PRODUÇÃO DA PROTEÍNA QUIMÉRICA MULTI-ANTIGÊNICA TgAGS/BsT DE Toxoplasma gondii EXPRESSA EM Escherichia coli BL21 STAR POR AUTOINDUÇÃO
Toxoplasmose, Escherichia coli, proteína quimérica, autoindução
A toxoplasmose é uma doença parasitária de alcance global com implicações na saúde pública e que apresenta desafios quanto ao desenvolvimento de vacinas e testes diagnósticos adequados para uso em humanos. Nesse sentido, o estudo das proteínas quiméricas recombinantes repre-senta um avanço promissor devido à diversidade de antígenos do parasita Toxoplasma gondii. Diante disso, o presente estudo tem por objetivo avaliar estratégias de cultivo descontínuo na produção da proteína quimérica multi-antigênica TgAGS/BsT de Toxoplasma gondii expressa em Escherichia coli BL21 Star através do método de autoindução. Para tanto, será efetuado um planejamento fatorial completo 23 com triplicata no ponto central, a fim de avaliar o efeito de três condições operacionais de grande influência no processo: A temperatura de cultivo, a velocidade de agitação e a concentração de lactose. O sistema será avaliado quanto à velocidade máxima de crescimento celular, produtividade em biomassa e em proteína, fator de conversão e estabilidade plasmidial. Os resultados esperados buscam demonstrar a viabilidade do uso do meio de autoindução, dadas as limitações apresentadas pela indução por IPTG, como alto custo, toxicidade para a célula e necessidade de monitoramento do tempo de indução. Além disso, espera-se obter mais conhecimento acerca dos fatores que influenciam a produção da proteína recombinante de interesse, bem como a sua purificação, a fim de obter um sistema otimizado ca-paz de produzir proteínas com alta capacidade e pureza, visando sua futura aplicação em outros estudos.