Estudo da variabilidade genética do papilomavírus humano e determinação de alvos moleculares para detecção e tipagem
Papilomavírus humano, câncer cervical, PCR, genotipagem, pressão seletiva, diversidade
O papilomavírus humano (HPV) é um pequeno vírus de DNA caracterizado como um dos mais comuns agentes sexualmente transmissíveis no mundo inteiro, cuja detecção e genotipagem acuradas só são possíveis através de técnicas de biologia molecular. Dentre os mais de 180 tipos diferentes já caracterizados, diferentes dinâmicas evolucionárias e propriedades biológicas têm sido reportadas, de maneira que um grupo particular de HPVs está fortemente relacionado a infecções crônicas e progressão a cânceres tais como cervical, anal, vulvar, vaginal, orofaríngeo e de pênis. No presente trabalho, foram realizadas análises de variabilidade genômica, pressão de seleção e filogenia, que revelaram perfis divergentes entre algumas regiões codificantes de grupos distintos, indicando prováveis determinantes para a evolução viral.A caracterização dessas regiões permitiu a seleção de alvos moleculares para o desenvolvimento de um novo conjunto de primers para a detecção e genotipagem do HPV por meio da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). O gene viral E1 foi escolhido como alvo, devido à presença de uma região conservada com tamanho variável entre os genótipos. O sistema proposto foi validado in vitro, e comparado com o sistema padrão para detecção do HPV. O método proposto permitiu a discriminação dos principais tipos oncogênicos de HPV por meio da análise do tamanho do fragmento amplificado por eletroforese em gel de agarose/poliacrilamida, com confirmação por sequenciamento direto, reduzindo o tempo e o custo necessários para a identificação viral. A compreensão da diversidade e da evolução viral é uma importante ferramenta para o desenvolvimento futuro de novas abordagens diagnósticas preventivas e terapêuticas para esse problema de saúde pública mundial.