Banca de QUALIFICAÇÃO: THAIS TEIXEIRA OLIVEIRA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : THAIS TEIXEIRA OLIVEIRA
DATA : 03/12/2019
HORA: 14:00
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich - Departamento de Bioquímica
TÍTULO:

Avaliação do efeito da inibição da via de reparo por excisão de bases sobre a transcrição geral durante a inflamação

PALAVRAS-CHAVES:

Reparo de DNA. Inflamação. NRF1. ELK1. Biogênese mitocondrial. Biogênese ribossomal.

PÁGINAS: 84
RESUMO:

APE1/Ref-1 é uma proteína de mamíferos que possui dois domínios funcionais. O domínio N-terminal, que é capaz de reduzir fatores de transcrição com NF-kB, AP-1 e HIF-1 aumentando suas capacidades de ligação ao DNA e assim a expressão de seus genes alvos. E o domínio c-terminal responsável por sua atividade de endonuclease que faz com que APE1/Ref-1 seja a principal endonuclease da via de reparo por excisão de bases. Recentemente, foi demonstrado que a presença de 8-oxoG nos promotores de alguns genes é na verdade um indutor da expressão na presença de OGG1 e APE1/Ref-1. Sendo assim, APE1/Ref-1 também regula a expressão gênica de maneira dependente da sua função de reparo. Devido a suas várias funções APE1 é um potencial alvo terapêutico muito estudado principalmente no câncer. Porém, o papel de cada uma das funções de APE1 sobre a regulação transcricional ainda não está completamente elucidado e proteínas capazes de interagir com APE1 são descobertas a cada ano. Em um trabalho anterior do nosso grupo, foi observado que a inibição da atividade de endonuclease de APE1/Ref-1 por metoxiamina diminui a expressão de citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias em monócitos pré-tratados com LPS. A fim de observar quais outros genes têm sua expressão afetada pela inibição do reparo de sítios AP, assim como identificar os possíveis reguladores e parceiros de APE1/Ref-1 nesta resposta. Foi realizado um RNA-seq de monócitos tratados com LPS por 24h e com metoxiamina por mais 4h e os genes diferencialmente expressos após o tratamento com metoxiamina foram analisados quanto suas funções, e quanto aos possíveis reguladores de sua expressão. Além disso, esses genes foram comparados com aqueles diferencialmente expressos após o tratamento com E3330 nas mesmas condições. Os principais reguladores das redes assim com seus alvos foram analisados quanto a sua expressão por meio de q-PCR e Western blot. Com a obtenção desses dados, concluímos que a inibição do reparo de sítios AP durante a inflamação diminui a expressão de genes relacionados a progressão do ciclo celular e aumenta a expressão de genes relacionados a inibição da via mTOR, o que sugere que a célula está sinalizando para uma parada de crescimento. Em adição, observamos que a função de reparo é capaz de regular a transcrição de genes relacionados a biogênese mitocondrial, assim como a expressão do pré-RNAr 47S sem afetar o processamento deste RNA. Por fim, metoxiamina foi capaz de drasticamente a expressão de c-Myc, o que torna esse inibidor um potencial terapêutico ainda mais promissor.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1837354 - JULLIANE TAMARA ARAUJO DE MELO CAMPOS
Externa ao Programa - 1251018 - RIVA DE PAULA OLIVEIRA
Interna - 1199127 - SILVIA REGINA BATISTUZZO DE MEDEIROS