH são capazes de internalizar as partículas de titânio, mas as células mantém sua capacidade de proliferação, diferenciação e preservam os mesmos  marcadores de membrana. Além disso, demonstrou-se que existe um aumento na instabilidade genômica com o decorrer do tempo de expansão in vitro, e esta instabilidade foi maior na presença de grande concentração de partículas de titânio. É necessário sempre avaliar os riscos/ benefícios da utilização do titânio na terapia tecidual envolvendo CTMH, considerando a biossegurança da utilização da regeneração óssea guiada que utiliza CTMH e titânio. Mesmo não se utilizando o titânio, é importante que o uso terapêutico de tais células seja baseado em análises que garantam a qualidade, segurança e estabilidade celular, com a implementação de programas de controle de qualidade adequados. Como conclusão, sugere-se que a análise citogenética  e a análise do citoma sejam realizadas nas CTMH antes de implantar num paciente, sejam elas cultivadas por longo tempo ou não.

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 304.897.408-39 - ANDRÉ DUCATI LUCHESSI - USP
Externo ao Programa - 1880243 - DANIEL CARLOS FERREIRA LANZA
Externo ao Programa - 1674643 - MARCOS ROMUALDO COSTA
Presidente - 1199127 - SILVIA REGINA BATISTUZZO DE MEDEIROS
Externo ao Programa - 043.511.028-45 - SILVIA REGINA CAMINADA DE TOLEDO - UNIFESP