Banca de QUALIFICAÇÃO: KYVIA REGINA FERNANDES VARELA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : KYVIA REGINA FERNANDES VARELA
DATA : 29/10/2022
HORA: 14:00
LOCAL: Sessão de videoconferência: https://meet.google.com/yct-adqp-nzt
TÍTULO:

FORMULAÇÃO DE PROTÓTIPOS DE VACINAS DE DNA E AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS FÍSICO-QUÍMICOS E BIOLÓGICOS

PALAVRAS-CHAVES:

Plasmídeos. Vacinas de DNA. Nanopartículas poliméricas. Polietilenoimina. Transferência de Genes.

PÁGINAS: 95
RESUMO:

As vacinas de DNA, também denominadas de vacinas de terceira geração ou vacinas gênicas, baseiam-se no uso de plasmídeos que codificam sequencias gênicas do patógeno como candidatado antigênico para indução da imunidade. As vacinas de DNA possuem inúmeras vantagens quando comparadas a outras vacinas, nomeadamente, serem de fácil desenvolvimento, baixo custo de produção, segurança e indução de resposta imune celular e humoral. Entretanto, a principal desvantagem é uma reduzida taxa de transfecção celular e consequentemente baixa produção endógena do antígeno de interesse. Esta desvantagem é devida principalmente à degradação dos plasmídeos por nucleases presentes nos tecidos e no interior das células. Nesse cenário, desenvolver uma estratégia para ultrapassar a barreira de digestão enzimática dos plasmídeos, durante o processo de imunização, parece ser um meio importante para melhorar a transferência de genes. Dessa maneira, o objetivo deste trabalho consiste no desenvolvimento de um nanosistema contendo plasmídeos utilizados em modelos de vacinas de DNA. Especificamente os plasmídeos, pVAX1, pVAX1lacZ e nTSApVAX1, incorporados à nanopartículas poliméricas de ácido poli-lático (PLA), com e sem presença de polietilenoimina (PEI), que consigam proteger e aumentar os níveis de transferência gênica dos plasmídeos, e assim construir protótipos vacinais eficientes. A seguir, os parâmetros dos sistemas foram avaliados, até o presente momento, a partir do diâmetro médio das partículas, índice de polidispersão (PDI) e potencial zeta, além de testes de performances, como estabilidade físico-química, retardo da mobilidade eletroforética, proteção contra degradação enzimática, para diferentes fontes e tipos de enzimas, e viabilidade celular in vitro. As nanoformulações produzidas apresentaram tamanho médio em torno de 250 nm, PDI <0,3. As nanoformulações catiônicas (PLA + PEI + pDNA) apresentaram boa complexação entre polímeros e pDNA, pois não houve aparecimento de bandas nos ensaios de eletroforese, mesmo frente as enzimas de degradação, sugerindo também proteção. O mesmo perfil não foi observado com as nanoformulações aniônicas (PLA + pDNA), indicando uma ligação não tão eficiente entre os componentes. Todas os sistemas produzidos apresentaram estabilidade físico-química, bem como viabilidade celular adequada. Dessa forma, os plasmídeos nanoformulados neste estudo demonstram-se como carreadores promissores no desenvolvimento de protótipos vacinais e vacinas de DNA, tornando desejável a realização de mais estudos in vitro e in vivo.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1639820 - ARNOBIO ANTONIO DA SILVA JUNIOR
Externa ao Programa - 2569445 - LOURENA MAFRA VERISSIMO - nullExterna à Instituição - WENDY MARINA TOSCANO QUEIROZ DE MEDEIROS - IFRN