Banca de DEFESA: KELLYA FRANCISCA MENDONÇA BARRETO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : KELLYA FRANCISCA MENDONÇA BARRETO
DATA : 25/07/2018
HORA: 14:00
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich - Departamento de Bioquímica
TÍTULO:
PALAVRAS-CHAVES:

Saccharum spp, Florescimento precoce, Anatomia, rede de interação proteica

PÁGINAS: 122
RESUMO:

A cana-de-açúcar é uma das mais importantes monoculturas produtoras no Brasil como fonte geradora de biocombustível renovável de primeira geração, assim como de açúcar e outros derivados. As condições edafoclimáticas da região Nordeste podem desfavorecer o seu cultivo afetando os vegetais a florescerem precocemente. Este apresenta um impacto negativo podendo promover uma redução na produção de álcool e açúcar. Estudos moleculares utilizando genes envolvidos na via de florescimento é de extrema importância econômica. Neste estudo, foi avaliado o papel da sequência ScCAM (sequência da Calmodulina encontrada em cana-de-açúcar) identificada anteriormente como associada ao processo de florescimento por meio de diferentes abordagens. Assim, foram utilizadas as abordagens de bioinformática, interação proteína-proteína (ensaios de dois híbridos), análise de plantas transgênicas Nicotiana tabacum contendo o cassete de super-expressão em orientação anti-senso bem como análise histológica de material de cana-de-açúcar obtido em campo de produção. Primeiramente, as análises de bioinformática permitiram verificar a conservação da sequência nucleotídica por meio da comparação entre a sequência ScCAM com as sequências de AtCAM (Arabidospis thaliana), o qual, apresentou 99% de identidade. Utilizando as sequências nucleotídicas codantes (CDS) foi realizada a construção de uma árvore filogenética que permitiu observar a alta conservação da calmodulina em plantas. Com bases nestes resultados foi realizada então a modelagem em 3D da sequência ScCAM, e esta foi sobreposta ao modelo 3D da AtCAM referente ao cristal 4AQR. Esta sobreposição possibilitou a observação dos motivos EF-hands e toda a estrutura proteica. Este modelo permite propor que esta sequência ScCAM possa ser funcional. Em seguida, foi construída uma rede de interação de proteínas utilizando a sequência de AtCAM7 (homóloga a ScCAM) gerada por via Cytoscape. Por meio do programa Gene Ontology (GO), os Clusters da rede foram enriquecidos, os quais mostraram algumas proteínas que possivelmente estejam atuando como indutoras da floração bem como, no controle da homeostase durante o processo de oxidação/redução. Esses dados também sugerem que a AtCAM7 possa estar envolvida na sinalização em resposta ao estresse. Por meio da metodologia de dois híbridos utilizando leveduras foram obtidos dois clones que tiveram uma identidade de 77,6% paraas proteínas ribossomais L31-1 e L19-1 de A. thaliana (acesso Uniprot: Q9SLL7). Estes resultados sugerem assim que a proteína ScCAM possa interagir com as proteínas ribossomais. Na abordagem utilizando plantas transgênicas de Nicotiana tabacum contendo o cassete de superexpressão em anti-senso foram observadas um aumento no potencial germinativo destas sementes; o aumento no número dos ramos da inflorescência e frutos, além das alterações estruturais nos tecidos das raízes com grande aumento dos pelos radiculares quando comparado com as linhagens denominadas de controle e as plantas não transformadas (selvagens). Nos tecidos foliares, não foram observadas alterações morformétricas. O cassete de super-expressão em orientação anti-senso deve reduzir ou bloquear a presença do RNAm endógeno de CAM. No entanto, houve alteração na altura, inflorescência e frutos das plantas. Paralelamente, foi realizada uma análise histológica para o tecido meristemático apical de plantas de cana-de-açúcar coletadas em campo de produção para as variedades de florescimento precoce e tardio. As análises histológicas permitiram observar que na variedade precoce apresentou indução floral entre 30-60 dias de antecedência quando comparada a variedade tardia, semelhante com as características das plantas transgênicas cultivadas em ambiente controlado. Os resultados obtidos por meio das análises de bioinformática, plantas transgênicas de N. tabacumin vivo, permitem propor que a sequência CAM em plantas possa estar associada ao florescimento. A rede de interações também indica que CAM deve atuar em vias de sinalização de estresse por meio de alteração de processos fisiológicos, na remodelação dos tecidos meristemáticos e raízes, consequentemente modificando o tempo de florescimento pela interação entre a CAM com as proteínas de actinas. Ademais, os resultados obtidos com o duplo híbrido sugerem que a ScCAM possa atuar junto a proteína 60S ribossomal associada na participação da formação das subunidades ribossomais ativando ou inibindo a tradução do produto de determinados genes.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CARLOS HENRIQUE SALVINO GADELHA MENESES - UEPB
Externo ao Programa - 2294466 - CRISTIANE ELIZABETH COSTA DE MACEDO
Externo à Instituição - DAIANE CRISTINA FERREIRA GOLBERT - UFRN
Presidente - 1453487 - KATIA CASTANHO SCORTECCI
Externo à Instituição - NATHALIA DE SETTA - UFABC