Banca de QUALIFICAÇÃO: SINARA CARLA DA SILVA ARAÚJO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SINARA CARLA DA SILVA ARAÚJO
DATA : 20/02/2018
HORA: 09:30
LOCAL: Sala SS1 - Departamento de Biologia Celular e Genética
TÍTULO:

PROSPECÇÃO E OBTENÇÃO DE UM BIOSSURFACTANTE DERIVADO DE UMA BIBLIOTECA METAGENÔMICA.

PALAVRAS-CHAVES:

Metagenoma, Biossurfactante, Biorremediação

PÁGINAS: 62
RESUMO:

Os microrganismos apresentam uma vasta diversidade genética e estão presentes em toda biosfera, no entanto estima-se que apenas 1% das espécies pode ser cultivada por técnicas laboratoriais padrão. Dentro dessa diversidade existe um enorme pool genético e biológico a ser explorado. A metagenômica tornou possível o acesso direto ao genoma microbiano derivado de amostras ambientais. A metodologia permite obter informação funcional de proteínas, assim como a identificação de potenciais produtos com interesse biotecnológico e de novos recursos biológicos industrialmente exploráveis, a exemplo de novas soluções para impactos ambientais. Áreas contaminadas com petróleo são caracterizadas por um grande acúmulo de hidrocarbonetos e os surfactantes são utilizados como coadjuvantes em biorremediação. Sendo assim, a abordagem metagenônima foi utilizada para selecionar genes envolvidos no processo de degradação e emulsificação de hidrocarbonetos. Em um trabalho anterior, o DNA ambiental (eDNA) foi extraído de um solo próximo a um rio salino no Rio Grande do Norte (Brasil), a biblioteca metagenômica foi construída e analisada funcionalmente. Os clones capazes de degradar o óleo foram avaliados quanto à capacidade de sintetizar biossurfactante. Um clone denominado 3C6 foi sequenciado e analisado, revelou uma ORF com 897 pb, 298 aminoácidos, referente uma proteína de peso molecular próximo a 32 kDa. A busca por homologia no GenBank revelou similaridade com a sequência que codifica uma proteína hipotética de representantes da família Halobacteriaceae, que foram mostradas recentemente como produtoras de biossurfactantes. A presença da sequência codificante inserida e do fenótipo adquirido foram confirmadas. Primers foram desenhados e sua ORFs amplificada por PCR. Em seguida, foram subclonadas em vetor de expressão pHis-parallel1. O teste de emulsificação foi realizado, utilizando diferentes fontes de hidrocarbonetos, para confirmação da atividade e apresentou resultado positivo. O biossurfactante foi parcialmente purificado através de precipitação ácida, apresentando também atividade emulsificante, além de resultados positivos para redução da tensão interfacial, colapso da gota e dispersão de óleo. Esse estudo foi o segundo a relatar uma possível proteína com atividade biossurfactante obtida a partir de uma abordagem metagenômica.  

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1549705 - ADRIANA FERREIRA UCHOA
Interno - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Externo ao Programa - 2170415 - JORGE ESTEFANO SANTANA DE SOUZA