Banca de QUALIFICAÇÃO: MARIA FERNANDA BEZERRA DE SOUZA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : MARIA FERNANDA BEZERRA DE SOUZA
DATA : 17/11/2025
HORA: 09:30
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich
TÍTULO:

Abordagem molecular baseada no gene MSP1 para diagnóstico diferencial das espécies de Plasmodium em áreas não endêmicas do Brasil

PALAVRAS-CHAVES:

Plasmodium; Malária; Gene MSP1; Diagnóstico molecular; Nested-PCR; Áreas não-endêmicas.

PÁGINAS: 104
RESUMO:

Malária é uma doença infecciosa tropical causada por protozoários do gênero Plasmodium e transmitida pela picada de fêmeas infectadas do mosquito Anopheles. No Brasil, o Sistema Único de Saúde (SUS) registra os casos como infecções por Plasmodium falciparum e/ou Plasmodium não-falciparum, sem a devida distinção entre espécies, o que compromete as estratégias de controle e eliminação da doença. Na Amazônia, a maioria dos casos é causada por P. vivax, enquanto em regiões extra-amazônicas predomina P. falciparum, espécie associada à maior letalidade. Também são relatadas infecções por P. malariae e espécies zoonóticas emergentes, como P. simium e P. brasilianum, cuja elevada similaridade morfológica, imunológica e molecular com P. vivax dificulta o diagnóstico microscópico. Embora a microscopia seja reconhecida como o padrão-ouro para o diagnóstico da malária, sua acurácia depende fortemente da experiência do examinador. Em regiões não endêmicas, a escassez de microscopistas qualificados e a ausência de rotina diagnóstica específica resultam em subnotificação, erros diagnósticos e atraso no início do tratamento. Como consequência, a taxa de letalidade por malária na região extra-amazônica foi 51 vezes superior à observada na Amazônia em 2023, alcançando 1,87%, embora a região Norte ainda concentre cerca de 99% dos casos nacionais. Diante desse cenário, este estudo propôs o desenvolvimento e a validação de um método molecular baseado em nested-PCR utilizando o gene MSP1 (merozoite surface protein 1) como marcador para o diagnóstico diferencial de P. vivax e P. falciparum. Foram analisadas 25 amostras clínicas de pacientes atendidos na Fundação de Medicina Tropical Doutor Heitor Vieira Dourado (FMT-HVD), em Manaus, previamente diagnosticados por microscopia de gota espessa corada com Giemsa. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da FMT-HVD (CAAE: 51071221.3.3001.5248; parecer: 5.180.415/2021). O DNA foi extraído do sangue total, e os ensaios de nested-PCR e eletroforese foram conduzidos conforme protocolos padronizados. O conjunto de primers derivados do gene MSP1 foi desenhado e testado in silico e experimentalmente, resultando em um protocolo robusto, sensível e reprodutível, adequado para aplicação tanto em áreas endêmicas quanto não endêmicas. Os resultados demonstraram alta concordância entre a microscopia e o nested-PCR, sem ocorrência de reações cruzadas entre P. vivax e P. falciparum. O ensaio mostrou-se capaz de detectar baixas densidades parasitárias, representando um avanço importante para o diagnóstico de casos importados em regiões extra-amazônicas. Além disso, a ausência de ferramentas moleculares específicas e a carência de sequências brasileiras em bancos genéticos reforçam a necessidade de ampliar a abordagem para espécies “não-falciparum”, como P. malariae, P. ovale, P. brasilianum e P. simium. Assim, o presente estudo evidencia o potencial do nested-PCR baseado no gene MSP1 como ferramenta complementar ao diagnóstico convencional da malária, contribuindo para o aprimoramento da vigilância epidemiológica e para o fortalecimento das estratégias de controle e eliminação da doença no Brasil.

MEMBROS DA BANCA:
Externa ao Programa - 2562988 - ANDREIA FERREIRA NERY - nullPresidente - 1046922 - LEONARDO CAPISTRANO FERREIRA
Interno - 2275890 - MARCELO DE SOUSA DA SILVA