Banca de DEFESA: RITA DE CASSIA BARRETO DA SILVA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: RITA DE CASSIA BARRETO DA SILVA
DATA: 27/03/2014
HORA: 14:00
LOCAL: Anfiteatro das Aves – Centro de Biociências
TÍTULO:

CARACTERIZAÇÃO DE UMA NOVA EXONUCLEASE IDENTIFICADA EM UMA BIBLIOTECA METAGENÔMICA


PALAVRAS-CHAVES:
Metagenoma; Endonuclease, Exonuclease, reparo de DNA

PÁGINAS: 118
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Genética
RESUMO:

A abordagem metagenômica tem permitido o acesso ao material genético de microrganismos não cultivados e tem sido usada para identificação de novos genes. Apesar da importância dos mecanismos de reparo de DNA para a manutenção da integridade genômica nosso conhecimento sobre mecanismos de reparo de DNA é baseado em organismos modelo como E. coli e pouco é conhecido sobre os organismos de vida livre e não cultivados. Neste trabalho, a abordagem metagenômica foi aplicada para descobrir novos genes envolvidos com a manutenção da integridade genômica. Um clone positivo foi identificado por replicar a biblioteca metagenômica em meio seletivo contendo H2O2. O clone metagenômico foi capaz de complementar parcialmente a deficiência em reparo de DNA de cepas simples e duplo-mutantes de E.coli (recA e xthA nfo, respectivamente) submetidas ao estresse gerado por H2O2 e MMS.A análise de sequência mostrou uma ORF codificando para uma proteína hipotética membro da superfamília Exo_Endo_Phos (PF03372) e, a filogenia indicou que a mesma não está inclusa em nenhuma das subfamílias EEP. Assim, uma nova nuclease foi identificada e experimentalmente caracterizada in vivo e in vitro. Ensaios específicos utilizando a nuclease purificada e oligonucleotideos fluorescentemente marcados revelaram sua atividade 3´-5´exonuclease, em substratos simples e dupla-fita, dependente de Magnésio e sensível a EDTA. Uma vez que este é o primeiro relato e caracterização de uma enzima obtida a partir de abordagem metagenômica mostrando uma atividade exonuclease, foi nomeada EXOMEG1


MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1149647 - LUCYMARA FASSARELLA AGNEZ
Externo ao Programa - 1549705 - ADRIANA FERREIRA UCHOA
Externo ao Programa - 1453487 - KATIA CASTANHO SCORTECCI
Externo à Instituição - CARLOS RENATO MACHADO - UFMG
Externo à Instituição - JOAO ANTONIO PEGAS HENRIQUES - UFRGS
Notícia cadastrada em: 26/03/2014 15:06
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