Banca de DEFESA: PAULO RICARDO PORFÍRIO DO NASCIMENTO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : PAULO RICARDO PORFÍRIO DO NASCIMENTO
DATA : 13/12/2016
HORA: 14:00
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich - Depto. de Bioquímica - CB/UFRN
TÍTULO:

Perfil transcricional e alterações histopatológicas na leishmaniose visceral canina.

PALAVRAS-CHAVES:

Histopatologia, Leishmaniose Visceral Canina, Transcriptoma.

PÁGINAS: 116
RESUMO:

Introdução: Os cães são considerados os principais reservatórios domésticos de Leishmania infantum e podem apresentar um amplo espectro de manifestações clínicas, variando de uma leve perda de peso até hepatoesplenomegalia e lesões dérmicas disseminadas, os quais são os sinais clássicos da leishmaniose visceral canina (LVC). O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de expressão gênica em células do baço e sangue periférico de animais naturalmente infectados por L. infantum e investigar as alterações histopatológicas no baço, fígado, intestino e pele, visando identificar possíveis vias imunoreguladoras envolvidas na patogênese da LVC. Metodologia: 21 animais foram selecionados para esse estudo no Centro de Controle de Zoonoses de Natal-RN e amostras biológicas de um subgrupo foi utilizada para estudos de expressão gênica global. As quantidades de Leishmania presentes nos diversos tecidos (baço, fígado, duodeno e sangue) foram estimadas por qPCR. O RNA total do baço e sangue periférico foi extraído e as bibliotecas de cDNA foram obtidas e sequenciadas em plataforma Illumina. As sequências obtidas foram filtradas e alinhadas contra o genoma de Canis familiaris pelo software Bowtie. A expressão gênica diferencial foi analisada usando o protocolo do Cufflinks, a anotação funcional e as características moleculares dos genes foram obtidas no banco de dados Gene Ontology e KEGG através do pacote STRINGdb. Fragmentos de fígado, duodeno, pele e baço foram coletados, processados e corados com hematoxilina/eosina e imunofluorescência para análises histopatológicas. Resultados: Neste estudo foi observada uma marcante diferença no perfil de expressão gênica de baço e sangue periférico de animais sintomáticos em relação aos assintomáticos. Aproximadamente 756 genes se mostraram super expressos no baço de animais sintomáticos, como CTLA4, CCL2 e IL27, além destes, cerca de 1.190 genes apresentaram expressão reprimida neste mesmo grupo, como BMP6, C1QB e C1QC. Baseado numa análise de enriquecimento, foram encontradas redes de interação gênica que podem estar envolvidas na patogenese da LVC. As vias de ativação de células NK, receptores dos tipos Toll-like e NOD-like estavam altamente expressas no baço de animais sintomáticos, enquanto as vias de síntese de âncoras de GPI e ativação do imunoprotessoma estavam reprimidas. Adicionalmente, foi observado que durante a doença ativa há a desorganização da cito arquitetura do baço, onde a delimitação entre polpa branca e vermelha é parcialmente perdida. É observado infiltrado inflamatório no fígado, duodeno e pele. Validando o achado do transcriptoma, foi observada por imunofluorescência a presença de CTLA4, CCR7 e NLRP3 no baço de animais sintomáticos. Conclusões: A desregulação de mecanismos tipicamente associados à imunidade inata pode estar diretamente envolvida na patogenia da LVC. Além disso, uma alta eficiência no processamento e apresentação de antígenos seja responsável, pela resistência ao desenvolvimento dos sinais clínicos e integridade tissular durante a infecção por L. infantum em cães.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CLAUDIA IDA BRODSKYN - IGM
Interno - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Externo à Instituição - MATHEUS AUGUSTO DE BITTENCOURT PASQUALI - UFCG
Externo ao Programa - 1939184 - SANDRO JOSE DE SOUZA
Presidente - 350647 - SELMA MARIA BEZERRA JERONIMO