Banca de QUALIFICAÇÃO: YAMARA ARRUDA SILVA DE MENEZES

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : YAMARA ARRUDA SILVA DE MENEZES
DATA : 29/06/2018
HORA: 15:00
LOCAL: Sala SS1 - Departamento de Biologia Celular e Genética
TÍTULO:

CARACTERIZAÇÃO PROTEÔMICA E BIOLÓGICA DA PEÇONHA DE ESCORPIÕES DO GÊNEROTityus

PALAVRAS-CHAVES:

Tityus stigmurus. Peçonha de escorpião. Proteômica bottom-up. Caracterização biológica.

PÁGINAS: 135
RESUMO:

Escorpiões do gênero Tityus pertencem a família Buthidae e são responsáveis pela maioria dos acidentes por envenenamentos no Brasil. O envenenamento geralmente é caracterizado por sintomas locais como dor, parestesia, edema e eritema. Peçonhas de escorpiões são misturas complexas contendo diversos peptídeos e proteínas tóxicas. O estudo da composição tóxica da peçonha de escorpiões é especialmente importante para o desenvolvimento de tratamentos para casos de escorpionismo. Adicionalmente, toxinas são moléculas que podem apresentar potencial aplicação biotecnológica. Neste estudo, apresentamos a caracterização proteômica e funcional da peçonha do escorpião brasileiro Tityus stigmurus.Esta espécie é amplamente distribuída na região Nordeste do país e reconhecida como a principal responsável pelos envenenamentos com importância médica e, embora estudos para essa espécie tenham sido realizados, um grande número de componentes da peçonha ainda permanece desconhecido. A caracterização proteômica da fração solúvel da peçonha de T. stigmurus (TstiV) foi realizada por proteômica bottom-up usando cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas em Tandem (LC-MS/MS) utilizando LTQ (“Linear Quadrupole Ion Trap”) Orbitrap Velos. A pesquisa de correspondência de espectro peptídico (PSM) foi realizada usando a plataforma PatternLab, e o sequenciamento de novo usando PEAKS Studio 8.0. Os bancos de dados contendo todas as entradas de proteínas para a ordem Scorpiones foram provenientes dos bancos UniProtKB (UniPro Knowledgebase) e NCBI (National Center for Biotechnology Information), e a quantificação de proteínas foi realizada utilizando o fator de abundância espectral (NSAF). Para a caracterização funcional foram realizados ensaios enzimáticos como fosfolipase A₂, hialuronidase e fibrinogenolítica, testes de TP e TTPa, atividade antimicrobiana, ensaio de viabilidade celular, produção de óxido nítrico (NO), determinação de letalidade e avaliação dos efeitos do envenenamento. As análises do proteoma para TstiV revelaram a presença de 6 novas famílias de toxinas para T. stigmurus, incluindo calcina, toxinas de canal de cálcio, peptídeo potencializador da bradicinina, serina proteases, inibidor de protease e fosfolipases A₂. Os peptídeos moduladores do canal iônico respondem por aproximadamente 70% dos peptídeos identificados, delineando a importância das neurotoxinas. Nenhum efeito tóxico foi verificado em células RAW 264.7, VERO E6 e 3T3, bem como o efeito modulador da produção de óxido nítrico em macrófagos. No entanto, a peçonha de T. stigmurus mostrou alta toxicidade para camundongos BALB/c (DL₅₀ = 0,575 mg/kg). O TstiV apresentou atividade hialuronidásica, anticoagulante e fibrinogenolítica, esta última com a participação proeminente de enzimas da classe metaloprotease. Os testes biológicos associados a tecnologia de análise proteômica contribuíram para uma melhor elucidação da composição e caracterização da peçonha de T. stigmurus. Esta abordagem apresenta a descrição mais completa do repertório molecular para o TstiV, fonte de moléculas com potencial aplicação farmacológica e/ou biotecnológica.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - ARIANE FERREIRA LACERDA - UFRN
Externo ao Programa - 3652554 - FRANCISCO CANINDE DE SOUSA JUNIOR
Presidente - 2085604 - SUSANA MARGARIDA GOMES MOREIRA