QUAL O PAPEL DO cDNA HOMÓLOGO À PROTEÍNA HINT1 DE CANA-DE-AÇÚCAR?
Saccharum spp., modelagem, ensaios de interação proteína-proteína, interactoma, cassete de super-expressão
O processo de florescimento é uma etapa crítica que promove a transição do ápice meristemático vegetal para reprodutivo e consequentemente o desenvolvimento das estruturas florais e das sementes. Esta transição é orquestrada por diferentes sinais externos e internos que vem sendo caracterizados em diferentes plantas modelo como Arabidopsis thaliana, arroz e milho. Para as plantas de cana-de-açúcar não se conhece muito sobre esse processo, mas sabe-se que a transição do ápice meristemático para reprodutivo tem um forte impacto na produção do suco, açúcar e álcool. Devido a este aspecto, este trabalho está inserido na linha de pesquisa associada com a identificação de genes/proteínas que possam estar associados a esta transição do ápice merismático utilizando diferentes ferramentas de bioinformática e genômica funcional. A proteína HINT foi identificada anteriormente em bibliotecas subtrativas construídas com ápice meristemático induzido ou não induzido para o florescimento. Neste trabalho buscamos compreender o papel desta proteína em cana-de-açúcar e em plantas. Verificamos que estas sequências são conservadas em monocotiledôneas e dicotiledôneas e estas sequências se separam em dois grandes ramos. Os dados obtidos com a modelagem mostraram que a ScHINT deva ser funcional e apresenta os sítios de ligação importantes para sua atividade. Uma segunda proteína foi caracterizada neste trabalho que foi a ScSUBTILASE. Esta foi identificada num ensaio de proteína-proteína por meio da metodologia de dois-híbridos. A proteína ScSUBTILASE também é conservada em plantas, e a modelagem mostrou que essa também deva ser funcional pela estrutura obtida e pelos sítios catalíticos identificados. Os resultados obtidos com o interactoma para as duas proteínas no modelo Arabidopsis mostraram que estas duas sequências estão associadas a resposta da produção de EROs. Com base nestes resultados apresentados aqui e com os dados da literatura podemos propor que a ScHINT e ScSUBTILASE poderiam ter o papel de manter o nível de EROs adequado para manter o ápice meristemático vegetativo, por isso quando temos as plantas transgênicas com o cassete anti-senso (provavelmente com a concentração destas reduzidas) obtivemos uma maior produção de flores nas plantas de Nicotiana tabacum transgênicas.