Banca de DEFESA: LUCIANA MARIA ARAUJO RABELO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LUCIANA MARIA ARAUJO RABELO
DATA : 25/10/2016
HORA: 14:00
LOCAL: Anfiteatro das Aves - Centro de Biociências
TÍTULO:

 

EFEITOS DE UM INIBIDOR DO TIPO

 KUNITZ PURIFICADO DE SEMENTES DE JUQUIRI (Mimosa regnellii Benth) SOBRE EVENTOS CELULARES DA LINHAGEM TUMORAL B16-f10

 

PALAVRAS-CHAVES:

Mimosa regnellii Benth; Inibidor de tripsina; Melanoma; Apoptose; Angiogênese; Migração celular; Potencial de membrana mitocondrial.

PÁGINAS: 132
RESUMO:

O câncer é um termo utilizado para representar um conjunto de mais de 200 patologias, incluindo tumores malignos de diferentes localizações. Vários são os mecanismos que contribuem para a carcinogênese: sinal proliferativo sustentado, desregulação da energia celular, evasão a apoptose, indução a angiogênese, replicação ilimitada, entre outros. Dentre os principais tipos de câncer existentes, o câncer de pele se destaca: surge nos melanócitos e é o mais frequente no Brasil, correspondendo a 30% de todos os tumores malignos registrados no País. Melanomas em estágio inicial podem, na maioria das vezes, ser tratados apenas com cirurgia, porém os cânceres mais avançados requerem outros tratamentos. Neste trabalho, um inibidor de tripsina do tipo Kunitz foi purificado de sementes da leguminosa Mimosa regnellii Benth (ITJ), parcialmente caracterizado e avaliado quanto sua toxicidade frente a linhagens de células tumorais, atuando especificamente com um IC₅₀ de 0,65 µM em linhagem celular B16-f10, não apresentando toxicidade frente a linhagens de células não transformadas. Sua capacidade de induzir morte celular pela via de apoptose em células de melanoma de camundongo B16-f10 também foi avaliada, através de citometria de fluxo com os marcadores Anexina V-FITC/PI. Além disso, o inibidor também foi avaliado quanto a sua capacidade de: alterar o potencial de membrana mitocondrial, visualizado por experimentos em citometria de fluxo utilizando a sonda Rodamina123 e microscopia confocal com o marcador Mitotracker Red; Liberar espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, através de sondas específicas visualizadas por técnicas de microscopia; Liberar cálcio citosólico, evento que influencia na ativação de apoptose; Inibir atividade angiogênica de células endoteliais de coelho, através de experimentos de inibição de formação de novos vasos em matrigel, análise da expressão de VEGF por técnicas de western Blotting e redução da expressão de IL-6 analisado por microscopia confocal; Inibir o processo de migração celular em ensaio de indução de ferimento e análise em microscopia e, por fim, a alterar a morfologia celular de B16-f10, analisada por incubação com anticorpos específicos para componentes da matriz extracelular e filamentos intermediários das células de melanoma, realizados em microscopia de fluorescência. Todos esses resultados reunidos favorecem a construção de um possível mecanismo de ação de ITJ na indução de morte celular por apoptose em células B16-f10, onde o inibidor atuaria principalmente alterando o funcionamento mitocondrial, onde o gatilho do início do processo apoptótico seria a perda do potencial de membrana mitocondrial, liberação de EROs e cálcio citosólico, ativando uma via de morte dependente de caspases. Estes resultados sugerem que ITJ apresenta potencial para ser utilizado como fármaco em tratamento adjuvante contra melanomas, devido a sua especificidade e baixa dosagem quando comparado a outras moléculas bioativas.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CELINA MARIA PINTO GUERRA DORE - F.M.Nassau
Interno - 1880243 - DANIEL CARLOS FERREIRA LANZA
Presidente - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Interno - 2195251 - HUGO ALEXANDRE DE OLIVEIRA ROCHA
Externo à Instituição - LUDOVICO MIGLIOLO - UCB